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…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁,總=sectionpages22頁第=page11頁,總=sectionpages11頁2025年湘教版選擇性必修3生物下冊月考試卷含答案考試試卷考試范圍:全部知識點;考試時間:120分鐘學校:______姓名:______班級:______考號:______總分欄題號一二三四五總分得分評卷人得分一、選擇題(共8題,共16分)1、下圖為動物成纖維細胞的培養(yǎng)過程示意圖。下列敘述正確的是()
A.步驟①的操作不需要在無菌環(huán)境中進行B.步驟②中用鹽酸溶解細胞間物質(zhì)使細胞分離C.步驟③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶處理D.步驟④培養(yǎng)過程中不會發(fā)生細胞轉(zhuǎn)化2、關(guān)于平板劃線法和稀釋涂布平板法的敘述錯誤的是()A.只能用于固體培養(yǎng)基接種B.都可以用于微生物的計數(shù)C.接種培養(yǎng)后均可獲得單菌落D.接種用具都需進行嚴格滅菌3、用于核移植的供體細胞一般都選用()A.受精卵B.10代以內(nèi)的細胞C.傳代10~50代以內(nèi)的細胞D.處于減數(shù)分裂第二次分裂中期的次級卵母細胞4、2002年1月18日至2月11日,山東曹縣克隆?;剡B續(xù)誕生了14頭“中國克隆牛”的牛犢。用于克隆研究的供核細胞來源于兩頭優(yōu)質(zhì)成年牛的耳成纖維細胞,一頭為高產(chǎn)黑白花奶牛,另一頭為優(yōu)質(zhì)蓋普威公牛。受體卵母細胞來自魯西黃牛的卵巢。研究人員在實驗室內(nèi)共培養(yǎng)了980枚重構(gòu)卵,有261枚發(fā)育成克隆囊胚,有230枚植到112頭代孕母牛體內(nèi),其中12頭懷孕成功的代孕母牛共產(chǎn)犢l4頭,現(xiàn)存活5頭,分別是動動、金金、銀銀、多多和福福。DNA檢測證明,克隆牛犢與代孕母牛沒有遺傳關(guān)系。下列說法中,不合理的一項是()A.中國克隆牛培育過程中用到的細胞工程技術(shù)有細胞核移植、動物細胞培養(yǎng)等B.克隆牛的性別由供核細胞控制,克隆牛是二倍體生物C.多多、福福將來長大以后,一定是高產(chǎn)奶牛D.克隆技術(shù)用于動物繁殖具有控制性別、加快繁殖速度、保持優(yōu)良性狀等優(yōu)點5、日本京都大學山中伸彌領(lǐng)導的實驗室在世界著名學術(shù)雜志《細胞》上率先報道了評iPS細胞的研究。他們把Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4這四種轉(zhuǎn)錄因子引入小鼠胚胎或皮膚纖維母細胞,發(fā)現(xiàn)可誘導其發(fā)生轉(zhuǎn)化,產(chǎn)生的iPS細胞在形態(tài)、基因和蛋白表達、表觀遺傳修飾狀態(tài)、細胞倍增能力、分化能力等方面都與胚胎干細胞極為相似。從理論角度而言,下列有關(guān)iPS細胞說法不正確的是()A.iPS細胞在理論上,可以避免免疫排斥B.iPS細胞在功能上具有細胞的全能性,即可以分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細胞C.iPS細胞可以用于治療人類因細胞壞死或退化引起的疾病D.iPS細胞在體外培養(yǎng)的條件下,可以增殖而不發(fā)生分化6、關(guān)于微生物的實驗室培養(yǎng)和菌種保存的敘述,正確的是()A.平板劃線法和稀釋涂布平板法分別用的接種工具是涂布器和接種環(huán)B.若液體培養(yǎng)基需震蕩培養(yǎng),其目的是使微生物分布均勻以便涂布C.長期保存的菌種,需放在-20℃的冷凍箱中保存D.斜面培養(yǎng)基中含有大量營養(yǎng)物,可以長期保存菌種7、下列關(guān)于基因工程應(yīng)用及安全性問題的敘述中,錯誤的是()A.區(qū)別于生殖性克隆,治療性克隆不需要面臨倫理性問題B.利用豬的器官解決人類器官移植也會面臨免疫排斥反應(yīng)難題C.可以通過基因工程技術(shù)建立轉(zhuǎn)基因小鼠原發(fā)性高血壓模型D.可以通過基因工程技術(shù)利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)某些藥物8、腫瘤壞死因子(TNF)在體內(nèi)和體外均能殺死某些腫瘤細胞或抑制腫瘤細胞的增殖,科研人員欲利用乳腺生物反應(yīng)器大量生產(chǎn)TNF,用于臨床上疾病的治療。已知HindⅢ、BamHI、BglⅡ和PstI為限制性內(nèi)切核酸酶,識別的序列均不相同。下列關(guān)于基因工程中重組質(zhì)粒構(gòu)建的說法,正確的是()
A.可選用PstI,BglⅡ和HindⅢ、BglⅡ兩種組合切割質(zhì)粒和目的基因B.可用DNA連接酶或DNA聚合酶連接TNF基因和切割開的質(zhì)粒C.啟動子指的就是起始密碼子,可驅(qū)動TNF基因的轉(zhuǎn)錄過程D.四環(huán)素抗性基因?qū)儆跇擞浕?,便于鑒別受體細胞中是否含有目的基因評卷人得分二、多選題(共6題,共12分)9、利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)羧酸酯酶(CarE)制劑的流程如圖所示;下列敘述正確的是()
A.過程①需使用逆轉(zhuǎn)錄酶B.過程②需使用解旋酶和PCR獲取目的基因C.過程③使用的感受態(tài)細胞可用NaCl溶液制備D.過程④可利用DNA分子雜交鑒定目的基因是否已導入受體細胞10、下列關(guān)于基因工程中的基本工具的說法中,正確的是()A.基因工程中的工具酶有限制性內(nèi)切核酸酶和DNA連接酶B.DNA連接酶可將任意的DNA片段通過形成磷酸二酯鍵而連接起來C.質(zhì)粒上必須有標記基因才可作為載體D.限制性內(nèi)切核酸酶一般不僅僅能切割外源DNA,也能切割自身的DNA分子11、熒光定量PCR技術(shù)可定量檢測樣本中DNA含量,也可用于RNA病毒的核酸檢測。其原理是:先由病毒的RNA逆轉(zhuǎn)錄得到cDNA,然后對得到的DNA進行PCR擴增。在PCR反應(yīng)體系中加入引物的同時,加入與某條模板鏈互補的熒光探針,當Taq酶催化子鏈延伸至探針處會水解探針,使熒光監(jiān)測系統(tǒng)接受到熒光信號,即每個DNA分子擴增一次,就有一個熒光分子生成(如圖)。Ct值(循環(huán)閾值)的含義為:每個反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號到達設(shè)定閾值時所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)。下列說法錯誤的是()
A.擴增過程中引物先于探針結(jié)合到模板DNA上B.若最初該反應(yīng)體系中只有逆轉(zhuǎn)錄而來的一個DNA分子,經(jīng)n次循環(huán)后,需要消耗熒光探針2n-1個C.C值越大表示被檢測樣本中病毒數(shù)目越多D.若樣本被污染,RNA酶將病毒RNA降解,檢測結(jié)果可能為陰性12、谷氨酸棒狀桿菌發(fā)酵過程中會生成大量的谷氨酸,經(jīng)加工后可制成味精。在其發(fā)酵過程中,發(fā)酵罐中碳氮比(碳元素與氮元素的比值)為4:1時,菌體大量繁殖而產(chǎn)生的谷氨酸少;當碳氮比為3:1時,菌體繁殖受抑制,但谷氨酸的合成量大增。下列相關(guān)敘述正確的是()A.谷氨酸棒狀桿菌可以從自然界中篩選,也可以通過誘變育種或基因工程育種獲得B.分離、提純產(chǎn)物是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié),有利于獲得更多的優(yōu)質(zhì)發(fā)酵產(chǎn)品C.由題干信息可推知發(fā)酵過程中需調(diào)整發(fā)酵罐內(nèi)營養(yǎng)成分的比例D.在發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵無需嚴格控制溶解氧、溫度、pH等條件13、為了檢測藥物X、Y和Z的抗癌效果,在細胞培養(yǎng)板的每個孔中加入相同數(shù)量的肺癌細胞使其貼壁生長。實驗組分別加入等體積相同濃度的溶于二甲基亞礬(溶劑)的藥物X、Y或Z,培養(yǎng)過程及結(jié)果如圖所示。下列敘述錯誤的是()
實驗結(jié)果見下表:。組別細胞數(shù)目(個/孔)對照7.8×106藥物X6.7×104藥物Y5.3×105藥物Z8.0×106
A.對照組中只需加入等體積的二甲基亞礬溶劑即可B.細胞培養(yǎng)液中通常需要加入一定量的抗生素防止病毒污染C.計數(shù)時可用胰蛋白酶處理貼壁細胞,使肺癌細胞脫落下來D.根據(jù)實驗結(jié)果,三種藥物均具有抗癌效果,但藥物X的抗癌效果最好14、下列有關(guān)PCR的敘述,正確的有()A.PCR所需引物和體內(nèi)DNA復制所需引物不同B.引物長度和復性溫度均會影響PCR擴增的特異性C.PCR產(chǎn)物電泳時的遷移速率與DNA分子的大小有關(guān),與凝膠的濃度無關(guān)D.PCR預變性的目的是增加大分子模板DNA徹底變性的概率評卷人得分三、填空題(共7題,共14分)15、生化武器散布途徑:將病原體_____或者通過_____、_____等散布到敵方,會對軍隊和平民造成大規(guī)模殺傷后果。16、動物細胞融合的意義:克服了______,成為研究_____、_____、腫瘤和生物新品種培育的重要手段。17、在篩選纖維素分解菌的過程中,人們發(fā)明了___________,這種方法能夠通過顏色反應(yīng)直接對微生物進行篩選。剛果紅(CongoRed,簡稱__________)是一種染料,它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成____________,但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。當纖維素被纖維素酶分解后,剛果紅一纖維素的復合物就無法形成,培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的______________。這樣,我們就可以通過是否產(chǎn)生________________來篩選纖維素分解菌。18、現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴格的____________條件下,將優(yōu)良__________菌種直接接種在豆腐上,這樣可以避免__________________的污染,保證產(chǎn)品的質(zhì)量。19、95%的______________以使DNA析出,用玻璃棒沿一個方向攪拌,卷起的絲狀物的顏色是____________。獲取的絲狀物后加入到質(zhì)量濃度為______________mol/L濃度的NaCL溶液的試管中,使絲狀物重新溶解。20、蛋白質(zhì)工程是指以______作為基礎(chǔ),通過______,對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行_____,或制造一種______,以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。(基因工程在原則上只能生產(chǎn)______的蛋白質(zhì))
21、基因工程是蛋白質(zhì)工程的關(guān)鍵技術(shù);蛋白質(zhì)工程是基因工程的延伸。有人對基因工程和蛋白質(zhì)工程的關(guān)系進行了比較,并歸納為下表。
基因工程與蛋白質(zhì)工程的比較。比較項目蛋白質(zhì)工程蛋白質(zhì)工程原理中心法則中心法則區(qū)別過程獲取目的基因→構(gòu)建表達載體→導入受體細胞→目的基因的檢測與鑒定預期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測氨基酸序列→合成DNA→表達出蛋白質(zhì)實質(zhì)定向改造生物的遺傳特性,以獲得人類所需要的生物類型或生物產(chǎn)品(基因的異體表達)定向改造蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)以生產(chǎn)人類所需要的蛋白質(zhì)定向改造蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)以生產(chǎn)人類所需要的蛋白質(zhì)結(jié)果生產(chǎn)自然界中已有的蛋白質(zhì)生產(chǎn)自然界中已有的蛋白質(zhì)生產(chǎn)自然界中已有的蛋白質(zhì)聯(lián)系蛋白質(zhì)工程是第二代基因工程
上表的比較是否正確?如果有不妥之處,嘗試進行修改。_________評卷人得分四、實驗題(共3題,共24分)22、科研人員以病毒表面S蛋白作為主要的病毒抗原;利用基因工程研制疫苗用于接種預防,簡要過程如圖所示?;卮鹣铝袉栴}:
(1)新冠病毒是一種RNA病毒,一般先通過_____________________得到cDNA,再經(jīng)PCR技術(shù)獲取大量S蛋白基因,PCR的中文全稱是_____________________。
(2)PCR技術(shù)還需用到_____________________酶,該酶能夠使脫氧核苷酸從引物的_____________________端開始連接,據(jù)下圖分析,可選擇的引物是_____________________。
(3)為了驗證表達的S蛋白與病毒S蛋白有相同的免疫反應(yīng)特性;請設(shè)計簡單的檢測方案并預期檢測結(jié)果。
方案:_________________________________。
結(jié)果:_________________________________。23、科學家的發(fā)現(xiàn)給人類的生活帶來了無限的想象;他們采集了某深海海域的沉積物樣品,分離;鑒定得到其中的深海放線菌,以期獲得具有前景的抗生素替代品。據(jù)此回答下列問題:
(1)研究人員欲篩選出深海放線菌進行研究,取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng),稀釋后取菌液通過_______________法接種到高氏一號(加數(shù)滴質(zhì)量分數(shù)為10%的酚)培養(yǎng)基表面以獲得單菌落。
(2)通過PCR技術(shù)擴增分離得到的放線菌的16SrRNA基因可進行菌株的種屬鑒定。PCR技術(shù)中起關(guān)鍵作用的酶是_____________。該技術(shù)能在放線菌總的DNA中專一性擴增出16SrRNA基因的原因是______________。PCR產(chǎn)物一般可通過_________________鑒定。
(3)科學家還將Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細胞中。2~3周后,這些細胞顯示出ES細胞的形態(tài)、具有活躍的分裂能力,它們就是iPS細胞。在這個實驗過程中,逆轉(zhuǎn)錄病毒的作用是_______________如何證明iPS細胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用?請寫出實驗設(shè)計思路______________24、黏多糖貯積癥是由IDUA基因突變導致的遺傳病??蒲腥藛T對此病的治療進行相關(guān)研究。
(1)黏多糖貯積癥患者細胞中IDUA基因由于堿基對___________造成突變,轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度不變但提前出現(xiàn)終止密碼子,最終導致合成的IDUA酶分子量___________;與正常IDUA酶的空間結(jié)構(gòu)差異顯著而失去活性,積累過多的黏多糖無法及時清除,造成人體多系統(tǒng)功能障礙。
(2)抑制性tRNA(sup-tRNA)與普通tRNA的結(jié)構(gòu)、功能相同,但它的反密碼子可以與終止密碼子配對。在上述這一類突變基因的翻譯過程中,加入sup-tRNA可以發(fā)揮的作用是___________;從而誘導通讀獲得有功能的全長蛋白。
(3)不同的sup-tRNA可以攜帶不同氨基酸;為比較它們的通讀效果,科研人員進行了相關(guān)研究,實驗結(jié)果如圖。
注:“-”代表未加入。
據(jù)圖分析,實驗組將___________基因?qū)胧荏w細胞,并采用___________技術(shù)檢測導入基因的表達情況。據(jù)結(jié)果分析,攜帶酪氨酸的sup-tRNA能___________。
(4)科研人員利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA突變基因純合小鼠及IDUA基因敲除小鼠進行治療,檢測肝臟細胞IDUA酶活性和組織黏多糖的積累量,與不治療的小鼠相比較,實驗結(jié)果為_____________,表明攜帶酪氨酸的sup-tRNA可以治療黏多糖貯積癥。評卷人得分五、綜合題(共4題,共16分)25、甘草酸是中藥甘草中的主要活性成分;為了快速檢測甘草酸,科研人員利用細胞工程技術(shù)制備了抗甘草酸的單克隆抗體,其基本操作過程如圖1。圖2是動物體細胞核移植與克隆動物的基本流程圖?;卮鹣铝袉栴}:
(1).圖1中制備單克隆抗體首先需要對動物進行免疫處理,所用的抗原是______________,因為細胞甲______________,所以細胞甲需要與骨髓瘤細胞融合。細胞丁的特性是______________。
(2).圖1中的②過程常用______________作為誘導劑,該劑不能用于植物細胞的融合。③和④過程為兩次篩選過程,這兩次篩選的目的分別是______________、______________。
(3).圖2所示的細胞核移植技術(shù)中涉及三個個體:提供細胞核的個體、提供卵母細胞的個體和代孕母體,克隆動物的性狀主要與______________相似但又不完全相同,原因是__________________。26、甲是抗寨卡病毒(一種RNA病毒)單克隆抗體制備的過程圖;圖乙是克隆羊培育過程示意圖,請據(jù)圖回答下列問題:
(1)圖甲和圖乙所示的過程中,應(yīng)該都會用到的動物細胞工程技術(shù)是______。
(2)圖甲中②過程常需要借助動物細胞融合技術(shù),其過程中動物細胞融合所特有的方法是使用______誘導細胞融合。
(3)利用基因工程生產(chǎn)寨卡病毒的疫苗時,需要將重組DNA導入細菌細胞中,這一步驟常用的方法是__________________。
(4)選用單克隆抗體技術(shù)將B淋巴細胞與骨髓瘤細胞進行融合,再用______培養(yǎng)基進行篩選,在該培養(yǎng)基上,____________的細胞都會死亡;只有雜交瘤細胞才能生長。
(5)單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比最大的優(yōu)點是__________________。
(6)核移植時受體應(yīng)選用______期的卵母細胞。經(jīng)圖乙所得到的克隆羊“多利”的遺傳特性與細胞核的供體白面綿羊并不完全相同的原因是__________________。27、Ⅰ;最近哈爾濱因疫情變化管控升級;對境外入哈、國內(nèi)疫情重點地區(qū)入哈人員,一律實行“14天集中隔離醫(yī)學觀察+14天居家隔離醫(yī)學觀察+2次核酸檢測+1次血清抗體檢測”的管控措施,做到凡進必檢、不漏一人、萬無一失。
Ⅱ;同時;中國率先開啟新冠疫苗二期臨床研究!據(jù)研究新冠病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原,在康復病人的血清中有抗S蛋白的特異性抗體。下圖為某機構(gòu)研制疫苗的部分過程。請回答下列相關(guān)問題:
(1)對疫情重點地區(qū)輸入人員進行核酸檢測需要用到_____________________做探針;進行血清抗體檢測的方法是______________。
(2)選擇性擴增S基因需要的前提條件及原因是___________________________。
(3)研究疫苗的步驟①用到的酶有______________;獲得的表達載體除了S基因外,還有____________________________等組成部分。
(4)S基因在培養(yǎng)的動物細胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是______________。
(5)為了檢驗步驟③所表達的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應(yīng)特性,可用動物細胞中表達的S蛋白與_____________進行抗原—抗體雜交實驗,從而得出結(jié)論。28、某動物體內(nèi)含有研究者感興趣的目的基因,研究者欲將該基因?qū)氪竽c桿菌的質(zhì)粒中保存。該質(zhì)粒含有氨芐青霉素抗性基因(AmpR)LacZ基因及一些酶切位點;其結(jié)構(gòu)和簡單的操作步驟如下圖所示。
注:LacZ基因編碼產(chǎn)生的β-半乳糖苷酶可以分解X-gal產(chǎn)生藍色物質(zhì);使菌落呈現(xiàn)藍色;否則菌落為白色。
請根據(jù)以上信息回答下列問題。
(1)在第②步中,應(yīng)怎樣選擇限制酶?______
(2)在第③步中,為了使質(zhì)粒DNA與目的基因能連接,還需要在混合物中加入哪種物質(zhì)?______
(3)選用含有AmpR和Lacz基因的質(zhì)粒進行實驗有哪些優(yōu)勢?______
(4)含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌落將呈現(xiàn)什么顏色?______為什么?______參考答案一、選擇題(共8題,共16分)1、C【分析】【分析】
動物細胞培養(yǎng)過程:取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中(原代培養(yǎng))→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞;制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液(傳代培養(yǎng))→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
【詳解】
A;動物細胞培養(yǎng)過程需要無菌操作;故步驟①的操作需要在無菌環(huán)境中進行,A錯誤;
B;動物細胞培養(yǎng)過程需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理動物組織;分散成單個細胞,制成細胞懸液,B錯誤;
C;傳代培養(yǎng)時需要用胰蛋白酶處理貼壁生長的細胞;使之分散成單個細胞,再分瓶培養(yǎng),C正確;
D;步驟④為傳代培養(yǎng)過程;該過程中部分細胞可能發(fā)生細胞轉(zhuǎn)化,核型改變,D錯誤。
故選C。2、B【分析】【分析】
微生物接種的方法中最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法;前者是指通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作,將聚集的菌種,逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面,后者是將菌液進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面,進行培養(yǎng)。
【詳解】
A;將微生物接種到固體培養(yǎng)基中的方法通常為平板劃線法和稀釋涂布平板法;A正確;
B;稀釋涂布平板法接種可以形成均勻分布的單菌落;所以常用來進行微生物的計數(shù),平板劃線法常用來篩選分離微生物,B錯誤;
C;兩種接種方法在培養(yǎng)基中都能形成單個菌落;C正確;
D;為防止雜菌污染;接種用具都需進行嚴格滅菌,D正確。
故選B。3、B【分析】【分析】
1;動物細胞核移植的概念:將動物的一個細胞的細胞核移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中;使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎,這個新的胚胎最終發(fā)育成動物個體。用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物。
2;原理:動物細胞核的全能性。
【詳解】
A;核移植的供體細胞一般為體細胞;A錯誤;
B;傳代10代以內(nèi)的細胞能保持正常的二倍體核型;適宜作為核移植的供體細胞,B正確;
C;傳代10~50代以內(nèi)的細胞;絕大多數(shù)細胞已死亡,存活的部分細胞的核型發(fā)生變化,所以不適宜用于核移植的供體細胞,C錯誤。
D;處于減數(shù)第二次分裂中期的次級卵母細胞是核移植的受體細胞;D錯誤。
故選B。
【點睛】
本題考查動物體細胞核移植、動物細胞培養(yǎng)等知識,明確核移植的供體細胞是體細胞、受體細胞是去核卵母細胞是解決本題的關(guān)鍵。4、C【分析】【分析】
動物核移植是指將動物的一個細胞的細胞核移入一個去掉細胞核的卵母細胞中;使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎。在體外將采集到的卵母細胞培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才成熟,可以通過顯微操作技術(shù)去除卵母細胞的細胞核和第一極體,核移植時,對提供細胞核和細胞質(zhì)的奶牛不需要進行同期發(fā)情處理,使用電脈沖等方法可以激活重組細胞使其完成細胞分裂和發(fā)育。
【詳解】
A;克隆牛涉及動物細胞核移植;即將牛的一個細胞的細胞核移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中,使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎,其中去掉細胞核的卵母細胞需要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期,因此中國克隆牛培育過程中用到的細胞工程技術(shù)有細胞核移植、動物細胞培養(yǎng)等,A正確;
B;克隆牛的遺傳物質(zhì)主要來自于供核細胞(含2個染色體組);因此克隆牛的性別由供核細胞控制,克隆牛是二倍體生物,B正確;
C;雖然多多和福福都是克隆而來;基因型相同,多多、福福將來長大以后,不一定是高產(chǎn)奶牛,因為表現(xiàn)型與環(huán)境和基因型有關(guān),C錯誤;
D;克隆技術(shù)屬于無性繁殖;其遺傳物質(zhì)主要來自于供核細胞,故克隆技術(shù)用于動物繁殖具有控制性別、加快繁殖速度、保持優(yōu)良性狀等優(yōu)點,D正確。
故選C。5、B【分析】【分析】
1;哺乳動物的胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞;來源于早期胚胎或從原始性腺中分離出來。
2;具有胚胎細胞的特性;在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小,細胞核大,核仁明顯;在功能上,具有發(fā)育的全能性,可分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細胞.另外,在體外培養(yǎng)的條件下,可以增殖而不發(fā)生分化,可進行冷凍保存,也可進行遺傳改造。
3;胚胎干細胞可用于治療人類的某些頑癥;如帕金森綜合癥.還可培育出人造器官,解決目前臨床上存在的供體器官不足和器官移植后免疫排斥的問題。
【詳解】
A;將iPS細胞增殖分化出的不同細胞移植回病人體內(nèi);由于來源的相同(相似)性,理論上可以避免免疫排斥反應(yīng),A正確;
B;iPS細胞屬于誘導多能干細胞;不能分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織的細胞,B錯誤;
C;iPS細胞可分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織的細胞;因此可能用于治療人類因細胞壞死或退化而導致的某些頑癥,C正確;
D;iPS細胞與胚胎干細胞極為相似;因此其在體外培養(yǎng)條件下,可以維持增殖而不發(fā)生分化,D正確。
故選B。6、C【分析】【分析】
微生物常見的接種的方法:
①平板劃線法:將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板;接種,劃線,在恒溫箱里培養(yǎng)。在劃線的開始部分,微生物往往連在一起生長,隨著線的延伸,菌數(shù)逐漸減少,最后可能形成單個菌落。
②稀釋涂布平板法:將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后;均勻涂布在培養(yǎng)皿表面,經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。
菌種保藏的原理:是為了達到長期保持菌種的優(yōu)良特性;核心問題是必須降低菌種變異率,而菌種的變異主要發(fā)生于微生物旺盛生長;繁殖過程,因此必須創(chuàng)造一種環(huán)境,使微生物處于新陳代謝最低水平,生長繁殖不活躍狀態(tài);常用的方法有臨時保存法和甘油管藏法。
【詳解】
A;平板劃線法的接種工具是接種環(huán);稀釋涂布平板法的接種工具是涂布器,A錯誤;
B;若液體培養(yǎng)基需震蕩培養(yǎng);其目的是增加培養(yǎng)液的溶氧,為微生物呼吸作用提供充足的氧氣,B錯誤;
C;長期保存的菌種;采用甘油管藏的方法,需放在-20℃的冷凍箱中保存,C正確;
D;斜面培養(yǎng)基保存菌種的方式是臨時保存的;菌種容易發(fā)生突變,所以不能長期保存菌種,D錯誤。
故選C。
【點睛】7、A【分析】【分析】
機體只要接觸來自非自己的細胞;組織、器官等就會發(fā)生排斥反應(yīng)。
【詳解】
A;生殖性克隆和治療性克隆都涉及倫理問題;我國政府不允許進行任何生殖性克隆人實驗,也同樣重視治療性克隆所涉及的倫理問題,A錯誤;
B;只要是非自己的細胞發(fā)育而來的器官;都會產(chǎn)生排斥,B正確;
C;原發(fā)性高血壓屬于多基因遺傳病;可以通過基因工程技術(shù)建立轉(zhuǎn)基因小鼠原發(fā)性高血壓模型,C正確;
D;可以通過基因工程技術(shù)利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)某些藥物;如單克隆抗體,D正確。
故選A。8、D【分析】【分析】
基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲取:方法有從基因文庫中獲??;利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。(2)基因表達載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟;基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細胞:根據(jù)受體細胞不同,導入的方法也不一樣。(4)目的基因的檢測與鑒定。
【詳解】
A;據(jù)圖可知;限制酶PstI切割質(zhì)粒時,會將質(zhì)粒切成兩段,且會破壞標記基因,切掉啟動子,因此不能選用PstI.BglⅡ這一組合,A錯誤;
B;不能使用DNA聚合酶連接目的基因和切割開的質(zhì)粒;應(yīng)使用DNA連接酶,B錯誤;
C;起始密碼子位于mRNA上;啟動子是一段具有特殊序列結(jié)構(gòu)的DNA片段,是RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點,可驅(qū)動TNF基因的轉(zhuǎn)錄過程,C錯誤;
D;四環(huán)素抗性基因?qū)儆跇擞浕?;便于鑒別受體細胞中是否含有目的基因,D正確。
故選D。二、多選題(共6題,共12分)9、A:D【分析】【分析】
過程①是以mRNA為模板合成DNA的過程;即逆轉(zhuǎn)錄過程;過程②表示利用PCR擴增目的基因;過程③表示將重組質(zhì)粒導入大腸桿菌;過程④培養(yǎng)并篩選轉(zhuǎn)基因大腸桿菌,級工程菌。
【詳解】
A;過程①是以mRNA為模板合成DNA的過程;即逆轉(zhuǎn)錄過程,需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化,故A正確;
B;過程②表示利用PCR擴增目的基因;在PCR過程中,不需要解旋酶,是通過控制溫度來達到解旋的目的,故B錯;
C;利用氯化鈣處理大腸桿菌;使之成為感受態(tài)細胞,故C錯;
D;檢測目的基因是否成功導入受體細胞的染色體DNA中;可以采用DNA分子雜交技術(shù),故D正確。
故選AD。
【點睛】10、A:C【分析】【分析】
基因工程的工具:
(1)限制酶:能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列;并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。
(2)DNA連接酶:連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。
(3)運載體:常用的運載體:質(zhì)粒;噬菌體的衍生物、動植物病毒。
【詳解】
A;限制性內(nèi)切核酸酶和DNA連接酶是基因工程的工具酶;A正確;
B;DNA連接酶只能催化具有互補黏性末端或平末端的DNA片段之間形成磷酸二酯鍵;B錯誤;
C;質(zhì)粒上必須有標記基因才可作為載體;便于篩選含有目的基因的受體細胞,C正確;
D;限制性內(nèi)切核酸酶的作用是不切割自身DNA分子;只切割外源DNA,以保護自身DNA的安全,D錯誤。
故選AC。
【點睛】11、A:B:C【分析】【分析】
多聚酶鏈式反應(yīng)擴增DNA片段:
1;PCR原理:在解旋酶作用下;打開DNA雙鏈,每條DNA單鏈作為母鏈,以4種游離脫氧核苷酸為原料,合成子鏈,在引物作用下,DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈,即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實際上就是在體外模擬細胞內(nèi)DNA的復制過程。DNA的復制需要引物,其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。
2;PCR反應(yīng)過程是:變性→復性→延伸。
【詳解】
A;基因擴增過程中需要特定的引物;該引物的作用是定位基因的位置,與模板鏈結(jié)合并為子鏈的延伸提供起點,擴增過程中引物和探針應(yīng)同時結(jié)合到模板DNA上,A錯誤;
B、若最初該反應(yīng)體系中只有逆轉(zhuǎn)錄而來的一個DNA分子,每個DNA分子需要1個探針,擴增n次,可得到2n個DNA分子,則共需要消耗2n-1個探針;B錯誤;
C;由題可知C值越大;該反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號到達設(shè)定閾值經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)越大,即每次循環(huán)出現(xiàn)的熒光信號越少。每次循環(huán)出現(xiàn)的熒光信號越少,代表被檢測樣本中的病毒數(shù)目越少,C錯誤;
D;如果樣本內(nèi)的病毒RNA被降解;會導致無法檢測出樣本內(nèi)的正確病毒數(shù)目,D正確。
故選ABC。12、A:C【分析】【分析】
微生物發(fā)酵指的是利用微生物;在適宜的條件下,將原料經(jīng)過特定的代謝途徑轉(zhuǎn)化為人類所需要的產(chǎn)物的過程。谷氨酸棒狀桿菌為原核生物,為異養(yǎng)需氧型。
【詳解】
A;用于發(fā)酵的谷氨酸棒狀桿菌可以從自然界中篩選;也可以通過誘變育種或基因工程育種獲得,A正確;
B;發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)是發(fā)酵過程;B錯誤;
C;由題意可知“在其發(fā)酵過程中;發(fā)酵罐中碳氮比(碳元素與氮元素的比值)為4∶1時,菌體大量繁殖而產(chǎn)生的谷氨酸少;當碳氮比為3∶1時,菌體繁殖受抑制,但谷氨酸的合成量大增”,說明在發(fā)酵過程中需調(diào)整發(fā)酵罐內(nèi)營養(yǎng)成分的比例以保證先獲得大量谷氨酸棒狀桿菌,在獲得大量發(fā)酵產(chǎn)物的目的,C正確;
D;谷氨酸棒狀桿菌為需氧菌;其發(fā)酵過程需要適宜的溫度和pH,所以在發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵需嚴格控制溶解氧、溫度、pH等條件,D錯誤。
故選AC。13、B:D【分析】【分析】
分析題意可知:該實驗?zāi)康氖菣z測藥物X和Y的抗癌活性;自變量是藥物X或Y,因變量是檢測細胞數(shù)量。
【詳解】
A;加入等體積的二甲基亞礬溶作為空白對照;排除體積和溶劑等無關(guān)因素的影響,A正確;
B;抗生素具有殺菌(不是殺病毒)作用;為防止培養(yǎng)液被污染,可在培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素,B錯誤;
C;要使貼壁細胞從瓶壁上分離下來;需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理,C正確;
D;分析實驗結(jié)果;加入X的癌細胞個數(shù)是6.7×104,加入Y的癌細胞個數(shù)是5.3×105,說明藥物X的抗癌效果比Y好,加入Z的癌細胞個數(shù)是8.0×106,與空白對照相比無抗癌作用,D錯誤。
故選BD。14、A:B:D【分析】【分析】
PCR原理:在高溫作用下;打開DNA雙鏈,每條DNA單鏈作為母鏈,以4中游離脫氧核苷酸為原料,合成子鏈,在引物作用下,DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈,即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實際上就是在體外模擬細胞內(nèi)DNA的復制過程。DNA的復制需要引物,其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。
【詳解】
A;PCR所需引物是一小段DNA;體內(nèi)DNA復制所需引物是一小段RNA,A正確;
B;由于引物的序列具有特異性;所以PCR擴增的特異性一般是由引物的特異性決定的,當復性溫度高時,只有引物與模板堿基匹配程度高,才能結(jié)合到模板上,而引物與模板匹配度低的區(qū)域則不能結(jié)合,所以引物長度和復性溫度均會影響PCR擴增的特異性,B正確;
C;PCR產(chǎn)物電泳時的遷移速率與DNA分子的大小有關(guān)和凝膠的濃度有關(guān);C錯誤;
D;在循環(huán)之前;常要進行一次預變性,以便增加大分子模板DNA徹底變性的概率,D正確。
故選ABD。三、填空題(共7題,共14分)15、略
【分析】【詳解】
生物武器種類:包括致病菌、病毒、生化毒劑,以及經(jīng)過基因重組的致病菌等。把這些病原體直接或者通過食物、生活必需品等散布到敵方,可以對軍隊和平民造成大規(guī)模殺傷后果?!窘馕觥竣?直接②.食物③.生活必需品16、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】遠緣雜交的不親和性細胞遺傳細胞免疫、17、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】剛果紅染色法CR紅色復合物透明圈透明圈18、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】無菌毛霉其他菌種19、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】冷酒精白色220、略
【分析】【分析】
【詳解】
略【解析】蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系基因修飾或基因合成改造新的蛋白質(zhì)自然界已存在21、略
【分析】【詳解】
蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ),通過基因修飾或基因合成,對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造,或制造一種新的蛋白質(zhì),其結(jié)果是生產(chǎn)自然界沒有的蛋白質(zhì)。【解析】蛋白質(zhì)工程的結(jié)果是生產(chǎn)自然界沒有的蛋白質(zhì)四、實驗題(共3題,共24分)22、略
【分析】【分析】
PCR原理:在解旋酶作用下;打開DNA雙鏈,每條DNA單鏈作為母鏈,以4種游離脫氧核苷酸為原料,合成子鏈,在引物作用下,DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈,即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實際上就是在體外模擬細胞內(nèi)DNA的復制過程。DNA的復制需要引物,其主要原因是DNA聚合酶只能從3'端延伸DNA鏈。
【詳解】
(1)利用RNA得到相應(yīng)DNA的方法為逆轉(zhuǎn)錄;起作用的酶為逆轉(zhuǎn)錄酶。在體外將DNA擴增的技術(shù)是PCR,中文名稱為多聚酶鏈式反應(yīng)。
(2)PCR技術(shù)是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術(shù);該過程需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶),熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)能夠使脫氧核苷酸從引物的3'端開始連接,使子代DNA從5'向3'延伸;進行擴增時,還應(yīng)選擇一對方向相反的引物,且與模板的3'端結(jié)合,據(jù)圖可知,應(yīng)選擇Ⅱ;Ⅲ。
(3)細胞內(nèi)是否合成了由目的基因控制的蛋白質(zhì),使用抗原-抗體雜交法檢測,為了檢驗表達的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應(yīng)特性,可用S蛋白與新冠病毒肺炎康復患者血清進行抗原-抗體雜交實驗來進行檢測,本實驗是驗證性實驗,實驗結(jié)果是唯一的,因此本實驗結(jié)果是出現(xiàn)雜交帶?!窘馕觥?1)逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈式反應(yīng)。
(2)熱穩(wěn)定DNA聚合酶##Taq酶3'II;Ⅲ
(3)用表達的S蛋白與新冠病毒肺炎康復患者血清進行抗原-抗體雜交實驗出現(xiàn)雜交帶23、略
【分析】【分析】
PCR原理:在解旋酶作用下;打開DNA雙鏈,每條DNA單鏈作為母鏈,以4種游離脫氧核苷酸為原料,合成子鏈,在引物作用下,DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈,即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實際上就是在體外模擬細胞內(nèi)DNA的復制過程。DNA的復制需要引物,其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。
【詳解】
(1)分析題意可知;研究人員取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng),稀釋后可通過稀釋涂布平板法接種到培養(yǎng)基表面以獲得單菌落。
(2)PCR技術(shù)是一項通過體外控制溫度擴增DNA的技術(shù),該技術(shù)中由于溫度較高,起關(guān)鍵作用的酶是耐高溫DNA聚合酶;PCR擴增的前提是要有一段目的基因的核苷酸片段,分析題意,該技術(shù)能在放線菌總的DNA中專一性擴增出16SrRNA基因的原因是:引物是根據(jù)16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列設(shè)計合成的;PCR產(chǎn)物一般可通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定:凝膠中的DNA分子通過染色;可以在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來。
(3)分析題意,科學家將Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細胞中,該過程中逆轉(zhuǎn)錄病毒是載體,能將外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纖維細胞;分析題意,實驗?zāi)康氖莍PS細胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用,故實驗的自變量是外源基因的有無,因變量是IPS細胞的產(chǎn)生情況,實驗設(shè)計應(yīng)遵循對照與單一變量原則,故可設(shè)計實驗如下:將轉(zhuǎn)入外源基因的細胞和沒有轉(zhuǎn)入外源基因的細胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中,在相同且適宜的條件下,如果只有轉(zhuǎn)入外源基因的細胞轉(zhuǎn)化成了iPS細胞,則可以證明iPS細胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用。【解析】(1)稀釋涂布平板法##涂布平板法
(2)耐高溫DNA聚合酶引物能與16SrRNA基因特異性結(jié)合(引物是根據(jù)16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列設(shè)計合成的)瓊脂糖凝膠電泳。
(3)逆轉(zhuǎn)錄病毒是載體,能將外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纖維細胞。將轉(zhuǎn)入外源基因的細胞和沒有轉(zhuǎn)入外源基因的細胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中,在相同且適宜的條件下,如果只有轉(zhuǎn)入外源基因的細胞轉(zhuǎn)化成了iPS細胞,則可以證明iPS細胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用24、略
【分析】【分析】
基因突變是指DNA分子中發(fā)生堿基對的替換;增添和缺失;而引起的基因結(jié)構(gòu)的改變。翻譯是指在核糖體上,以mRNA為模板、以氨基酸為原料合成蛋白質(zhì)的過程,該過程還需要tRNA來運轉(zhuǎn)氨基酸。
密碼子由位于mRNA上決定一個氨基酸的三個相鄰的堿基組成。終止密碼子的作用是終止翻譯過程。
基因工程中檢測目的基因在受體細胞內(nèi)是否成功表達可以用抗原-抗體雜交技術(shù)。
【詳解】
(1)由題干信息可知;黏多糖貯積癥患者細胞中IDUA基因突變后,轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度不變,說明其沒有發(fā)生堿基對的增添和缺失,因為這兩者改變會導致轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度改變,因此推測其基因突變是由于堿基對替換。由于終止密碼子提前出現(xiàn),導致翻譯提前終止,肽鏈變短,IDUA酶分子量變小,空間結(jié)構(gòu)改變而失活。
(2)由題干可知;抑制性tRNA(sup-tRNA)可以最終誘導核糖體通讀mRNA上的遺傳信息合成具有功能的全長蛋白,并且抑制性tRNA(sup-tRNA)與普通tRNA的結(jié)構(gòu);功能相同,據(jù)此推測該抑制性tRNA可以攜帶氨基酸至核糖體并與終止密碼子堿基配對使翻譯過程繼續(xù)。
(3)本實驗?zāi)康氖潜容^攜帶不同氨基酸的sup-tRNA的通讀效果;需要保證實驗組細胞含有突變IDUA基因,即其不能合成具有正常功能的IDUA酶(防止正常IDUA酶對實驗結(jié)果產(chǎn)生干擾),同時保證在不同的實驗組細胞中可以轉(zhuǎn)錄出攜帶不同中氨基酸的sup-tRNA,因此實驗組中受體細胞中應(yīng)該含有導入攜帶不同氨基酸的sup-tRNA基因和突變IDUA基因。若要判斷各個實驗組細胞中攜帶不同氨基酸的sup-tRNA是否成功誘導了具有功能的IDUA酶,可以采用該酶的特異性抗體對其進行檢測,即進行抗原-抗體雜交。分析題圖可知,與對照組(含正常IDUA基因的組)相比,含攜帶酪氨酸的sup-tRNA的受體細胞中表達的全長IDUA蛋白量比其他實驗組都多,說明其能有效恢復細胞中全長IDUA蛋白的合成,且效果最好。
(4)由以上實驗可知,攜帶酪氨酸的sup-tRNA能有效誘導核糖體對突變IDUA基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA進行通讀,進而產(chǎn)生具有正常功能的IDUA酶,因此利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA突變基因純合小鼠進行治療,與不進行治療的IDUA突變基因純合小鼠相比,治療組小鼠的IDUA酶活性高,組織黏多糖積累量少;同時,利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA基因敲除小鼠進行治療,與不進行治療的IDUA基因敲除小鼠相比,由于二者都不含有IDUA基因,則其細胞內(nèi)都沒有相應(yīng)mRNA,因此攜帶酪氨酸的sup-tRNA無法發(fā)揮作用,最終導致治療組與不治療組的IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無明顯差異?!窘馕觥?1)替換減少。
(2)識別終止密碼子并攜帶氨基酸至核糖體使翻譯過程繼續(xù)。
(3)攜帶不同氨基酸的suptRNA基因和變IDUA抗原一抗體雜交恢復細胞中全長IDUA蛋白的合成;且效果最好。
(4)IDUA突變基因純合小鼠IDUA酶活性高,組織黏多糖積累量少;IDUA基因敲除小鼠IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無明顯差異五、綜合題(共4題,共16分)25、略
【分析】【分析】
單克隆抗體制備流程:先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng);之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞;誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合,利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞;進行抗體檢測,篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞;進行克隆化培養(yǎng),即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng);最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。【小問1】
結(jié)合題意可知;該過程是制備抗甘草酸的單克隆抗體,而抗原與抗體的結(jié)合具有特異性,故圖1中所用抗原是甘草酸-牛血清白蛋白結(jié)合抗原;骨髓瘤細胞可以無限增殖,而細胞甲即效應(yīng)B細胞無法無限增殖,所以需要兩者結(jié)合,兩者結(jié)合后經(jīng)過篩選獲得的細胞丁既能產(chǎn)生抗體又能無限增殖。【小問2】
圖1中的②過程為促進細胞融合的過程;常用滅活的病毒(適用于動物細胞融合而不適用于植物細胞融合)作用于細胞膜上的糖蛋白,使細胞互相融合;細胞融合后要進行兩次篩選,即圖中的③和④過程,第一次篩選把雜交瘤細胞選出來,第二次篩選把能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞選出來。【小問3】
圖2所示的細胞核移植技術(shù)中涉及三個個體:提供細胞核的個體;提供卵母細胞的個體和代孕母體;而細胞核是遺傳信息的中心,生物性狀主要取決于細胞核,所以克隆動物的細胞核遺傳物質(zhì)來自提供細胞核的個體,但是細胞質(zhì)中也有少量的遺傳信息,所以與提供細胞核的個體不完全相同。
【點睛】
本題重點考查了單克隆抗體的制備和克隆動物的獲取流程,解答此題需要考生能正確辨析圖中的相關(guān)信息并能合理運用?!窘馕觥俊拘☆}1】①.甘草酸—牛血清白蛋白結(jié)合抗原②.不能無限增殖③.既能產(chǎn)生抗體又能無限增殖。
【小題2】①.滅活的病毒②.篩選出雜交瘤細胞③.篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞。
【小題3】①.提供細胞核的個體②.克隆動物的細胞核遺傳物質(zhì)來自提供細胞核的個體,但細胞質(zhì)遺傳物質(zhì)來自提供卵母細胞的個體26、略
【分析】【分析】
單克隆抗體:由單個B淋巴細胞進行無性繁殖形成的細胞系所產(chǎn)生出的化學性質(zhì)單一;特異性強的抗體.具有特異性強、靈敏度高;并可能大量制備的特點;單克隆抗體的制備過程:首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi),使其發(fā)生免疫,小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細胞.利用動物細胞融合技術(shù)將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合,單克隆抗體制備過程中的兩次篩選:第一次篩選:利用特定選擇培養(yǎng)基篩選,獲得雜交瘤細胞,即AB型細胞(A為B淋巴細胞,B為骨髓瘤細胞),不需要A、B、AA、BB型細胞.第二次篩選:利用多孔板法和抗原-抗體雜交法篩選,獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞.最終篩選獲得的雜交瘤細胞的特點是能無限增殖并能分泌特異性抗體,最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取單克隆抗體;若不考慮環(huán)境因素影響,克隆羊的性狀不是全部像提供細胞核的個體,因為卵細胞細胞質(zhì)中的線粒體遺傳物質(zhì)也能控制某些性狀;卵母細胞的細胞質(zhì)可使體細胞胞核全能性得到表達,所以選擇減數(shù)第二次分裂中期的卵母細胞作為核移植的受體細胞.
【詳解】
(1)圖甲單克隆抗體制備過程;圖乙克隆羊培育過程,都必須用到的動物細胞工程技術(shù)手段是動物細胞培養(yǎng);
(2)誘導動物細胞融合最常用的誘導方法是滅活的病毒;
(3)利用基因工程將重組DNA導入細菌細胞中;這一步驟常用的方法是用鈣離子處理細菌細胞;
(4)選用單克隆抗體技術(shù)將B淋巴細胞與骨髓瘤細胞進行融合;再用選擇培養(yǎng)基進行篩選,在該培養(yǎng)基上,未融合的細胞;互相融合的B淋巴細胞和互相融合的骨髓瘤細胞的細胞都會死亡,只有雜交瘤細胞才能生長;
(5)單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比最大的優(yōu)點是特異性強;靈敏度高、能大量制備;
(6)核移植時受體應(yīng)選用減數(shù)第二次分裂的中期的卵母細胞。經(jīng)圖乙所得到的克隆羊“多利”的遺傳特性與細胞核的供體白面綿羊并不完全相同的原因是克隆羊“多利”的細胞質(zhì)遺傳物質(zhì)來自黑面綿羊的去核卵母細胞。
【點睛】
本題結(jié)合圖解,考查單克隆抗體的制備過程和動物體細胞核移植技術(shù),意在考查考生的識記能力和理解所學知識要點,把握知識間內(nèi)在聯(lián)系,形成知識網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力;能運用所學知識,準確判斷問題的能力,屬于考綱識記和理解層次的考查?!窘馕觥竣?動物細胞培養(yǎng)技術(shù)②.滅活的病毒③.用鈣離子處理細菌細胞④.選擇⑤.未融合的細胞、互相融合的B淋巴細胞和互相融合的骨髓瘤細胞⑥.特異性強、靈敏度高、能大量制備⑦.MII中(或減數(shù)第二次分裂的中期)⑧.克隆羊“多利”的細胞質(zhì)
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