2023-2024學(xué)年高二生物下學(xué)期期末復(fù)習(xí)：期末測試卷（基礎(chǔ)卷）教師版（新人教版選擇性必修3）

期末測試卷（基礎(chǔ)卷）

一、單項選擇題（共30分，每道題3分，共10題）

1.果酒中，蘋果酒清香明快，風(fēng)味清爽。如果將蘋果酒進(jìn)一步發(fā)酵，還能獲得果醋。無論是果酒還

是果醋，都具有一定的保健養(yǎng)生的功效。下列關(guān)于在果酒、果醋制作過程中的操作和菌種的敘述，

正確的是（）

A.果酒制作中，先將葡萄去掉枝梗，再對葡萄進(jìn)行沖洗以防止雜菌污染

B.果酒制成后，加入醋酸菌適當(dāng)提高溫度，并密閉無氧即可生產(chǎn)果醋

C.發(fā)酵條件不當(dāng)果酒可能變酸，在變酸的酒的表面形成菌膜是乳酸菌大量繁殖而形成的

D.在果汁中加入人工培養(yǎng)的酵母菌可以提高果酒的品質(zhì)并更好地抑制其他微生物的生長

【答案】D

【解析】

【分析】

1、參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。

2、參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、

糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再?/p>

乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

A、果酒制作中，先將葡萄進(jìn)行沖洗，再去掉梗以防止雜菌污染，A錯誤；

B、果酒制成后，加入醋酸菌適當(dāng)提高溫度，并通入無菌氧氣即可生產(chǎn)果醋，B錯誤；

C、發(fā)酵條件不當(dāng)果酒可能變酸，在變酸的酒的表面形成菌膜是醋酸菌大量繁殖而形成的，C錯誤；

D、在果汁中加入人工培養(yǎng)的酵母菌可以提高果酒的品質(zhì)并更好地抑制其他微生物的生長，D正確。

故選Do

2.污水中一般都會含有亞硝酸鹽，科研人員從污水中分離了亞硝酸鹽降解菌，該微生物能對污水中

的亞硝酸鹽進(jìn)行有效的去除。從水體取樣后置于含亞硝酸鹽培養(yǎng)基中進(jìn)行富集培養(yǎng)，取富集培養(yǎng)6

代后的菌液依次等比稀釋。稀釋系列菌液濃度為10-4、10,10*10110一8,分別取0.1mL培

養(yǎng)液涂平板，37℃倒置培養(yǎng)24h,觀察菌落形態(tài)并進(jìn)行相關(guān)檢測、純化和保藏。下列說法錯誤的是

（）

A.該富集培養(yǎng)基是以亞硝酸鹽作為唯一氮源的培養(yǎng)基

B.菌液加入裝有新鮮富集培養(yǎng)基中反復(fù)培養(yǎng)6代的目的是淘汰不能利用亞硝酸鹽的微生物

C.若稀釋涂布平板上生長出不同形態(tài)的亞硝酸鹽降解菌，可再進(jìn)行平板劃線檢測、純化

D.如果研究純化后的降解菌的生長曲線，可取該菌落進(jìn)行液體培養(yǎng)并用甲紫溶液染色后進(jìn)行活菌

計數(shù)

【答案】D

【解析】

【分析】

選擇培養(yǎng)基是指一類根據(jù)特定微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某理化因素抗性的原理而設(shè)計的培養(yǎng)

基。具有只允許特定的微生物生長，而同時抑制或阻止其他微生物生長的功能。

【詳解】

A、該富集培養(yǎng)基是以亞硝酸鹽作為唯一氮源的培養(yǎng)基，這樣可以使利用亞硝酸鹽的細(xì)菌大量繁殖,

而不能利用亞硝酸鹽的細(xì)菌不能生長，A正確；

B、菌液加入裝有新鮮富集培養(yǎng)基中反復(fù)培養(yǎng)6代的目的是使能利用亞硝酸鹽的微生物大量繁殖，

從而將不能利用亞硝酸鹽的微生物淘汰掉，B正確；

C、若稀釋涂布平板上生長出不同形態(tài)的亞硝酸鹽降解菌，說明利用亞硝酸鹽的微生物有多種，因

此需要再進(jìn)行平板劃線檢測、純化，C正確；

D、如果研究純化后的降解菌的生長曲線，可取該菌落進(jìn)行液體培養(yǎng)并用抽樣檢測法結(jié)合染色進(jìn)行

活菌計數(shù)，D錯誤。

故選D。

3.下列關(guān)于探究抗生素對細(xì)菌選擇作用的相關(guān)描述，正確的是（）

A.平板培養(yǎng)基劃了4個區(qū)域，1個區(qū)域為對照組，另外3個均為實驗組

B.對照組不放置無菌紙片，實驗組放置含抗生素的無菌紙片

C.接種涂布后的培養(yǎng)皿正向放置于37℃的恒溫箱中培養(yǎng)12~16h

D.抑菌圈越大細(xì)菌耐藥性越強，應(yīng)從遠(yuǎn)離抑菌圈的菌落挑取細(xì)菌繼續(xù)培養(yǎng)

【答案】A

【解析】

【分析】

抗生素能夠抑制細(xì)菌的繁殖，有些抗生素通過抑制細(xì)菌細(xì)胞壁的形成來抑制細(xì)胞增殖。從圖中可知,

該培養(yǎng)基分為四個區(qū)域，1區(qū)域無抑菌圈，2、3、4三組有抑菌圈。

【詳解】

A、1個區(qū)域為對照組，只放置了不含抗生素的紙片，排除紙片對實驗干擾，另外3個均為實驗組，

因為另外3組有抑菌圈，A正確；

B、對照組需放置無菌紙片，排除無菌紙片對實驗干擾，B錯誤；

C、接種涂布后的培養(yǎng)皿要倒置培養(yǎng)，防止培養(yǎng)基中水分蒸發(fā)過快，C錯誤；

D、抑菌圈越大細(xì)菌耐藥性越弱，應(yīng)從靠近抑菌圈的菌落挑取細(xì)菌繼續(xù)培養(yǎng)，該區(qū)域菌種對抗生素

耐藥性強，D錯誤。

故選Ao

4.平板涂布是分離菌種常用的方法，下列相關(guān)敘述不恰當(dāng)?shù)氖牵ǎ?/p>

A.固體培養(yǎng)基滅菌后，應(yīng)冷卻至60℃左右時倒平板

B.倒好的平板需冷卻后立即使用，以免表面干燥，影響菌的生長

C.平板涂布分離到的單菌落需進(jìn)一步擴(kuò)增鑒定純化后用于生產(chǎn)應(yīng)用

D.平板涂布法既可用于微生物的分離，也可用于微生物的計數(shù)

【答案】B

【分析】

稀釋平板計數(shù)是根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的單個菌落，即是由一個單細(xì)胞繁殖而成這一培

養(yǎng)特征設(shè)計的計數(shù)方法，即一個菌落代表一個單細(xì)胞。計數(shù)時，首先將待測樣品制成均勻的系列稀

釋液，盡量使樣品中的微生物細(xì)胞分散開，使成單個細(xì)胞存在（否則一個菌落就不只是代表一個細(xì)

胞），再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi)。經(jīng)培

養(yǎng)后，由單個細(xì)胞生長繁殖形成菌落，統(tǒng)計菌落數(shù)目，即可計算出樣品中的含菌數(shù)。此法所計算的

菌數(shù)是培養(yǎng)基上長出來的菌落數(shù)，故又稱活菌計數(shù)。

【詳解】

A、固體培養(yǎng)基滅菌后，應(yīng)冷卻至60℃左右時倒平板，固體培養(yǎng)基中含有瓊脂，40℃左右會凝固，

因此溫度過低會導(dǎo)致培養(yǎng)基凝固無法倒平板，A正確；

B、倒好的未接種的培養(yǎng)基不能馬上使用，需要在恒溫箱中保存『2d,如果沒有菌落生長，說明培

養(yǎng)基的制備是成功的，這時才可以使用，B錯誤；

C、平板涂布分離到的單菌落仍需進(jìn)一步劃線純化，用于生產(chǎn)應(yīng)用或者菌種保藏，C正確；

D、結(jié)合分析可知，平板涂布法既可用于微生物的分離，也可用于微生物的計數(shù)，D正確。

故選Bo

5.在培育轉(zhuǎn)基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作為標(biāo)記基因，只有含卡那霉素抗性基

因的細(xì)胞和組織才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長。下圖為獲得抗蟲棉的技術(shù)流程。請據(jù)圖回答，敘述

正確的是（）

①A過程需要的酶主要有限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶②B過程需要加入卡那霉素進(jìn)行選擇培

養(yǎng)③C過程為脫分化過程，培養(yǎng)基中只需加入營養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂④D過程可以用放射性同位素（或

熒光分子）標(biāo)記的抗蟲基因作為探針進(jìn)行分子水平的檢測⑤D過程可以用蟲感染植株進(jìn)行個體水

平的檢測

A.①②③④⑤B.①②④⑤

C.③④⑤D.①③④⑤

【答案】B

【解析】

【分析】

借抗蟲棉的培育過程考查基因工程的基本操作程序以及基因分離定律的靈活運用，旨在考查對知識

的理解和應(yīng)用知識解決實際問題的的能力。質(zhì)粒作為運載體的特點：能夠自我復(fù)制，或整合到染色

體上隨染色體復(fù)制；有多個限制酶切點（便于切割）；有標(biāo)記基因（便于進(jìn)行檢驗）目的基因整合到受

體細(xì)胞的一條染色體上，而其同源染色體上沒有該交易時時，基因遺傳遵循分離定律。

【詳解】

①A過程需要的酶主要有限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶，①正確；

②B過程需要加入卡那霉素進(jìn)行選擇培養(yǎng)，②正確；

③C過程為脫分化過程，培養(yǎng)基中需加入營養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂、激素以及卡拉霉素，③錯誤；

@D過程可以用放射性同位素（或熒光分子）標(biāo)記的抗蟲基因作為探針進(jìn)行分子水平的檢測，④正確;

⑤D過程可以用蟲感染植株進(jìn)行個體水平的檢測，⑤正確；

故選B。

6.下列關(guān)于采用胚胎工程技術(shù)實現(xiàn)某良種肉用?？焖俜敝车臄⑹?，正確的是（）

A.采取激素注射等方法對良種母牛作超數(shù)排卵處理

B.體外培養(yǎng)發(fā)育到原腸胚期的胚胎即可進(jìn)行移植

C.使用免疫抑制劑以避免代孕牛對植入胚胎的排斥反應(yīng)

D.利用胚胎分割技術(shù)，同卵多胎較同卵雙胎成功率更高

【答案】A

【解析】

【分析】

胚胎移植的基本程序：對供體和受體的選擇和處理（同期發(fā)情處理，超數(shù)排卵處理）、配種或進(jìn)行

人工授精、對胚胎的收集檢查培養(yǎng)或保存、進(jìn)行胚胎移植。所以在發(fā)情期給良種母牛注射激素，促

進(jìn)母牛多排卵，這種處理屬于超數(shù)排卵處理。

【詳解】

用促性腺激素對良種奶牛進(jìn)行注射處理，可促使其超數(shù)排卵，A正確；進(jìn)行移植的胚胎是桑根胚或

囊胚，B錯誤；受體對移植的胚胎幾乎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，因此無需使用免疫抑制劑，C錯誤；

利用胚胎分割技術(shù)，同卵雙胎較同卵多胎成功率更高，D錯誤。

7.采用基因工程技術(shù)將人凝血因子基因?qū)肷窖蚴芫?，培育出了轉(zhuǎn)基因羊，但是人凝血因子只存

在該轉(zhuǎn)基因羊的乳汁中，下列相關(guān)敘述，正確的是（）

A.人體細(xì)胞中凝血因子基因的堿基對數(shù)目，小于凝血因子氨基酸數(shù)目的3倍

B.可將含有人凝血因子基因的重組DNA分子導(dǎo)入羊的受精卵中

C.在該轉(zhuǎn)基因羊中，人凝血因子基因只存在于乳腺細(xì)胞，而不存在羊的其他體細(xì)胞中

D.人凝血因子基因開始轉(zhuǎn)錄后，DNA聚合酶以DNA分子的一條鏈為模板合成mRNA

【答案】B

【解析】

【分析】

真核生物基因包括編碼區(qū)和非編碼區(qū)，而編碼區(qū)又分為外顯子和內(nèi)含子，真正編碼蛋白質(zhì)的是編碼

區(qū)的外顯子，非編碼區(qū)和內(nèi)含子只是起了調(diào)控表達(dá)的作用；轉(zhuǎn)錄是以DNA的一條鏈為模板，利用RNA

聚合酶的催化生成mRNA的過程；受體細(xì)胞如果是植物細(xì)胞可以選擇受精卵或一般的體細(xì)胞，如果

是動物細(xì)胞受體細(xì)胞一般為受精卵，受精卵的全能性最高。

【詳解】

A、因為真核生物的基因中存在非編碼區(qū)，而編碼蛋白質(zhì)的只是編碼區(qū)的外顯子，并且終止密碼子

不編碼氨基酸，所以凝血因子基因的堿基對數(shù)目應(yīng)大于凝血因子氨基酸數(shù)目的3倍，A錯誤；

B、基因工程中一般將目的基因?qū)雱游锏氖芫鸭?xì)胞，該過程常采用顯微注射法，B正確；

C、因為目的基因?qū)氲搅耸芫阎?，而轉(zhuǎn)基因羊的每一個體細(xì)胞都是由受精卵有絲分裂而來的，

所以轉(zhuǎn)基因羊的體細(xì)胞都含有人凝血因子基因，只是基因存在選擇性表達(dá)，C錯誤；

D、人凝血因子基因開始轉(zhuǎn)錄后，RNA聚合酶以DNA分子的一條鏈為模板合成mRNA,D錯誤。

故選Bo

8.我國科研人員在實驗室中通過構(gòu)建多種酶催化體系的方法，首次實現(xiàn)了在細(xì)胞外從二氧化碳固定

到合成淀粉的過程。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）

A.可采用PCR技術(shù)從不同物種的基因組中擴(kuò)增得到多酶催化體系中的目標(biāo)酶基因

B.在多酶催化體系中，可能會因為酶的最適反應(yīng)條件不同而使反應(yīng)中斷

C.該方法可在分子水平上直接改變氨基酸的序列，實現(xiàn)對酶特性的改造和優(yōu)化

D.若該科研成果成熟后推廣應(yīng)用有助于擺脫耕地和自然環(huán)境限制，解決糧食危機

【答案】C

【解析】

【分析】

1、PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項在生物體外復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成技術(shù)，基本步驟

是變性、退火（復(fù)性）、延伸。

2、蛋白質(zhì)工程：是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及與其生理功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或

基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。

【詳解】

A、獲得的目的基因可利用PCR技術(shù)在體外反應(yīng)體系中擴(kuò)增，A正確

B、酶的作用條件較溫和，不同的酶其適宜的溫度和pH不同，在多酶催化體系中，可能會因為酶的

最適反應(yīng)條件不同而使反應(yīng)中斷，B正確；

C、該方法在分子水平上，通過改變基因的堿基序列，間接改變氨基酸的序列，從而改變蛋白質(zhì)的

結(jié)構(gòu)，實現(xiàn)對酶特性的改造和優(yōu)化，c錯誤；

D、該科研實現(xiàn)了在細(xì)胞外從二氧化碳固定到合成淀粉的過程，若成熟后推廣應(yīng)用有助于擺脫耕地

和自然環(huán)境限制，解決糧食危機，D正確。

故選Co

9.采用基因工程技術(shù)將人凝血因子基因?qū)肷窖蚴芫?，培育出了轉(zhuǎn)基因羊，但是人凝血因子只存

在該轉(zhuǎn)基因羊的乳汁中，下列相關(guān)敘述，正確的是（）

A.人體細(xì)胞中凝血因子基因的堿基對數(shù)目，小于凝血因子氨基酸數(shù)目的3倍

B.可將含有人凝血因子基因的重組DNA分子導(dǎo)入羊的受精卵中

C.在該轉(zhuǎn)基因羊中，人凝血因子基因只存在于乳腺細(xì)胞，而不存在羊的其他體細(xì)胞中

D.人凝血因子基因開始轉(zhuǎn)錄后，DNA聚合酶以DNA分子的一條鏈為模板合成mRNA

【答案】B

【解析】

【分析】

真核生物基因包括編碼區(qū)和非編碼區(qū)，而編碼區(qū)又分為外顯子和內(nèi)含子，真正編碼蛋白質(zhì)的是編碼

區(qū)的外顯子，非編碼區(qū)和內(nèi)含子只是起了調(diào)控表達(dá)的作用；轉(zhuǎn)錄是以DNA的一條鏈為模板，利用RNA

聚合酶的催化生成mRNA的過程；受體細(xì)胞如果是植物細(xì)胞可以選擇受精卵或一般的體細(xì)胞，如果

是動物細(xì)胞受體細(xì)胞一般為受精卵，受精卵的全能性最高。

【詳解】

A、因為真核生物的基因中存在非編碼區(qū)，而編碼蛋白質(zhì)的只是編碼區(qū)的外顯子，并且終止密碼子

不編碼氨基酸，所以凝血因子基因的堿基對數(shù)目應(yīng)大于凝血因子氨基酸數(shù)目的3倍，A錯誤；

B、基因工程中一般將目的基因?qū)雱游锏氖芫鸭?xì)胞，該過程常采用顯微注射法，B正確；

C、因為目的基因?qū)氲搅耸芫阎?，而轉(zhuǎn)基因羊的每一個體細(xì)胞都是由受精卵有絲分裂而來的，

所以轉(zhuǎn)基因羊的體細(xì)胞都含有人凝血因子基因，只是基因存在選擇性表達(dá)，C錯誤；

D、人凝血因子基因開始轉(zhuǎn)錄后，RNA聚合酶以DNA分子的一條鏈為模板合成mRNA,D錯誤。

故選B。

10.軟體動物卵裂初期會從受精卵的植物極形成一個暫時性的細(xì)胞質(zhì)突起，稱為極葉（如圖所示）。

若人工將極葉除去，發(fā)育成的個體在足、眼等處有缺陷。相關(guān)敘述鎮(zhèn)誤的是（）

A.本實驗說明細(xì)胞質(zhì)對細(xì)胞分化有重要作用

B.極葉中可能含有一些胚胎發(fā)育必需的物質(zhì)

C.極葉是減數(shù)分裂中細(xì)胞質(zhì)不均分的結(jié)果

D.極葉的形成依賴于細(xì)胞有序的調(diào)控

【答案】C

【解析】

【分析】

細(xì)胞的分化：在個體發(fā)育過程中，在細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上發(fā)生的穩(wěn)定性差異的過程。

【詳解】

A、由題干信息可知，人工將極葉除去，發(fā)育成的個體在足、眼等處有缺陷，說明細(xì)胞質(zhì)對細(xì)胞分

化有重要作用，A正確；

B、從題干信息可知，人工將極葉除去，發(fā)育成的個體在足、眼等處有缺陷，極葉中可能含有一些

胚胎發(fā)育必需的物質(zhì)，B正確；

C、極葉是受精卵發(fā)育形成，進(jìn)行的是有絲分裂過程，C錯誤；

D、極葉的形成，實質(zhì)上基因選擇性表達(dá)的結(jié)果，依賴于細(xì)胞有序的調(diào)控D正確。

故選Co

二、非選擇題(共70分，共5題)

11.青霉素是由真菌分泌對抗細(xì)菌的物質(zhì)，而雷帕霉素相反，是由細(xì)菌分泌對抗真菌的物質(zhì)：請回

答下列問題：

(1)細(xì)菌與真菌在結(jié)構(gòu)上的主要區(qū)別是；培養(yǎng)細(xì)菌時，需將pH調(diào)至—

(2)從土壤中分離和提純能分泌雷帕霉素的細(xì)菌，實驗流程為：土壤取樣一選擇培養(yǎng)一梯度稀釋一

鑒別培養(yǎng)

①選擇培養(yǎng)的目的是選擇培養(yǎng)使用的是—(填“固體”或“液體”)培養(yǎng)基。

②該處鑒別培養(yǎng)時，可依菌落特征進(jìn)行鑒定，菌落特征包括(答出2點即可)。利

用菌落特征能夠鑒定特定微生物的原因是o

(3)為進(jìn)一步研究雷帕霉素的作用，請?zhí)岢鲆粋€值得探究的課題名稱：o

【答案】

(1)細(xì)菌無核膜(或無成型的細(xì)胞核)中性或微堿性

(2)增加目標(biāo)菌的濃度以確保能夠從樣品中分離到所需的微生物液體菌落的形

狀、大小、顏色、隆起程度等在一定的培養(yǎng)條件下，同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征

(3)探究雷帕霉素對不同真菌的抑菌效果(或探究抑制真菌的最適雷帕霉素濃度)

【解析】

【分析】

1、培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生

長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)

霉菌時需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌時需將pH調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧微生物時則需

要提供無氧的條件。

2、選擇培養(yǎng)基是指通過培養(yǎng)混合的微生物，僅得到或篩選出所需要的微生物，其他不需要的種類

在這種培養(yǎng)基上是不能生存的。

(1)細(xì)菌屬于原核生物，真菌屬于真核生物，細(xì)菌與真菌在結(jié)構(gòu)上的主要區(qū)別是細(xì)菌無核膜為界限

的細(xì)胞核；大多數(shù)細(xì)菌的最適生長pH值為6.5?7.5,故培養(yǎng)細(xì)菌時需要將培養(yǎng)基的pH調(diào)至中性或

微堿性。

(2)①選擇培養(yǎng)基是指通過培養(yǎng)混合的微生物，僅得到或篩選出所需要的微生物，其他不需要的種

類在這種培養(yǎng)基上是不能生存的。選擇培養(yǎng)的目的是增加目標(biāo)菌的濃度以確保能夠從樣品中分離到

所需的微生物；按照物理形態(tài)分，培養(yǎng)基可分為固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，該處培

養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基。

②菌落是由單個或多個同種細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的，有一定形態(tài)，構(gòu)造等特征的子細(xì)胞群體。

菌落特征包括菌落的形狀、大小、顏色、隆起程度等；在一定的培養(yǎng)條件下，同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)

定的菌落特征，可利用菌落特征來鑒定特定微生物。

(3)為進(jìn)一步研究雷帕霉素的作用，可探究雷帕霉素對不同真菌的抑菌效果。

12.常見的釀酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖來進(jìn)行酒精發(fā)酵，自然界中某些酵母菌能分解

木糖產(chǎn)生酒精，科學(xué)家欲從果園的葡萄上或土壤中分離這種酵母菌，操作如下：

(1)制備酵母菌培養(yǎng)基要進(jìn)行倒平板操作，待平板冷凝后，要將平板倒置，其主要原因是

(2)純化菌株時，通常使用的劃線工具是。在第二次及以后劃線時，總是從上一次的末端

開始劃線，這樣做的目的是o劃線的某個平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線

上都不間斷地長滿了菌落，第二劃線區(qū)域的第一條線上無菌落，其他劃線上有菌落。造成劃線無菌

落可能的操作失誤是o

(3)將自然界中采集到的葡萄帶回實驗室，用無菌水將葡萄皮上的微生物沖洗到無菌的三角瓶中，

然后將瓶中的液體用涂布器涂布接種于以為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，在適宜的條件下

培養(yǎng)一段時間，獲得多個所需的酵母菌菌落。實驗中所用的培養(yǎng)基按功能屬于培養(yǎng)基。

(4)若要檢測土樣中的酵母菌含量，應(yīng)采用法。將1mL土壤溶液分別稀釋10倍和100

倍，每種稀釋度各在3個平板上分別接入0.1mL稀釋液，經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，6個平板上的菌落數(shù)分別

為548、472、450、48、47和58。據(jù)此可得出每升土壤溶液中的活菌數(shù)約為個。

【答案】

(1)防止培養(yǎng)皿蓋的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染

(2)接種環(huán)將聚集的菌落逐步減少以獲得單個菌落接種環(huán)灼燒后未冷卻(或劃

線未從第一區(qū)域末端開始)

(3)木糖選擇

(4)稀釋涂布平板5.1X107

【解析】

【分析】

1、選擇培養(yǎng)基是指通過培養(yǎng)混合的微生物，僅得到或篩選出所需要的微生物，其他不需要的種類

在這種培養(yǎng)基上是不能生存的。利用選擇培養(yǎng)基和轉(zhuǎn)基因技術(shù)能夠篩選利用木糖產(chǎn)生酒精，且對酒

精的耐受能力強的酵母菌。

2、培養(yǎng)基配制時的注意事項：①全程要求無菌操作，無菌技術(shù)除了用來防止實驗室的培養(yǎng)物被其

他外來微生物污染外，還能有效地避免操作者自身被微生物感染;②培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50℃

左右時，才能用來倒平板?？梢杂檬钟|摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，當(dāng)感覺到錐形瓶的溫度下降到剛剛

不燙手時，就可以進(jìn)行倒平板。操作時應(yīng)使錐形瓶的瓶口通過火焰，以防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)

基；③平板冷凝后皿蓋上會凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，若將平板倒置，既可

以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染；④在倒平板

的過程中，不能將培養(yǎng)基濺到皿蓋與皿底之間的部位，因為空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間

的培養(yǎng)基上滋生。

(1)為了防止培養(yǎng)皿蓋的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染，制備酵母菌培養(yǎng)基要進(jìn)行倒平板操作，待平

板冷凝后，要將平板倒置。

(2)純化菌株時，通常使用的劃線工具是接種環(huán)。在第二次及以后劃線時，總是從上一次的末端開

始劃線，這樣做可以將聚集的菌落逐步減少以獲得單個菌落。劃線的某個平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)

域的劃線上都不間斷地長滿了菌落，第二劃線區(qū)域的第一條線上無菌落，其它劃線上有菌落。造成

劃線無菌落可能的操作失誤是接種環(huán)灼燒后未冷卻或者劃線未從第一區(qū)域末端開始。

(3)自然界中某些酵母菌能分解木糖產(chǎn)生酒精，科學(xué)家欲從果園的葡萄上或土壤中分離這種酵母菌,

則培養(yǎng)基應(yīng)以木糖為唯一碳源。由于該培養(yǎng)基只能讓分解木糖的微生物生存，因此屬于選擇培養(yǎng)基。

(4)稀釋涂布平板法可用于微生物技術(shù)，因此若要檢測土樣中的酵母菌含量，應(yīng)采用稀釋涂布平板

法。稀釋涂布平板法中，一般選用30-300個菌落數(shù)進(jìn)行計數(shù)，根據(jù)6個平板上的菌落數(shù)分別為548、

472、450、48、47和58,可知應(yīng)采用稀釋100倍的平板進(jìn)行計數(shù)，菌落數(shù)分別為48、47和58,據(jù)

此可得出每升土壤溶液中的活菌數(shù)為=(48+47+58)4-3X1004-(0.1X10-3)=5.1X10,個。

13.水稻胚乳生物反應(yīng)器技術(shù)是利用基因工程技術(shù)改造水稻，以水稻胚乳作為“蛋白生產(chǎn)車間”來

表達(dá)和生產(chǎn)重組蛋白質(zhì)或者多肽的技術(shù)。血清白蛋白對治療肝硬化和肝腹水等疾病有顯著療效，我

國通過自主研發(fā)將血清白蛋白基因?qū)胨九呷榧?xì)胞，成功提取到植物源重組人血清白蛋白。該技

術(shù)具有生產(chǎn)成本低、無病原菌的污染以及適合大規(guī)模生產(chǎn)等優(yōu)勢?；卮鹣铝袉栴}：

(1)根據(jù)血清白蛋白氨基酸序列，人工合成血清白蛋白mRNA在______的催化下獲得cDNA,再利用

PCR技術(shù)擴(kuò)增得到血清白蛋白基因。PCR擴(kuò)增時，要設(shè)計一對引物(引物1和引物2),PCR過程完成

三次循環(huán)所需引物的總數(shù)為,n次循環(huán)后產(chǎn)生的DNA分子中含有引物1的占

(2)為了便于擴(kuò)增的血清白蛋白基因與質(zhì)粒連接，經(jīng)常在兩條引物上設(shè)計加入不同的限制性酶切位

點，主要目的是保證，防止質(zhì)?；蚰康幕蜃陨憝h(huán)化。

(3)在構(gòu)建基因表達(dá)載體時，需將血清白蛋白基因與等調(diào)控組件重組在一起，從而確保

血清白蛋白基因在水稻胚乳細(xì)胞中表達(dá)。

(4)科學(xué)家最初利用大腸桿菌生產(chǎn)重組人血清白蛋白，結(jié)果沒有得到有活性的血清白蛋白，而轉(zhuǎn)基

因水稻胚乳細(xì)胞能夠產(chǎn)生有活性的血清白蛋白。其原因是

【答案】

(1)逆轉(zhuǎn)錄酶14(2"-1)/2"

(2)目的基因定向插入質(zhì)粒

(3)水稻胚乳蛋白基因的啟動子

(4)大腸桿菌沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，不能對蛋白質(zhì)進(jìn)行加工、修飾，而水稻胚乳細(xì)胞具有

【解析】

【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

(1)目的基因的獲取方法有：從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子

和標(biāo)記基因等。

(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞。

(4)目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測和個體水平上的鑒定。

(l)cDNA是以mRNA為模板得到的產(chǎn)物，所以該過程是逆轉(zhuǎn)錄過程，需要逆轉(zhuǎn)錄酶的參與。PCR過程

完成一次循環(huán)產(chǎn)生兩個DNA分子，所需引物為2個，完成第二次循環(huán)產(chǎn)生四個DNA分子，所需引物

為4個，完成第三次循環(huán)產(chǎn)生8個DNA分子，所需引物為8個，所以PCR過程完成三次循環(huán)所需引

物的總數(shù)為：2+4+8=14。n次循環(huán)后產(chǎn)生的DNA分子為2"個，n次循環(huán)后產(chǎn)生的DNA分子中含有引

物1的占(2"-1)/2%

(2)為了便于擴(kuò)增的血清白蛋白基因與質(zhì)粒連接，常在兩條引物上設(shè)計加入不同的限制性酶切位點，

使DNA片段能定向插入表達(dá)載體，避免因為DNA片段的黏性末端相同，而導(dǎo)致的自身連接或者反向

連接。

(3)基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子、標(biāo)記基因等部分，因此在構(gòu)建基因表達(dá)載體時,

為了確保血清白蛋白基因在水稻胚乳細(xì)胞中表達(dá)，需將血清白蛋白基因與水稻胚乳蛋白基因的啟動

子等調(diào)控組件重組在一起。

(4)利用大腸桿菌生產(chǎn)重組人血清白蛋白，結(jié)果沒有得到有活性的血清白蛋白，而轉(zhuǎn)基因水稻胚乳

細(xì)胞能夠產(chǎn)生有活性的血清白蛋白。其原因是大腸桿菌是原核生物，沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，不能

對蛋白質(zhì)進(jìn)行加工、修飾，而水稻胚乳細(xì)胞具有。

14.依據(jù)所學(xué)相關(guān)知識，回答下列問題：

(1)卵細(xì)胞和精子發(fā)生上的重要區(qū)別之一是，卵泡的形成和在卵巢內(nèi)的儲備是在_____(時期)完成

的，初情期后再發(fā)生MI和Mil。

(2)精子穿越放射冠和透明帶，觸及卵細(xì)胞膜的瞬間，會產(chǎn)生__________反應(yīng)，防止多個精子入卵

受精。

(3)來自同一胚胎經(jīng)分割得到的的后代具有相同的,因此胚胎分割屬于—

或克隆。具體操作時，將胚胎切開，吸出其中的半個胚胎，注入預(yù)先準(zhǔn)備好的中，或

直接將裸半胚植入受體。

(4)胚胎移植技術(shù)中供體的主要職能是，受體的主要職能是

(5)動物細(xì)胞的全能性會隨著動物細(xì)胞分化程度的提高而逐漸受到限制，分化潛能逐漸變?nèi)?，目?/p>

還不能用類似的方法獲得完整的動物個體，因此，用動物體細(xì)胞克隆的動物，

實際是通過來實現(xiàn)的。

【答案】

⑴胎兒期

⑵透明帶

(3)遺傳物質(zhì)無性繁殖(或無性生殖)