2025年人民版選擇性必修3生物上冊(cè)階段測(cè)試試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年人民版選擇性必修3生物上冊(cè)階段測(cè)試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共6題，共12分)1、為檢測(cè)某藥物X的抗癌活性，在細(xì)胞培養(yǎng)板的每個(gè)孔中加入相同數(shù)量的肝癌細(xì)胞，使其貼壁生長(zhǎng)，實(shí)驗(yàn)組加入溶于二甲基亞礬的藥物X，培養(yǎng)72小時(shí)后進(jìn)行計(jì)數(shù)，比較實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組每個(gè)孔中細(xì)胞數(shù)目。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.細(xì)胞培養(yǎng)液中通常需要加入血清等天然成分B.可用胰蛋白酶處理使肝癌細(xì)胞脫落下來(lái)并進(jìn)行計(jì)數(shù)C.對(duì)照組中應(yīng)加入等體積的無(wú)菌蒸餾水，其他條件一致D.若實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞數(shù)遠(yuǎn)低于對(duì)照組，可初步判斷此藥物有抗癌效果2、由單克隆抗體研制而成的“生物導(dǎo)彈”由兩部分組成，一是“瞄準(zhǔn)裝置”，二是殺傷性“彈頭”，下列對(duì)此敘述不正確的是（）A.“瞄準(zhǔn)裝置”是指識(shí)別腫瘤的單克隆抗體B.“彈頭”由放射性同位素、化學(xué)藥物等物質(zhì)構(gòu)成C.“彈頭”具有選擇性殺傷腫瘤細(xì)胞的功能D.“生物導(dǎo)彈”的制備利用了細(xì)胞工程技術(shù)3、用農(nóng)作物秸稈等纖維質(zhì)原料生產(chǎn)的乙醇，經(jīng)加工可制成燃料乙醇，從而可以減少對(duì)石油資源的依賴(lài)，如圖為生產(chǎn)燃料乙醇的簡(jiǎn)要流程，據(jù)圖分析，錯(cuò)誤的是（）

A.微生物A和微生物B所利用的碳源相同B.圖中過(guò)程②常用的微生物B是酵母菌C.要得到微生物A，最好選擇富含纖維素的土壤采集土樣D.微生物A的同化作用類(lèi)型為異養(yǎng)型4、科學(xué)家在蛙的核移植實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，腸上皮核移植1%-2%形成蝌蚪，囊胚核移植50%形成蝌蚪或成蛙。下列敘述正確的是（）A.實(shí)驗(yàn)中用到核移植、胚胎移植等技術(shù)B.該發(fā)現(xiàn)說(shuō)明低等動(dòng)物細(xì)胞的全能性更容易表達(dá)C.這種差異與兩種核原先所處的細(xì)胞質(zhì)環(huán)境有關(guān)D.該發(fā)現(xiàn)說(shuō)明細(xì)胞質(zhì)對(duì)異源細(xì)胞核的調(diào)控具有專(zhuān)一性5、農(nóng)作物秸稈的回收利用方式很多，其中之一是將秸稈碎化后作為食用菌的栽培基質(zhì)。碎化秸稈中纖維所起的作用，相當(dāng)于植物組織培養(yǎng)中固體培養(yǎng)基的（）A.瓊脂+蔗糖B.蔗糖+激素C.激素+無(wú)機(jī)鹽D.無(wú)機(jī)鹽+瓊脂6、細(xì)菌需要從外界吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)并通過(guò)代謝來(lái)維持正常的生長(zhǎng)和繁殖。下列與此有關(guān)的說(shuō)法正確的是（）A.乳酸菌與硝化細(xì)菌所利用的碳源物質(zhì)是相同的B.固體培養(yǎng)基中加入少量水即可制成液體培養(yǎng)基C.瓊脂中的多糖是細(xì)菌生長(zhǎng)和繁殖中不可缺少的一種物質(zhì)D.以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的不都是尿素分解菌評(píng)卷人得分二、多選題(共6題，共12分)7、我國(guó)的釀酒技術(shù)歷史悠久，古人在實(shí)際生產(chǎn)中積累了很多經(jīng)驗(yàn)?！洱R民要術(shù)》記載：“酒冷沸止，米有不消者，便是曲勢(shì)盡?！币馑际钱Y中酒液涼了不再起泡，米有未消耗完的，就是酒曲的力量用盡了。下列敘述正確的是（）A.用酒曲釀酒過(guò)程中，為加快微生物代謝需不斷通入O2B.酒液溫度的變化與酒曲中微生物呼吸作用釋放熱量有關(guān)C.起泡是由微生物進(jìn)行呼吸作用產(chǎn)生的CO2釋放形成的D.“曲勢(shì)盡”可能是甕中液體pH降低、酒精濃度過(guò)高導(dǎo)致8、MIC是指藥敏試驗(yàn)中某種抗生素對(duì)測(cè)試菌的最低抑制濃度。某研究小組將含有相同濃度抗生素I~IV的四個(gè)大小相同的紙片分別貼在長(zhǎng)滿(mǎn)測(cè)試菌的瓊脂平板上，進(jìn)行藥敏試驗(yàn)以了解病原微生物對(duì)四種抗生素的敏感程度，用于指導(dǎo)臨床合理選用抗生素。圖1為實(shí)驗(yàn)器材，圖2為實(shí)驗(yàn)結(jié)果。下列敘述正確的是（）

A.為獲得長(zhǎng)滿(mǎn)測(cè)試菌的瓊脂平板，需要使用圖1中工具①②③B.據(jù)圖2可知抗生素I的MIC大于抗生素皿的MICC.圖2抑菌圈中出現(xiàn)菌落的原因可能是病原菌中出現(xiàn)了能抗抗生素IV的突變株D.圖2抑菌圈中離紙片越近的菌落對(duì)抗生素IV的抗性越強(qiáng)9、苯丙酮尿癥是一種嚴(yán)重的單基因遺傳病。圖1是某患者的家族系譜圖，其中部分成員Ⅰ1、Ⅰ2、Ⅱ1和Ⅱ2的DNA經(jīng)限制酶MspⅠ酶切，產(chǎn)生不同的片段，經(jīng)電泳后與相應(yīng)探針雜交結(jié)果見(jiàn)圖2.下列分析正確的是（）

A.個(gè)體Ⅱ1是雜合體的概率為2/3B.個(gè)體Ⅱ2與一雜合體婚配生患病孩子的概率為0C.個(gè)體Ⅱ3是隱性純合體，有19kb探針雜交條帶D.個(gè)體Ⅱ4可能為雜合體，有2個(gè)探針雜交條帶10、下圖表示利用細(xì)胞融合技術(shù)進(jìn)行基因定位的過(guò)程，在人-鼠雜種細(xì)胞中人的染色體會(huì)以隨機(jī)方式丟失，通過(guò)分析基因產(chǎn)物進(jìn)行基因定位?，F(xiàn)檢測(cè)細(xì)胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中人的4種酶活性，只有Ⅱ具有芳烴羥化酶活性，只有Ⅲ具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脫氫酶活性。下列相關(guān)敘述正確的有（）

A.加入滅活仙臺(tái)病毒的作用是促進(jìn)細(xì)胞融合B.細(xì)胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分別為人-人、人-鼠、鼠-鼠融合細(xì)胞C.芳烴羥化酶基因位于2號(hào)染色體上，乳酸脫氫酶基因位于11號(hào)染色上D.胸苷激酶基因位于17號(hào)染色體上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上11、下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞工程操作的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)，在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中除了加入細(xì)胞所需的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需要加入瓊脂B.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交都能形成雜種個(gè)體C.干細(xì)胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中，包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等，有著自我更新能力及分化潛能D.動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植12、如圖為“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)”實(shí)驗(yàn)中樣品稀釋示意圖。據(jù)圖分析正確的是（）

A.某一稀釋度下至少涂3個(gè)平板，該實(shí)驗(yàn)方法統(tǒng)計(jì)得到的結(jié)果常會(huì)比實(shí)際活菌數(shù)目少B.3號(hào)試管中的樣品溶液稀釋倍數(shù)為104倍C.5號(hào)試管的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為1.7×108個(gè)D.該實(shí)驗(yàn)需設(shè)置牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作對(duì)照，用以判斷選擇培養(yǎng)基是否有選擇作用評(píng)卷人得分三、填空題(共8題，共16分)13、本課題對(duì)分解纖維素的微生物進(jìn)行了初步的篩選。但是，這只是分離純化的第一步。為確定得到的是纖維素分解菌，還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)，纖維素酶的發(fā)酵方法有___________和___________發(fā)酵兩種。纖維素酶的測(cè)定方法，一般是采用對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的__________進(jìn)行________的測(cè)定。14、______——“分子手術(shù)刀”15、回答下列問(wèn)題。

（1）果酒的制作離不開(kāi)酵母菌，溫度是酵母菌生長(zhǎng)和發(fā)酵的重要條件，酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在_________，醋酸菌是一種________細(xì)菌，它的最適生長(zhǎng)溫度為_(kāi)______________，乳酸菌是________細(xì)菌，在無(wú)氧的情況下，將葡萄糖分解成___________。

（2）微生物的接種方法很多，最常用的是_____________和__________________，稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目___________，這是因?yàn)開(kāi)_____________________________。

（3）飲用水中大腸桿菌的數(shù)目可以通過(guò)濾膜法來(lái)測(cè)定，將濾膜放在____________培養(yǎng)基上培養(yǎng)，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)___________；從而計(jì)算出水樣中大腸桿菌的數(shù)目。

（4）固定化酶和固定化細(xì)胞技術(shù)是利用物理或化學(xué)方法將酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)，包括化學(xué)結(jié)合法、____________和物理吸附法。酶更適合采用__________和___________固定化，而細(xì)胞多采用___________固定化。16、PCR技術(shù)的DNA體外復(fù)制環(huán)境有DNA解旋酶、耐熱DNA聚合酶、DNA母鏈、4種脫氧核苷酸和__________，它能使DNA聚合酶能夠從引物的________端開(kāi)始連接脫氧核苷酸。（人教P58列表），而引物是一段______________片段，用于PCR的引物長(zhǎng)度通常為_(kāi)___個(gè)核苷酸。17、概念：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的______，將它分散成______，然后放在適宜的______中，讓這些細(xì)胞______。18、生物數(shù)據(jù)庫(kù)的知識(shí)與正在迅猛發(fā)展的生物信息學(xué)有關(guān)。什么是生物信息學(xué)________？19、基因表達(dá)載體的組成及其作用。

一個(gè)基因表達(dá)載體的組成，除了______________、_______________外，還必須有__________、______________等(如圖所示)。

①______________②______________③______________

④______________⑤______________⑥______________

⑦_(dá)_____________20、最后檢測(cè)目的基因是否翻譯成______，方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取______，用相應(yīng)的______進(jìn)行______。評(píng)卷人得分四、判斷題(共3題，共15分)21、胚胎發(fā)育早期，細(xì)胞的數(shù)量不斷增加，胚胎的總體積也增加。（選擇性必修3P58）()A.正確B.錯(cuò)誤22、利用基因工程技術(shù)建立移植器官工廠是目前基因工程取得實(shí)際應(yīng)用成果非常多的領(lǐng)域。（選擇性必修3P90）()A.正確B.錯(cuò)誤23、生殖性克隆是指通過(guò)克隆技術(shù)產(chǎn)生獨(dú)立生存的新個(gè)體。（選擇性必修3P106）()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共1題，共4分)24、科學(xué)家的發(fā)現(xiàn)給人類(lèi)的生活帶來(lái)了無(wú)限的想象；他們采集了某深海海域的沉積物樣品，分離；鑒定得到其中的深海放線菌，以期獲得具有前景的抗生素替代品。據(jù)此回答下列問(wèn)題：

(1)研究人員欲篩選出深海放線菌進(jìn)行研究，取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng)，稀釋后取菌液通過(guò)_______________法接種到高氏一號(hào)（加數(shù)滴質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的酚）培養(yǎng)基表面以獲得單菌落。

(2)通過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增分離得到的放線菌的16SrRNA基因可進(jìn)行菌株的種屬鑒定。PCR技術(shù)中起關(guān)鍵作用的酶是_____________。該技術(shù)能在放線菌總的DNA中專(zhuān)一性擴(kuò)增出16SrRNA基因的原因是______________。PCR產(chǎn)物一般可通過(guò)_________________鑒定。

(3)科學(xué)家還將Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細(xì)胞中。2~3周后，這些細(xì)胞顯示出ES細(xì)胞的形態(tài)、具有活躍的分裂能力，它們就是iPS細(xì)胞。在這個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，逆轉(zhuǎn)錄病毒的作用是_______________如何證明iPS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用？請(qǐng)寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路______________評(píng)卷人得分六、綜合題(共3題，共6分)25、人工栽培的馬鈴薯易感染病菌而出現(xiàn)青枯病導(dǎo)致產(chǎn)量降低。某研究小組采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將抗菌肽基因轉(zhuǎn)入馬鈴薯中提高其抗性；具體步驟如下：基因表達(dá)載體的構(gòu)建（含抗菌肽基因與青霉素抗性基因）；重組DNA分子導(dǎo)入農(nóng)桿菌、轉(zhuǎn)化細(xì)胞的篩選、農(nóng)桿菌侵染外植體、愈傷組織的誘導(dǎo)與分化。請(qǐng)回答下列有關(guān)問(wèn)題：

(1)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法利用的原理是其Ti質(zhì)粒的T-DNA片段具有_________的特點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)中基因表達(dá)載體的組成除了有抗菌肽基因與青霉素抗性基因外，還有啟動(dòng)子、終止子和__________等。

(2)將重組DNA分子導(dǎo)入農(nóng)桿菌時(shí)可用_________對(duì)農(nóng)桿菌進(jìn)行處理；提高其吸收外源DNA的能力。

(3)將本實(shí)驗(yàn)中農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)入含有_________的培養(yǎng)基中培養(yǎng)；可以篩選出成功導(dǎo)入抗菌肽基因的細(xì)胞。

(4)使用不同種類(lèi)農(nóng)桿菌對(duì)馬鈴薯外植體侵染后的轉(zhuǎn)化成功率不同。某研究小組為了尋找較高轉(zhuǎn)化效率的侵染方法；測(cè)定了不同種類(lèi)農(nóng)桿菌侵染馬鈴薯外植體后的轉(zhuǎn)化效率，結(jié)果如下圖甲。

由圖甲可知，進(jìn)行馬鈴薯農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化時(shí)應(yīng)該選擇_________農(nóng)桿菌菌種。實(shí)驗(yàn)中農(nóng)桿菌過(guò)度繁殖可能會(huì)使外植體細(xì)胞壞死，判斷依據(jù)是___________________________。

(5)為避免農(nóng)桿菌過(guò)度繁殖，被侵染后的外植體在培養(yǎng)一段時(shí)間后還需要進(jìn)行脫菌處理，研究小組測(cè)定了不同抗生素對(duì)未導(dǎo)入質(zhì)粒的不同種農(nóng)桿菌抑菌率如圖乙。根據(jù)圖甲和圖乙分析，本實(shí)驗(yàn)中導(dǎo)入了抗菌肽基因的農(nóng)桿菌與外植體共培養(yǎng)一段時(shí)間后，選擇_________作為抑菌抗生素能起到最佳脫菌效果。

(6)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，抑菌抗生素在對(duì)農(nóng)桿菌生長(zhǎng)起抑制作用的同時(shí)，對(duì)馬鈴薯愈傷組織的誘導(dǎo)與分化也可能產(chǎn)生抑制作用，為探究是否存在這種毒副作用，還需要進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)是__________________。26、棉花為雌雄同株植物，某一品系的棉花野生型植株既不抗蟲(chóng)也不抗除草劑，如圖為構(gòu)建轉(zhuǎn)基因植株的過(guò)程示意圖，從中選擇抗蟲(chóng)抗除草劑的單株甲和乙分別進(jìn)行自交獲得F1，F(xiàn)1性狀表現(xiàn)如下表所示。（不考慮相同目的基因多次插入受體細(xì)胞同一條染色體上的情況，A+表示有抗蟲(chóng)基因，A-表示沒(méi)有抗蟲(chóng)基因；B+表示有抗除草劑基因，B-表示沒(méi)有抗除草劑基因）

自交親本F1植株數(shù)抗蟲(chóng)抗除草劑抗蟲(chóng)不抗除草劑不抗蟲(chóng)抗除草劑不抗蟲(chóng)抗除草劑甲1411乙1141

(1)基因A和基因B在結(jié)構(gòu)上的區(qū)別是_______。采用Ti質(zhì)粒作為載體的優(yōu)勢(shì)是________。為防止自身環(huán)化及相互連接，準(zhǔn)備工作①中應(yīng)至少使用____種不同的限制性?xún)?nèi)切核酸酶。

(2)畫(huà)出甲植株體細(xì)胞中A+、B+基因與染色體所有可能的位置關(guān)系（不考慮染色體復(fù)制后的情況）_______。

(3)若給甲自交后代F1植株噴施一定量的除草劑，則存活植株中含一個(gè)A+基因的占____。

(4)乙中的抗蟲(chóng)基因和抗除草劑基因分別有____個(gè)，乙測(cè)交子代的表型及比例為_(kāi)___（不考慮突變和交叉互換）。27、實(shí)驗(yàn)小組將啟動(dòng)子rd29A和擬南芥植株的抗寒累因DREBI相連后導(dǎo)入大豆，獲得了抗寒轉(zhuǎn)基因植株，下圖1表示構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)所用的載體，已知Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ為四種不同的限制酶，其各自識(shí)別的DNA序列如下表所示，回答下列問(wèn)題：。限制酶ⅠⅡⅢⅣ識(shí)別序列及。

切割位點(diǎn)

(1)構(gòu)建重組質(zhì)粒過(guò)程中最好同時(shí)使用______兩種限制酶切割質(zhì)粒，原因是______________，培養(yǎng)基中需要加入______（填“四環(huán)素”或“氨芐青霉素”），其作用是________________。

(2)實(shí)驗(yàn)小組進(jìn)一步研究了不同的溫度誘導(dǎo)下轉(zhuǎn)基因植株中抗寒基因DREBI的表達(dá)情況；實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2所示：

試根據(jù)檢測(cè)結(jié)果闡述目的植株導(dǎo)入DREB7基因的優(yōu)點(diǎn)在于______________。參考答案一、選擇題(共6題，共12分)1、C【分析】【分析】

1；分析題干可知：自變量是藥物X；因變量是檢測(cè)癌細(xì)胞數(shù)量。

2；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：

（1)無(wú)菌；無(wú)毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；防止培養(yǎng)過(guò)程中的污染；③定期更換培養(yǎng)液，以便清除代謝廢物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。

（2)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：糖；氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等；還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)。

（3)溫度和pH。

（4)氣體環(huán)境：95%空氣和5%的CO2(CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH)。

【詳解】

A；培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)；細(xì)胞培養(yǎng)液中通常需要加入血清，A正確；

B；對(duì)于已經(jīng)貼壁生長(zhǎng)的動(dòng)物細(xì)胞；可用胰蛋白酶處理，使肝癌細(xì)胞脫落下來(lái)并進(jìn)行計(jì)數(shù)，B正確；

C；實(shí)驗(yàn)組加入等體積相同濃度的溶于二甲基亞礬（溶劑）的藥物X；故對(duì)照組中應(yīng)加入等體積的二甲基亞礬（溶劑），C錯(cuò)誤；

D；分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知；添加藥物X的實(shí)驗(yàn)組肝癌細(xì)胞數(shù)目最少，可以初步判斷藥物X的抗癌效果較好，D正確。

故選C。

【點(diǎn)睛】

本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等內(nèi)容，意在考查學(xué)生的實(shí)驗(yàn)探究能力。2、C【分析】【分析】

由于單克隆抗體的特異性強(qiáng)；能特異性識(shí)別抗原，因此可以把抗癌細(xì)胞的單克隆抗體跟放射性同位素；藥物等相結(jié)合，制成“生物導(dǎo)彈”借助單克隆抗體的定位導(dǎo)向作用將藥物定向帶到癌細(xì)胞，在原位殺死癌細(xì)胞，具有療效高，副作用小，位置準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)。

【詳解】

A；“瞄準(zhǔn)裝置”是由識(shí)別腫瘤的單克隆抗體構(gòu)成；單克隆抗體可與抗原(癌細(xì)胞)發(fā)生特異性結(jié)合，起到導(dǎo)向作用，A正確；

B；“彈頭”由放射性同位素、化學(xué)藥物和毒素等物質(zhì)構(gòu)成；殺傷癌細(xì)胞，B正確；

C；“彈頭”中的藥物不具有選擇作用；C錯(cuò)誤；

D；單克隆抗體運(yùn)用了動(dòng)物細(xì)胞工程中的動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)；D正確。

故選C。3、A【分析】【分析】

1；土壤中存在著大量纖維素分解酶；包括真菌、細(xì)菌和放線菌等，它們可以產(chǎn)生纖維素酶；纖維素酶是一種復(fù)合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進(jìn)一步分解為葡萄糖，使微生物加以利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長(zhǎng)，其他微生物則不能生長(zhǎng)；

2；微生物常見(jiàn)的接種的方法①平板劃線法②稀釋涂布平板法；

3；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類(lèi)型為異養(yǎng)兼性厭氧型。

【詳解】

A；微生物A所利用的碳源為纖維素；微生物B所利用的碳源為纖維素降解物，A錯(cuò)誤；

B；題圖中過(guò)程②表示生產(chǎn)乙醇的過(guò)程；常用的微生物是酵母菌，B正確；

C；根據(jù)題圖可知；微生物A利用的碳源是纖維素，故要獲得微生物A，最好選擇富含纖維素的土壤采集土樣，C正確；

D；微生物A可利用纖維素作為碳源；故其同化作用類(lèi)型為異養(yǎng)型，D正確。

故選A。4、C【分析】【分析】

1；細(xì)胞核移植技術(shù)；是指將一個(gè)動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核移植至去核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。

2；對(duì)囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時(shí)要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割；否則會(huì)影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。

【詳解】

A；蛙是體外受精；生殖發(fā)育過(guò)程都是在體外完成的，所以實(shí)驗(yàn)中用到核移植技術(shù)，不用胚胎移植，A錯(cuò)誤；

B；該實(shí)驗(yàn)用的是蛙的不同種類(lèi)細(xì)胞；說(shuō)明同一物種不同種類(lèi)細(xì)胞全能性不同，B錯(cuò)誤；

C；細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)是相互依存的；這種差異與兩種核原先所處的細(xì)胞質(zhì)環(huán)境有關(guān)，C正確；

D；不同細(xì)胞核移植都可能發(fā)育成個(gè)體；不能說(shuō)明細(xì)胞質(zhì)對(duì)異源細(xì)胞核的調(diào)控具有專(zhuān)一性，D錯(cuò)誤。

故選C。5、A【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)基的主要成分是無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)物（主要由大量元素和微量元素兩部分組成）；有機(jī)物（維生素、蔗糖、瓊脂等）和生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)（植物生長(zhǎng)素類(lèi)、細(xì)胞分裂素、赤霉素等）。培養(yǎng)基中的碳水化合物通常是蔗糖；作為培養(yǎng)基內(nèi)的碳源和能源外，對(duì)維持培養(yǎng)基的滲透壓也起重要作用。培養(yǎng)基中添加了瓊脂，主要是作為培養(yǎng)基的支持物，使培養(yǎng)基呈固體狀態(tài)，而成為固體培養(yǎng)基。

秸稈是食用菌栽培的主要基質(zhì),其中的纖維素和木質(zhì)素在食用菌菌絲生長(zhǎng)過(guò)程中大量降解,秸稈栽培食用菌是秸稈利用的最佳途徑。

【詳解】

據(jù)題干的信息；“秸稈碎化后作為食用菌的栽培基質(zhì)”，秸稈中的纖維素在食用菌菌絲生長(zhǎng)過(guò)程中大量降解，提供碳源和能源，這相當(dāng)于植物組織培養(yǎng)基中添加的蔗糖；秸稈中的纖維素是固體，可以作為培養(yǎng)基的支持物，使培養(yǎng)基呈固體狀態(tài)，這相當(dāng)于植物組織培養(yǎng)基中添加的瓊脂。

故選A。

【點(diǎn)睛】

本題主要考查植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生對(duì)所學(xué)知識(shí)的識(shí)記和辨析的能力。6、D【分析】【分析】

微生物培養(yǎng)基的成分有水；無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源和生長(zhǎng)因子；不同的生物有不同的碳源和氮源，如尿素分解菌以尿素為唯一氮源，某些碳源、氮源也可以提供能源，如牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。

【詳解】

A；乳酸菌是異養(yǎng)型微生物；需要有機(jī)碳源，而硝化細(xì)菌是自養(yǎng)型微生物，需要的碳源是二氧化碳，A錯(cuò)誤；

B；固體培養(yǎng)基中去除瓊脂（凝固劑）才可制成液體培養(yǎng)基；B錯(cuò)誤；

C；培養(yǎng)基中的瓊脂是凝固劑；不會(huì)被微生物利用，C錯(cuò)誤；

D；自生固氮微生物可以利用大氣中的氨氣作為氮源；因此以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的不都是尿素分解菌，D正確。

故選D。二、多選題(共6題，共12分)7、B:C:D【分析】【分析】

用酒曲釀酒菌種是酵母菌；代謝類(lèi)型是兼性厭氧型真菌，屬于真核細(xì)胞，條件是18～25℃；前期需氧，后期不需氧。

【詳解】

A、用酒曲釀酒是利用了微生物細(xì)胞呼吸的原理，進(jìn)行的是酵母菌的無(wú)氧發(fā)酵，不能一直通入O2；A錯(cuò)誤；

B；由于呼吸作用會(huì)產(chǎn)熱；故會(huì)導(dǎo)致酒液溫度產(chǎn)生變化，B正確；

C、起泡是由微生物進(jìn)行呼吸作用產(chǎn)生的CO2釋放到發(fā)酵液中形成的；C正確；

D；“曲勢(shì)盡”可能是隨著發(fā)酵的進(jìn)行甕中液體pH降低、酒精濃度過(guò)高導(dǎo)致酵母菌大量死亡；D正確。

故選BCD。8、A:B:C【分析】【分析】

1；平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

2；稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后形成單個(gè)菌落。

【詳解】

A；為獲得長(zhǎng)滿(mǎn)測(cè)試菌的瓊脂平板；需要用到的接種方法是稀釋涂布平板法。稀釋涂布平板法需要用到酒精燈、涂布器和培養(yǎng)基，A正確；

B；MIC是指藥敏試驗(yàn)中某種抗生素對(duì)測(cè)試菌的最低抑制濃度。含有相同濃度抗生素Ⅰ～Ⅳ的四個(gè)大小相同的紙片分別貼在長(zhǎng)滿(mǎn)測(cè)試菌的瓊脂平板上；抗生素Ⅰ的抑菌圈比抗生素Ⅲ的抑菌圈小。說(shuō)明抗生素Ⅰ的MIC大于抗生素Ⅲ的MIC。即想要達(dá)到和抗生素Ⅲ相同的抑菌效果抗生素Ⅰ要增加濃度才行，B正確；

C；圖2抑菌圈中出現(xiàn)菌落的原因可能是病原菌中出現(xiàn)了能抗抗生素Ⅳ的突變株；這些突變株在抗生素的環(huán)境下能夠存活并繁殖形成菌落。細(xì)菌是原核生物，發(fā)生變異最可能是基因突變，C正確；

D；在抑菌圈中出現(xiàn)的菌落都是對(duì)該種抗生素具有抗性的菌株；它們之間抗性的強(qiáng)弱無(wú)法根據(jù)題干信息進(jìn)行判斷。如果要判斷它們之間抗性的強(qiáng)弱還需進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)才能確定，D錯(cuò)誤。

故選ABC。

【點(diǎn)睛】

本題考查的知識(shí)點(diǎn)包括：微生物接種，微生物培養(yǎng)及微生物的應(yīng)用。9、B:C:D【分析】苯丙酮尿癥是一種嚴(yán)重的單基因遺傳病，假設(shè)該病受一對(duì)等位基因A、a控制，分析圖1，Ⅰ1、Ⅰ2都無(wú)病，但其女兒Ⅱ3卻有病，所以該病為常染色體隱性遺傳病，Ⅱ3基因型為aa，Ⅰ1和Ⅰ2的基因型都為Aa，再結(jié)合圖2的酶切結(jié)果可知，Ⅰ1、Ⅰ2、Ⅱ1的基因型相同，因此Ⅱ1的基因型為Aa，Ⅱ2表現(xiàn)正常，且從酶切結(jié)果看，Ⅱ2與Ⅱ1基因型（Aa）不同，所以Ⅱ2的基因型為AA，由此可以推知，23kb探針雜交條帶對(duì)應(yīng)正常顯性基因A，19kb探針雜交條帶對(duì)應(yīng)隱性基因a。

【詳解】

A、由分析可知，個(gè)體Ⅱ1的基因型為Aa；雜合體的概率為1，A錯(cuò)誤；

B、由分析可知，個(gè)體Ⅱ2的基因型為AA；與雜合體Aa婚配，生患病孩子aa的概率為0，B正確；

C、個(gè)體Ⅱ3是患者，是隱性純合體，故有19kb探針雜交條帶；C正確；

D、個(gè)體Ⅱ4是Ⅰ1（Aa）和Ⅰ2（Aa）所生的表現(xiàn)正常的后代；基因型可能是AA或Aa，若為雜合體就有2個(gè)探針雜交條帶，D正確。

故選BCD。10、A:C:D【分析】【分析】

分析題干信息：Ⅰ保留X；11號(hào)染色體；Ⅱ保留2、11號(hào)染色體，具有芳烴羥化酶活性，Ⅲ，保留X、11、17號(hào)染色體具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脫氫酶活性，所以支配芳烴羥化酶合成的基因位于2號(hào)染色體上，支配胸苷激酶合成的基因位于17號(hào)染色體上；支配磷酸甘油酸激合成的基因位于X號(hào)染色體上；支配乳酸脫氫酶合成的基因位于11號(hào)染色體上。

【詳解】

A；動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程中；可以利用滅活的仙臺(tái)病毒或聚乙二醇作誘導(dǎo)劑促進(jìn)細(xì)胞融合，A正確；

B；細(xì)胞Ⅲ中保留了人的X、11、17號(hào)染色體；故不會(huì)是鼠-鼠融合細(xì)胞，B錯(cuò)誤；

CD；根據(jù)分析可知；芳烴羥化酶基因位于2號(hào)染色體上，乳酸脫氫酶基因位于11號(hào)染色上，胸苷激酶基因位于17號(hào)染色體上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上，CD正確。

故選ACD。11、A:B【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)包括動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)；動(dòng)物細(xì)胞融合、核移植技術(shù)等技術(shù)；其中動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中除了加入細(xì)胞所需的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需要加入血清等天然成分。干細(xì)胞包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等，存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中，有著自我更新能力及分化潛能。

【詳解】

A；在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)；培養(yǎng)基中除了加入細(xì)胞所需的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需要加入血清等天然成分，A錯(cuò)誤；

B；動(dòng)物細(xì)胞融合不能形成雜種個(gè)體；形成的是雜種細(xì)胞，而植物體細(xì)胞雜交能形成雜種個(gè)體，兩者都能形成雜種細(xì)胞，B錯(cuò)誤；

C；干細(xì)胞包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等；存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中，有著自我更新能力及分化潛能，C正確；

D；動(dòng)物體細(xì)胞分化程度較高；全能性較低，因此動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植，D正確。

故選AB。12、A:B:D【分析】【分析】

分析題圖：圖中5支試管為梯度稀釋?zhuān)蛔詈蠼?jīng)稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后進(jìn)行計(jì)數(shù)。統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)在30~300的平板，取其平均值，進(jìn)行計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)公式為（C÷V）×M。（C為平均菌落數(shù)，V為涂布液體積，M為稀釋倍數(shù)）。

【詳解】

A；設(shè)置重復(fù)組；增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性，故某一稀釋度下至少涂3個(gè)平板。稀釋涂布平板得到的菌落可能存在兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌細(xì)胞長(zhǎng)成一個(gè)菌落，使該實(shí)驗(yàn)方法統(tǒng)計(jì)得到的結(jié)果往往會(huì)比實(shí)際活菌數(shù)目要低，A正確；

B、據(jù)圖可知，將10g土樣加入到90mL無(wú)菌水中定容至100mL后，此時(shí)土樣稀釋倍數(shù)為10倍，再經(jīng)3次10倍稀釋得到3號(hào)試管中的樣品，故3號(hào)試管中樣品的稀釋倍數(shù)是104倍；B正確；

C、5號(hào)試管進(jìn)行稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為（168+175+167）÷3×106÷0.1≈1.7×109個(gè)；C錯(cuò)誤；

D；要判斷選擇培養(yǎng)基是否起到選擇作用；需設(shè)置接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作對(duì)照，若牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基培養(yǎng)基上的菌落種類(lèi)數(shù)目多于選擇培養(yǎng)基上的菌落類(lèi)型，則說(shuō)明起到了選擇作用，D正確。

故選ABD。三、填空題(共8題，共16分)13、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】液體發(fā)酵固體發(fā)酵葡萄糖定量14、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶15、略

【分析】【分析】

果酒制作菌種是酵母菌；來(lái)源于葡萄皮上野生型酵母菌或者菌種保藏中心，條件是無(wú)氧；溫度是18～25℃，pH值呈酸性．果醋制備的菌種是醋酸菌，條件是發(fā)酵過(guò)程中充入無(wú)菌氧氣，溫度為30～35℃。

【詳解】

（1）酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在18～25℃；醋酸菌是一種好氧細(xì)菌，它的最適生長(zhǎng)溫度為30～35℃。乳酸菌是厭氧細(xì)菌，在無(wú)氧的情況下，將葡萄糖分解成乳酸。

（2）微生物的接種方法很多；最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低，這是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。

（3）飲用水中大腸桿菌的數(shù)目可以通過(guò)濾膜法來(lái)測(cè)定；將濾膜放在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上培養(yǎng)，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)黑色，從而計(jì)算出水樣中大腸桿菌的數(shù)目。

（4）固定化技術(shù)一般包括化學(xué)結(jié)合法；包埋法和物理吸附法。酶更適合采用化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法固定化；而細(xì)胞多采用包埋法固定化。

【點(diǎn)睛】

本題考查果酒和果醋制備原理，意在考查學(xué)生理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，屬識(shí)記內(nèi)容?！窘馕觥?8－25℃好氧30－35℃厭氧乳酸平板劃線法稀釋涂布平板法低當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落伊紅美藍(lán)黑色包埋法化學(xué)結(jié)合法物理吸附法包埋法16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】2種引物DNA或RNA20—3017、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】組織單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)基生長(zhǎng)和繁殖18、略

【分析】【詳解】

生物信息學(xué)是研究生物信息的采集、處理、存儲(chǔ)、傳播,分析和解釋等各方面的學(xué)科，也是隨著生命科學(xué)和計(jì)算機(jī)科學(xué)的迅猛發(fā)展，生命科學(xué)和計(jì)算機(jī)科學(xué)相結(jié)合形成的一門(mén)新學(xué)科，生物信息學(xué)主要是核酸和蛋白質(zhì)序列數(shù)據(jù)的計(jì)算機(jī)處理和分析?！窘馕觥可镄畔W(xué)是研究生物信息的采集、處理、存儲(chǔ)、傳播,分析和解釋等各方面的學(xué)科，也是隨著生命科學(xué)和計(jì)算機(jī)科學(xué)的迅猛發(fā)展，生命科學(xué)和計(jì)算機(jī)科學(xué)相結(jié)合形成的一門(mén)新學(xué)科19、略

【分析】略【解析】目的基因標(biāo)記基因啟動(dòng)子終止子啟動(dòng)子上游RNA聚合酶終止子下游轉(zhuǎn)錄標(biāo)記20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)抗體抗原－抗體雜交四、判斷題(共3題，共15分)21、B【分析】【詳解】

胚胎發(fā)育早期；細(xì)胞數(shù)量不斷增加，但胚胎總體積不變或略有縮小。

故錯(cuò)誤。22、B【分析】【詳解】

基因工程技術(shù)可以使建立移植器官工廠的設(shè)想成為現(xiàn)實(shí)；說(shuō)明并未開(kāi)始實(shí)際應(yīng)用。

故題中描述錯(cuò)誤。23、A【分析】【詳解】

生殖性克隆，即通常所說(shuō)的克隆人，通過(guò)克隆技術(shù)產(chǎn)生獨(dú)立生存的新個(gè)體，即通常所說(shuō)的克隆人，該說(shuō)法正確。五、實(shí)驗(yàn)題(共1題，共4分)24、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打開(kāi)DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開(kāi)始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實(shí)際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過(guò)程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。

【詳解】

（1）分析題意可知；研究人員取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng)，稀釋后可通過(guò)稀釋涂布平板法接種到培養(yǎng)基表面以獲得單菌落。

（2）PCR技術(shù)是一項(xiàng)通過(guò)體外控制溫度擴(kuò)增DNA的技術(shù)，該技術(shù)中由于溫度較高，起關(guān)鍵作用的酶是耐高溫DNA聚合酶；PCR擴(kuò)增的前提是要有一段目的基因的核苷酸片段，分析題意，該技術(shù)能在放線菌總的DNA中專(zhuān)一性擴(kuò)增出16SrRNA基因的原因是：引物是根據(jù)16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列設(shè)計(jì)合成的；PCR產(chǎn)物一般可通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳來(lái)鑒定：凝膠中的DNA分子通過(guò)染色；可以在波長(zhǎng)為300nm的紫外燈下被檢測(cè)出來(lái)。

（3）分析題意，科學(xué)家將Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細(xì)胞中，該過(guò)程中逆轉(zhuǎn)錄病毒是載體，能將外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纖維細(xì)胞；分析題意，實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖莍PS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用，故實(shí)驗(yàn)的自變量是外源基因的有無(wú)，因變量是IPS細(xì)胞的產(chǎn)生情況，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)應(yīng)遵循對(duì)照與單一變量原則，故可設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)如下：將轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞和沒(méi)有轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中，在相同且適宜的條件下，如果只有轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞轉(zhuǎn)化成了iPS細(xì)胞，則可以證明iPS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用?！窘馕觥?1)稀釋涂布平板法##涂布平板法

(2)耐高溫DNA聚合酶引物能與16SrRNA基因特異性結(jié)合（引物是根據(jù)16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列設(shè)計(jì)合成的）瓊脂糖凝膠電泳。

(3)逆轉(zhuǎn)錄病毒是載體，能將外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纖維細(xì)胞。將轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞和沒(méi)有轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中，在相同且適宜的條件下，如果只有轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞轉(zhuǎn)化成了iPS細(xì)胞，則可以證明iPS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用六、綜合題(共3題，共6分)25、略

【分析】【分析】

農(nóng)桿菌易感染植物細(xì)胞；其Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移并整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上。利用上述原理，將目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA上，再導(dǎo)入農(nóng)桿菌，用農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞，可以將目的基因整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上。

【詳解】

（1）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法利用的原理是其Ti質(zhì)粒的T-DNA片段具有可轉(zhuǎn)移并整合到植物細(xì)胞的染色體DNA上的特點(diǎn)。

在農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法中；構(gòu)建基因表達(dá)載體是為了把目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA中，并在導(dǎo)入農(nóng)桿菌后，讓農(nóng)桿菌將目的基因整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上，并且可以遺傳給下一代，使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，所選的載體需要具備以下條件：①能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存；②具有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn)，供外源DNA片段插入；③具有標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇；④對(duì)受體細(xì)胞無(wú)害。基因表達(dá)載體包括目的基因；標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)等。本實(shí)驗(yàn)中基因表達(dá)載體的組成除了有抗菌肽基因（目的基因）與青霉素抗性基因（標(biāo)記基因）外，還有啟動(dòng)子、終止子和復(fù)制原點(diǎn)或多個(gè)限制酶酶切位點(diǎn)等。

（2）Ca2+處理細(xì)胞，可以提高細(xì)胞吸收外源DNA的能力，成為感受態(tài)細(xì)胞。所以，可用Ca2+對(duì)農(nóng)桿菌進(jìn)行處理；讓重組DNA分子更容易導(dǎo)入農(nóng)桿菌。

（3）因?yàn)榛虮磉_(dá)載體含青霉素抗性基因；所以成功導(dǎo)入抗菌肽基因的農(nóng)桿菌還含有青霉素抗性基因。能在含青霉素的培養(yǎng)基上生存，所以，將本實(shí)驗(yàn)中農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)入含有青霉素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，可以篩選出成功導(dǎo)入抗菌肽基因的細(xì)胞。

（4）由圖甲可知；用不同種類(lèi)農(nóng)桿菌侵染馬鈴薯外植體15分鐘后，轉(zhuǎn)化效率最好，其中，EHA105菌株的轉(zhuǎn)化效率是四種菌株里最好的，所以，進(jìn)行馬鈴薯農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化時(shí)應(yīng)該選擇EHA105農(nóng)桿菌菌種。由圖甲可知，農(nóng)桿菌侵染30分鐘時(shí)，四種農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化效率都比15分鐘時(shí)更低，可能在農(nóng)桿菌侵染15分鐘以后，農(nóng)桿菌過(guò)度繁殖使外植體細(xì)胞壞死，外植體受侵害嚴(yán)重，生長(zhǎng)受抑制，所以使得轉(zhuǎn)化效率下降。

（5）因?yàn)檗r(nóng)桿菌過(guò)度繁殖可能會(huì)使外植體細(xì)胞壞死；所以為避免農(nóng)桿菌過(guò)度繁殖，被侵染后的外植體在培養(yǎng)一段時(shí)間后還需要進(jìn)行脫菌處理，由圖乙可知，在使用相同濃度的抑菌劑時(shí)，青霉素和頭孢曲松鈉比頭孢噻肟鈉對(duì)EHA105的抑菌率更高，又因?yàn)楸緦?shí)驗(yàn)中導(dǎo)入了抗菌肽基因的農(nóng)桿菌又含有青霉素抗性基因，所以不能選青霉素作脫菌處理，而選擇頭孢曲松鈉作為抑菌抗生素。

（6）調(diào)查發(fā)現(xiàn)，抑菌抗生素在對(duì)農(nóng)桿菌生長(zhǎng)起抑制作用的同時(shí)，對(duì)馬鈴薯愈傷組織的誘導(dǎo)與分化也可能產(chǎn)生抑制作用，為探究是否存在這種毒副作用，所設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)的自變量應(yīng)該是是否含抑菌抗生素，分別探究在沒(méi)有抑菌抗生素的情況下和有抑菌抗生素的情況下，馬鈴薯愈傷組織的誘導(dǎo)與分化情況，比較分析抑菌抗生素會(huì)不會(huì)對(duì)馬鈴薯愈傷組織的誘導(dǎo)與分化產(chǎn)生抑制作用。因?yàn)樯项}依據(jù)圖甲和圖乙的結(jié)果選擇了頭孢曲松鈉作為抑菌抗生素，所以還需進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)是將馬鈴薯（相同部位）外植體分別放入含有頭孢曲松鈉和不含頭孢曲松鈉的等量（MS）培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，觀察統(tǒng)計(jì)愈傷組織的誘導(dǎo)與分化成功率?！窘馕觥?1)可轉(zhuǎn)移并整合到植物細(xì)胞的染色體DNA上復(fù)制原點(diǎn)或多個(gè)限制酶酶切位點(diǎn)。

(2)Ca2+

(3)青霉素。

(4)EHA105農(nóng)桿菌侵染15分鐘以后；外植體受侵害嚴(yán)重，生長(zhǎng)受抑制，轉(zhuǎn)化效率下降。

(5)頭孢曲松鈉。

(6)將馬鈴薯（相同部位）外植體分別放入含有頭孢曲松鈉和不含頭孢曲松鈉的等量（MS）培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，觀察統(tǒng)計(jì)愈傷組織的誘導(dǎo)與分化成功率26、略

【分析】【分析】

基因是指有遺傳效應(yīng)的DNA片段。不同基因內(nèi)的堿基對(duì)的排列順序不同。基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。簭幕蛭膸?kù)中獲?。焕肞CR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是Ca2＋處理法。

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)－抗原－抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定；抗病鑒定等。

【詳解】

（1）基因A和基因B在結(jié)構(gòu)上的區(qū)別是堿基對(duì)的數(shù)目和排列順序不同；農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的TDNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞；并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上，因此采用Ti質(zhì)粒作為載體的優(yōu)勢(shì)是其具有整合到受體細(xì)胞染色體DNA上的T－