相關(guān)藥物分析與檢驗(yàn)技術(shù)簡介(藥物分析課件)

相關(guān)藥物分析與檢驗(yàn)技術(shù)簡介中藥制劑檢測技術(shù)概述概述中藥制劑樣品的前處理

一、中藥制劑分析的特點(diǎn)（一）有效成分的難確定性（二）化學(xué)成分的復(fù)雜性（三）中藥組方的規(guī)律性（四）各成分含量的差異性（五）劑型的多樣性（六）分析方法的先進(jìn)性二、影響中藥制劑質(zhì)量的因素（一）原料藥材的影響原料藥材的品種、產(chǎn)地、采收時間、藥用部位和加工方法的不同，對有效成分的含量有較大的影響

（二）炮制方法的影響中藥飲片即藥材的加工品或炮制品。原料藥材經(jīng)加工炮制后，其中的化學(xué)成分、性味、藥理作用和功能主治等都會發(fā)生一定的變化二、影響中藥制劑質(zhì)量的因素（三）生產(chǎn)工藝的影響制劑工藝是否合理是影響中藥制劑質(zhì)量的重要因素（四）中藥制劑的包裝、貯藏、保管的影響中藥制劑的包裝應(yīng)能保證藥品在生產(chǎn)、運(yùn)輸、貯藏及使用過程中的質(zhì)量，并便于醫(yī)療使用三、中藥指紋圖譜（一）中藥指紋圖譜的定義、特點(diǎn)和分類1.定義中藥指紋圖譜是指某些中藥材或中藥制劑經(jīng)適當(dāng)處理后，采用一定的分析手段，得到的能夠標(biāo)示其化學(xué)特征的色譜圖或者光譜圖。2.特點(diǎn)整體性、模糊性三、中藥指紋圖譜（一）中藥指紋圖譜的定義、特點(diǎn)和分類3.分類中藥指紋圖譜技術(shù)已涉及多種方法，包括薄層掃描（TLCS）、氣相色譜法（GC）、高效液相色譜法（HPLC）和高效毛細(xì)管電泳法（HPCE）等色譜法以及紫外光譜法（UV）、紅外光譜法（IR）、核磁共振法（NMR）、質(zhì)譜法（MS）和X-射線衍射法等光譜法三、中藥指紋圖譜（二）中藥指紋圖譜建立的意義中藥指紋圖譜的研究和建立，對于提高中藥的質(zhì)量，促進(jìn)中藥的現(xiàn)代化具有重要意義。（三）中藥指紋圖譜研究概況相關(guān)藥物分析與檢驗(yàn)技術(shù)簡介中藥制劑樣品的前處理概述中藥制劑樣品的前處理一、中藥制劑樣品前處理的意義中藥制劑樣品的前處理是否科學(xué)合理，直接影響到中藥制劑成分的定量提取、被測成分的富集、雜質(zhì)的除去等，直接影響到中藥制劑分析的專屬性二、中藥制劑樣品前處理的方法中藥制劑樣品的前處理方法大致遵循以下步驟樣品的粉碎（或分散）→提取→富集→供試品溶液（一）樣品的粉碎或分散（二）樣品的提取1.浸漬法2.回流法3.水蒸氣蒸餾法4.微量升華法5.超聲波提取法二、中藥制劑樣品前處理的方法（三）常用的精制和富集方法中藥制劑樣品提取液一般來說，體積較大、含量低、雜質(zhì)多、干擾大。為提高分析效率，減小干擾，使分析結(jié)果更具有可靠性，常需對提取液進(jìn)一步精制和富集。主要方法有液-液萃取法、蒸餾法和色譜法等藥物分析/相關(guān)藥物分析與檢驗(yàn)技術(shù)簡介體內(nèi)藥物分析簡介體內(nèi)藥物分析簡介第一節(jié)概述 第二節(jié)體內(nèi)樣品的種類、采集與儲存 第三節(jié)體內(nèi)樣品的預(yù)處理 學(xué)習(xí)目標(biāo)知識要求1.熟悉體內(nèi)樣品的種類、采集、儲存及制備方法；體內(nèi)樣品的預(yù)處理方法。2.了解體內(nèi)藥物分析的性質(zhì)、任務(wù)、特點(diǎn)及發(fā)展趨勢。技能要求1.能根據(jù)藥物的性質(zhì)及體內(nèi)樣品的類型選擇預(yù)處理方法。2.會體內(nèi)藥物分析樣品的采集與儲存方法。案例導(dǎo)入案例：小王因上呼吸道感染，醫(yī)生給開了口服抗生素，一天后小王向醫(yī)生反映感染癥狀沒有消退，不是應(yīng)該藥到病除的嗎？醫(yī)生解釋藥到病除，這種說法并不完整，如果是靜脈滴注抗生素效果會更快。討論：1.藥物進(jìn)入人體后經(jīng)歷了什么過程，從而導(dǎo)致不能藥到病除呢？2.為什么不同的給藥途徑會導(dǎo)致藥物作用的發(fā)揮不同？第一節(jié)概述一、體內(nèi)藥物分析的性質(zhì)和任務(wù)（一）體內(nèi)藥物分析的性質(zhì)

體內(nèi)藥物分析是指通過體內(nèi)藥物濃度的分析，了解藥物在體內(nèi)的數(shù)量和質(zhì)量的變化，獲得藥代動力學(xué)參數(shù)，為藥品的生產(chǎn)、臨床應(yīng)用作出評價。它直接關(guān)系到藥物的體內(nèi)作用機(jī)制探討與質(zhì)量評價和藥物臨床使用的安全、有效與合理。體內(nèi)藥物分析在藥物使用的安全、有效、合理用藥以及開發(fā)新藥等方面有著重要作用。一、體內(nèi)藥物分析的性質(zhì)和任務(wù)（二）體內(nèi)藥物分析的任務(wù)1.進(jìn)行分析方法學(xué)研究2.開展各種生物樣品的常規(guī)測定3.新藥開發(fā)中的新藥體內(nèi)研究4.藥物代謝產(chǎn)物的研究與測定5.內(nèi)源性藥物的測定和研究6.濫用藥物的檢測二、體內(nèi)藥物分析的特點(diǎn)與發(fā)展趨勢（一）體內(nèi)藥物分析的特點(diǎn)1、體內(nèi)樣品需經(jīng)過分離與濃集或者化學(xué)衍生法處理后才能進(jìn)行分析；2、對分析方法的專屬性和靈敏度要求較高；3、工作量大，測定數(shù)據(jù)的處理和闡述有時不太容易，常需要相關(guān)學(xué)科的參與；4、實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具有現(xiàn)代化儀器設(shè)備，應(yīng)有多種檢測手段。（二）體內(nèi)藥物分析的發(fā)展趨勢二、體內(nèi)藥物分析的特點(diǎn)與發(fā)展趨勢

在體內(nèi)藥物分析中，色譜技術(shù)一直是研究體內(nèi)藥物及其代謝物最強(qiáng)有力的手段。目前，隨著藥物分析技術(shù)與其他學(xué)科新技術(shù)相結(jié)合，色譜技術(shù)在進(jìn)樣方式、分離模式、檢測技術(shù)及適用對象等方面迅速發(fā)展。近年來，新方法、新技術(shù)的聯(lián)用提高了檢測的靈敏度和選擇性，分析自動化程度提高，分析時間縮短。第二節(jié)體內(nèi)樣品的種類、采集與儲存一、體內(nèi)樣品的種類

體內(nèi)樣品包括各種體液和組織。其中最為常用的樣本是血液、尿液和唾液。血液血漿血清尿液唾液頭發(fā)二、常用體內(nèi)樣品的采集及制備（一）血樣血樣包括血漿、血清和全血，是體內(nèi)藥物分析中最常用的樣品。1.血樣的采集靜脈采血，1-5ml2.血漿的制備全血+抗凝劑血漿常用抗凝劑：肝素3.血清的制備4.全血的制備2500-3000r/min，5-10min離心

體內(nèi)興奮劑檢測的樣品主要是尿液。（二）尿樣尿藥測定主要用于藥物劑量回收研究、尿清除率、生物利用度的研究、并可推斷患者是否違反醫(yī)囑用藥，同時根據(jù)藥物劑量回收研究可以預(yù)測藥物的代謝過程及測定藥物的代謝類型（代謝速率，MR）等。尿液中，水占96%～97%，其他為尿素、尿酸、肌酐、氨等非蛋白氮化合物、硫酸鹽等。淡黃色或黃褐色比重1.015～1.025pH值4.8～8.0。（三）唾液1.唾液的組成分泌量：1-1.5LpH：6.2-7.62.唾液的采集3.唾液樣品的制備三、體內(nèi)樣品的儲存與處理（一）冷藏與冷凍樣品種類儲存方式血漿/血清置于硬質(zhì)玻璃試管或聚乙烯塑料離心管中完全密塞。短期保存可置冰箱（4℃）中；長期保存時，須置冷凍柜（-20℃）中尿液應(yīng)立即測定，否則應(yīng)加入防腐劑（甲苯、二甲苯、三氯甲烷以及醋酸、濃鹽酸等）置冰箱中保存。保存時間為24~36h，可置冰箱（4℃）中，長時間保存應(yīng)冰凍（-20℃）唾液4℃以下保存三、體內(nèi)樣品的儲存與處理（二）去活性為防止酶進(jìn)一步分解體內(nèi)待測樣品，采樣后必須立即終止酶的活性。常用的方法液氮快速冷凍法微波照射勻漿及沉淀加入酶活性阻斷劑（如氟化鈉、四氫尿苷、三氯醋酸等）或者抗氧劑(如維生素C)樣品煮沸等。第三節(jié)體內(nèi)樣品的預(yù)處理一、體內(nèi)樣品預(yù)處理的目的和原則（一）體內(nèi)樣品預(yù)處理的目的1.使待測藥游離2.使樣品適合分析方法3.防止污染分析儀器（二）預(yù)處理方法選擇的一般原則1.生物樣品的種類2.藥物的理化性質(zhì)和濃度范圍3.藥物測定的目的4.樣品制備與分析技術(shù)的關(guān)系二、樣品預(yù)處理的方法1.加入沉淀劑和變性試劑：加入中性鹽、加入強(qiáng)酸、加入金屬離子2.加入可與水混溶的有機(jī)溶劑：如甲醇、乙醇、丙酮、乙腈、四氫呋喃等3.酶消化法枯草菌溶素（一）去蛋白質(zhì)法

藥物經(jīng)人體代謝后，多與內(nèi)源性物質(zhì)結(jié)合形成綴合物經(jīng)尿液排出。所以在提取之前需要將綴合物中的藥物釋放，常用酸水解、酶水解酸水解：適量的鹽酸溶液酶水解:葡萄糖醛酸苷酶或硫酸酯酶（二）綴合物水解法1.液-液萃取法:液-液萃取法在體內(nèi)藥物分析中應(yīng)用相當(dāng)廣泛，萃取一次即可除去大部分雜質(zhì)，從大量的樣品中提取藥物經(jīng)濃集后作為分析用樣品，萃取時應(yīng)注意溶劑的pH調(diào)節(jié)和提取溶劑的選擇（三）萃取分離法2.液-固萃取法：將具有吸附、分配及離子交換性質(zhì)的、表面積大的擔(dān)體作為萃取劑填入小柱，以溶劑淋洗，藥物或雜質(zhì)被保留在固定相上而達(dá)到分離。（1）親脂型:大孔吸附樹脂、親脂性鍵合硅膠（2）親水型:硅膠、硅藻土、棉纖維（3）離子交換樹脂載體十八烷基鍵合硅膠（ODS或C18）最為常用（三）