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PAGEPAGE10第2課時試驗操作及試驗結(jié)果題型一制備牛肉膏蛋白胨固體培育基1.制備牛肉膏蛋白胨固體培育基的步驟是()A.計算、稱量、倒平板、溶化、滅菌B.計算、稱量、溶化、倒平板、滅菌C.計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板D.計算、稱量、滅菌、溶化、倒平板答案C解析制備牛肉膏蛋白胨固體培育基的一般步驟:計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。2.在制備牛肉膏蛋白胨固體培育基的過程中加入瓊脂這一志向的凝固劑,下列關(guān)于瓊脂的說法錯誤的是()A.不被所培育的微生物分解利用,對所培育的微生物無毒害作用B.在微生物生長溫度范圍內(nèi)保持固體狀態(tài)C.瓊脂凝固點(diǎn)低,利于微生物的生長D.瓊脂在滅菌過程中不會被破壞,透亮度好,凝固力強(qiáng)答案C解析瓊脂不會被微生物利用且對微生物無毒害作用,在滅菌過程中不會被破壞,透亮度好,凝固力強(qiáng),A、D正確;瓊脂在水中加熱至95℃時起先熔化,溫度降至40℃時才起先凝固,微生物生長最相宜的溫度范圍一般為16~30℃,所以在微生物生長溫度范圍內(nèi)保持固體狀態(tài),B正確;瓊脂的凝固點(diǎn)相對于微生物生長的溫度較高,一般不是微生物的養(yǎng)分成分,只起固化作用,對微生物的生長不會產(chǎn)生作用,C錯誤。3.下列敘述錯誤的是()A.右手拿裝有培育基的錐形瓶,左手拔出棉塞,為避開污染需放在酒精燈火焰旁邊B.倒平板整個過程應(yīng)在火焰旁進(jìn)行C.打開培育皿蓋,右手將錐形瓶中的培育基倒入培育皿,左手馬上蓋上培育皿的皿蓋D.為避開水滴滴入培育基,平板應(yīng)倒過來放置答案C解析右手拿裝有培育基的錐形瓶,左手拔出棉塞,為避開污染需放在酒精燈火焰旁邊,A正確;為了防止雜菌污染,倒平板整個過程應(yīng)在火焰旁進(jìn)行,B正確;操作方法為用左手將培育皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,右手將錐形瓶中的培育基(約10~20mL)倒入培育皿,左手馬上蓋上培育皿的皿蓋,C錯誤;為避開水滴滴入培育基,平板應(yīng)倒過來放置,D正確。4.檢驗培育基是否被雜菌污染的最有效方法是()A.將未接種的培育基放在試驗桌上培育B.將未接種的培育基放在窗臺上培育C.將未接種的培育基放在恒溫箱中培育D.將已接種的培育基放在恒溫箱中培育答案C解析檢驗培育基有沒有被雜菌污染,可將未接種的培育基放在恒溫箱中培育。假如在培育過程中未接種的培育基上沒有菌落生長,說明培育基沒有被雜菌污染;若未接種的培育基上有菌落生長,說明培育基被雜菌污染,C正確。5.下列關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨培育基的敘述,錯誤的是()A.培育基應(yīng)先調(diào)pH再進(jìn)行滅菌B.培育基應(yīng)先滅菌再分裝到培育皿C.熔化瓊脂時要不斷用玻璃棒攪拌D.運(yùn)用高壓蒸汽滅菌鍋時干脆將滅菌鍋密封加熱答案D解析運(yùn)用高壓蒸汽滅菌鍋時,應(yīng)把滅菌鍋內(nèi)的水加熱煮沸,將其中原有的冷空氣徹底排出后,將鍋密閉,接著加熱使鍋內(nèi)氣壓逐步上升,D錯誤。題型二大腸桿菌的純化6.下列依次表示倒平板、接種的位置以及平板劃線法接種的路徑的示意圖,其中錯誤的是()答案D解析平板劃線法除第一次劃線外,每一次劃線都從上一次劃線的末端起先,D錯誤。7.下列有關(guān)平板劃線操作的敘述,不正確的是()A.第一步灼燒接種環(huán)是為了避開接種環(huán)上可能存在的微生物污染培育物B.除第一次劃線外,每次劃線前,灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上的菌種C.在其次區(qū)域內(nèi)劃線時,接種環(huán)上的菌種干脆來源于菌液D.劃線結(jié)束后,灼燒接種環(huán),能剛好殺死接種環(huán)上的菌種,避開細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者答案C解析在其次區(qū)域內(nèi)劃線時,接種環(huán)上的菌種來源于第一次劃線的末端,C錯誤。8.有關(guān)稀釋涂布平板法,敘述錯誤的是()A.首先將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋B.然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培育基的表面C.相宜條件下培育D.結(jié)果都可在培育基表面形成單個的菌落答案D解析稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培育基的表面,在相宜條件下培育,A、B、C正確;在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細(xì)胞,從而能在培育基表面形成單個的菌落,D錯誤。9.涂布平板操作須要用到()A.接種環(huán)、滴管、酒精燈 B.接種環(huán)、酒精燈、移液管C.酒精燈、移液管、涂布器 D.接種環(huán)、酒精燈、涂布器答案C解析涂布平板時,須要移液管將菌液進(jìn)行一系列梯度稀釋;須要用酒精燈對涂布器進(jìn)行灼燒滅菌;進(jìn)行涂布時,需用涂布器將菌液涂布勻稱,該操作要在酒精燈的火焰旁進(jìn)行。10.分別純化大腸桿菌最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。下列有關(guān)這兩種方法的敘述錯誤的是()A.均將大腸桿菌接種在固體培育基的表面B.獲得的每個菌落均是由一個細(xì)菌繁殖而來的子細(xì)胞群C.都應(yīng)在火焰旁邊進(jìn)行操作,以防止雜菌污染D.稀釋分散菌種的原理不同,均能達(dá)到分別純化大腸桿菌的目的答案B解析用稀釋涂布平板法時,假如稀釋得當(dāng),在平板表面就可出現(xiàn)分散的單個菌落,這個菌落可能是由一個細(xì)菌細(xì)胞繁殖形成的;平板劃線中最終一次劃線的末端處形成的菌落才是由單一的細(xì)胞或孢子繁殖形成,這種菌落才符合要求,但也存在兩個或多個細(xì)胞聚集在一起形成一個菌落的狀況,B錯誤。題型三菌種的保藏11.菌種保藏應(yīng)當(dāng)限制的條件是()①高溫②低溫③干燥④有光⑤隔絕空氣⑥適當(dāng)氧氣A.①④⑥B.②③⑥C.①⑤⑥D(zhuǎn).②③⑤答案D解析考慮不同類型微生物的保藏條件時,肯定要從該微生物的代謝入手考慮,其保藏條件應(yīng)當(dāng)既不利于其代謝又不影響其生存。低溫、干燥、缺氧等條件,抑制微生物的代謝作用,使其生命活動降低到極低的程度或處于休眠狀態(tài),從而延長菌種生命以及使菌種保持原有的性狀,防止變異,②③⑤正確。12.以下關(guān)于菌種保藏的敘述錯誤的是()A.菌種保藏的目的是保持菌種的純凈B.固體斜面培育基可用于菌種的臨時保藏C.菌種的長期保存一般采納甘油管藏的方法D.由于甘油管藏菌種在-20℃條件下保存,因此對甘油可不必滅菌答案D解析采納甘油管藏的方法保存菌種時,所用的甘油必需滅菌,D錯誤。13.請回答下列有關(guān)微生物培育與分別的問題:(1)微生物的培育都須要培育基,在配制固體培育基時加入的凝固劑一般是________。(2)制備牛肉膏蛋白胨固體培育基的一般流程包括:eq\x(計算)→eq\x(稱量)→eq\x(溶化)→eq\x(A)→eq\x(B)上述流程中A代表____________,試驗室中這個步驟常用的方法有______________________________;流程中B代表________________,該步驟進(jìn)行的相宜溫度是________℃左右。(3)某微生物純化培育的結(jié)果如下圖甲,在________(填圖中編號)區(qū)域出現(xiàn)了單個菌落,產(chǎn)生每個菌落的最初細(xì)菌數(shù)目是________個,據(jù)圖分析,在培育基上劃線接種時,劃線的依次依次是________________(用編號表示)。某探討者接種培育后得到的平板如圖乙所示,推想接種時可能的操作失誤是______________。(4)將分別純化的菌種進(jìn)行臨時保存時,可在低溫下運(yùn)用試管斜面保存,但該方法除保存時間短外,菌種還易____________________;若需較長時間保存菌種,可用的方法是______________。答案(1)瓊脂(2)滅菌干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌倒平板50(3)②1①→③→②涂布不勻稱(4)被污染或產(chǎn)生變異甘油管藏法解析(1)瓊脂是制備固體培育基最常用的凝固劑。(2)制備牛肉膏蛋白胨固體培育基的流程包括:計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板,因此流程中A表示滅菌,干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌是試驗室中常用的培育皿、培育基滅菌方法。流程中B代表倒平板,該步驟進(jìn)行的相宜溫度為50℃左右。(3)從圖甲可知,②號區(qū)域出現(xiàn)了單個菌落;1個菌落由1個細(xì)菌繁殖形成;依據(jù)各區(qū)域菌落的多少可推斷,劃線的依次依次是①→③→②。由圖乙可知,菌落分布不勻稱,推想接種時可能的操作失誤是涂布不勻稱。(4)試管斜面保存菌種,菌種易被污染或產(chǎn)生變異,若需較長時間保存菌種,可采納甘油管藏法。14.圖甲、乙是微生物接種常用的兩種方法,回答相關(guān)問題:(1)圖甲是利用____________法進(jìn)行微生物接種,圖乙是利用______________法進(jìn)行微生物接種。這兩種方法所用的接種工具分別是________和________;對這兩種接種工具進(jìn)行滅菌和消毒的方法依次是________和酒精消毒。(2)平板劃線時,為保證微生物的數(shù)目隨劃線次數(shù)的增加而逐步削減,每次劃線都要從__________________起先,平板劃線結(jié)束后,最終一次劃的線不能與第一次劃的線________。(3)接種操作為什么肯定要在火焰旁邊進(jìn)行?________________________。(4)下圖是接種后培育的效果圖解,其接種方法是________(填“圖甲”或“圖乙”)。(5)假設(shè)用圖乙所示方法接種培育結(jié)束后,發(fā)覺培育基上菌落連成一片,可能的緣由是什么?______________________________________。答案(1)平板劃線稀釋涂布平板接種環(huán)涂布器灼燒滅菌(2)上一次劃線的末端相連(或相接、相交、交叉等)(3)火焰旁邊存在著無菌區(qū)域(4)圖乙(5)稀釋倍數(shù)不夠,菌液的濃度太高解析(1)圖甲和圖乙分別是平板劃線法和稀釋涂布平板法進(jìn)行微生物接種,這兩種方法所用的接種工具分別是接種環(huán)和涂布器。(2)平板劃線時,每次劃線都要從上一次劃線的末端起先,最終一次劃線不能與第一次劃線相連。(3)由于在酒精燈火焰旁邊存在著無菌區(qū)域,因此接種常在火焰旁邊進(jìn)行。(4)培育基上的菌落分布勻稱,接種方法為稀釋涂布平板法。(5)采納稀釋涂布平板法進(jìn)行菌種分別時,稀釋度要足夠高,否則會使微生物不能分散成單個細(xì)胞。1.下列關(guān)于微生物培育基的敘述,錯誤的是()A.制備固體培育基,可以在液體培育基中加入凝固劑瓊脂B.微生物在固體培育基表面生長形成的菌落,可以用肉眼視察到C.全部培育基都含有相同的水、碳源、氮源和無機(jī)鹽等四類物質(zhì)D.培育乳酸桿菌時須要在培育基中添加維生素答案C解析瓊脂是凝固劑,對微生物無害,制備固體培育基時,可在液體培育基中加入瓊脂,A正確;微生物在固體培育基上生長,可以形成肉眼可見的菌落,B正確;培育不同的微生物,所需配方存在差異,C錯誤;培育乳酸桿菌時須要在培育基中添加維生素,D正確。2.下列有關(guān)微生物試驗的敘述,不正確的是()A.獲得純凈培育物的關(guān)鍵是防止雜菌污染B.平板劃線法操作完成后,培育基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌,接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌C.分別不同的微生物要采納不同的稀釋度D.視察菌落的特征可以用來進(jìn)行菌種的鑒定答案B解析防止雜菌污染是獲得純凈培育物的關(guān)鍵,A正確;平板劃線法操作完成后,培育基不能滅菌處理,B錯誤;不同微生物在環(huán)境中的數(shù)量是不同的,因此,分別不同的微生物應(yīng)采納不同的稀釋度,C正確;不同菌種形成的菌落特征不同,因此,通過視察菌落的特征可以鑒定菌種,D正確。3.下列關(guān)于配制培育基的敘述,正確的是()A.配制固體培育基必需加入瓊脂B.培育細(xì)菌時需將pH調(diào)至中性或微酸性C.培育自生固氮菌的培育基中不需添加氮源D.發(fā)酵工程一般用半固體培育基或液體培育基答案C解析在配制固體培育基時,可加入瓊脂作為凝固劑,但瓊脂并不是唯一的凝固劑,A錯誤;培育細(xì)菌時需將pH調(diào)至中性或微堿性,B錯誤;發(fā)酵工程應(yīng)用于生產(chǎn)實踐一般用液體發(fā)酵,可以連續(xù)培育,提高產(chǎn)量,D錯誤;自生固氮菌能夠?qū)⒖諝庵械腘2還原為NH3,因此培育基中不需加氮源,C正確。4.在微生物的試驗室培育中,下列哪項操作不須要在無菌條件下進(jìn)行()A.配制培育基 B.倒平板C.接種 D.培育答案A解析配制培育基時不須要在無菌條件下進(jìn)行,因為配制后的培育基須要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌,A符合題意。5.關(guān)于牛肉膏蛋白胨固體培育基的制備,敘述錯誤的是()A.操作依次為計算、稱量、溶化、倒平板、滅菌B.將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯C.待培育基冷卻至50℃左右時進(jìn)行倒平板D.等平板冷卻凝固約5~10min后將平板倒過來放置答案A解析制備牛肉膏蛋白胨固體培育基時,其操作依次為計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板,A錯誤;由于牛肉膏比較黏稠,稱量時可連同稱量紙一同放入燒杯,B正確;待培育基冷卻至50℃左右時,在酒精燈火焰旁邊倒平板,C正確;平板冷凝后,應(yīng)將平板倒過來放置,以防止皿蓋上的水珠落入培育基,造成污染,D正確。6.最常用的接種微生物的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法,下列關(guān)于二者的比較正確的是()平板劃線法稀釋涂布平板法①需在無菌條件下操作不需無菌操作②培育基中不加瓊脂培育基中加有瓊脂③不行計算菌液中的活菌數(shù)可計算菌液中的活菌數(shù)④須要接種環(huán)須要涂布器A.②④B.③④C.①④D.②③答案B解析平板劃線法和稀釋涂布平板法都須要進(jìn)行無菌操作,以避開雜菌污染,①錯誤;平板劃線法和稀釋涂布平板法都運(yùn)用固體培育基,培育基中都加有瓊脂,②錯誤;平板劃線法不能計算菌液中的活菌數(shù),稀釋涂布平板法可計算菌液中的活菌數(shù),③正確;平板劃線法采納接種環(huán)或接種針進(jìn)行接種,而稀釋涂布平板法采納涂布器進(jìn)行接種,④正確,故選B。7.如圖是微生物平板劃線示意圖,劃線的依次為1、2、3、4、5。下列操作方法正確的是()A.操作前要將接種環(huán)放在火焰旁滅菌B.劃線操作需在火焰上進(jìn)行C.在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)進(jìn)行滅菌D.在5區(qū)域中才能得到所需菌落答案C解析在每次劃線前后都要對接種環(huán)進(jìn)行滅菌,接種環(huán)的滅菌方法應(yīng)是在火焰上灼燒,A錯誤,C正確;接種時劃線操作是在火焰四周進(jìn)行,B錯誤;在5個區(qū)域中,只要有單個活細(xì)菌,通過培育即可獲得所需菌落,D錯誤。8.利用稀釋涂布平板法純化的大腸桿菌,經(jīng)過培育后,發(fā)覺培育基上出現(xiàn)了多種菌落,不行能的緣由是()A.可能是培育基制備過程中被雜菌污染B.可能是接種過程中,無菌操作不符合要求C.可能是大腸桿菌的種類不同形成的D.可能是系列稀釋時,無菌操作不符合要求答案C解析培育基制備過程中被雜菌污染,會導(dǎo)致培育基上出現(xiàn)多種菌落,A不符合題意;接種過程中,無菌操作不符合要求,會導(dǎo)致培育基上出現(xiàn)多種菌落,B不符合題意;大腸桿菌就是一種類型的細(xì)菌,因此不會導(dǎo)致培育基上出現(xiàn)多種菌落,C符合題意;系列稀釋時,無菌操作不符合要求,會導(dǎo)致培育基上出現(xiàn)多種菌落,D不符合題意。9.下表是培育某微生物的培育基的配方,請回答下列問題:試劑牛肉膏蛋白胨NaCl瓊脂加水定容至用量5g10g5g20g1000mL(1)培育基的類型許多,但培育基中一般都含有水、碳源、________和無機(jī)鹽。上述培育基配方中能充當(dāng)碳源的成分是____________________。培育基配制完成以后,一般還要調(diào)整pH并對培育基進(jìn)行________處理。(2)在微生物培育過程中,除考慮養(yǎng)分條件外,還要考慮________、________和滲透壓等條件。(3)在微生物培育操作過程中,為防止雜菌污染,需對培育基和培育器皿進(jìn)行________(填“消毒”或“滅菌”);操作者的雙手需進(jìn)行清洗和________;空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅,其緣由是紫外線能使蛋白質(zhì)________,還能損傷DNA的結(jié)構(gòu)。(4)分別純化微生物最常運(yùn)用的接種方法是___________和______________。(5)在接種前須要檢測培育基是否被污染。對于固體培育基應(yīng)采納的檢測方法是____________________________________________________________。答案(1)氮源牛肉膏和蛋白胨滅菌(2)溫度酸堿度(3)滅菌消毒變性(4)平板劃線法稀釋涂布平板法(5)將未接種的培育基在相宜的溫度下放置相宜的時間,視察培育基上是否有菌落產(chǎn)生解析(1)培育基中一般都含有水、無機(jī)鹽、碳源、氮源。培育基配制完成后要調(diào)pH和滅菌。牛肉膏、蛋白胨中含碳元素,可作為有機(jī)碳源。(2)配制培育基時,除考慮養(yǎng)分條件外,還要考慮溫度、酸堿度和滲透壓等條件。(3)滅菌是運(yùn)用劇烈的理化因素殺死物體內(nèi)外全部的微生物,所以要對培育基和培育皿進(jìn)行滅菌。消毒是指運(yùn)用較為溫柔的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物,故操作者的雙手須要進(jìn)行清洗和消毒。紫外線能使蛋白質(zhì)變性,還能損傷DNA的結(jié)構(gòu)。(4)分別純化微生物常采納平板劃線法和稀釋涂布平板法。(5)培育微生物時,在接種前須要檢測培育基是否被污染。對于固體培育基應(yīng)采納的檢測方法是將未接種的培育基在相宜的溫度下放置相宜的時間,視察培育基上是否有菌落產(chǎn)生。10.急性腸胃炎、手足口病分別是由細(xì)菌和病毒通過消化道進(jìn)入人體導(dǎo)致的。因此檢驗飲用水的細(xì)菌含量和病毒含量是有效監(jiān)控疾病發(fā)生的必要措施,請回答下列與檢驗飲用水有關(guān)的問題:(1)檢驗大腸桿菌的含量時,通常將水樣進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培育基的表面進(jìn)行培育,記錄菌落數(shù)量,這種方法稱為________________。在下面所示的四種菌落分布圖中,不行能是用該方法得到的是________。(2)用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)時是否須要設(shè)置比照組?________________。為什么?_______________________________________________________。(3)已知大腸桿菌能發(fā)酵乳糖并產(chǎn)酸產(chǎn)氣,現(xiàn)供應(yīng)足量的已滅菌的乳糖蛋白胨培育液和具塞試管,應(yīng)如何推斷待檢水樣中是否含有大腸桿菌?____________________________________________________________________________。答案(1)稀釋涂布平板法D(2)須要因為須要推斷培育基是否被雜菌污染(或培育基滅菌是否合格)(3)通過無菌操作向試管內(nèi)注入肯定量待檢水樣,再注入已滅菌的乳糖蛋白胨培育液將試管充溢,塞上塞子,混勻后置于37℃恒溫箱培育24h。若試管內(nèi)有氣泡生成,則說明水樣中有大腸桿菌解析(1)分別純化微生物最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。平板劃線法是通過接種環(huán)在瓊脂固體培育基表面連續(xù)劃線的操作,將聚集的菌種逐步稀釋分散到培育基的表面。稀釋涂布平板法則是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培育基的表面進(jìn)行培育。A、B、C圖菌落為稀釋涂布平板法所得,D圖菌落為平板劃線法所得。(2)利用稀釋涂布平板法統(tǒng)計樣本菌落須要設(shè)置比照組,目的是判定培育基是否被雜菌污染,保證明驗的嚴(yán)謹(jǐn)性。(3)由題意知大腸桿菌發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣,為檢測水樣中是否有大腸桿菌,可將待檢水樣加入打算好的試管中,相宜條件培育,視察是否有氣體產(chǎn)生。11.苯酚及其衍生物廣泛存在于工業(yè)廢水中,對環(huán)境有嚴(yán)峻危害。小明同學(xué)打算依據(jù)下圖操作步驟,從處理廢水的活性污泥中分別篩選酚降解
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