2025年外研銜接版選擇性必修3生物下冊階段測試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年外研銜接版選擇性必修3生物下冊階段測試試卷886考試試卷考試范圍：全部知識點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五總分得分評卷人得分一、選擇題(共9題，共18分)1、科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細(xì)胞融合的是()A.經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞B.不經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞C.經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞D.不經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞2、在果酒、果醋和腐乳制作中，都要防止微生物污染，有關(guān)敘述不正確的是（）A.果醋發(fā)酵階段應(yīng)向發(fā)酵瓶中泵入無菌空氣B.腌制腐乳的鹵湯中應(yīng)含有12%左右的酒精以抑制細(xì)菌的增殖C.將長滿毛霉的豆腐放在瓶中，并逐層加鹽，接近瓶口部分的鹽要鋪厚一些D.利用自然菌種發(fā)酵果酒時(shí)，將封有葡萄汁的發(fā)酵瓶進(jìn)行高壓滅菌3、某種果酒的發(fā)酵裝置如圖所示。下列敘述正確的是（）

A.隨著發(fā)酵的進(jìn)行發(fā)酵液的pH會越來越大B.集氣管里儲存的氧氣可以被酵母菌利用C.發(fā)酵過程中產(chǎn)生的酒精不會影響酵母菌的代謝D.可用重鉻酸鉀溶液檢驗(yàn)發(fā)酵液中是否含有酒精4、下列關(guān)于基因工程中操作工具的敘述，不正確的是（）A.限制性內(nèi)切酶識別并在特定位置斷開磷酸二酯鍵B.處理載體和處理目的基因的限制酶通常是相同的C.載體中常以抗生素抗性基因作為標(biāo)記基因D.HIV病毒可以直接作為基因工程的載體5、哺乳動物的胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）在畜牧學(xué)和醫(yī)學(xué)上有十分重要的應(yīng)用價(jià)值。下列關(guān)于胚胎干細(xì)胞的敘述，正確的是（）A.ES細(xì)胞是由原腸胚分離岀來的一類細(xì)胞B.ES細(xì)胞在形態(tài)上表現(xiàn)為體積大，核小，核仁明顯C.ES細(xì)胞在滋養(yǎng)層細(xì)胞上可以只增殖不分化D.用ES細(xì)胞誘導(dǎo)分化岀的某些組織細(xì)胞可成功治愈糖尿病6、標(biāo)準(zhǔn)的PCR過程一般分為變性、復(fù)性、延伸三大步，這三大步需要的溫度依次是（）A.95℃、55℃、72℃B.72℃、55℃、92℃C.55℃、92℃、72℃D.80℃、55℃、72℃7、用過濾的方法得到細(xì)胞中的氯化鈉溶液后，還要用酒精處理，可以得到較純化的DNA。這是因?yàn)椋ǎ〢.DNA易溶于酒精，而細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)不易溶于酒精B.DNA不易溶于酒精，而細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)易溶于酒精C.DNA和細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)更易溶于酒精D.DNA和細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)都不溶于酒精8、獼猴桃是原產(chǎn)我國的野生藤本果樹，營養(yǎng)價(jià)值較高，我國現(xiàn)有54個種。毛花獼猴桃為二倍體，果實(shí)大，維生素C含量高；軟棗獼猴桃為四倍體，極耐寒，在-40℃下可安全越冬。某農(nóng)科所利用這兩種獼猴桃體細(xì)胞，通過細(xì)胞工程的方法培育出了獼猴桃新品種，培育過程如下圖所示。下列說法不正確的是（）

A.過程①需用纖維素酶和果膠酶進(jìn)行去壁處理B.過程②利用了細(xì)胞膜的流動性原理實(shí)現(xiàn)a和b的融合C.獼猴桃新品種的培育體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性D.新品種的培育屬于雜交育種9、豬或牛的初級卵母細(xì)胞的減數(shù)第二次分裂完成于（）A.排卵前后，在卵巢內(nèi)B.排卵前，在卵巢內(nèi)C.排卵后，在輸卵管內(nèi)D.受精時(shí)，在輸卵管內(nèi)評卷人得分二、多選題(共5題，共10分)10、轉(zhuǎn)MT-like基因的衣藻對Pb、Cd等重金屬離子的抗性明顯增強(qiáng)，對Cb2+富集效應(yīng)顯著。某研究小組計(jì)劃通過多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）技術(shù)擴(kuò)增MT-like基因，并進(jìn)一步通過基因工程手段構(gòu)建凈化重金屬廢水的工程菌。下列有關(guān)PCR操作的敘述，正確的是（）A.PCR擴(kuò)增需要加入Taq酶和DNA連接酶B.需設(shè)計(jì)一對與MT-like基因兩端序列互補(bǔ)的引物C.設(shè)計(jì)引物時(shí)要避免引物之間形成互補(bǔ)堿基對D.長度相同，但GC含量高的引物需要更高的退火溫度11、抗菌肽又名多肽抗生素，廣泛存在于昆蟲以及兩棲類動物、哺乳動物體內(nèi)，具有廣譜抗菌活性。其作用原理是在細(xì)菌細(xì)胞膜上形成跨膜的離子通道，造成細(xì)胞內(nèi)容物泄漏，最終導(dǎo)致細(xì)菌死亡。最新研究表明，某些抗菌肽對癌細(xì)胞甚至感染了病毒的宿主細(xì)胞均具有殺傷作用。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.從免疫調(diào)節(jié)的方式分析，抗菌肽參與特異性免疫過程B.抗菌肽改變了細(xì)胞膜的通透性，使細(xì)胞不能保持正常滲透壓而死亡C.利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)抗菌肽時(shí)，常選用大腸桿菌作為受體菌D.對抗菌肽的研究可為治療癌癥、新型冠狀病毒肺炎等提供新思路12、下列關(guān)于DNA粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)敘述不正確的是（）A.獲取雞血時(shí)，容器中應(yīng)先加入適量的NaCl溶液以防止血液凝固B.由于DNA對高溫耐受性差，故提取時(shí)需加入95%的冷酒精C.可用木瓜蛋白酶純化過濾后研磨液中的DNAD.向溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中緩緩加蒸餾水，當(dāng)出現(xiàn)析出物時(shí)停止加水13、某植物有甲、乙兩品種，科研人員在設(shè)計(jì)品種乙組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)時(shí)，參照品種甲的最佳激素配比（見下表）進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。為確定品種乙的II階段的最適細(xì)胞分裂素濃度，參照表中α2（α2>2．0μmol·L-1），以0．5μmol·L-1為梯度，設(shè)計(jì)5個濃度水平的實(shí)驗(yàn)，其中細(xì)胞分裂素最高濃度設(shè)為M。下列有關(guān)敘述正確的是（）。品種甲組織培養(yǎng)階段細(xì)胞分裂素/（μmol·L-1）生長素/（μmol·L-1）I誘導(dǎo)形成愈傷組織α1b1II誘導(dǎo)形成幼芽α2b2Ⅲ誘導(dǎo)生根α3b3

A.表中發(fā)生基因選擇性表達(dá)的是II和Ⅲ階段B.實(shí)驗(yàn)中共配制了2種不同的培養(yǎng)基，即生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基C.確定品種乙II階段最適細(xì)胞分裂素濃度的實(shí)驗(yàn)中，M為α2+2μmol·L-1D.生長素和細(xì)胞分裂素的配比是啟動細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵因素14、2020年7月20日，國際醫(yī)學(xué)權(quán)威期刊《柳葉刀》上發(fā)表了新冠病毒疫苗II期臨床試驗(yàn)的成果。該試驗(yàn)是由陳薇院士等人領(lǐng)銜的團(tuán)隊(duì)開展的研究，試驗(yàn)中使用的疫苗是一種腺病毒載體重組新冠病毒疫苗(基因重組疫苗)。試驗(yàn)結(jié)果表明，單次接種疫苗28天后，99．5%的受試者產(chǎn)生了特異性抗體，95．3%受試者產(chǎn)生了中和抗體，89%的受試者產(chǎn)生了特異性T細(xì)胞免疫反應(yīng)。這表明，陳薇團(tuán)隊(duì)研發(fā)的新冠疫苗可為健康人群提供“三重保護(hù)”，將新冠病毒“拒之門外”。下列敘述正確的是（）A.該疫苗的制備需要用到限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶B.受試者接受重組新冠病毒疫苗的接種后，體內(nèi)能產(chǎn)生分泌特定抗體的效應(yīng)T細(xì)胞C.主要通過檢測受試者體內(nèi)新冠病毒抗體的含量來評價(jià)試驗(yàn)的有效性D.新冠肺炎康復(fù)患者可以不注射該疫苗評卷人得分三、填空題(共5題，共10分)15、本課題對分解纖維素的微生物進(jìn)行了初步的篩選。但是，這只是分離純化的第一步。為確定得到的是纖維素分解菌，還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)，纖維素酶的發(fā)酵方法有___________和___________發(fā)酵兩種。纖維素酶的測定方法，一般是采用對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的__________進(jìn)行________的測定。16、本課題對能分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行了初步的篩選。但是，這只是分離純化菌種的第一步。對分離的菌種作進(jìn)一步的鑒定，還需要借助生物化學(xué)的方法。在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中，細(xì)菌合成的___________將尿素分解成了_____________。氨會使培養(yǎng)基的________________，pH______________。因此，我們可以通過檢測培養(yǎng)基______________來判斷該化學(xué)反應(yīng)是否發(fā)生。在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入_____________，培養(yǎng)某種細(xì)菌后，如果pH升高，指示劑將變________________。17、最常用的載體是______，它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨(dú)立于細(xì)菌染色體之外，并具有______能力的_____。18、動物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同，誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的方法與植物原生質(zhì)體融合的方法類似，常用的誘導(dǎo)因素有______等。19、請回答有關(guān)植物細(xì)胞工程的問題：

（1）在植物中，一些分化的細(xì)胞，經(jīng)過________的誘導(dǎo)，可以脫分化失去其__________而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞。

（2）胡蘿卜的組織培養(yǎng)中，將接種后的胡蘿卜組織塊，放在恒溫_________（填：“光照”或“黑暗”）條件下培養(yǎng)。一段時(shí)間后，將生長良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到_________培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。

（3）在植物組織培養(yǎng)過程中，由于培養(yǎng)細(xì)胞一直處于不斷的分生狀態(tài)，因此容易受到__________的影響而產(chǎn)生突變。為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將種子播種在含_____的培養(yǎng)基上，獲得所需個體。評卷人得分四、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共21分)20、德陽中江盛產(chǎn)蜜柚；汁多肉脆，口感香甜。但是近年各地大面積種植該類產(chǎn)品，導(dǎo)致大量果品積壓。為了解決果農(nóng)的燃眉之急，有一定生物學(xué)知識的村干部想到了多渠道開發(fā)產(chǎn)品的方法，幫助果農(nóng)辦起了加工廠。請回答下列相關(guān)問題；

（1）利用蜜柚果肉可以生產(chǎn)果汁，為提高出汁率和澄清度，可向蜜柚汁中加入果膠酶將果膠分解為________；生產(chǎn)果汁剩下的柚皮可用________法提取精油；作為工業(yè)原料。

（2）在利用蜜柚汁制作果酒的過程中；為了提高酵母菌的發(fā)酵效率，工作人員對酵母菌進(jìn)行了固定化，過程如下：酵母細(xì)胞活化→①→配制海藻酸鈉溶液→海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞混合→固定化酵母細(xì)胞。

上述流程中，①為配制________溶液；溶化海藻酸鈉時(shí)，要用________加熱；直至其完全溶化。

（3）上述固定酵母細(xì)胞的方法稱為法________，而制備固定化淀粉酶則不用此法進(jìn)行固定，原因是________________________________

（4）在利用蜜抽果酒制作果醋的過程中，一工作人員又向發(fā)酵裝置中添加一定量的蜜柚汁（不影響菌種的活性），檢測發(fā)現(xiàn)乙醇的利用速率迅速下降，原因是________________________________________________。21、科學(xué)家的發(fā)現(xiàn)給人類的生活帶來了無限的想象；他們采集了某深海海域的沉積物樣品，分離；鑒定得到其中的深海放線菌，以期獲得具有前景的抗生素替代品。據(jù)此回答下列問題：

(1)研究人員欲篩選出深海放線菌進(jìn)行研究，取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng)，稀釋后取菌液通過_______________法接種到高氏一號（加數(shù)滴質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的酚）培養(yǎng)基表面以獲得單菌落。

(2)通過PCR技術(shù)擴(kuò)增分離得到的放線菌的16SrRNA基因可進(jìn)行菌株的種屬鑒定。PCR技術(shù)中起關(guān)鍵作用的酶是_____________。該技術(shù)能在放線菌總的DNA中專一性擴(kuò)增出16SrRNA基因的原因是______________。PCR產(chǎn)物一般可通過_________________鑒定。

(3)科學(xué)家還將Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細(xì)胞中。2~3周后，這些細(xì)胞顯示出ES細(xì)胞的形態(tài)、具有活躍的分裂能力，它們就是iPS細(xì)胞。在這個實(shí)驗(yàn)過程中，逆轉(zhuǎn)錄病毒的作用是_______________如何證明iPS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用？請寫出實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路______________22、黏多糖貯積癥是由IDUA基因突變導(dǎo)致的遺傳病?？蒲腥藛T對此病的治療進(jìn)行相關(guān)研究。

(1)黏多糖貯積癥患者細(xì)胞中IDUA基因由于堿基對___________造成突變，轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度不變但提前出現(xiàn)終止密碼子，最終導(dǎo)致合成的IDUA酶分子量___________；與正常IDUA酶的空間結(jié)構(gòu)差異顯著而失去活性，積累過多的黏多糖無法及時(shí)清除，造成人體多系統(tǒng)功能障礙。

(2)抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結(jié)構(gòu)、功能相同，但它的反密碼子可以與終止密碼子配對。在上述這一類突變基因的翻譯過程中，加入sup-tRNA可以發(fā)揮的作用是___________；從而誘導(dǎo)通讀獲得有功能的全長蛋白。

(3)不同的sup-tRNA可以攜帶不同氨基酸；為比較它們的通讀效果，科研人員進(jìn)行了相關(guān)研究，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖。

注：“-”代表未加入。

據(jù)圖分析，實(shí)驗(yàn)組將___________基因?qū)胧荏w細(xì)胞，并采用___________技術(shù)檢測導(dǎo)入基因的表達(dá)情況。據(jù)結(jié)果分析，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能___________。

(4)科研人員利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA突變基因純合小鼠及IDUA基因敲除小鼠進(jìn)行治療，檢測肝臟細(xì)胞IDUA酶活性和組織黏多糖的積累量，與不治療的小鼠相比較，實(shí)驗(yàn)結(jié)果為_____________，表明攜帶酪氨酸的sup-tRNA可以治療黏多糖貯積癥。評卷人得分五、綜合題(共4題，共12分)23、胡蘿卜素可用于治療夜盲癥和于皮癥；也是常用的食品色素。為了提高胡蘿卜素生產(chǎn)效率，降低生產(chǎn)成本，某科研人員試圖從藍(lán)細(xì)菌（藍(lán)藻）中提取胡蘿卜素，實(shí)驗(yàn)流程如下：取少量污泥樣品，先后在光照強(qiáng)度為2kLux和溫度為30℃的條件下反復(fù)交替進(jìn)行液體培養(yǎng)和固體平板培養(yǎng)，最后取少量的液體培養(yǎng)液進(jìn)行浸提；離心、干燥和萃取，得到樣品并進(jìn)行胡蘿卜素鑒定。請回答：

(1).在培養(yǎng)藍(lán)細(xì)菌的過程中，實(shí)驗(yàn)所用的培養(yǎng)基中可不需要添加的主要營養(yǎng)物質(zhì)是__________。

(2).若需對藍(lán)細(xì)菌進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)，則固體平板培養(yǎng)過程應(yīng)采用的接種方法是________。若培養(yǎng)液的稀釋倍數(shù)不夠，固體平板培養(yǎng)基上出現(xiàn)的現(xiàn)象是__________

(3).從干燥的菌體中提取胡蘿卜素常采用萃取法，萃取劑一般選用____________。

(4).對萃取液進(jìn)行濃縮之前，還必須對萃取液進(jìn)行過濾操作的目的是______________。24、某研究小組從黃色短桿菌（能合成L—亮氨酸）中篩選L—亮氨酸缺陷型（不能合成L—亮氨酸）突變菌株；實(shí)驗(yàn)流程如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：

（1）培養(yǎng)基滅菌常用的方法是____________________。

（2）圖中將試管中的菌液進(jìn)行振蕩培養(yǎng)的目的是_____________________________。

（3）過程②接種時(shí)，先將滅菌后的金絲絨與培養(yǎng)皿A中的菌落接觸一次，然后像蓋印章一樣將菌種連續(xù)接種到培養(yǎng)皿B和C的培養(yǎng)基表面，這種接種方法便于將來比較______________________________。

（4）培養(yǎng)皿A、B、C中的培養(yǎng)基都要使用固體培養(yǎng)基，原因是__________________________________。

（5）若培養(yǎng)皿B的培養(yǎng)基中含有L—亮氨酸，培養(yǎng)皿C的培養(yǎng)基中不含L—亮氨酸，培養(yǎng)一段時(shí)間后菌落生長情況如圖所示，研究人員應(yīng)該從培養(yǎng)皿__________（填“B”或“C”）中選取目的菌落，確定目的菌落位置的依據(jù)是________________________________________________。25、四環(huán)素是放線菌產(chǎn)生的一種廣譜抗生素；既可以用來進(jìn)行動物疾病的治療，還可以作為飼料的添加劑促進(jìn)動物生長。然而，四環(huán)素的化學(xué)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，在動物體內(nèi)并不能被完全吸收轉(zhuǎn)化，大部分以原尿形式排出體外，易在環(huán)境中積累，造成污染。研究人員從養(yǎng)雞場糞便堆肥中篩選獲得兩株對四環(huán)素具有一定降解能力的菌株，并探究其對四環(huán)素降解的最佳條件，為修復(fù)及治理被四環(huán)素污染的環(huán)境提供菌種資源和理論依據(jù)?；卮鹣铝袉栴}：

(1)為篩選出四環(huán)素降解菌，從飼料中添加_______的養(yǎng)雞場糞便中取5g樣品，加入無菌水制成懸液接種至適宜的液體培養(yǎng)基中，置于30℃、160t/min搖床恒溫振蕩培養(yǎng)，此操作的目的是________________。

(2)培養(yǎng)結(jié)束后對培養(yǎng)液進(jìn)行梯度稀釋，從不同稀釋倍數(shù)的稀釋液中各吸取100μL稀釋液，涂布于含有“一定濃度四環(huán)素的選擇培養(yǎng)基上。待長出單菌落，挑選菌落形態(tài)外觀不同的單菌落直接用______法進(jìn)一步分離純化。若要臨時(shí)保藏菌種，可將其接種到試管的______上；待長成菌落后再置于4℃冰箱中保藏，以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

(3)分離得到兩種對四環(huán)素具有降解能力的菌種A和B。為研究不同碳源和氮源時(shí)；兩種菌對四環(huán)素降解能力的影響，在含適宜濃度的四環(huán)素的無機(jī)鹽培養(yǎng)基中分別加入1%不同碳源和氮源作為實(shí)驗(yàn)組，不加碳源或氮源的作為對照組，6d后測定四環(huán)素殘留量結(jié)果如下圖所示：

①四環(huán)素可為能降解四環(huán)素的微生物提供碳源，碳源可為微生物的生長提供__________（答出兩點(diǎn)）；分析可知，在碳源和氮源分別為_________________時(shí)，A菌降解四環(huán)素的能力最高；添加蔗糖對B菌降解四環(huán)素具有______________作用。

②為保證實(shí)驗(yàn)的嚴(yán)謹(jǐn)性，本實(shí)驗(yàn)還需要再添加一組對照實(shí)驗(yàn)，該對照實(shí)驗(yàn)的設(shè)置為_______________。26、2018年11月26日；世界首例免疫艾滋病的“基因編輯嬰兒”誕生。有媒體認(rèn)為“中國在基因編輯技術(shù)用于疾病預(yù)防領(lǐng)域?qū)崿F(xiàn)歷史性突破”；也有人認(rèn)為“潘多拉盒子就此打開”?；卮鹣铝袉栴}：

（1）基因編輯技術(shù)用到的工具酶有_______________________________；“基因編輯嬰兒”需要涉及的生物技術(shù)有__________________________________________（答出三點(diǎn)即可）。

（2）設(shè)計(jì)試管嬰兒時(shí)為了提高受孕率，需要用___________激素處理，促進(jìn)女子排出更多的卵子。培養(yǎng)的卵母細(xì)胞需要發(fā)育至______________________期；使其獲得受精能力。

（3）由于母體對移入子宮的外來胚胎____________________________；故為胚胎移植取得成功提供了可能。

（4）胚胎干細(xì)胞簡稱ES細(xì)胞或EK細(xì)胞，是由___________________________中分離出來的一類細(xì)胞。

（5）我國是種植轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物較多的國家之一，關(guān)于轉(zhuǎn)基因生物的安全性的爭論越來越多，轉(zhuǎn)基因生物安全主要涉及________________________________________等三方面。

（6）與傳統(tǒng)的工程相比，生態(tài)工程是一類_____________________________的工程體系。

（7）發(fā)展生態(tài)農(nóng)業(yè)用沼渣肥田主要體現(xiàn)了_____________________原理；連年種植單一品種造成病蟲害增加主要違反了_____________________原理。參考答案一、選擇題(共9題，共18分)1、A【分析】單克隆抗體制備是利用經(jīng)免疫的B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的雜交細(xì)胞產(chǎn)生的。2、D【分析】【分析】

1.果酒的制作離不開酵母菌；酵母菌是兼性厭氧型生物，在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖，在無氧條件下，酵母菌進(jìn)行酒精發(fā)酵。溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件，20℃左右，酒精發(fā)酵時(shí)，一般將溫度控制在18~25℃，在葡萄酒自然發(fā)酵過程當(dāng)中，其主要作用的是附著在葡萄皮上的野生酵母菌。

2.醋酸菌是一種好氧細(xì)菌；只有當(dāng)氧氣充足時(shí)，才能進(jìn)行旺盛的生理活動。醋酸菌對氧氣的含量特別敏感，當(dāng)進(jìn)行深層發(fā)酵時(shí)，即使只是短時(shí)間中斷通入氧氣，也會引起醋酸菌死亡。當(dāng)氧氣；糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?。醋酸菌的最適生長溫度為30~35℃。

3.參與腐乳制作的微生物主要是毛霉；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型．腐乳制作的原理：毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸。

【詳解】

A；參與果醋制作的醋酸菌是好氧菌；因此果醋發(fā)酵階段需要不斷泵入無菌空氣，不能封閉充氣口，A正確；

B；腌制腐乳的鹵湯中應(yīng)含有12%左右的酒精以抑制細(xì)菌的增殖；另外還可以起到調(diào)味的作用，B正確；

C；將長滿毛霉的豆腐放在瓶中；并逐層加鹽，接近瓶口部分的鹽要鋪厚一些，因?yàn)樵浇咏靠诒浑s菌污染的機(jī)會越大，C正確；

D；利用自然菌種發(fā)酵果酒時(shí)；菌種是來自葡萄皮上的野生型酵母菌，因此不能將封有葡萄汁的發(fā)酵瓶進(jìn)行高壓滅菌，否則會殺死菌種，D錯誤。

故選D。

【點(diǎn)睛】3、D【分析】【分析】

參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型．果酒制作的原理：

（1）在有氧條件下，反應(yīng)式如下：

（2）在無氧條件下，反應(yīng)式如下：

【詳解】

A；酵母菌代謝產(chǎn)生的二氧化碳會溶解在發(fā)酵液中；使發(fā)酵液的pH變小，A錯誤；

B；集氣管里收集到的是酵母菌細(xì)胞呼吸產(chǎn)生的二氧化碳；不是氧氣，B錯誤；

C；發(fā)酵過程中產(chǎn)生的酒精是代謝的產(chǎn)物；積累過多會影響酵母菌的代謝，C錯誤；

D；在酸性條件下；可用重鉻酸鉀溶液檢驗(yàn)發(fā)酵液中是否含有酒精，D正確。

故選D。4、D【分析】【分析】

基因工程的操作工具有限制酶；DNA連接酶和運(yùn)載體。

【詳解】

A；一種限制酶只能識別特定的DNA序列；且在特定的位點(diǎn)打開磷酸二酯鍵，A正確；

B；常用同種限制酶處理載體和目的基因；以產(chǎn)生相同的黏性末端，B正確；

C；載體中常以抗生素抗性基因作為標(biāo)記基因；在培養(yǎng)基中添加相應(yīng)的抗生素以篩選含目的基因的細(xì)胞，C正確；

D；HIV病毒需要經(jīng)過改造才能作為基因工程的載體；D錯誤。

故選D。

【點(diǎn)睛】5、D【分析】【分析】

胚胎干細(xì)胞簡稱ES或EK細(xì)胞；來源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)）。其特點(diǎn)是：具有胚胎細(xì)胞的特性，體積較小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物任何一種組織細(xì)胞；另一方面，在體外培養(yǎng)條件下，ES細(xì)胞可不斷增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存，也可以進(jìn)行某些遺傳改造。

【詳解】

A；ES細(xì)胞是從早期胚胎（原腸胚期之前）或原始性腺中分離出來的一類細(xì)胞；A錯誤；

B；ES細(xì)胞的體積較??；細(xì)胞核大，核仁明顯，B錯誤；

C；在體外培養(yǎng)條件下；ES細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上可不斷增殖而不發(fā)生分化，C錯誤；

D；利用可以被誘導(dǎo)分化形成新的組織細(xì)胞的特性；用ES細(xì)胞誘導(dǎo)分化岀的某些組織細(xì)胞可成功治愈糖尿病，D正確。

故選D。

【點(diǎn)睛】6、A【分析】【分析】

PCR技術(shù)：①概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)；②原理：DNA復(fù)制；③條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）；④方式：以指數(shù)的方式擴(kuò)增，即約2n；⑤過程：高溫變性；低溫復(fù)性、中溫延伸。

【詳解】

標(biāo)準(zhǔn)的PCR過程一般分為變性；復(fù)性、延伸三大步；其中變性需要高溫使DNA解螺旋，故為95℃；而復(fù)性是在較低溫度下，兩種引物和DNA單鏈想結(jié)合，故溫度為55℃；延伸為在DNA聚合酶的作用下，合成新的DNA鏈，溫度為72℃。A正確。

故選A。

【點(diǎn)睛】7、B【分析】【分析】

DNA粗提取和鑒定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液；但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精；DNA對酶；高溫和洗滌劑的耐受性；（2）DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色。

【詳解】

由于DNA不易溶于酒精；而濾液中某些雜質(zhì)易溶于酒精，因此過濾的方法得到細(xì)胞中的氯化鈉溶液后，還要用酒精處理，可以得到較純化的DNA。B正確。

故選B。

【點(diǎn)睛】8、D【分析】【分析】

題圖分析；表示植物體細(xì)胞雜交過程，過程①表示酶解法去除細(xì)胞壁獲得細(xì)胞原生質(zhì)體的過程，過程②表示原生質(zhì)體融合的過程，過程③表示再生出新的細(xì)胞壁的過程。

【詳解】

A；由分析可知；過程①是利用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁獲得細(xì)胞原生質(zhì)體的過程，因?yàn)橹参锛?xì)胞壁的成分主要是纖維素和果膠，A正確；

B、過程②是原生質(zhì)體融合的過程，可采用離心、振動、電刺激、聚乙二醇為誘導(dǎo)劑等方法，原生質(zhì)體a和b的融合過程依賴細(xì)胞膜的流動性；B正確；

C；獼猴桃新品種的培育利用了植物體細(xì)胞雜交技術(shù)和植物組織培養(yǎng)技術(shù)；該過程中運(yùn)用了植物細(xì)胞全能性的原理，C正確；

D；由題干信息可知；毛花獼猴桃為二倍體，軟棗獼猴桃為四倍體，二者為不同的物種，不能通過雜交育種完成新品種的培育，圖中運(yùn)用的技術(shù)是植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，D錯誤。

故選D。

【點(diǎn)睛】9、D【分析】卵子的發(fā)生：

（1）場所：卵子的發(fā)生是在卵巢內(nèi)完成的；

（2）時(shí)間：卵原細(xì)胞通過有絲分裂不斷增加其數(shù)量；并演變?yōu)槌跫壜涯讣?xì)胞，被卵泡細(xì)胞包圍，形成卵泡，是在胎兒時(shí)期完成的（卵泡=初級卵母細(xì)胞+卵泡細(xì)胞）。MⅠ是在雌性動物排卵前后完成的，結(jié)果是產(chǎn)生次級卵母細(xì)胞和第一極體；次級卵母細(xì)胞再分裂產(chǎn)生一個成熟的卵子和第二極體（MⅡ在輸卵管中完成的，這一點(diǎn)請?zhí)貏e注意）。

【詳解】

在卵細(xì)胞的形成過程中；初級卵母細(xì)胞的減數(shù)第一次分裂是在雌性動物排卵前后完成的；在精卵結(jié)合時(shí)完成減數(shù)第二次分裂，該過程在輸卵管中完成。

故選D。二、多選題(共5題，共10分)10、B:C:D【分析】【分析】

PCR技術(shù)：1；概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。2、原理：DNA復(fù)制。3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。4、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。5、過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開。

【詳解】

A；DNA連接酶催化DNA片段連接；Taq酶催化脫氧核苷酸連接，故PCR擴(kuò)增不需要DNA連接酶，A錯誤；

B；PCR技術(shù)的原理是堿基互補(bǔ)配對和DNA半保留復(fù)制；其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物，因此需設(shè)計(jì)一對與MT-like基因兩端序列互補(bǔ)的引物，B正確；

C；為避免引物自連；設(shè)計(jì)引物時(shí)要避免引物之間形成互補(bǔ)堿基對，C正確；

D；因G-C堿基對之間的氫鍵多于A-T堿基對之間的氫鍵；GC堿基對含量高的雙鏈的穩(wěn)定性更高，故GC堿基對含量高的引物需要更高的退火溫度，D正確。

故選BCD。

【點(diǎn)睛】11、B:D【分析】【分析】

1；病毒同所有生物一樣；具有繁殖、遺傳、變異、進(jìn)化的特點(diǎn)，病毒是一種體積非常微小，結(jié)構(gòu)極其簡單的生物，僅由蛋白質(zhì)外殼和內(nèi)部的遺傳物質(zhì)組成，沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)。不能獨(dú)立生活，只能寄生在活細(xì)胞內(nèi)，并在寄主細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行繁殖。一旦離開了活細(xì)胞，病毒就無法生存，就會變成結(jié)晶體。

2；真菌較細(xì)菌作為受體細(xì)胞的優(yōu)勢是真菌為真核微生物；含有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體可對蛋白進(jìn)行加工和修飾。

【詳解】

A；通過題干信息可知；抗菌肽具有廣譜抗菌活性，抗菌肽不參與特異性免疫過程，A錯誤；

B；根據(jù)題干信息；抗菌肽“在細(xì)菌細(xì)胞膜上形成跨膜的離子通道，造成細(xì)胞內(nèi)容物泄漏，最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡”，即改變了細(xì)胞膜的通透性，使細(xì)胞不能保持正常滲透壓而死亡，B正確；

C；抗菌肽“是廣泛存在于昆蟲以及兩棲類動物、哺乳動物體內(nèi)的抗菌活性物質(zhì)”；即來源于真核細(xì)胞，如利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)提高抗菌肽的產(chǎn)量，但最好選擇真菌作為受體菌，因?yàn)檎婢钦婧思?xì)胞，繁殖速度快，遺傳物質(zhì)少，C錯誤；

D；根據(jù)題干信息；“某些抗菌肽對癌細(xì)胞甚至病毒等均具有強(qiáng)有力的殺傷作用”，則對抗菌肽的研究可為治療癌癥、新型冠狀病毒肺炎等提供新思路，D正確。

故選BD。

【點(diǎn)睛】12、A:B:D【分析】【分析】

DNA粗提取和鑒定的實(shí)驗(yàn)原理：1；DNA的溶解性（1）DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol/L溶解度最低）；利用這一特點(diǎn)，選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使DNA充分溶解，而使雜質(zhì)沉淀，或者相反，以達(dá)到分離目的。（2）DNA不溶于酒精溶液，但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精．利用這一原理，可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步的分離。2、DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性：蛋白酶能水解蛋白質(zhì)，但是對DNA沒有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受60-80℃的高溫，而DNA在80℃以上才會變性．洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜，但對DNA沒有影響。3、DNA的鑒定：在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。

【詳解】

A；檸檬酸鈉可以防止血液凝固；因此獲取雞血時(shí)，容器中應(yīng)先加入檸檬酸鈉以防止血液凝固，加入適量的NaCl溶液目的是維持血細(xì)胞的形態(tài)，A錯誤；

B；DNA對高溫的耐受性比蛋白質(zhì)強(qiáng)；DNA不溶于冷酒精，而其他雜質(zhì)可溶于酒精，則用體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精能提純DNA，B錯誤；

C；木瓜蛋白酶能分解蛋白質(zhì)；但不能分解DNA，因此可用木瓜蛋白酶純化過濾后研磨液中的DNA，C正確；

D；當(dāng)氯化鈉的物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L時(shí)；DNA的溶解度最低，DNA析出量最大，因此向溶解有DNA的2mol/L的NaCl溶液中緩緩加蒸餾水，直至析出物不再增加為止，D錯誤。

故選ABD。13、A:B:D【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)中植物激素使用：物組織培養(yǎng)中關(guān)鍵性激素是生長素和細(xì)胞分裂素；同時(shí)使用生長素和細(xì)胞分裂素時(shí)；兩者用量的比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向；先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長素，細(xì)胞既分裂又分化。

【詳解】

A；Ⅰ階段為脫分化；II階段和Ⅲ階段為再分化，Ⅰ、II、Ⅲ階段中會發(fā)生基因的選擇性表達(dá)，A錯誤；

B；實(shí)驗(yàn)至少配制了3種不同的培養(yǎng)基；即形成愈傷組織的培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基，B錯誤；

C、由于參照品種B的激素配比（a2＞2.0），以0.5μmol/L為梯度，設(shè)計(jì)5個濃度水平的實(shí)驗(yàn)，則細(xì)胞分裂素濃度依次為a2-1.0μmol/L、a2-0.5μmol/L、a2μmol/L、a2+0.5μmol/L、a2+1.0μmol/L，可見細(xì)胞分裂素的最高濃度M應(yīng)設(shè)為a2+1.0μmol/L；C錯誤；

D；生長素和細(xì)胞分裂素的配比是啟動細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵因素；D正確。

故選ABD。14、A:C:D【分析】【分析】

疫苗研制已經(jīng)發(fā)展了三代：

第一代疫苗指的是滅活疫苗和減毒活疫苗；通過體外培養(yǎng)病毒，然后用滅活的病毒刺激人體產(chǎn)生抗體，它是使用最為廣泛的傳統(tǒng)疫苗；

第二代疫苗又稱為亞單位疫苗；是通過基因工程原理獲得的具有免疫活性的病原特異性結(jié)構(gòu)蛋白，刺激人體產(chǎn)生抗體；

第三代疫苗是核酸疫苗；又稱基因疫苗，包括DNA疫苗和mRNA疫苗，其中DNA疫苗是將編碼某一抗原蛋白的基因作為疫苗，注射到人體中，通過正常的人體生理活動產(chǎn)生抗原蛋白，誘導(dǎo)機(jī)體持續(xù)作出免疫應(yīng)答產(chǎn)生抗體。

【詳解】

A；該疫苗是基因重組疫苗；需要將腺病毒載體和新冠病毒的基因進(jìn)行連接，所以該疫苗的制備需要用到限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶，A正確；

B；受試者接受重組新冠病毒疫苗的接種后；體內(nèi)能產(chǎn)生分泌特定抗體的漿細(xì)胞，B錯誤；

C；主要通過檢測受試者體內(nèi)新冠病毒抗體的含量來評價(jià)試驗(yàn)的有效性；C正確；

D；新冠肺炎康復(fù)患者體內(nèi)產(chǎn)生了新冠病毒抗體和和相應(yīng)的記憶細(xì)胞；可以不注射該疫苗，D正確。

故選ACD。三、填空題(共5題，共10分)15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】液體發(fā)酵固體發(fā)酵葡萄糖定量16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】脲酶氨堿性增強(qiáng)升高pH的變化酚紅指示劑紅17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】質(zhì)粒自我復(fù)制雙鏈環(huán)狀DNA分子18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】聚乙二醇、滅活的病毒、電刺激19、略

【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)的條件：①細(xì)胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度；適時(shí)的光照、pH和無菌環(huán)境等）；②一定的營養(yǎng)（無機(jī)、有機(jī)成分）和植物激素（生長素和細(xì)胞分裂素）。決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類和比例；特別是生長素和細(xì)胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過程中非常重要，被稱為“激素杠桿”。

【詳解】

（1）在植物中；一些分化的細(xì)胞，經(jīng)過激素的誘導(dǎo)，可以脫分化失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞。

（2）胡蘿卜的組織培養(yǎng)中；將接種后的胡蘿卜組織塊，放在恒溫黑暗條件下培養(yǎng)。一段時(shí)間后，將生長良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。

（3）在植物組織培養(yǎng)過程中；由于培養(yǎng)細(xì)胞一直處于不斷的分生狀態(tài)，因此容易受到培養(yǎng)條件和外界壓力的影響而產(chǎn)生突變。為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將種子播種在含一定濃度的鹽的培養(yǎng)基上，獲得所需個體。

【點(diǎn)睛】

本題考查植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識，要求考生識記植物組織培養(yǎng)的過程、原理及條件，掌握植物組織培養(yǎng)技術(shù)的相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確分析，屬于考綱識記和理解層次的考查。【解析】①.激素②.特有的結(jié)構(gòu)和功能③.黑暗④.分化⑤.培養(yǎng)條件和外界壓力⑥.一定濃度的鹽四、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共21分)20、略

【分析】【分析】

1；果膠酶能夠分解果膠；瓦解植物的細(xì)胞壁及胞間層，使榨取果汁變得容易，而果膠分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得渾濁的果汁變得澄清。果膠酶并不特指某一種酶，而是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和果膠酯酶。

2；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。

3；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

（1）為了提高出汁率和澄清度；需要用果膠酶和纖維素酶處理，果膠酶可將果膠分解成半乳糖醛酸（和半乳糖醛酸甲酯）；考慮到成本和技術(shù)難度問題，通常采用壓榨法提取精油；

（2）固定化酵母菌的流程是：酵母細(xì)胞活化→配制CaCl2溶液→配制海藻酸鈉溶液→海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞混合→固定化酵母細(xì)胞，故①為配制CaCl2溶液；海藻酸鈉溶化時(shí)；最好采用小火間斷加熱的方法，避免海藻酸鈉焦糊；

（3上述過程將酵母菌包埋在海藻酸鈉制成的凝膠中；其固定酵母細(xì)胞的方法稱為包埋法；酶分子較小，容易從包埋材料中漏出，所以制備固定化淀粉酶則不用此法進(jìn)行固定；

（4）結(jié)合分析可知；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿?，加入蜜柚汁后，發(fā)酵裝置中糖源充足，醋酸菌直接將葡萄汁中的果糖分解成醋酸，故對乙醇的利用率迅速下降。

【點(diǎn)睛】

本題以利用蜜柚開發(fā)產(chǎn)品為情景，考查固定化酶和固定化細(xì)胞技術(shù)及果醋的制作，學(xué)生的理解能力和綜合分析能力是解答本題的關(guān)鍵。【解析】半乳糖醛酸壓榨CaCl2小火間斷包埋酶分子較小，容易從包埋材料中漏出當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿幔划?dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將蜜柚汁中的果糖分解成醋酸21、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實(shí)際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。

【詳解】

（1）分析題意可知；研究人員取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng)，稀釋后可通過稀釋涂布平板法接種到培養(yǎng)基表面以獲得單菌落。

（2）PCR技術(shù)是一項(xiàng)通過體外控制溫度擴(kuò)增DNA的技術(shù)，該技術(shù)中由于溫度較高，起關(guān)鍵作用的酶是耐高溫DNA聚合酶；PCR擴(kuò)增的前提是要有一段目的基因的核苷酸片段，分析題意，該技術(shù)能在放線菌總的DNA中專一性擴(kuò)增出16SrRNA基因的原因是：引物是根據(jù)16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列設(shè)計(jì)合成的；PCR產(chǎn)物一般可通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定：凝膠中的DNA分子通過染色；可以在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來。

（3）分析題意，科學(xué)家將Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細(xì)胞中，該過程中逆轉(zhuǎn)錄病毒是載體，能將外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纖維細(xì)胞；分析題意，實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖莍PS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用，故實(shí)驗(yàn)的自變量是外源基因的有無，因變量是IPS細(xì)胞的產(chǎn)生情況，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)應(yīng)遵循對照與單一變量原則，故可設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)如下：將轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞和沒有轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中，在相同且適宜的條件下，如果只有轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞轉(zhuǎn)化成了iPS細(xì)胞，則可以證明iPS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用。【解析】(1)稀釋涂布平板法##涂布平板法

(2)耐高溫DNA聚合酶引物能與16SrRNA基因特異性結(jié)合（引物是根據(jù)16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列設(shè)計(jì)合成的）瓊脂糖凝膠電泳。

(3)逆轉(zhuǎn)錄病毒是載體，能將外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纖維細(xì)胞。將轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞和沒有轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中，在相同且適宜的條件下，如果只有轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞轉(zhuǎn)化成了iPS細(xì)胞，則可以證明iPS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用22、略

【分析】【分析】

基因突變是指DNA分子中發(fā)生堿基對的替換；增添和缺失；而引起的基因結(jié)構(gòu)的改變。翻譯是指在核糖體上，以mRNA為模板、以氨基酸為原料合成蛋白質(zhì)的過程，該過程還需要tRNA來運(yùn)轉(zhuǎn)氨基酸。

密碼子由位于mRNA上決定一個氨基酸的三個相鄰的堿基組成。終止密碼子的作用是終止翻譯過程。

基因工程中檢測目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)可以用抗原-抗體雜交技術(shù)。

【詳解】

（1）由題干信息可知；黏多糖貯積癥患者細(xì)胞中IDUA基因突變后，轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度不變，說明其沒有發(fā)生堿基對的增添和缺失，因?yàn)檫@兩者改變會導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度改變，因此推測其基因突變是由于堿基對替換。由于終止密碼子提前出現(xiàn)，導(dǎo)致翻譯提前終止，肽鏈變短，IDUA酶分子量變小，空間結(jié)構(gòu)改變而失活。

（2）由題干可知；抑制性tRNA（sup-tRNA）可以最終誘導(dǎo)核糖體通讀mRNA上的遺傳信息合成具有功能的全長蛋白，并且抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結(jié)構(gòu)；功能相同，據(jù)此推測該抑制性tRNA可以攜帶氨基酸至核糖體并與終止密碼子堿基配對使翻譯過程繼續(xù)。

（3）本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖潜容^攜帶不同氨基酸的sup-tRNA的通讀效果；需要保證實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞含有突變IDUA基因，即其不能合成具有正常功能的IDUA酶（防止正常IDUA酶對實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生干擾），同時(shí)保證在不同的實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞中可以轉(zhuǎn)錄出攜帶不同中氨基酸的sup-tRNA，因此實(shí)驗(yàn)組中受體細(xì)胞中應(yīng)該含有導(dǎo)入攜帶不同氨基酸的sup-tRNA基因和突變IDUA基因。若要判斷各個實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞中攜帶不同氨基酸的sup-tRNA是否成功誘導(dǎo)了具有功能的IDUA酶，可以采用該酶的特異性抗體對其進(jìn)行檢測，即進(jìn)行抗原-抗體雜交。分析題圖可知，與對照組（含正常IDUA基因的組）相比，含攜帶酪氨酸的sup-tRNA的受體細(xì)胞中表達(dá)的全長IDUA蛋白量比其他實(shí)驗(yàn)組都多，說明其能有效恢復(fù)細(xì)胞中全長IDUA蛋白的合成，且效果最好。

（4）由以上實(shí)驗(yàn)可知，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能有效誘導(dǎo)核糖體對突變IDUA基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA進(jìn)行通讀，進(jìn)而產(chǎn)生具有正常功能的IDUA酶，因此利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA突變基因純合小鼠進(jìn)行治療，與不進(jìn)行治療的IDUA突變基因純合小鼠相比，治療組小鼠的IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；同時(shí)，利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA基因敲除小鼠進(jìn)行治療，與不進(jìn)行治療的IDUA基因敲除小鼠相比，由于二者都不含有IDUA基因，則其細(xì)胞內(nèi)都沒有相應(yīng)mRNA，因此攜帶酪氨酸的sup-tRNA無法發(fā)揮作用，最終導(dǎo)致治療組與不治療組的IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無明顯差異?！窘馕觥?1)替換減少。

(2)識別終止密碼子并攜帶氨基酸至核糖體使翻譯過程繼續(xù)。

(3)攜帶不同氨基酸的suptRNA基因和變IDUA抗原一抗體雜交恢復(fù)細(xì)胞中全長IDUA蛋白的合成；且效果最好。

(4)IDUA突變基因純合小鼠IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；IDUA基因敲除小鼠IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無明顯差異五、綜合題(共4題，共12分)23、略

【分析】【分析】

胡蘿卜素的提?。海?）胡蘿卜素的性質(zhì)：胡蘿卜素是橘黃色結(jié)晶；化學(xué)性質(zhì)比較穩(wěn)定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有機(jī)溶劑。（2）胡蘿卜素的提取來源：提取天然胡蘿卜素的方法主要有：一是從植物中提??；二是從大面積養(yǎng)殖的巖藻中荻得；三是利用微生物的發(fā)酵生產(chǎn)。（3）萃取劑：最適宜作胡蘿卜素萃取劑的是石油醚。（4）實(shí)驗(yàn)流程：胡蘿卜→粉碎→干燥→萃?。ㄊ兔眩^濾→濃縮→胡蘿卜素→鑒定（紙層析法）?！拘?】

在培養(yǎng)藍(lán)細(xì)菌的過程中；由于藍(lán)細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)含有葉綠素和藻藍(lán)素，能進(jìn)行光合作用制造有機(jī)物，故實(shí)驗(yàn)所用的培養(yǎng)基中可不需要添加碳源（葡萄糖）?！拘?】

稀釋涂布平板法可以對活菌進(jìn)行計(jì)數(shù)；故若需對藍(lán)細(xì)菌進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)，則固體平板培養(yǎng)過程應(yīng)采用的接種方法是稀釋涂布平板法（活菌計(jì)數(shù)法）。

若培養(yǎng)液的稀釋倍數(shù)不夠；培養(yǎng)液中藍(lán)細(xì)菌濃度過高，會導(dǎo)致固體平板培養(yǎng)基上菌落數(shù)目過多而連成一片（有由兩個或多個細(xì)胞連在一起的菌落，菌落數(shù)超過300或菌落重疊）?！拘?】

由于胡蘿卜素不溶于水；微溶于乙醇，易溶于石油醚等有機(jī)溶劑，從干燥的菌體中提取胡蘿卜素常采用萃取法，而由于石油醚為水不溶性有機(jī)溶劑；具有較高的沸點(diǎn)，在加熱萃取時(shí)不易揮發(fā)，故萃取劑一般選用石油醚?！拘?】

對萃取液進(jìn)行濃縮之前；還必須對萃取液進(jìn)行過濾操作以除去萃取液中的不溶物。

【點(diǎn)睛】

本題主要考查胡蘿卜素的提取，要求考生識記胡蘿卜素的特點(diǎn)和理化性質(zhì)，首先根據(jù)胡蘿卜素易溶于有機(jī)溶劑的特點(diǎn)，選擇有機(jī)溶劑萃取的方法；其次選擇萃取劑時(shí)，還需要考慮多種因素，要求考生理解聯(lián)系實(shí)際，進(jìn)行綜合考慮?！窘馕觥俊拘☆}1】碳源（葡萄糖）

【小題2】①.稀釋涂布平板法（活菌計(jì)數(shù)法）菌落數(shù)目過多而連成一片（有由兩個或多個細(xì)胞連在一起的菌落②.菌落數(shù)超過300或菌落重疊。

【小題3】石油醚。

【小題4】除去萃取液中的不溶物24、略

【分析】【分析】

分析題圖：將黃色短桿菌先在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)；然后進(jìn)行誘變處理，再用稀釋涂布平板法接種到培養(yǎng)皿A中，待長出菌落后，運(yùn)用“影印法”將菌種分別接種到培養(yǎng)皿B和培養(yǎng)皿C中，根據(jù)L—亮氨酸缺陷型菌株不能在培養(yǎng)皿C（缺乏L—亮氨酸）中生長，而能在培養(yǎng)皿B（含L—亮氨酸）中生長，據(jù)此可以篩選出L—亮氨酸缺陷型突變菌株。

【詳解】

（1）對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌常用高壓蒸汽滅菌法。

（2）將試管中的菌液進(jìn)行振蕩培養(yǎng)；一方面可以提高溶解氧，另一方面，讓菌體與營養(yǎng)物質(zhì)充分接觸，有利于黃色短桿菌的增殖。

（3）過程②接種時(shí)；先將滅菌后的金絲絨與培養(yǎng)皿A中的菌落接觸一次，然后像蓋印章一樣將菌種連續(xù)接種到培養(yǎng)皿B和C的培養(yǎng)基表面，這種接種方法叫影印法，由于其不改變原有菌株在培養(yǎng)基中的位置，因而將來可比較B；C培養(yǎng)皿中菌落的差異。

（4）由于固體培養(yǎng)基便于形成菌落；觀察菌落特征和分離目的菌株，所以培養(yǎng)皿A；B、C中的培養(yǎng)基都要使用固體培養(yǎng)基。

（5）在培養(yǎng)皿C（不含L—亮氨酸）中；L—亮氨酸缺陷型突變菌株不能生長，而在培養(yǎng)皿B（含L—亮氨酸）中能夠生長，因此研究人員應(yīng)該從培養(yǎng)皿B中選取目的菌落。在培養(yǎng)皿B中有菌落，而在培養(yǎng)皿C中的對應(yīng)位置沒有菌落，則對應(yīng)的B培養(yǎng)皿中的菌落為目的菌株。

【點(diǎn)睛】

本題考查微生物的培養(yǎng)、分離與計(jì)數(shù)，識記滅菌方法、不同培養(yǎng)基的作用、從題圖中提取有效信息等是解答本題的關(guān)鍵?！窘馕觥扛邏赫羝麥缇ㄌ岣呷芙庋?、同時(shí)讓菌體與營養(yǎng)物質(zhì)充分接觸B、C培養(yǎng)皿中菌落的差異便于形成菌落，觀察菌落特征和分離目的菌株