2025年沉淀反應(yīng)實(shí)驗(yàn)操作與結(jié)果分析報(bào)告

試驗(yàn)蛋白質(zhì)的沉淀反應(yīng)與顏色反應(yīng)掌握鑒定蛋白質(zhì)的原理和措施。熟悉蛋白質(zhì)的沉淀反應(yīng)，深入熟悉蛋白質(zhì)的有關(guān)反應(yīng)。二、試驗(yàn)原理蛋白質(zhì)分子中某種或某些集團(tuán)可與顯色劑作用，產(chǎn)生顏色。不一樣的蛋白質(zhì)由于所含的氨基酸不完全相似，顏色反應(yīng)亦不完全相似。顏色反應(yīng)不是蛋白質(zhì)的專(zhuān)一反應(yīng)，某些非蛋白物質(zhì)也可產(chǎn)生同樣的顏色反應(yīng)，因此不能根據(jù)顏色反應(yīng)的成果來(lái)決定被測(cè)物與否為蛋白質(zhì)。此外，顏色反應(yīng)也可作為某些常用蛋白質(zhì)定量測(cè)定的根據(jù)。蛋白質(zhì)是親水性膠體，在溶液中的穩(wěn)定性與質(zhì)點(diǎn)大小、電荷、水化作用有關(guān)，但其穩(wěn)定性是有條件的，相對(duì)的。假如條件發(fā)生了變化，破壞了蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性，蛋白質(zhì)就會(huì)從溶液中沉淀出來(lái)。試紙6、水浴鍋7、移液管1、卵清蛋白液：雞蛋清用蒸餾水稀釋10-20倍，3-4層紗布過(guò)濾，濾液放在冰箱里冷藏備用。2、0.58苯酚：1g苯酚加蒸餾水稀釋至200ml。3、millon's試劑：40g汞溶于60ml濃硝酸(水浴加溫助溶)溶解后，冷卻，加二倍體積的蒸餾水，混勻，取上清夜備用。此試劑可長(zhǎng)期保留。4、尿素晶體5、18cuso:1gcuso晶體溶于蒸餾水，稀釋至100ml446、108naoh:10gnaoh溶于蒸餾水，稀釋至100ml7、濃硝酸8、0.1茚三酮溶液：0.1g茚三酮溶于958的乙醇并稀釋至100ml.10、濃硫酸11、飽和硫酸銨溶液：100ml蒸餾水中加硫酸銨至飽和。12、硫酸銨晶體：用研缽研成碎末。13、95%乙醇。14、醋酸鉛溶液：1g醋酸鉛溶于蒸餾水并稀釋至100ml15、氯化鈉晶體16、10%三氯乙酸溶液：10g三氯乙酸溶于蒸餾水中并稀釋至100ml17、飽和苦味酸溶液：100ml蒸餾水中加苦味酸至飽和。18、18醋酸溶液。五、試驗(yàn)環(huán)節(jié)蛋白質(zhì)的顏色反應(yīng)1、苯酚試驗(yàn)：取0.5號(hào)苯酚溶液1ml于試管中，加millon's試劑0.5ml,電爐小心加熱觀測(cè)2、蛋白質(zhì)試驗(yàn)：取2ml蛋白液，加millon's試劑0.5ml,出現(xiàn)白色的蛋白質(zhì)沉淀，小心加熱，觀測(cè)現(xiàn)象。(二)雙縮脲反應(yīng)1、取少許尿素晶體放在干燥的試管中，微火加熱熔化，至重新結(jié)晶時(shí)冷卻。然后加108naoh溶液1ml,搖勻，再加2-4滴1號(hào)cuso4溶液，混勻，觀測(cè)現(xiàn)象。2、取蛋白液1ml,加108naoh溶液1ml,搖勻，再加2-4滴18cuso4溶液，混勻，觀測(cè)現(xiàn)取一支試管，加入1ml蛋白液及濃硝酸5滴。加熱，冷卻后注意顏色變化。然后再加入10%naoh溶液1ml,觀測(cè)顏色有取蛋白液1ml于試管中，加4-8滴茚三酮溶液，加熱至沸，即有藍(lán)紫色出現(xiàn)。蛋白質(zhì)的沉淀(一)蛋白質(zhì)的鹽析作用1、試管中加蒸餾水3ml,加固體硫酸銨至飽和。另一支試管加蛋白液2ml,再加入飽和硫酸銨溶液2ml,搖勻靜置觀測(cè)現(xiàn)象。2、將上述混合液過(guò)濾。向?yàn)V液中逐漸加入少許固體硫酸銨，直至飽和為止，此時(shí)析出為清蛋白。再加入少許蒸餾水，觀測(cè)沉淀與否溶解。(二)有機(jī)溶劑沉淀蛋白質(zhì)試管中加蛋白液1ml,加晶體氯化鈉少許，溶解后加95%乙醇3ml,搖勻，觀測(cè)現(xiàn)象。(三)重金屬鹽與某些有機(jī)酸沉淀蛋白質(zhì)1、取試管2支，各加蛋白液2ml,一支管中滴加1號(hào)醋酸鉛溶液，另一支管中滴加1硫酸銅溶液，至有沉淀產(chǎn)生。2、取一支試管加蛋白液2ml,再加入10%三氯乙酸1ml,充足混勻，觀測(cè)成果。(四)生物堿試劑沉淀蛋白質(zhì)取一支試管，加入蛋白液2ml及醋酸4-5滴，再加飽和苦味酸數(shù)滴，觀測(cè)現(xiàn)象。蛋白質(zhì)的顏色反應(yīng)1、苯酚試驗(yàn)：溶液即出現(xiàn)玫瑰紅色。2、蛋白質(zhì)試驗(yàn)：出現(xiàn)白色的蛋白質(zhì)沉淀，小心加熱后凝固的蛋白質(zhì)出現(xiàn)紅色。1、有紫色出現(xiàn)。2、溶液有藍(lán)紫色出現(xiàn)先有黃色沉淀生成，加入10號(hào)naoh溶液1ml后顏色變?yōu)殚冱S色。有藍(lán)紫色出現(xiàn)。蛋白質(zhì)的沉淀(一)蛋白質(zhì)的鹽析作用1、有蛋白析出。2、有蛋白質(zhì)析出，加水后可復(fù)溶。(六)有機(jī)溶劑沉淀蛋白質(zhì)取一試管加蛋白液1ml,,加入晶體氯化鈉少許，待溶解后再加95%乙醇3ml,搖勻，觀測(cè)現(xiàn)象(七)重金屬鹽與某些有機(jī)酸沉淀蛋白質(zhì)取試管2支，各加蛋白液2ml,一支管中滴加1號(hào)醋酸鉛溶液，另一支管中滴加1號(hào)硫酸銅溶液，至有沉淀產(chǎn)生。(八)生物堿試劑沉淀蛋白質(zhì)取一支試管，加入蛋白液2ml及醋酸4-5滴，再加飽和苦味酸和鞣酸數(shù)滴，觀測(cè)現(xiàn)象。七、試驗(yàn)分析蛋白質(zhì)分子中某種或某些集團(tuán)可與顯色劑作用，產(chǎn)生顏色。不一樣的蛋白質(zhì)由于所含的氨基酸不完全相似，顏色反應(yīng)亦不完全相似。篇二：自由沉淀試驗(yàn)匯報(bào)六、試驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄與整頓1、試驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄柱高沉降柱直徑水樣來(lái)源柱高表面皿表面皿編號(hào)質(zhì)量/g表面皿和懸浮物總質(zhì)量/g水樣中懸浮物質(zhì)量/g水樣體積/ml懸浮物沉降柱濃度/工作水(g/ml)深/mm顆粒沉沉淀效速/率/%(mm/s)殘存顆粒比例/%79.043880.74121.697481.760383.20751.447264.189065.466.116267.32861.212473.789574.93851.149083.478284.31.030.030.030.030.0.05480.04820.04360.04040.03830.03846.0808.0780.0724.066(2)繪制沉淀曲線：e-t、e-u、ui~pi曲線如下：2-1、繪制清除率與沉淀時(shí)間的曲線如圖2.2:沉淀時(shí)間t與沉淀效率e的關(guān)系曲線圖2.2:顆粒沉速u(mài)與沉淀效率e的關(guān)系曲線(1)選擇t=60min時(shí)刻：(大家注意哦!這部分手寫(xiě)的，不要直接打印!)水樣中懸浮物質(zhì)量水樣中懸浮物質(zhì)量1.6974水樣體積31.0水樣中懸浮物質(zhì)量1.1508水樣體積31.0h?10(500-250)??0.069?100%??100%?32.30c0?100%??100號(hào)?67.70c00.05481.混凝作用原理包括三部分：1)壓縮雙電層作用；2)吸附架橋作用；3)網(wǎng)捕作用。這膠體表面的電荷值常用電動(dòng)電位ξ表達(dá)，又稱(chēng)為zeta電位。一般天然水中的膠體顆粒的zeta氯化鋁(簡(jiǎn)稱(chēng)pac)、聚丙烯酰胺等。本試驗(yàn)使用pac,它是介于alcl3和al(oh)3之3.投藥量單位體積水中投加的混凝劑量稱(chēng)為"投藥量",單位為mg/1?；炷齽┑耐都恿砍芤?。與入射光成90(1)濁度儀一臺(tái)(sgz-2數(shù)顯濁度儀，上海悅豐儀器儀表有限企業(yè))(3)電子天平(賽多利斯科學(xué)儀器，北京有限企業(yè))(4)沉淀桶(600ml燒杯)6個(gè)；(5)100ml取樣瓶6個(gè)；(6)乳膠管或塑料軟管(直徑5~8mm)15~20cm;(7)100ml燒杯1個(gè)；(8)100ml量筒1個(gè)；2.試驗(yàn)試劑混凝劑：聚合氯化鋁pac;原水(制備工作已由試驗(yàn)員完畢);自來(lái)水1)制備原水：事先用高嶺土配制濁度為50ntu左右的渾水，靜沉1天以上，取上清液備用。(已由2)用電子天平稱(chēng)取混凝劑(pac)3g溶于11自來(lái)水中，濃度為3g/1。4)根據(jù)原水體積，按照投加量80、120、160、200、300、400mg/1計(jì)算加藥量，并換算成液的體積量。換算后，混凝劑溶液的體積分別為：16、24、32、40、60、805)設(shè)置攪拌儀程序：(1)轉(zhuǎn)速400轉(zhuǎn)/分，攪拌1.5min;(2)轉(zhuǎn)速150轉(zhuǎn)/分，繼續(xù)攪拌5min;(3)轉(zhuǎn)速60轉(zhuǎn)/分，繼續(xù)攪拌5min;(4)轉(zhuǎn)速0轉(zhuǎn)/分鐘，沉淀15min6)用量筒量取環(huán)節(jié)(3)計(jì)算的混凝劑量，迅速加入沉淀桶中。貼好標(biāo)簽，將六個(gè)沉淀桶放置在攪7)啟動(dòng)攪拌儀，按照設(shè)定程序運(yùn)行。(注意觀測(cè)各個(gè)沉淀桶的絮凝沉淀狀況)8)程序結(jié)束后，打開(kāi)沉淀桶的小閥門(mén)，取每個(gè)沉淀桶中上清液50~100ml于清洗好的試管中。9)用濁度儀測(cè)定上清液濁度并進(jìn)行記錄(速度要快；使用前要調(diào)零；待濁度儀示數(shù)較穩(wěn)定期讀濁度/ntu8.233.302.202.434.70110.0016243240608080120160200對(duì)應(yīng)的投藥量約為255mg/1,即該原水的最佳投藥量為255mg/1。22)混凝包括混合與凝聚，混合過(guò)程(即混凝劑剛加入水中的混合過(guò)程)規(guī)定迅速防止因時(shí)間間隔子互相凝聚。混合過(guò)程大概要在1~2分鐘內(nèi)完畢，而凝聚過(guò)程則大概需要20~30分鐘，沉淀過(guò)程則大試驗(yàn)二蛋白質(zhì)的呈色反應(yīng)，沉淀反應(yīng)同組：湯殷飛學(xué)號(hào)：班級(jí)：室溫：教師：09針外成績(jī)：1.理解蛋白質(zhì)的性質(zhì)。2.掌握蛋白質(zhì)的鑒定措施。1.蛋白質(zhì)的呈色反應(yīng)。2.蛋白質(zhì)的沉淀反應(yīng)。(一)蛋白質(zhì)的呈色反應(yīng)比較和鑒別不一樣的蛋白質(zhì)。1.雙縮脲反應(yīng)【試驗(yàn)原理】(1)取小試管一支，加1:10雞蛋白液2滴，10%naoh溶液5滴及1%硫酸銅溶液1滴，混勻，可見(jiàn)溶液呈紫色。(2)另取一小試管，加一小匙尿素(綠豆大小),小火加熱至熔，嗅其氣味為(臭味)。繼續(xù)加熱使之凝固，這固體是(雙縮脲),加水10滴，108naoh溶液5滴，1號(hào)硫酸銅溶液1滴，可見(jiàn)溶液變成紫紅色。2.茚三酮反應(yīng)【試驗(yàn)原理】凡具有自由氨基的化合物例如蛋白質(zhì)，多肽，多種氨基酸(脯氨酸化合物(包括氨)與茚三酮共熱時(shí)，能生成紫藍(lán)色化合物，這種反應(yīng)即茚三酮反應(yīng)?！静僮鳌慨?dāng)維持蛋白質(zhì)膠體溶液的穩(wěn)定原因(水化膜和電能再溶解，此即不可逆的沉淀反應(yīng)。1.蛋白質(zhì)的鹽析【試驗(yàn)原理】用。鹽析作用包括兩種過(guò)程：1)大量電解質(zhì)破壞了蛋白質(zhì)的水化膜從而出現(xiàn)沉淀的硫酸銨溶液中析出?！静僮鳌坑^測(cè)現(xiàn)象是溶液中有白色沉淀析出。(2)過(guò)濾，搜集透明濾液，濾液中會(huì)有清蛋白，若溶液混濁，須反復(fù)過(guò)濾至透明為再向混濁液加1.5-2.0ml水，觀測(cè)現(xiàn)象是溶液中沉淀逐漸溶解2.重金屬鹽類(lèi)沉淀蛋白質(zhì)【試驗(yàn)原理】質(zhì)。【操作】【試驗(yàn)原理】熱而凝固。(1)取4支試管，編號(hào)，按下表加入試劑(2)取出試管，冷卻后于第3管中慢慢滴入10%naoh溶液，觀測(cè)現(xiàn)象是溶液先變渾濁，然后(3)向第4管中慢慢滴入10號(hào)醋酸，觀測(cè)現(xiàn)象為溶液先變渾濁，然后渾濁慢慢溶解，其原因是電點(diǎn)，沉淀溶解。四.試驗(yàn)材料(一)試劑1.1:10雞蛋白溶液2.10%naoh3.1%硫酸銅4.尿素5.0.1%茚三酮乙醇液6.0.25%丙氨酸溶液7.飽和硫酸銨溶液8.固體硫酸銨9.0.5%naoh10.0.5號(hào)硫酸鋅11.10%磺基水楊酸12.10%hcl13.18hac14.108hac(二)儀器水浴鍋(100攝氏度)(三)其他一巨噬細(xì)胞吞