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…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁,總=sectionpages22頁第=page11頁,總=sectionpages11頁2024年滬教版選擇性必修3生物下冊(cè)階段測(cè)試試卷557考試試卷考試范圍:全部知識(shí)點(diǎn);考試時(shí)間:120分鐘學(xué)校:______姓名:______班級(jí):______考號(hào):______總分欄題號(hào)一二三四五總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共7題,共14分)1、下圖表示基因型為DdTt的水稻的花藥通過無菌操作;接入試管后,在一定條件下形成試管苗的培育過程。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()
A.a、b、c、d中的植物細(xì)胞都有全能性,但全能性的表達(dá)程度有差異B.水稻花藥經(jīng)a~d發(fā)育成試管苗的過程涉及有絲分裂、減數(shù)分裂C.試管苗可能出現(xiàn)的基因型有DT、Dt、dT、dtD.為促進(jìn)細(xì)胞分裂生長(zhǎng),可在培養(yǎng)基中加入適宜濃度的植物激素2、植物的秸稈;枝葉等纖維物質(zhì)是地球上最多的可再生資源;利用秸稈可以發(fā)酵生產(chǎn)乙醇,其流程如下圖所示。下列有關(guān)說法錯(cuò)誤的是()
A.土壤是微生物的天然培養(yǎng)基,微生物X與Y均可從土壤中分離純化B.微生物X產(chǎn)生的能將秸稈中纖維素分解的酶至少由三種組分構(gòu)成C.糖液濃度過高時(shí)葡萄糖的產(chǎn)生受到抑制,這與分解秸稈的酶活性無關(guān)D.接種微生物Y后,過程③需在密閉條件下進(jìn)行以保證獲得產(chǎn)物乙醇3、相比正常甲狀腺組織,甲狀腺癌細(xì)胞中N基因表達(dá)水平較低。為研究N基因?qū)谞钕侔┘?xì)胞的影響,研究者培養(yǎng)出單層細(xì)胞,通過更換培養(yǎng)基,使癌細(xì)胞不再增殖,并使用硬物劃線,48小時(shí)后觀察結(jié)果如下,下列分析錯(cuò)誤的是()
A.甲狀腺髓樣癌細(xì)胞培養(yǎng)液中需要加入葡萄糖,水,氨基酸、動(dòng)物血清等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)B.經(jīng)過胰蛋白酶處理后的甲狀腺髓樣癌細(xì)胞在培養(yǎng)板上出現(xiàn)貼壁生長(zhǎng)的現(xiàn)象C.轉(zhuǎn)入空質(zhì)粒的組為對(duì)照組,目的是排除轉(zhuǎn)基因操作以及基因載體對(duì)細(xì)胞的影響D.實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明N基因能夠抑制癌細(xì)胞的增殖,為預(yù)防和治療癌癥提供了新的方向4、基因編輯技術(shù)CRISPR/Cas9系統(tǒng)包括兩個(gè)組分:一個(gè)是人工合成的短鏈RNA(sgRNA)和一個(gè)來自細(xì)菌的核酸酶Cas9。sgRNA與目的基因中希望被編輯的DNA序列相結(jié)合,然后Cas9切割該DNA序列,使DNA雙鏈斷裂,此時(shí)向細(xì)胞中加入大量可用于修復(fù)的模板DNA,細(xì)胞就會(huì)以這些片段為模板合成DNA,從而使特定的堿基序列被引入基因組中、下列說法錯(cuò)誤的是()A.Cas9決定了基因編輯的位點(diǎn)和基因編輯的效率B.基因編輯技術(shù)可以破壞某個(gè)基因使其失去功能C.基因突變是不定向的而基因編輯能定向改變基因D.Cas9類似限制酶能夠使雙鏈DNA中的磷酸二酯鍵斷裂5、地錢具有重要的藥用價(jià)值,若要利用葉片快速人工繁育,可用的技術(shù)是()A.單倍體育種技術(shù)B.干細(xì)胞技術(shù)C.細(xì)胞核移植技術(shù)D.植物組織培養(yǎng)技術(shù)6、最常用的接種微生物的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法,下列關(guān)于二者的比較正確的()。平板劃線法稀釋涂布平板法①需在無菌條件下操作不需無菌操作②培養(yǎng)基中不加瓊脂培養(yǎng)基中加有瓊脂③不可計(jì)算菌液中的活菌數(shù)可計(jì)算菌液中的活菌數(shù)④需要接種環(huán)需要涂布器
A.③④B.②④C.①④D.②③7、為研究治療性克隆技術(shù)能否用于帕金森病的治療,科研人員利用帕金森病模型鼠進(jìn)行如圖實(shí)驗(yàn),相關(guān)敘述正確的是()
A.過程①中選擇MII期的卵母細(xì)胞不利于細(xì)胞核全能性恢復(fù)B.過程②重構(gòu)胚培養(yǎng)需對(duì)細(xì)胞進(jìn)行一次脫分化和兩次胰蛋白酶處理C.過程③的關(guān)鍵是利用特定條件誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞相關(guān)基因表達(dá)D.過程④對(duì)受體小鼠需要注射免疫抑制劑來抑制其細(xì)胞免疫功能評(píng)卷人得分二、多選題(共5題,共10分)8、下圖為雜交瘤細(xì)胞制備示意圖。骨髓瘤細(xì)胞由于缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(HGPRT-);在HAT篩選培養(yǎng)液中不能正常合成DNA,無法生長(zhǎng)。下列敘述正確的是()
A.可用滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合B.未融合的細(xì)胞和融合的同種核細(xì)胞都能在HAT培養(yǎng)液中生長(zhǎng)C.雜交瘤細(xì)胞需進(jìn)一步篩選才能用于生產(chǎn)D.細(xì)胞膜的選擇透過性是細(xì)胞融合的基礎(chǔ)9、廚余垃圾是指居民日常生活及食品加工、飲食服務(wù)、單位供餐等活動(dòng)中產(chǎn)生的垃圾。廢液中的淀粉、蛋白質(zhì)、脂肪等微溶性物質(zhì),易腐爛變質(zhì),滋生病原微生物等。若處理不當(dāng),可能造成嚴(yán)重的污染。圓褐固氮菌和巨大芽孢桿菌組合可以將有機(jī)廚余垃圾迅速分解成水和二氧化碳,減輕環(huán)境污染。為制備分解有機(jī)廚余垃圾的微生物菌劑,某科研小組對(duì)兩菌種進(jìn)行了最佳接種量比的探究實(shí)驗(yàn),并得出下圖的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。下面敘述錯(cuò)誤的是()
A.巨大芽孢桿菌生長(zhǎng)過程中需要氮源,圓褐固氮菌生長(zhǎng)過程中不需要氮源B.要統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)量可采用平板劃線法和稀釋涂布平板法C.將1mL菌液稀釋100倍,在3個(gè)平板上分別接0.1mL稀釋液;經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后,3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為42、39和36。據(jù)此可得出每升菌液中的活菌數(shù)為3.9×105D.處理該類廚余垃圾廢液,兩菌種的最佳接種量比為1:110、長(zhǎng)春花是野生花卉,其所含的長(zhǎng)春堿具有良好的抗腫瘤作用。研究人員利用已免疫的B淋巴細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞通過雜交技術(shù)生產(chǎn)出能夠同時(shí)特異性識(shí)別癌胚抗原和長(zhǎng)春堿的雙特異性單克隆抗體,制備過程如圖所示。下列說法錯(cuò)誤的是()
A.①過程要多次注射抗原,其目的是刺激小鼠產(chǎn)生更多的抗體B.經(jīng)③過程獲得的雜交瘤細(xì)胞都能產(chǎn)生抗癌胚抗原的特異性抗體C.圖中“?”處只能使用PEG融合法和電融合法來誘導(dǎo)細(xì)胞融合D.制備雙特異性抗體的目的是使長(zhǎng)春堿能定向地作用于癌細(xì)胞11、下圖是利用牛的乳腺細(xì)胞生產(chǎn)人體血清白蛋白的操作流程;其中細(xì)胞①已導(dǎo)入人血清白蛋白基因。相關(guān)敘述正確的是()
A.細(xì)胞①的培養(yǎng)液中需要加入胃蛋白酶B.“卵母細(xì)胞”應(yīng)在體外培養(yǎng)成熟C.圖示“細(xì)胞②→早期胚胎”發(fā)生輸卵管中D.該技術(shù)與試管牛培育的主要原理不同12、黑尿癥是一種單基因遺傳?。辉摬≡谌巳褐械陌l(fā)病率大約為百萬分之一?;颊咭蛉狈δ蚝谒嵫趸?,使得尿黑酸不能被氧化分解而導(dǎo)致尿液呈黑色。下圖是該遺傳病的某家系圖。下列說法正確的是()
A.該實(shí)例說明基因通過控制蛋白質(zhì)的合成而直接控制性狀B.控制黑尿癥的基因?yàn)殡[性基因,且位于X染色體上C.Ⅱ4和Ⅱ5婚配,所生男孩患黑尿癥的概率約為1/3003D.若用該致病基因制作的探針檢測(cè),則Ⅰ1、Ⅰ2、Ⅱ3一定會(huì)出現(xiàn)雜交帶評(píng)卷人得分三、填空題(共9題,共18分)13、第三步:將目的基因?qū)隷_____14、第一步:______15、為了避免外源DNA等因素污染,PCR實(shí)驗(yàn)中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸餾水等在使用前必須進(jìn)行_____________。而使用的緩沖液并在__________℃存儲(chǔ)。16、_______mol/L濃度下,DNA溶解度最大。17、注意:a生理基礎(chǔ):______,______
b植物細(xì)胞融合前需用______和______除去細(xì)胞壁18、請(qǐng)回答有關(guān)植物細(xì)胞工程的問題:
(1)在植物中,一些分化的細(xì)胞,經(jīng)過________的誘導(dǎo),可以脫分化失去其__________而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞。
(2)胡蘿卜的組織培養(yǎng)中,將接種后的胡蘿卜組織塊,放在恒溫_________(填:“光照”或“黑暗”)條件下培養(yǎng)。一段時(shí)間后,將生長(zhǎng)良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到_________培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。
(3)在植物組織培養(yǎng)過程中,由于培養(yǎng)細(xì)胞一直處于不斷的分生狀態(tài),因此容易受到__________的影響而產(chǎn)生突變。為篩選出具有抗鹽性狀的突變體,需將種子播種在含_____的培養(yǎng)基上,獲得所需個(gè)體。19、近年來,克隆技術(shù)的發(fā)展取得了巨大突破?在日常生活中,我們遇到過與克隆技術(shù)有關(guān)的問題嗎?_____。20、有時(shí)還需進(jìn)行______的鑒定。如轉(zhuǎn)基因抗蟲植物是否出現(xiàn)______。21、應(yīng)用分析與比較的方法,對(duì)生殖性克隆與治療性克隆進(jìn)行列表闡述?
生殖性克隆與治療性克隆的比較。比較項(xiàng)目生殖性克隆治療性克隆含義__________用到的技術(shù)__________目的__________評(píng)卷人得分四、實(shí)驗(yàn)題(共2題,共8分)22、單克隆抗體特異性強(qiáng);靈敏度高,用于診療疾病具有準(zhǔn)確;高效等特點(diǎn)。下圖表示單克隆抗體制備過程。
回答下列問題:
(1)若細(xì)胞B是小鼠的骨髓瘤細(xì)胞;則A是_________________細(xì)胞,誘導(dǎo)d過程常用的因素是_________________(答出一個(gè)即可)。
(2)用于篩選細(xì)胞D的培養(yǎng)基必需滿足兩個(gè)條件:一是_________________細(xì)胞都會(huì)死亡;二是保證_________________細(xì)胞能生長(zhǎng)。
(3)使用合成培養(yǎng)基體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞時(shí);通常需要加入_________________等一些天然成分,并置于含有_________混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
(4)制備抗新冠病毒單克隆抗體檢測(cè)試劑,可用_________________(選填數(shù)字標(biāo)號(hào):①新冠病毒滅活疫苗、②新冠病毒RNA疫苗、③新冠病毒滅活疫苗或RNA疫苗)免疫小鼠,以獲得圖中的A細(xì)胞。23、番茄果實(shí)在成熟的過程中;多聚半乳糖醛酸酶(PG)合成顯著增加,以降解果膠使細(xì)胞壁破損,從而使果實(shí)變紅變軟,但不利于保鮮??茖W(xué)家利用基因工程得到轉(zhuǎn)基因番茄,大大延長(zhǎng)果實(shí)保質(zhì)期。操作流程如下,回答下列問題:
(1)利用RT—PCR技術(shù)即逆轉(zhuǎn)錄—多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)制備PG基因,最好從番茄的_____細(xì)胞中提取mRNA,此技術(shù)所需要的酶主要有_____。
(2)據(jù)圖可知,轉(zhuǎn)基因番茄主要通過抑制PG基因的_____過程;使PG合成量減少,從而延長(zhǎng)果實(shí)保質(zhì)期。
(3)圖中的農(nóng)桿菌。能夠在含_____的培養(yǎng)基中生存,而在含_____的培養(yǎng)基中不能生存的即為已轉(zhuǎn)化的所需農(nóng)桿菌。
(4)圖中將反向連接PC基因?qū)敕鸭?xì)胞的方法稱為_____。要檢測(cè)感染農(nóng)桿菌后的番茄細(xì)胞染色體DNA上是否插入了反向連接PC基因,_____(填“能”或“不能”)用標(biāo)記的PG基因的單鏈作為探針進(jìn)行檢測(cè),理由是_____。
(5)在將轉(zhuǎn)化的番茄細(xì)胞通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)形成番茄幼苗過程中,培養(yǎng)基_____(填“要”或“不要”)添加有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),原因是_____。評(píng)卷人得分五、綜合題(共1題,共10分)24、β-葡萄糖苷酸酶(GUS)基因來自大腸桿菌。轉(zhuǎn)GUS基因的植物組織浸泡在含有某底物的緩沖液中;GUS能與底物發(fā)生反應(yīng),使植物組織呈現(xiàn)藍(lán)色。研究人員利用轉(zhuǎn)GUS基因的葡萄植株,以探究干旱條件對(duì)葡萄P啟動(dòng)子的功能是否有誘導(dǎo)作用。請(qǐng)回答:
(1)葡萄P啟動(dòng)子是_________識(shí)別并結(jié)合的位點(diǎn)。欲獲得葡萄P啟動(dòng)子,可根據(jù)___________設(shè)計(jì)引物,利用該引物和從葡萄細(xì)胞獲取的______為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增。
(2)將葡萄P啟動(dòng)子與GUS基因等元件構(gòu)建基因表達(dá)載體,利用__________方法將該基因表達(dá)載體導(dǎo)入葡萄愈傷組織,葡萄愈傷組織在培養(yǎng)基中經(jīng)_________后;進(jìn)而發(fā)育形成轉(zhuǎn)基因葡萄植株。
(3)取上述轉(zhuǎn)基因葡萄植株分為A、B兩組,A組置于正常條件(無干旱處理)下培養(yǎng),B組置于干旱條件下培養(yǎng)。一段時(shí)間后分別取A、B組葡萄植株幼根,浸泡在含有底物的緩沖液中,觀察幼根顏色變化情況。請(qǐng)預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象及相關(guān)結(jié)論。參考答案一、選擇題(共7題,共14分)1、B【分析】【分析】
1;植物組織培養(yǎng)過程是:離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織;然后再分化生成根、芽,最終形成植物體。
2;植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性。
3;在離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織的過程中;需要的條件:①消毒滅菌;②一定濃度的植物激素;③適宜的溫度;④充足的養(yǎng)料。
4、分析題圖:圖中a→b表示脫分化過程,b→c表示再分化過程。
【詳解】
A、a、b;c、d中的植物細(xì)胞都有全能性;但細(xì)胞分化程度不同,全能性的表達(dá)程度有差異,A正確;
B;減數(shù)分裂是形成生殖細(xì)胞的過程;水稻花藥經(jīng)a~d發(fā)育成試管苗的過程沒有生殖細(xì)胞的形成,只涉及有絲分裂,B錯(cuò)誤;
C;基因型為DdTt產(chǎn)生的配子的基因型有DT、Dt、dT、dt;因此試管苗可能出現(xiàn)的基因型有DT、Dt、dT、dt,C正確;
D;為促進(jìn)細(xì)胞分裂生長(zhǎng);可在培養(yǎng)基中加入適宜濃度的植物激素,如生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素,D正確。
故選B。2、C【分析】【分析】
據(jù)圖分析:①表示篩選分離纖維素分解菌;②表示接種酵母菌,③表示無氧發(fā)酵。微生物X是纖維素分解菌,微生物Y是酵母菌。纖維素分解菌能夠?qū)⒗w維素分解為葡萄糖,酵母菌能夠利用葡萄糖無氧發(fā)酵產(chǎn)生酒精。從土壤中篩選分離纖維素分解菌的一般步驟是:土壤取樣;選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株。
【詳解】
A;土壤是微生物的天然培養(yǎng)基;含有各種營(yíng)養(yǎng)成分,微生物X與Y可以利用選擇培養(yǎng)分別把他們分離純化,A正確;
B、微生物X產(chǎn)生的能將秸稈中纖維素分解的酶至少由三種組分構(gòu)成,包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶;B正確;
C;糖液濃度過高時(shí);葡萄糖的產(chǎn)生會(huì)受到抑制,原因是產(chǎn)物(葡萄糖)過多,反饋抑制了分解秸稈的酶的活性,C錯(cuò)誤;
D;酵母菌無氧呼吸可以產(chǎn)生乙醇;所以葡萄糖的酒精發(fā)酵必須保證密閉無氧的條件,D正確。
故選C。3、B【分析】【分析】
下丘腦通過釋放促甲狀腺激素釋放激素(TRH);來促進(jìn)垂體合成和分泌促甲狀腺激素(TSH),TSH則可以促進(jìn)甲狀腺的活動(dòng),合成和釋放甲狀腺激素,這就是所謂的分級(jí)調(diào)節(jié)。而在正常情況下甲狀腺激素要維持在一定濃度內(nèi),不能持續(xù)升高。當(dāng)甲狀腺激素達(dá)到一定濃度后,這個(gè)信息又會(huì)反饋給下丘腦和垂體,從而抑制兩者的活動(dòng),這樣系統(tǒng)就可以維持在相對(duì)穩(wěn)定水平。
【詳解】
A;甲狀腺髓樣癌細(xì)胞屬于動(dòng)物細(xì)胞;動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中需要加入葡萄糖,水,氨基酸、動(dòng)物血清等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),A正確;
B;經(jīng)過胰蛋白酶處理后的甲狀腺髓樣癌細(xì)胞在培養(yǎng)板上不會(huì)出現(xiàn)貼壁生長(zhǎng)的現(xiàn)象;B錯(cuò)誤;
C;轉(zhuǎn)入空質(zhì)粒的組為對(duì)照組;目的是排除轉(zhuǎn)基因操作以及基因載體對(duì)細(xì)胞的影響,C正確;
D;與另外兩組相比;48h后轉(zhuǎn)入重組質(zhì)粒的細(xì)胞劃痕的寬度較小,說明N基因能夠N基因能夠抑制癌細(xì)胞的增殖,為預(yù)防和治療癌癥提供了新的方向,D正確。
故選B。4、A【分析】【分析】
1;基因工程的基本操作步驟主要包括四步:①目的基因的獲?。虎诨虮磉_(dá)載體的構(gòu)建;③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞;測(cè)與表達(dá)。
2;從分子水平上檢測(cè)目的基因的方法:①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù);②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù);③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。
【詳解】
A;由題干可知;Cas9只能切割與sgRNA結(jié)合的DNA序列,所以決定基因編輯位點(diǎn)的是sgRNA,而不是Cas9,A錯(cuò)誤;
B;基因編輯技術(shù)可以修改特定基因的堿基排列順序;因此可以通過去除啟動(dòng)子等方式使得某個(gè)基因無法進(jìn)行表達(dá),B正確;
C;基因突變具有不定向性;而基因編輯技術(shù)可以對(duì)特定基因進(jìn)行特定的修改,是定向改變,C正確;
D;Cas9和限制酶一樣;都可以切割DNA,使得DNA雙鏈斷裂,說明二者都能使得DNA中的磷酸二酯鍵斷裂,D正確。
故選A。5、D【分析】【分析】
植物組織培養(yǎng)技術(shù):(1)過程:離體的植物組織;器官或細(xì)胞(外植體)→愈傷組織→胚狀體→植株(新植體);(2)原理:植物細(xì)胞的全能性;(3)條件:①細(xì)胞離體和適宜的外界條件(如適宜溫度;適時(shí)的光照、pH和無菌環(huán)境等);②一定的營(yíng)養(yǎng)(無機(jī)、有機(jī)成分)和植物激素(生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素);(4)植物細(xì)胞工程技術(shù)的應(yīng)用:植物繁殖的新途徑(包括微型繁殖,作物脫毒、人工種子等)、作物新品種的培育(單倍體育種、突變體的利用)、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。
【詳解】
用葉片快速人工繁育;可用的技術(shù)是植物組織培養(yǎng),該技術(shù)的原理是植物細(xì)胞的全能性,D正確;
故選D。6、A【分析】【分析】
微生物接種到固體培養(yǎng)基常用的方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法;其中稀釋涂布平板法接種可以形成單菌落,所以常用來進(jìn)行微生物的計(jì)數(shù)。
【詳解】
①兩種方法都需要在無菌條件下操作;①錯(cuò)誤;
②兩種方法都需要配制固體培養(yǎng)基;均需要添加瓊脂,②錯(cuò)誤;
③平板劃線法不能對(duì)菌落進(jìn)行計(jì)數(shù);稀釋涂布平板法能進(jìn)行活菌計(jì)數(shù),③正確;
④平板劃線法的接種工具是接種環(huán);稀釋涂布平板法的接種工具是涂布器,④正確。
綜上正確的選項(xiàng)是③④;故選A。
【點(diǎn)睛】7、C【分析】【分析】
動(dòng)物胚胎發(fā)育的基本過程為;①在輸卵管完成受精;②卵裂期,受精進(jìn)行有絲分裂,細(xì)胞數(shù)量不斷增加,但胚胎的總體體積并不增加,或略有減小;③桑葚胚,胚胎細(xì)胞數(shù)目達(dá)到32個(gè)左右時(shí),胚胎形成致密的細(xì)胞團(tuán),形似桑葚,每個(gè)細(xì)胞都是全能細(xì)胞;④囊胚,開始出現(xiàn)分化,聚集在胚胎一端個(gè)體較大的細(xì)胞稱為內(nèi)細(xì)胞團(tuán),將來發(fā)育成胎兒的各種組織,中間的空腔稱為囊胚腔;⑤原腸胚,有了三胚層的分化,具有囊胚腔和原腸腔。
【詳解】
A;卵母細(xì)胞中含激發(fā)細(xì)胞核全能性的物質(zhì);過程①(核移植)中選擇MII期的卵母細(xì)胞有利于細(xì)胞核全能性恢復(fù),A錯(cuò)誤;
B;過程②重構(gòu)胚培養(yǎng)經(jīng)歷了卵裂、桑葚胚、囊胚和原腸胚等胚胎發(fā)育過程;不需要進(jìn)行脫分化和胰蛋白酶處理,B錯(cuò)誤;
C;過程③是誘導(dǎo)分化過程;其關(guān)鍵是利用特定條件誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞相關(guān)基因表達(dá),C正確;
D;過程④移植的神經(jīng)元細(xì)胞是取自該小鼠自身細(xì)胞誘導(dǎo)分化而來;不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng),故不需要注射免疫抑制劑來抑制其細(xì)胞免疫功能,D錯(cuò)誤。
故選C。二、多選題(共5題,共10分)8、A:C【分析】【分析】
(1)動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性;細(xì)胞的增殖;誘導(dǎo)手段有電激、聚乙二醇、滅活的病毒等,結(jié)果產(chǎn)生雜交細(xì)胞,主要用于制備單克隆抗體。
(2)單克隆抗體制備的原理包括:①免疫理:B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生特異性抗體;②細(xì)胞融合原理:利用病毒對(duì)宿主細(xì)胞的穿透性使B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合;③動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù):對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi);體外培養(yǎng)。
(3)制備單克隆抗體過程中的幾種細(xì)胞:①免疫B細(xì)胞(漿細(xì)胞):能產(chǎn)生單一抗體;但不能無限增殖;②骨髓瘤細(xì)胞:能無限增殖,但不能產(chǎn)生抗體;③雜交瘤細(xì)胞:既能產(chǎn)生單一抗體,又能在體外培養(yǎng)條件下無限增殖。
【詳解】
A;誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有電激、聚乙二醇、滅活的病毒(如滅活的仙臺(tái)病毒)等;A正確;
B;兩兩融合的細(xì)胞包括免疫B細(xì)胞與免疫B細(xì)胞融合的具有同種核的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的具有同種核的細(xì)胞、免疫B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的雜交瘤細(xì)胞;骨髓瘤細(xì)胞雖然能無限增殖,但缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶,免疫B細(xì)胞雖然有次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶,但不具有無限增殖的本領(lǐng),所以在HAT篩選培養(yǎng)液中,兩兩融合的具有同種核的細(xì)胞都無法生長(zhǎng),只有雜交瘤細(xì)胞才能生長(zhǎng),B錯(cuò)誤;
C;因每個(gè)免疫B細(xì)胞只分泌一種特異性抗體;因此在HAT篩選培養(yǎng)液中篩選出來的眾多的雜交瘤細(xì)胞所分泌的抗體,不一定都是人類所需要的,還需要進(jìn)一步通過專一抗體陽性檢測(cè),把能分泌人類所需要抗體的雜交瘤細(xì)胞篩選出來,C正確;
D;動(dòng)物細(xì)胞融合是以細(xì)胞膜的流動(dòng)性為基礎(chǔ)的;D錯(cuò)誤。
故選AC。
【點(diǎn)睛】9、A:B:C:D【分析】【分析】
微生物接種的方法很多;最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法。若要對(duì)微生物進(jìn)行取樣計(jì)數(shù),接種方法只能是稀釋涂布平板法。稀釋涂布平板法則是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面,進(jìn)行培養(yǎng)。
【詳解】
A;微生物的生長(zhǎng)需要碳源、氮源、無機(jī)鹽等物質(zhì);只是有些固氮菌由于能利用氮?dú)庾鳛榈?,不需要在培養(yǎng)基中添加氮源,A錯(cuò)誤;
B;平板劃線法不能用于計(jì)數(shù);B錯(cuò)誤;
C、將1mL菌液稀釋100倍,在3個(gè)平板上分別接0.1mL稀釋液;經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后,3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為42、39和36。據(jù)此可得出每升菌液中的活菌數(shù)為(42+39+36)÷3÷0.1×100×1000=3.9×107;C錯(cuò)誤;
D;根據(jù)圖示可知;兩菌種的接種量比為1:1時(shí)比兩菌種的接種量比為2:1時(shí)效果好,但由于該實(shí)驗(yàn)設(shè)置的兩菌種的接種量比例的組數(shù)過少,所以無法判斷處理該類廚余垃圾廢液的兩菌種的最佳接種量比,D錯(cuò)誤。
故選ABCD。10、A:B:C【分析】【分析】
單克隆抗體制備流程:先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng);之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞;誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融臺(tái),利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞;進(jìn)行抗體檢測(cè),篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞;進(jìn)行克隆化培養(yǎng),即用培養(yǎng)基坮養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng);最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。
【詳解】
A;①過程要多次注射抗原;其目的是刺激小鼠產(chǎn)生更多的已免疫的B淋巴細(xì)胞,A錯(cuò)誤;
B;③為選擇培養(yǎng)基;經(jīng)選擇培養(yǎng)基獲得的雜交瘤細(xì)胞不一定能產(chǎn)生所需抗體,要產(chǎn)生所需抗體還要進(jìn)行抗體檢測(cè)陽性和克隆化培養(yǎng),B錯(cuò)誤;
C;誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合可以使用PEG融合法、電融合法和滅活病毒誘導(dǎo)法等;C錯(cuò)誤;
D;雙特異性抗體中的癌胚抗原抗體能將藥物定向引導(dǎo)至和癌細(xì)胞結(jié)合;從而避免對(duì)其他細(xì)胞的破壞,D正確。
故選ABC。11、B:D【分析】【分析】
題圖分析:圖示操作流程為“利用牛的乳腺細(xì)胞生產(chǎn)人體血清白蛋白”;因此首先需要將人體血清白蛋白基因?qū)氪菩阅膛H橄偌?xì)胞,形成細(xì)胞①;取出細(xì)胞①的細(xì)胞核,注入去核牛卵母細(xì)胞中,形成細(xì)胞②,該過程采用了核移植技術(shù),其原理是動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性;要形成轉(zhuǎn)基因克隆奶牛還需要采用早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)。
【詳解】
A;為了得到單個(gè)細(xì)胞;在細(xì)胞①的培養(yǎng)液中需要加入胰蛋白酶,不能使用胃蛋白酶,A錯(cuò)誤;
B;圖中卵母細(xì)胞應(yīng)該在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期;此時(shí)的次級(jí)卵母細(xì)胞具有受精能力,B正確;
C;圖示“細(xì)胞②→早期胚胎”為體外培養(yǎng)胚胎的過程;該過程在體外完成,C錯(cuò)誤;
D;圖示克隆牛的培育主要采用了核移植技術(shù)和胚胎移植技術(shù);屬于無性生殖;試管牛的培育主要采用了體外受精和胚胎移植技術(shù),屬于有性生殖,因此兩者產(chǎn)生犢牛的生殖方式不相同,D正確。
故選BD。12、C:D【分析】【分析】
單基因遺傳病指的是受一對(duì)等位基因控制的遺傳?。豢捎肈NA分子雜交技術(shù)進(jìn)行基因檢測(cè)進(jìn)而鑒定某胚胎是否攜帶有某致病基因;DNA分子雜交技術(shù)利用放射性同位素(或熒光分子)標(biāo)記的致病基因片段作為基因探針,通過堿基互補(bǔ)配對(duì)原則與待測(cè)分子進(jìn)行配對(duì),能配對(duì)的說明某胚胎攜帶某致病基因存在。
【詳解】
A;該實(shí)例中;患者因缺乏尿黑酸氧化酶,使得尿黑酸不能被氧化分解而導(dǎo)致尿液呈黑色,即基因通過控制酶的合成,進(jìn)而控制代謝過程,從而間接控制生物的性狀,A錯(cuò)誤;
B、遺傳家系譜圖中,不患黑尿癥的Ⅰ1與Ⅰ2生下了患黑尿癥的女兒Ⅱ3;確定黑尿癥屬于常染色體隱性遺傳,B錯(cuò)誤;
C、假設(shè)控制該病的基因?yàn)锳a,該病在人群中的發(fā)病率約為1/1000000,即aa概率為1/1000000,則a占1/1000,A占999/1000,Aa的概率為2×1/1000×999/1000=1998/1000000,因此人群中正常人為雜合子Aa的概率為(2×1/1000×999/1000)÷(2×1/1000×999/1000+999/1000×999/1000)=2/1001,Ⅱ4的基因型為1/3AA或2/3Aa,Ⅱ5為正常人,為雜合子的概率為2/1001,Ⅱ4和Ⅱ5婚配;所生男孩患黑尿癥的概率約為2/3×2/1001×1/4=1/3003,C正確;
D、由前面的分析可知,Ⅰ1和Ⅰ2為雜合子,Ⅱ3為患者,均含有該致病基因,若用該致病基因制作的探針檢測(cè),則Ⅰ1、Ⅰ2、Ⅱ3一定會(huì)出現(xiàn)雜交帶;D正確。
故選CD。
【點(diǎn)睛】三、填空題(共9題,共18分)13、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】受體細(xì)胞14、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】目的基因的獲取15、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】高壓滅菌—2016、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】0.1417、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】細(xì)胞膜流動(dòng)性植物細(xì)胞全能性纖維素酶果膠酶18、略
【分析】【分析】
植物組織培養(yǎng)的條件:①細(xì)胞離體和適宜的外界條件(如適宜溫度;適時(shí)的光照、pH和無菌環(huán)境等);②一定的營(yíng)養(yǎng)(無機(jī)、有機(jī)成分)和植物激素(生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素)。決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類和比例;特別是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過程中非常重要,被稱為“激素杠桿”。
【詳解】
(1)在植物中;一些分化的細(xì)胞,經(jīng)過激素的誘導(dǎo),可以脫分化失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞。
(2)胡蘿卜的組織培養(yǎng)中;將接種后的胡蘿卜組織塊,放在恒溫黑暗條件下培養(yǎng)。一段時(shí)間后,將生長(zhǎng)良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。
(3)在植物組織培養(yǎng)過程中;由于培養(yǎng)細(xì)胞一直處于不斷的分生狀態(tài),因此容易受到培養(yǎng)條件和外界壓力的影響而產(chǎn)生突變。為篩選出具有抗鹽性狀的突變體,需將種子播種在含一定濃度的鹽的培養(yǎng)基上,獲得所需個(gè)體。
【點(diǎn)睛】
本題考查植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí),要求考生識(shí)記植物組織培養(yǎng)的過程、原理及條件,掌握植物組織培養(yǎng)技術(shù)的相關(guān)應(yīng)用,能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確分析,屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查?!窘馕觥竣?激素②.特有的結(jié)構(gòu)和功能③.黑暗④.分化⑤.培養(yǎng)條件和外界壓力⑥.一定濃度的鹽19、略
【分析】【詳解】
在日常生活中;我們遇到過的與克隆技術(shù)有關(guān)的問題有:
①瀕臨滅絕動(dòng)物的克?。嚎寺】梢哉葹l危的國(guó)家保護(hù)動(dòng)物以及植物;我們可運(yùn)用克隆,復(fù)制瀕臨滅絕的生物,讓其不至于在我們的生活中消失;
②農(nóng)業(yè)克?。簯?yīng)用于農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域;通過轉(zhuǎn)基因的方式,增加糧食的畝產(chǎn)量,提高土地的單位出產(chǎn)量;
③細(xì)胞克隆替代或者修復(fù)人體細(xì)胞問題;比如胚胎干細(xì)胞;
④畜牧業(yè)克隆:應(yīng)用于畜牧業(yè),提升優(yōu)良品種群體基數(shù),縮短畜牧育種年限?!窘馕觥坑?,比如:①瀕臨滅絕動(dòng)物的克?。虎谵r(nóng)業(yè)克?。簯?yīng)用于農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域,通過轉(zhuǎn)基因的方式,增加糧食的畝產(chǎn)量,提高土地的單位出產(chǎn)量;③細(xì)胞克隆替代或者修復(fù)人體細(xì)胞問題,比如胚胎干細(xì)胞;④畜牧業(yè)克?。簯?yīng)用于畜牧業(yè),提升優(yōu)良品種群體基數(shù),縮短畜牧育種年限。20、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】個(gè)體生物學(xué)水平抗蟲性狀。21、略
【分析】【詳解】
生殖性克隆指利用克隆技術(shù)獲得胚胎;并將胚胎孕育成為人類個(gè)體的克隆性技術(shù),其目的是用于生育,獲得人的復(fù)制品;治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細(xì)胞或組織等,用于治療性移植的克隆性技術(shù),其目的是用于醫(yī)學(xué)研究和疾病的治療。
據(jù)概念可知,實(shí)現(xiàn)生殖性克隆和治療性克隆都會(huì)用到的技術(shù)有體細(xì)胞核移植技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)等;治療性克隆在獲取胚胎干細(xì)胞后,根據(jù)治療目的誘導(dǎo)干細(xì)胞分化形成各種組織和器官,供患者移植用,故治療性克隆還會(huì)應(yīng)用到的技術(shù)為干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)?!窘馕觥可承钥寺≈咐每寺〖夹g(shù)獲得胚胎,并將胚胎孕育成為人類個(gè)體的克隆性技術(shù)治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細(xì)胞或組織等,用于治療性移植的克隆性技術(shù)體細(xì)胞核移植技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)等體細(xì)胞核移植技術(shù),早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)、干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)等用于生育,獲得人的復(fù)制品用于醫(yī)學(xué)研究和疾病的治療四、實(shí)驗(yàn)題(共2題,共8分)22、略
【分析】【分析】
1;動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng):
(1)原理:細(xì)胞增殖。
(2)培養(yǎng)基性質(zhì):液體培養(yǎng)基。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基的成分與體內(nèi)細(xì)胞基本相同;如需要有葡萄糖;氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽、微量元素、動(dòng)物血清或血漿,還有適量的抗生素以保證無菌環(huán)境。
(3)需要使用動(dòng)物血清。
(4)適宜的溫度:36.5℃±0.5℃;適宜的pH:7.2~7.4。
(5)無菌條件下進(jìn)行。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素;以防培養(yǎng)過程中的污染。此外,應(yīng)定期更換培養(yǎng)液,防止代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。
(6)氣體環(huán)境:95%空氣+5%CO2。O2是細(xì)胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。
2;單克隆抗體的制備:
(1)單克隆抗體制備的原理包括:①免疫原理:B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生特異性抗體。②細(xì)胞融合原理:利用病毒對(duì)宿主細(xì)胞的穿透性使B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合。③動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù):對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi);體外培養(yǎng)。
(2)單克隆抗體制備流程:先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng);之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞;誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合,利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞;進(jìn)行抗體檢測(cè),篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞;進(jìn)行克隆化培養(yǎng),即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng);最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。
(3)制備單克隆抗體過程中的幾種細(xì)胞:①免疫B細(xì)胞(漿細(xì)胞):能產(chǎn)生單一抗體;但不能無限增殖。②骨髓瘤細(xì)胞:能無限增殖,但不能產(chǎn)生抗體。③雜交瘤細(xì)胞:既能產(chǎn)生單一抗體,又能在體外培養(yǎng)條件下無限增殖。
(4)動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性;細(xì)胞的增殖。動(dòng)物細(xì)胞融合誘導(dǎo)手段有電刺激、聚乙二醇、滅活的病毒等;結(jié)果產(chǎn)生雜交細(xì)胞。
【詳解】
(1)若細(xì)胞B是小鼠的骨髓瘤細(xì)胞;則此過程可以為單克隆抗體的制備過程。故A是已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞或能產(chǎn)生特定抗體的B細(xì)胞。動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性;細(xì)胞的增殖。動(dòng)物細(xì)胞融合誘導(dǎo)手段(誘導(dǎo)d過程)有電刺激、聚乙二醇、滅活的病毒等,結(jié)果產(chǎn)生雜交細(xì)胞。
(2)一般來說;誘導(dǎo)A細(xì)胞和B細(xì)胞融合,形成C細(xì)胞后,必須利用選擇培養(yǎng)基來篩選出目的細(xì)胞。那么滿足的條件必須是:未融合的(親本)細(xì)胞和融合的同種(核的)細(xì)胞都會(huì)死亡,而雜交(瘤)細(xì)胞(或雜種細(xì)胞)能夠在選擇培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。
(3)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng):一是液體培養(yǎng)基。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基的成分與體內(nèi)細(xì)胞基本相同,如需要有葡萄糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽、微量元素、動(dòng)物血清或血漿,還有適量的抗生素以保證無菌環(huán)境。二是氣體環(huán)境:95%空氣+5%CO2。
(4)選用免疫原性好的細(xì)菌;病毒、立克次體、螺旋體等;經(jīng)人工培養(yǎng),再用物理或化學(xué)方法將其殺滅制成疫苗,即為滅活疫苗。而新冠病毒為RNA病毒,選用RNA疫苗都可以。故選③新冠病毒滅活疫苗或RNA疫苗。
【點(diǎn)睛】
本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、單克隆抗體制備的相關(guān)知識(shí),意在考查考生理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn),把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系的能力;能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀點(diǎn),對(duì)某些現(xiàn)實(shí)生活中的生物學(xué)問題進(jìn)行解釋、推理,做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論?!窘馕觥拷?jīng)過(抗原、病原體)免疫的(小鼠)B(淋巴)細(xì)胞(或漿細(xì)胞,或已免疫的B細(xì)胞,或能產(chǎn)生特定抗體的B細(xì)胞)聚乙二醇(PEG)、滅活的(仙臺(tái))病毒、電激(或電融合)未融合的(親本)細(xì)胞和融合的同種(核的)細(xì)胞雜交(瘤)細(xì)胞(或雜種細(xì)胞))血清(或血漿)95%空氣和5%CO2③23、略
【分析】【分析】
基因工程技術(shù)的基本步驟:
(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@?。焕肞CR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。
(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟;基因表達(dá)載體包括目的基因;啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。
(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同;導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法;基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。
(4)目的基因的檢測(cè)與鑒定:分子水平上的檢測(cè):①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因??DNA分子雜交技術(shù);②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA??分子雜交技術(shù);③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定:抗蟲鑒定;抗病鑒定、活性鑒定等。
【詳解】
(1)利用RT—PCR技術(shù)即逆轉(zhuǎn)錄—多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)制備PG基因;由于多聚半乳糖醛酸酶(PG)可降解果膠使細(xì)胞壁破損,從而使果實(shí)變紅變軟,說明PG基因在果肉中表達(dá)量較高,所以最好從番茄的果肉細(xì)胞中提取mRNA,此技術(shù)所需要的酶主要有逆轉(zhuǎn)錄酶和Taq酶(或熱穩(wěn)定DNA聚合酶);
(2)據(jù)圖可知;轉(zhuǎn)基因番茄PG基因與反向連接PG基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA1和mRNA2相結(jié)合形成雙鏈,從而抑制PG基因的翻譯過程,使PG合成量減少,從而延長(zhǎng)果實(shí)保質(zhì)期;
(3)分析表達(dá)載體的構(gòu)建過程圖可知;目的基因插入到圖中農(nóng)桿菌的四環(huán)素抗性基因上,導(dǎo)致農(nóng)桿菌失去了四環(huán)素的抗性,所
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