標準品和校準品的概念

標準品和校準品的概念傳統(tǒng)的臨床檢驗，要使檢驗結(jié)果可靠或有依據(jù)，往往有一個標準品(Standard)。以臨床化學(xué)檢驗的比色測定為例，常作三個檢測：空白、標準、測定。用空白液調(diào)整吸光度為零，讀出測定比色液和標準比色液的吸光度，分別為As和Au；已知標準液濃度為Cs。在一定范圍內(nèi)，某分析物濃度和吸光度呈良好比例關(guān)系。為了克服純標準液和病人樣品間的基體差異，20年前開始引用具有與病人樣品基體相似的校準品替代標準品，用于日常工作。由于以往在使用標準品時不強調(diào)它的專用性，國內(nèi)在應(yīng)用校準品時忽略了它的專用性。任何方法或儀器、試劑使用一個校準品，嚴重影響檢驗質(zhì)量。一。標準液的定值

一般而言，檢驗工作使用的標準品屬應(yīng)用標準。配制或供應(yīng)這類標準品的實驗室或廠商具有符合質(zhì)量標準的純品。稱取一定量的純品，然后將其溶解，在容量瓶內(nèi)用溶劑稀釋至容積刻度，混勻，標準液配制完成。由稱量法獲得的稱量值和容量法配制的容積，計算出該標準品濃度。檢定部門抽樣測定，結(jié)果在規(guī)定范圍內(nèi)屬合格。即使測定檢定結(jié)果在范圍的上、下限，也不能將實測值作為標準值。因為測定值的可靠性取決于檢定方法，一般的分析方法的可靠性不如分析化學(xué)公認的稱量法和容量法。所以標準品的定值由稱量和容積計算確定。檢定不合格即報廢，決不可將實測值替代修正。

二。校準品的定值1．校準值隨方法而異如前述，由于純標準液和新鮮病人標本間的基體差異，以標準液標化常用方法后，常用方法檢測病人標本的結(jié)果和參考方法結(jié)果的可比性很差。參見圖2-

。為了克服基體效應(yīng)，推薦使用校準品。校準品的大多來源為人的樣品混合物，如混合血清。本身內(nèi)含被檢分析物，制備時可添加某些分析物增加含量。校準品中被檢分析物的含量無法由稱量法和容量法確定，只能倚賴于分析方法。校準品的校準值必須取決于分析方法或檢測系列。2．新鮮病人標本是最佳校準品

由于所有校準品都是處理過的樣品，和新鮮病人標本有著基體差異。若使用公認的參考方法去標化測定校準品，測定程序是嚴密的，測定值是可靠的。但使用該測定值去校準常規(guī)的檢測系列時，校準品中被檢分析物參與反應(yīng)時的表現(xiàn)明顯不同于新鮮病人標本，不能將參考方法系列的準確度通過校準品傳遞給病人標本?？蓞⒁妶D2-

。須明確的，所有用于檢驗中的檢測方法、儀器、試劑等都是用來檢測病人新鮮標本的，不是用來檢測校準品這樣的處理過樣品。如果先用公認的參考方法檢測病人標本，再以具有參考值的病人標本去校準某檢測系列（包括方法、試劑、儀器），此時該檢測系列再檢測其他新鮮病人標本時，這些病人標本結(jié)果的溯源性可上溯至公認的參考方法。也即用新鮮病人標本是校準檢測系列的最佳校準品。用這種方式校準，能使同一個檢測系列在不同實驗室檢測新鮮病人標本時，檢驗結(jié)果在實驗室間具可比性。一些大公司正是按照這樣的認識為校準品定值。三、原則上，以具有參考值的新鮮病人標本去校準某檢測系列（包括方法、試劑、儀器）后，檢測系列再去檢測候選的校準品（處理過），得到的檢測值為初始校準值。以初始校準值反過來再校準組合的檢測系列后，該檢測系列又去檢測病人的新鮮標本。觀察病人標本的檢測值是否和參考方法的測定值具良好的可比性。實踐說明，只有不斷地調(diào)整校準值，直至用該校準值校準指定的檢測系列（加上具有校準值的校準品，即組合成檢測系統(tǒng)）后，檢測系統(tǒng)再檢測病人標本，得到的測定值和病人標本的參考方法測定值具有滿意的可比性（測定值和參考值間的偏倚≤2%）。此時，校準品的校準值可以確認。

本文來自檢驗地帶網(wǎng)1．校準值不是測定值，是糾正的調(diào)整值(CorrectedValue)

廠商的校準品定值方案極為嚴密。為了便于說明問題，以某公司的定值方案為例，定值的校準品是人血清。1）準備一批血清樣品，內(nèi)含被檢分析物含量不同，可反映所需的病人結(jié)果可報告范圍。將它們離心、過濾，分裝后深低溫保存。由參考實驗室用公認的參考方法和標準品或參考品，對這些血清檢測定值。這些血清是公司的一級“參考品”，參考方法對血清的定值猶如參考值，是確定校準品校準值的依據(jù)。2）制備一大批侯選校準品。由參考實驗室也為之定值。邀請多家具有指定的相同型號儀器的實驗室（包括公司的實驗室）參與工作。指定使用公司某型號的試劑盒（批號任意）及檢測程序。校準目標是：公司提供的儀器、試劑和方法系列（加上校準品即為檢測系統(tǒng)）對病人樣品的檢測結(jié)果和參考方法對病人樣品檢測結(jié)果具可比性。首先，用侯選校準品的定值對檢測系列校準后，檢測一級參考品的血清。由于侯選校準品和病人樣品間的基體差異，以它的參考實驗室定值對檢測系統(tǒng)校準后，檢測系統(tǒng)對病人樣品的檢測結(jié)果必然和這些血清已有的參考值有偏倚。要使組成的檢測系統(tǒng)實現(xiàn)校準目標，唯一方法是調(diào)整侯選校準品的校準值。經(jīng)反復(fù)檢測和調(diào)整、統(tǒng)計，最終實現(xiàn)校準目標時的校準值，為該校準品的定值。這個校準品是公司的一級校準品，是公司內(nèi)部具有可溯源性的第一代的校準品，不外售。3）以后公司在生產(chǎn)供應(yīng)給客戶的校準品時，生產(chǎn)質(zhì)量規(guī)格相同于一級校準品，定值方案也相同于上述步驟；但此時分發(fā)給各實驗室的一級校準品已具有了真正校準該檢測系統(tǒng)的校準值。各實驗室的檢測系統(tǒng)被一級校準品校準后，檢測一級參考品血清和新校準品。首先確認各系統(tǒng)對一級參考品血清檢測結(jié)果和原有的血清參考值具良好的可比性，說明一級校準品有效。再以新校準品的定值去校準各系統(tǒng)后，各系統(tǒng)再檢測一級參考品血清和一級校準品，觀察檢測結(jié)果。若能實現(xiàn)校準目標，校準確認，則新校準品的定值為它的校準值。在實踐中血清結(jié)果往往仍然出現(xiàn)偏倚，必須對新校準品的定值略作調(diào)整，反復(fù)檢測，直至實現(xiàn)校準目標，調(diào)整的最佳值為該批校準品的校準值。此時這批校準品可供市售。4）為使公司供應(yīng)的各批校準品間具可比性，以后對每批新校準品定值時，

本文來自檢驗地帶網(wǎng)須使用已上市的校準品、即將過期的校準品、以及即將上市的校準品當(dāng)作控制品，隨同一級校準品和一級參考品血清一起被檢測。它們的檢測結(jié)果須和原校準值的偏倚小于某規(guī)定的范圍（如不大于2%），方可認可這批校準品的校準值（這即為校準認可的要求）。5）用這樣的程序制備的校準品，專用于指定的某公司型號的儀器、試劑、方法和檢測程序組成的檢測系統(tǒng)。因此校準品只能為這樣的系統(tǒng)服務(wù)，起校準作用，不能對其他系統(tǒng)作校準。2．具多個校準值的校準品

專門供應(yīng)試劑盒的廠商，為了使他們的試劑盒用于各種類型、型號的儀器和方法，也同時為客戶提供校準品。說明書告訴客戶，使用他們的校準品，按公司指定校準您原系統(tǒng)的校準值去校準系統(tǒng)，可以使新組合的檢測系統(tǒng)（原儀器、方法、檢測程序，新試劑和新校準品）的病人標本檢測結(jié)果和原配套檢測系統(tǒng)的病人標本檢測結(jié)果具可比性。由于各公司的原檢測系統(tǒng)，從試劑、校準品、儀器都有各自特點，形成了各檢測系統(tǒng)間的差異。而這類試劑廠商專門針對客戶不同檢測系統(tǒng)，在替用他們的試劑時強調(diào)了替換后必須用他們的校準品，而且必須按校準品說明書上原系統(tǒng)名稱下指定的校準值校準新系統(tǒng)，可使新系統(tǒng)對病人樣品的檢測結(jié)果和原系統(tǒng)結(jié)果具可比性。同一個校準品適用于不同系統(tǒng)必須有不同的校準值，這樣的做法充分說明校準值的專用特性。決不能一個校準品、一個校準值、一種試劑盒用于各種不同的儀器；也不能一個校準品、一個校準值，用于不同的、已具有原試劑配套的儀器系列；無論哪一種方式均使病人樣品的檢測結(jié)果不可靠，也不具有溯源性。討論]轉(zhuǎn)貼：標準物質(zhì)與核查標準的概念與應(yīng)用

近期論壇上，網(wǎng)友<不會游泳的魚>發(fā)起的《國家標準品和質(zhì)控品的區(qū)別》的討論，很有意思。許多朋友的帖子也是說的很明白。經(jīng)過思考，我也寫了一篇討論帖子，題目是《標準物質(zhì)與核查標準的概念與應(yīng)用》。我為什么選用“標準物質(zhì)和核查標準”名稱，它與“標準品和質(zhì)控品”是不是一回事，等等，請朋友們看看我的帖子后，就會知道其中的緣由。

一、關(guān)于標準物質(zhì)—標準品

我用ELISA試劑盒為例題，介紹情況如下。

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試劑生產(chǎn)廠家，每個項目（如HBsAg、抗—HCV

EIA等）的申請報批就不說了。獲得生產(chǎn)許可證后就可以進入批生產(chǎn)。每生產(chǎn)一個批號的產(chǎn)品，就要申報、等待國家檢定所派員現(xiàn)場抽樣、同時貼上封條封存該批號的全部庫存產(chǎn)品、等待檢定結(jié)果報告。

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檢定所按時用已知血清型確定為陽性和陰性的組合血清盤（標準血清盤）進行檢定檢測，然后發(fā)出檢定結(jié)果報告。

說明：

（1）檢定所用的已知血清型確定為陽性和陰性的組合血清盤（標準血清盤），應(yīng)當(dāng)是國家級標準物質(zhì)—標準品。

（2）鑒定報告：包括陰性符合率、陽性符合率、…等等。

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生產(chǎn)商接到報告、并由檢定所派員現(xiàn)場啟封、按數(shù)量發(fā)給試劑盒合格證標簽、每盒貼上花錢買“標準品”用于統(tǒng)計控制。據(jù)我所知，檢定所的“型——特異性標準血清”的價格比同一型的“質(zhì)控血清”，要高出很多倍哦！況且，也無必要高價購買“型——特異性標準血清”去做統(tǒng)計控制。如果檢定所也生產(chǎn)供應(yīng)“質(zhì)控品”（核查標準）、即使價格適當(dāng)高于部中心、感興趣單位愿意購買使用，那是“各有選擇、無可非議”。

關(guān)于標準血清盤和質(zhì)控品，我想借此補充說一下不同品牌試劑盒“對于不同人群血樣中非特異性物質(zhì)的非特異性反應(yīng)性”造成臨床樣本檢測和統(tǒng)計控制操作的干擾。

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例如抗—HCV標準血清盤是已知HCV抗原片段的抗體陽性、和確認不含HCV抗體為陰性的組合標準血清，是經(jīng)過“多次純化、純而又純”、不含任何雜質(zhì)、決無導(dǎo)致非特異性反應(yīng)物的高度精制品，商家經(jīng)過幾個批次試劑審定與了解之后，可以從包備物含量與配比的調(diào)整、工藝上的改進，生產(chǎn)出適應(yīng)標準血清盤內(nèi)陰、陽性標準血清的“考驗”、受檢試劑很少會出現(xiàn)非特性反應(yīng)，然后會獲得符合“合格”產(chǎn)品和<合格證>、繼而允許供貨。注：由此提示—國家檢定所用的組合標準血清盤，僅僅用于鑒定商家的試劑（產(chǎn)品）是否合格！

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但是，一定要知道：在不同地區(qū)，不同民族、性別、年齡和不同健康狀況或有無夾雜其他疾病，以及與試驗項目對應(yīng)病種不同感染率的各類人群血清樣本的血清流行病學(xué)調(diào)查中，必然會出現(xiàn)不同廠家的試劑檢出陽性與陰性的檢測報告“異同差別”，甚至這種“陰、陽有別”的差別相當(dāng)明顯。WHO通報、以及全國的調(diào)查報告等參考資料足以說明這個現(xiàn)象的實際指導(dǎo)意義（參考資料，略）。這就是第2個層面——人群血清樣本對試劑質(zhì)量的“考察和比較”。這也是WHO為什么要求在HIV人群不同感染率地區(qū)的供血員篩查，要選用人群血清學(xué)調(diào)查的特異度和靈敏度（預(yù)先經(jīng)過蛋白印跡法確認）高達99.9%的試劑、而不是依據(jù)各個檢定機構(gòu)的鑒定報告“合格”標準選購試劑的理由（WHO的調(diào)查報告可在1991—95年的Bull.WHO上查悉）。

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即便是不同廠牌試劑，對同一批質(zhì)控品的“質(zhì)控”結(jié)果，也會有明顯差異。這是做質(zhì)控的朋友們都是十分熟悉的事，毋庸多言。

六、臨檢、血站如何選購和比較試劑呢？第1，少不了要買有批準文號、有合格證和檢定報告書的試劑；第2，最好用質(zhì)控血清對試劑預(yù)先作“篩查和比較”（樣本數(shù)據(jù)n=6以上即可）后，再決定選購哪個商家產(chǎn)品。我用網(wǎng)上的例題簡要說一下。

05-03-16網(wǎng)上yhch（bjyhch1110）提供了2組ELISA測定數(shù)據(jù)：這是用兩個牌號、對同一個定值質(zhì)控血清、初檢和復(fù)檢時的兩組數(shù)據(jù)，描述統(tǒng)計的幾個相關(guān)指標見附表—1和附圖—2，復(fù)制網(wǎng)上的兩幅控制圖，見附圖—3。

1附表—1中可見，甲試劑的C.V.為6.1%，但是，乙試劑高達35.8%，而且，乙試劑的從負數(shù)（-0.27）到7.33的分布范圍合理嗎？顯然是不合理的。此時要想到，用乙試劑做質(zhì)控、檢測樣本，都會帶來種種麻煩，樣本中的陰性樣本有可能被誤判為“假陽性”。

2由附表—1、結(jié)合附圖—1、2可見：甲試劑的數(shù)據(jù)是2.54—3.67；甲試的=2.53與C.O.I.=1.00間距是1.54（這個“間距”很重要）。可是，乙試劑的下限間距，竟然是（－0.27）－1.00=－1.27。這是ELISA試劑內(nèi)在質(zhì)量上很忌諱的現(xiàn)象！查閱過外商ELISA試劑質(zhì)量評價文獻的讀者都知道，實際檢測陽性血清的-3s下值、檢測陰性血清的+3s上值，兩者與C.O.I.值1.00的間距，有一定要求，間距大比小好。至少，前者不可以向下、后者不可以向上竄過C.O.I.=1.00這個“基線”。向下竄過者，容易出現(xiàn)“假陽性”；向上竄過者，容易出現(xiàn)“假陰性”。感興趣的朋友，有時間可以看看我的2篇未發(fā)表文章，1是：乙型肝炎HBsAgEIA批試劑HBV血清盤考核綜合評價；2是：，或者查看：Evaluationsofenzyme-linkedimmunosorbentassays:amethodofdeltaanalysis.J.Viol.Method.1998,22:51—59。

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/，打開<論壇交流>文件夾，點擊：ZBH-HBsA、HBeAg、抗—HCVELISA試劑檢測等文稿6篇。其中有上文中提到的幾篇過去的文稿。標準物質(zhì)的定義

標準物質(zhì)是具有準確量值的測量標準,它在化學(xué)測量、生物測量、工程測量與物理測量領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用.標準物質(zhì)具有以下特點:

(1)標準物質(zhì)的量值只與物質(zhì)的性質(zhì)有關(guān),與物質(zhì)的數(shù)量和形狀無關(guān);

(2)標準物質(zhì)種類多,僅化學(xué)成分量標準物質(zhì)就數(shù)以千計,其量限范圍跨越12個數(shù)量級;

(3)標準物質(zhì)實用性強,可在實際工作條件下應(yīng)用,既可用于校準檢定測量儀器,評價測量方法的準確度,也可用于測量過程的質(zhì)量評價以及實驗室的計量認證與測量仲裁等;

(4)標準物質(zhì)具有良好的復(fù)現(xiàn)性,可以批量制備并且在用完后再行復(fù)制.

按照"國際通用計量學(xué)基本術(shù)語"和"國際標準化組織指南30",標準物質(zhì)有如下定義:

(1)標準物質(zhì)(ReferenceM