技能訓(xùn)練2 組培常用儀器設(shè)備的使用

恒溫水浴鍋技能訓(xùn)練2組培常用儀器設(shè)備的使用恒溫水浴鍋技能目標1．清楚組織培養(yǎng)常用儀器設(shè)備的原理2．熟練使用組織培養(yǎng)常用的儀器設(shè)備訓(xùn)練前準備組織培養(yǎng)實驗室；高壓滅菌鍋、超凈工作臺等常用儀器設(shè)備及相關(guān)試劑、用品等。1.精密pH計(PHS-3C型)的使用圖1-12精密pH計(PHS-3C型)(1)構(gòu)造與工作原理精密pH圖1-12精密pH計(PHS-3C型)(2)操作步驟①開機前準備A.電極梗旋入電極插座，調(diào)節(jié)電極夾到適當(dāng)位置；B.復(fù)合電極夾在電極夾上，拉下電極前端的電極套；C.用蒸水清洗電極，清洗后用濾紙吸干。②開機A.電源線插入電源插座；B.按下電源開關(guān)，電源接通后，預(yù)熱30min后進行標定。③標定儀器使用前先要標定。如果儀器連續(xù)使用則每天要標定1次。A.在測量電極插座處撥去短路插座；B.在測量電極插座處插上復(fù)合電極；C.把選擇開關(guān)旋鈕調(diào)到pH檔；D.調(diào)節(jié)溫度補償旋鈕，使旋鈕白線對準溶液溫度值；E.把斜率調(diào)節(jié)旋鈕順時針旋到底（即調(diào)到100%位置）；F.把清洗過的電極插入pH6.86的緩沖溶液中；G.調(diào)節(jié)定位調(diào)節(jié)旋，使儀器顯示讀數(shù)與該緩沖溶液當(dāng)時溫定下降時的pH值相一致（如用混合磷酸定位溫度為10℃時，pH6.92）；H.用蒸餾水清洗過的電極，再插入pH4.00（或pH9.18）的標準溶液中，調(diào)節(jié)斜率旋鈕使儀器顯示讀數(shù)與該緩沖溶液中當(dāng)時溫度下的PH值一致；I.重復(fù)（6）～（8）直至不用再調(diào)節(jié)定位或斜率兩個調(diào)節(jié)旋鈕為止，標定完成。④測量pH值經(jīng)標定過的儀器，即可用來測定被測溶液。被測溶液與標定溶液溫度相同與否，其測量步驟也有所不同。A.被測溶液與定位溶液溫度相同時，測量步驟如下：

用蒸餾水清洗電極頭部，再用被測溶液清洗1次；

把電極浸入被測溶液中，用玻璃棒攪拌溶液使溶液均勻，在顯示屏上讀出溶液的pH值。B.被測溶液和定位溶液溫度不相同時，在電極清洗后，要用溫度計測出被測溶液的溫度值，調(diào)節(jié)“溫度”調(diào)節(jié)旋鈕，使白線對準被測溶液的溫度值，然后再實際測定溶液的pH值。圖1-13超凈工作臺2.超凈工作臺的使用圖1-13超凈工作臺(1)構(gòu)造與工作原理超凈工作臺有水平風(fēng)和垂直風(fēng)、單人和雙人之分，主要由三相電機、鼓風(fēng)機、初過濾器和超過濾器、擋板、工作臺面等幾部分構(gòu)成（圖2-10）。通過電機帶動，鼓風(fēng)機將空氣通過特制的微孔泡沫塑料片層疊合組成的“超級濾清器”后吹送出來，形成連續(xù)不斷的無塵無菌的超凈空氣層流(除去了大于0.3μm的塵埃、真菌和幼苗孢子等)，在工作臺面制造無菌區(qū)，這足以防止附近空氣可能襲擾而引起的污染，20～30m/min的風(fēng)速也不會妨礙采用酒精燈對器械的灼燒滅菌。(2)操作步驟①接通電源；②打開臺內(nèi)紫外燈殺菌30min；③30min后關(guān)紫外燈，打開風(fēng)機20min；④打開照明燈，準備接種。(3)超凈工作臺使用時的注意事項①新安裝的或長期未使用的超凈工作臺，使用前必須對超凈工作臺和周圍環(huán)境使用超凈真空吸塵器或不產(chǎn)生纖維的工具，認真進行清潔工作。②工作臺面上不要存放不必要的物品，以保持工作區(qū)內(nèi)的潔凈氣流，不受干擾。③禁止在工作臺面上記錄，工作時應(yīng)須盡量避免作明顯擾亂氣流的動作。④定期(一般為2個月)用熱球式風(fēng)速儀測量工作區(qū)風(fēng)速，如發(fā)現(xiàn)不符合技術(shù)要求，則可調(diào)大風(fēng)機的供電電壓。⑤在工作臺右側(cè)有5A外接電源插座，可供使用。圖1-14便攜式壓力滅菌鍋3.便攜式壓力滅菌鍋的使用圖1-14便攜式壓力滅菌鍋(1)構(gòu)造與工作原理便攜式壓力滅菌器由鍋體、內(nèi)鍋、電熱管、擱簾、鍋蓋、壓力表、橡膠密封墊、放氣閥、安全閥等構(gòu)成(圖2-11)。其工作原理是利用所產(chǎn)生的高壓濕熱水蒸汽(溫度為121～123℃，壓力為0.10～0.15Mpa)(2)操作步驟①加水裝鍋打開鍋蓋，加入清水，至超過鍋底擱簾1cm左右，然后放上內(nèi)鍋，裝入滅菌物物品，蓋上鍋蓋，對角線擰緊螺栓。②通電升壓，排冷空氣接通電源，使滅菌器開始工作。當(dāng)壓力0.05MPa時，打開放氣閥，排放冷氣，待指針回零后(根據(jù)具體情況，可反復(fù)2～3次排放冷氣)，關(guān)閉放氣閥，使滅菌器升壓。③保壓當(dāng)壓力達到0.10MPa時，開始計時，使鍋內(nèi)蒸汽壓力保持0.10～0.15MPa的范圍，維持15～30min的滅菌時間。④降壓排汽：滅菌結(jié)束后斷開電源，讓鍋內(nèi)壓力自然下降。當(dāng)指針歸零后打開放汽閥，排放余汽。⑤出鍋冷卻：當(dāng)壓力表指針為零時，打開放氣閥，手戴隔熱手套，開鍋取瓶。用周轉(zhuǎn)筐運至接種室或冷卻室，待培養(yǎng)基冷卻凝固后方可使用。(3)使用和維護時的注意事項①裝鍋時，不要裝得太滿，并且嚴禁堵塞安全閥的出氣孔，必須留出空位保證其空氣暢通。②滅菌液體時，應(yīng)采用耐熱玻璃瓶灌裝，并且液體以不超過3/4體積為好，切勿使用未打孔的橡膠或軟木塞。③長期使用壓力鍋，若壓力表的指示不正確或不能回復(fù)零位，應(yīng)及時檢修。平時注意定期與標準壓力表相對照，若不正常，應(yīng)換上新表。④平時應(yīng)將設(shè)備保持清潔和干燥，方可延長使用年限，橡膠密封墊使用日久會老化，應(yīng)定期更換。⑤安全閥應(yīng)定期檢查其可靠性，工作壓力超過0.165兆帕?xí)r需要更換合格的安全閥。4.HZS-H超級恒溫水浴振蕩器的使用(1)構(gòu)造與工作原理恒溫水浴振蕩器主要由水浴槽和控制面板兩部分構(gòu)成(圖2-12)。水浴槽上有密封蓋，槽內(nèi)裝水；控制面板可設(shè)定溫度和轉(zhuǎn)速，根據(jù)培養(yǎng)材料的不同，設(shè)定相應(yīng)的水溫和轉(zhuǎn)速為，從而實現(xiàn)離體材料的液體培養(yǎng)。圖1-15恒溫水浴振蕩器(2)操作步驟圖1-15恒溫水浴振蕩器①加水：檢查儀器背面的放水膠堵是否安好在水箱內(nèi)加不少于20立升的蒸餾水；②接通電源：將三芯插頭插入電源插座．并將機器背面的“斷路器”置“通”的位置；③開啟右下角“加熱”開關(guān)．此時儀表應(yīng)能顯示出箱內(nèi)的溫度值。④溫度設(shè)定：按“參數(shù)選擇”健至儀表顯示設(shè)定值（表盤右側(cè)“設(shè)定”處發(fā)光管亮）時，用鑼絲刀調(diào)節(jié)“溫度設(shè)定”鈕至所需的溫度，設(shè)定過程即告結(jié)束，儀器開始升溫。⑤振蕩調(diào)節(jié)：將”速度調(diào)節(jié)”扭至最小位置，開啟右下角旋轉(zhuǎn)開關(guān)．儀器開始振蕩。按下“參數(shù)選擇”健至儀表顯示“轉(zhuǎn)速”（表盤上“轉(zhuǎn)速”發(fā)光管亮）時，調(diào)節(jié)“速度調(diào)節(jié)”鈕，使儀器達到所需要的轉(zhuǎn)速。⑥儀表參數(shù)顯示的順序是：每按一次“參數(shù)選擇”鍵，儀表按“溫度－轉(zhuǎn)速－設(shè)定－溫度”的順序周而復(fù)始的變化。不論儀表顯示哪一個參數(shù)，控溫的調(diào)節(jié)系統(tǒng)都在正常進行。(3)設(shè)備使用與維護時的注意事項①本儀器應(yīng)使用蒸餾水，長期不用時應(yīng)將水放掉。水箱內(nèi)如使用自來水，則要經(jīng)常清潔箱內(nèi)的水垢。②本儀器表面應(yīng)經(jīng)常擦拭，以保持清潔。操作時應(yīng)避開議表控制箱的側(cè)面，以免將水滴入機內(nèi)，損壞設(shè)備。③儀器必須先加水后通電。④開機時“速度調(diào)節(jié)”應(yīng)調(diào)至最小位置。⑤箱內(nèi)要及時補充水量，以免燒干損壞設(shè)備。5.電子分析天平的使用圖1-16電子分析天平圖1-16電子分析天平日本島津進口電子分析天平主要由天平機體、稱重艙、天平盤、鍵板（包括4個鍵）、液晶顯示屏等構(gòu)成(圖2-13)。國產(chǎn)分析天平與此類似。(2)操作步驟①調(diào)平天平放穩(wěn)后，轉(zhuǎn)動腳螺旋，使水平氣泡在水平指示的紅環(huán)內(nèi)；②自檢在空載下，天平內(nèi)部進行自檢，顯示屏上相繼顯示CHE3→0，CAL4LINKWord.Document.8"C:\\MyDocuments\\2002－2003學(xué)年第二學(xué)期：植物組織培養(yǎng)幻燈片\\組織培養(yǎng)實踐指導(dǎo)：2003年4月7日\\組織培養(yǎng)實習(xí)指導(dǎo)2003年4月.doc""OLE_LINK1"\a\r→0，CAL，END，CAL，OFF；③全顯示按“ON／OFF”鍵，液晶屏進入全顯示態(tài)；④這時再按“ON／OFF’鍵，液晶屏進入預(yù)熱狀態(tài)，有綠色指示燈顯示。平時可放置在這個狀態(tài)。當(dāng)再啟動“ON／OFF”鍵，又進入全顯示狀態(tài)；⑤清零按Tare鍵，液晶屏顯示“0”⑥去皮重清零將硫酸紙放在天平盤上，再按Tare鍵清零，液晶屏再顯示“0”⑦稱樣品將藥品放在硫酸紙上，至液晶屏左側(cè)穩(wěn)定標志“→”出現(xiàn)，讀數(shù)即為樣品重量。小數(shù)點前為克單位。如1.234即為1.234克(3)設(shè)備使用與維護時的注意事項①天平為精密儀器，使用時雙手、樣品、容器及硫酸紙一定要潔凈干燥，切勿將藥品直接放到天平盤上。②不要把水、金屬弄到天平盤上。③天平嚴禁靠近磁性物體。④天平使用時，不要撞擊天平所在桌面，要關(guān)上附近的窗戶，以防氣流影響稱重。⑤天平必須進入預(yù)熱態(tài)方可斷電。技能訓(xùn)練時的注意事項1.消除儀器設(shè)備的安全隱患，培養(yǎng)學(xué)生安全意識，要求學(xué)生正確操作和安全使用儀器設(shè)備。2.受實驗室空間、儀器設(shè)備臺數(shù)和教學(xué)時間的限制，應(yīng)分組交替訓(xùn)練。訓(xùn)練與考核建議1．教師集中介紹儀器設(shè)備的構(gòu)造、原理、使用方法及注意事項后，學(xué)生分組交替練習(xí)，教師加強組織與協(xié)調(diào)。2．技能訓(xùn)練側(cè)重儀器設(shè)備和器械用具的使用。3．考核旨在提高組培常用儀器設(shè)備的熟練使用程度，為后續(xù)的組培操作奠定基礎(chǔ)?？己酥攸c側(cè)重操作的規(guī)范性和熟練程度?？?/p>