飼料中巴比妥類藥物的測定 編制說明

（公開征求意見稿）一、工作簡況 31.1任務(wù)來源 31.2標(biāo)準(zhǔn)修訂背景 31.3主要工作過程 4二、標(biāo)準(zhǔn)編制原則和主要技術(shù)內(nèi)容確定的依據(jù) 7（一）標(biāo)準(zhǔn)編制原則 7（二）主要修訂內(nèi)容 7（三）主要技術(shù)內(nèi)容及其確定的依據(jù) 81.巴比妥類藥物的性質(zhì)及結(jié)構(gòu) 82.高效液相色譜法 92.1方法原理 92.2方法主要參數(shù)及試驗條件的確定 92.3固相萃取小柱的優(yōu)化 122.4干擾實驗 2.5標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液有效期的確定 133.液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法 133.1方法原理 3.2流動相及色譜柱的選擇 133.3方法主要參數(shù)及試驗條件的確定 14（四）方法學(xué)考察 1.線性范圍 2.方法的檢出限和定量限 152.1液相色譜法的檢出限和定量限 152.2液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法的檢出限和定量限 3.方法的回收率和精密度考察 163.1添加量的估算 3.2液相色譜法的回收率和精密度 173.3液相色譜法串聯(lián)質(zhì)譜法的回收率和精密度 20三、試驗驗證的分析、綜述報告，技術(shù)經(jīng)濟(jì)論證，預(yù)期的經(jīng)濟(jì)效果 22四、與國際、國外同類標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)內(nèi)容的對比情況，或者與測試的國外樣品、樣機(jī)的有關(guān)數(shù)據(jù)對比情 22五、采標(biāo)情況，以及是否合規(guī)引用或采用國際國外標(biāo)準(zhǔn) 22六、與有關(guān)法律、法規(guī)的關(guān)系 22七、重大分歧意見的處理經(jīng)過和依據(jù) 23八、涉及專利的有關(guān)說明 23九、貫徹國家標(biāo)準(zhǔn)的要求，以及組織措施、技術(shù)措施、過渡期和實施日期的建議等措施建議 23十、其他應(yīng)當(dāng)說明的事項............................................................................................................................23一、工作簡況-2010）標(biāo)準(zhǔn)修訂項目，計劃編號20233313-T-469，起草單位為山東省畜面廣，應(yīng)用較多，一般較容易獲得。但是，動物攝發(fā)熱、呼吸抑制現(xiàn)象，大劑量攝入引起中毒。人食的動物組織，將導(dǎo)致頭暈、惡心、嘔吐，長期攝入規(guī)定巴比妥、苯巴比妥、苯巴比妥鈉等均屬于禁用一定的問題，一是有些標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布時間較早，其中便性、準(zhǔn)確性方面已不能滿足如今的檢測需求，序標(biāo)準(zhǔn)編號標(biāo)準(zhǔn)名稱檢測方法1GB/T20363-2006飼料中苯巴比妥的測定高效液相色譜法、氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法2GBT/23741-2009飼料中4種巴比妥類藥物的測定，高效液相色譜法、液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法3農(nóng)業(yè)部公告2483-2-2016飼料中苯巴比妥鈉的測定高效液相色譜法4農(nóng)業(yè)部公告2483-4-2016飼料中苯巴比妥鈉的測定液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法高相液相色譜分離、紫外檢測定量或串聯(lián)質(zhì)譜定量。最常用線上組織起草單位人員召開標(biāo)準(zhǔn)修訂啟動會，會上詳細(xì)研確各起草單位工作分工，主持單位負(fù)責(zé)標(biāo)準(zhǔn)修訂工作總體路線確定及文本編寫審核；諾安實力可商品檢驗（青島）責(zé)技術(shù)審核及路線設(shè)計、樣品檢測和數(shù)據(jù)匯總等工作；國技術(shù)顧問、標(biāo)準(zhǔn)文本和編制說明修改二、標(biāo)準(zhǔn)編制原則和主要技術(shù)內(nèi)容確定的依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)》的規(guī)定和要求編寫標(biāo)準(zhǔn)全文。查閱了國內(nèi)外相（2）有關(guān)國家或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)；（4）標(biāo)準(zhǔn)編制小組調(diào)研和實測的樣品檢測數(shù)據(jù)。標(biāo)準(zhǔn)制定結(jié)合國內(nèi)外檢測技術(shù)發(fā)展趨勢和我國《飼料中4種巴比妥類藥物的測定》。與原標(biāo)準(zhǔn)相比，除結(jié)構(gòu)調(diào)整和編輯性改動外，擬修訂技術(shù)內(nèi)容如下:a)更改適用范圍，本次修訂增加寵物配合飼料b)增加了戊巴比妥和仲丁巴比妥的檢測；c)原標(biāo)準(zhǔn)的萃取溶劑為三氯甲烷，屬于有毒類危在檢測實驗室中，液相色譜以及液質(zhì)連用的應(yīng)用相對氣質(zhì)足檢測要求的情況下，本次修訂刪除氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法1.巴比妥類藥物的性質(zhì)及結(jié)構(gòu)比妥類藥物微溶或極微溶于水，易溶于有機(jī)溶劑；其鈉鹽則易不溶于有機(jī)溶劑。六元環(huán)的結(jié)構(gòu)比較穩(wěn)定，加酸、氧化劑、還），C11H18N2O3C10H16N2O32.高效液相色譜法試樣中的藥物用乙腈溶解超聲提取后，以磷酸2.2方法主要參數(shù)及試驗條件的確定險品，屬于管制化學(xué)品，因此本次修訂放棄使用80%乙腈水溶液做為提取試劑時，回收率較好雜質(zhì)提出，導(dǎo)致在液相分析時雜質(zhì)峰較多會影響作為提取試劑，回收率較好，且液相上機(jī)分析時色譜柱對目標(biāo)物的分離更好。如圖2所示，六種目標(biāo)物能夠?qū)崿F(xiàn)完全分離流動相，本法選擇磷酸二氫鈉與乙腈溶液梯度運行做為流動相妥和戊巴比妥結(jié)構(gòu)相似，完整的分離兩種物質(zhì)難度較大。分別溶液，進(jìn)行實驗。結(jié)果表明，在流動相為乙腈+10mmol/L磷酸二氫鈉溶液做為時間（min）乙腈（%）0.003.04.5257522.0277322.52026.52027.030.32.3固相萃取小柱的優(yōu)化步驟簡單，操作方便，減少了活化、淋洗等步驟，待測組分BondElutPlexa80.277.381.079.4苯巴比妥82.681.493.590.2仲丁巴比妥88.582.590.291.3戊巴比妥90.290.791.488.9異戊巴比妥89.382.589.783.5司可巴比妥77.573.888.689.02.4干擾實驗件下上進(jìn)行測定。這幾種物質(zhì)的出峰時間互不干擾。所以2.5標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液有效期的確定測試-20℃和2℃~8℃保存的穩(wěn)定性情況。分別在0天、15天、30天取求，最終確定：100μg/mL標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液2℃~8℃保存，有效期1個月。3.液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法試樣中的巴比妥類藥物經(jīng)乙腈提取，固相萃取柱待測目標(biāo)物中，異戊巴比妥與戊巴比妥性質(zhì)結(jié)整，使得母離子、子離子數(shù)完全相同的異戊巴比妥與戊巴比妥00m/zm/zV測組分的色譜峰面積為縱坐標(biāo)，以待測組分的濃度為序號待測組分線性范圍(μg/mL）線性方程R210.5-50.0Y=13.967x-2.01990.99992苯巴比妥0.5-50.0Y=12.632x-1.33670.99993仲丁巴比妥0.5-50.0Y=10.521x-2.15770.99994戊巴比妥0.5-50.0Y=13.534x+1.32390.99965異戊巴比妥0.5-50.0Y=14.067x+1.9070.99996司可巴比妥0.5-50.0Y=13.5553x-2.01460.99992.方法的檢出限和定量限2.1液相色譜法的檢出限和定量限圖3配合飼料加標(biāo)回收色譜圖（按順序依次為巴比妥、苯巴比妥、仲丁巴比妥、戊巴比妥、異戊巴比妥和司可巴比妥）圖4濃縮飼料加標(biāo)回收色譜圖（按順序依次為巴比妥、苯巴比妥、仲丁巴比妥、戊巴比妥、異戊巴比妥和司可巴比妥）2.2液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法的檢出限和定量限3.方法的回收率和精密度考察3.1添加量的估算用中的可能添加量。其他幾種待測物的用量基本羊3豬6犬貓23.2液相色譜法的回收率和精密度試驗收集育肥豬配合飼料、貓糧、豬濃縮飼料、合飼料妥妥豬濃縮飼料妥妥妥妥妥妥妥妥3.3液相色譜法串聯(lián)質(zhì)譜法的回收率和精密度加回收。按上述確定的樣品提取方法條件和色譜育肥豬配合飼料69.166.368.770.468.370.168.62.1775.571.075.674.169.768.573.23.6873.878.669.976.276.478.875.04.4177.980.673.373.478.673.376.84.2677.581.879.876.279.279.378.92.7371.172.571.876.373.174.173.02.7670.374.271.975.073.876.673.02.6175.975.178.077.069.973.875.24.1982.288.581.781.983.783.63.4177.882.883.782.582.580.781.92.8479.579.579.771.977.278.777.64.2981.588.387.683.979.582.384.24.52妥77.073.479.681.076.877.277.63.7774.681.574.179.379.576.977.84.2080.680.380.382.681.682.881.1妥68.364.363.068.467.16666.23.6969.669.669.667.666.668.868.62.0666.763.165.866.466.363.765.72.2370.370.069.268.766.266.968.92.3673.271.774.172.274.974.773.273.570.573.478.974.974.674.272.480.577.380.476.673.677.44.3078.377.178.077.678.781.577.90.7973.972.876.274.572.072.273.92.1974.974.075.271.875.575.374.32.0167.871.267.079.376.680.472.47.4779.584.688.586.979.887.783.94.8781.576.081.684.984.077.181.64.2579.482.067.669.167.281.273.19.6883.179.481.385.081.083.382.02.62妥74.175.475.575.177.373.875.577.179.077.875.176.979.477.281.180.580.483.481.580.881.4妥65.268.769.064.863.166.866.23.9065.967.169.969.867.66868.12.5766.763.667.169.567.065.766.83.15貓糧88.586.180.787.188.386.886.13.7190.789.387.686.982.290.487.33.7079.986.683.386.387.485.284.73.6687.088.086.587.589.087.691.888.489.088.086.188.888.72.3384.486.573.184.583.781.582.46.4689.790.286.879.989.579.887.24.9389.488.186.489.188.786.988.379.980.584.482.180.683.481.52.2291.087.686.590.686.689.288.52.4789.589.387.891.991.489.990.088.584.384.483.484.686.785.02.34妥89.987.588.586.990.489.988.689.191.386.288.991.39089.42.3680.879.972.586.379.986.679.96.15妥88.691.787.087.389.489.988.82.1391.789.687.689.990.787.889.980.979.582.982.785.084.682.22.55三、試驗驗證的分析、綜述報告，技術(shù)經(jīng)濟(jì)論證，預(yù)期的經(jīng)修訂飼料中巴比妥類藥物的測定國家標(biāo)準(zhǔn)方法，對于規(guī)范提高產(chǎn)品質(zhì)量和安全水平，加強(qiáng)飼料質(zhì)量安全監(jiān)管，安全，確保人民身體健康，推動畜牧產(chǎn)業(yè)和畜牧業(yè)經(jīng)十分重要的意義。本標(biāo)準(zhǔn)作為