化妝品 抗熱老化活性的評價 秀麗線蟲法-征求意見稿_第1頁
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1化妝品抗熱老化活性的評價秀麗線蟲法材料與試劑、實驗儀器與設(shè)備、實驗步驟、實驗T/GDCA013—2022化妝品抗氧化活性的評價秀麗線T/GDCA033—2023化妝品抗羰基化活性的評價秀3.1熱老化Antithermalaging基質(zhì)金屬蛋白酶過度降解細(xì)胞基質(zhì)，造成膠原蛋白和彈性3.24檢測原理HSP-16.2蛋白是分子量為16kd的小分子熱休克蛋白（sHS綠色熒光蛋白報告基因（GFP）偶聯(lián)的hsp16.2啟動子，具有與HSP16.2相同的表達模式），測定化妝品5.2.1除非另有說明，化學(xué)試劑使用符合國家標(biāo)準(zhǔn)的分析純試劑。25.2.2培養(yǎng)基與試劑配制按T/GDCA033—2023的規(guī)定進行實驗。422PO4磷酸氫二鉀（K2HPO4）、磷酸氫二鈉十二水（Na27.2樣品性調(diào)整前處理方法，具體按T/GDCA013—202稱取0.001g蝦青素于2mL離心管中，加入558μL二甲基亞砜。將離心管超聲30min后置于80℃水浴取E.coliOP50菌液和蝦青素母液按98:2比例混合均勻，用移液槍吸取150μL菌液輕緩地打在每個8.2預(yù)測試8.3線蟲抗熱老化測定收集繁殖期TJ375線蟲用于同期化。將同期化的幼蟲轉(zhuǎn)移到含/不含藥物的NGM上作用48h后暴露于片上，每個處理組挑選至少30條線蟲轉(zhuǎn)移至左旋咪唑液滴中以麻醉線蟲至無任何反應(yīng)，拍攝在激發(fā)/發(fā)9結(jié)果評價3采用ImageJ軟件對圖像中線蟲熒光強度進行相對定量分析，得到各組熒光強度值。采用GraphPadPrism軟件繪制柱狀圖，t-test在實驗滿足有效性的基礎(chǔ)上，樣品組熒光強度值顯著低于空白組（p＜0.05說明該受試物在該濃度下，能下調(diào)熱應(yīng)激線蟲的HSP16.2蛋白表達，保護線蟲免受熱應(yīng)激損傷，可作為抗熱老化活性評蝦青素得到穩(wěn)定的數(shù)據(jù)，以確保實驗?zāi)Ｐ偷某晒θ絷栃詫φ战M的線蟲熒光強度值未顯著低于空白組，則該次實驗視435℃條件下TJ375線蟲熒光圖像見A.1，TJ375線蟲熒光強度的相對定量分析見圖A5[1]JinYoungSeo,JinHoChung.elegans,Food&Fuction,2021,12:9098-9110.smallheat-shockproteinSocietiesforExperimentalBiologycomplexity.JBiolChem.2019,294(6):2121-2132.Caenorhabditiselega

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