作業(yè)19　細胞工程2025年高考總復習優(yōu)化設計二輪專題生物浙江專版課后習題課時規(guī)范練含答案

作業(yè)19細胞工程2025年高考總復習優(yōu)化設計二輪專題生物浙江專版課后習題課時規(guī)范練作業(yè)19(分值:26分)素養(yǎng)升級練P049

1.(2024北京卷)大豆葉片細胞的細胞壁被酶解后,可獲得原生質體。以下對原生質體的敘述,錯誤的是()A.制備時需用纖維素酶和果膠酶B.膜具有選擇透過性C.可再生出細胞壁D.失去細胞全能性答案D解析分離出的原生質體保留了植物細胞的遺傳物質,具有全能性,D項錯誤。2.制備單克隆抗體的過程中,動物細胞培養(yǎng)需要先分離出單個細胞,然后再進行培養(yǎng)和篩選。這樣做的目的是()A.為了避免微生物污染B.保證獲得細胞的遺傳背景相同C.為了使細胞周期一致D.保證細胞得到充足的營養(yǎng)答案B解析由于動物的生活環(huán)境中存在多種抗原感染,會形成多種雜交瘤細胞,將這些細胞放在特定的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng),可篩選出雜交瘤細胞,但這些雜交瘤細胞可產生多種抗體,為了篩選到能產生單一抗體的細胞群,可將上述雜交瘤細胞進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測,由于每個小孔內只有一個雜交瘤細胞,因此可篩選到產生特異性抗體的雜交瘤細胞,即兩次篩選的目的是保證獲得細胞的遺傳背景相同。3.(2024湖州月考)植物組織培養(yǎng)技術在科學研究和生產實踐中得到了廣泛的應用。下列過程中不涉及植物組織培養(yǎng)技術的是()A.培育甘藍-蘿卜的體細胞雜交植株B.用植物莖尖培養(yǎng)可減少病毒感染的脫毒苗C.用秋水仙素處理單倍體西瓜幼苗獲得二倍體植株D.利用植物細胞生產藥品、調料等細胞產物答案C解析甘藍和蘿卜體細胞經過細胞融合技術形成雜種細胞,雜種細胞再經過植物組織培養(yǎng)技術培育成為雜種植株,A項不符合題意;可利用植物莖尖通過植物組織培養(yǎng)技術得到脫毒苗,B項不符合題意;用秋水仙素處理二倍體西瓜幼苗獲得四倍體植株不涉及植物組織培養(yǎng)技術,C項符合題意;利用植物細胞生產藥品、調料等細胞產物需要采用植物組織培養(yǎng)技術,D項不符合題意。4.(2024浙江北斗新盟聯(lián)考)牛胚胎移植的基本程序如圖,下列敘述正確的是()A.a表示超數(shù)排卵,一般通過促性腺激素處理后才能達到B.d表示將原腸胚等早期胚胎移植到受體母牛中C.圖示過程屬于牛的無性生殖技術,可加快良種牛的繁育速度D.通過圖示技術分娩的犢牛也稱為試管牛答案A解析圖中a表示超數(shù)排卵,一般用促性腺激素處理供體母牛,A項正確;一般采用發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑葚胚或囊胚進行胚胎移植,B項錯誤;圖示過程經過了精子和卵細胞的融合,屬于有性生殖技術,可加快良種牛的繁育速度,C項錯誤;試管牛的培育需經過體外受精、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植以及在母體中發(fā)育和分娩等過程,圖示沒有經過體外受精,故分娩的犢牛不是試管牛,D項錯誤。5.(2024浙江Z20名校聯(lián)盟聯(lián)考)如圖是白菜與甘藍體細胞雜交技術的流程,下列分析錯誤的是()A.該過程發(fā)生了染色體變異B.過程①②均應置于較高滲透壓溶液中C.經過程②③獲得的均為雜種細胞D.過程④⑤通常需要適宜的植物生長調節(jié)劑的配比答案C解析圖示為植物體細胞雜交過程,雜種細胞為異源四倍體,即發(fā)生了染色體數(shù)目的變異,A項正確;過程①②均應置于較高滲透壓溶液中,這樣可以避免原生質體吸水漲破,B項正確;經過程②③獲得的未必都是雜種細胞,因為只考慮兩兩融合,則融合的細胞會有三種情況,即白菜和甘藍的原生質體自融的情況和互融獲得的雜種細胞,因而還需要篩選才能獲得所需的雜種細胞,C項錯誤;過程④⑤為植物組織培養(yǎng)技術的脫分化和再分化過程,該過程中通常需要適宜的植物生長調節(jié)劑的配比來獲得不同的細胞團,如當培養(yǎng)基中細胞分裂素和生長素比例適當時會誘導愈傷組織的產生,D項正確。6.腫瘤細胞通過細胞膜上的PD-L1蛋白與機體T細胞膜上PD-1結合,抑制T細胞激活,實現(xiàn)免疫逃逸?？蒲腥藛T制備靶向PD-L1的單克隆抗體治療腫瘤,下列說法錯誤的是()A.需用PD-1免疫小鼠以獲得B細胞B.用滅活的病毒誘導產生雜交瘤細胞C.雜交瘤細胞的培養(yǎng)液中需添加動物血清D.利用抗原-抗體結合的原理制備靶向藥物答案A解析科研人員制備靶向PD-L1的單克隆抗體治療腫瘤,所以需用PD-L1免疫小鼠以獲得B淋巴細胞,A項錯誤;誘導動物細胞融合的方法有物理法、化學法和生物法,其中生物法是用滅活的病毒誘導產生雜交瘤細胞,B項正確;動物細胞培養(yǎng)時需要添加血清,補充人工培養(yǎng)基缺乏的物質,所以雜交瘤細胞的培養(yǎng)液中需添加動物血清,C項正確;PD-L1的單克隆抗體治療腫瘤利用的原理是抗原-抗體結合,利用抗體與靶抗原結合的特性攜帶靶向藥物進入腫瘤細胞從而發(fā)揮作用,D項正確。(2024杭州S9聯(lián)盟期中)閱讀材料,回答7、8題。紫杉醇是紅豆杉屬植物產生的一種復雜的細胞代謝產物,能和微管蛋白聚合體相互作用,阻礙紡錘體的形成。利用植物組織培養(yǎng)和細胞培養(yǎng)的方法生產紫杉醇是一條重要途徑,基本方法如圖所示。7.下列敘述正確的是()A.多種藥劑配合使用消毒外植體后,需經蒸餾水沖洗才可用于接種B.從外植體到愈傷組織是通過細胞的再分化實現(xiàn)的C.愈傷組織是無組織結構的松散的薄壁細胞團D.完成細胞懸浮培養(yǎng)和繼代培養(yǎng),體現(xiàn)了植物細胞的全能性答案C解析外植體用多種藥劑消毒后需經無菌水沖洗才可用于接種,A項錯誤;從外植體到愈傷組織是通過細胞的脫分化實現(xiàn)的,B項錯誤;愈傷組織是無組織結構的松散的薄壁細胞團,C項正確;完成細胞懸浮培養(yǎng)和繼代培養(yǎng),只是增加了細胞數(shù)量,未發(fā)育成完整個體或其他各種細胞,不能體現(xiàn)植物細胞的全能性,D項錯誤。8.下列敘述錯誤的是()A.在液體培養(yǎng)基中懸浮振蕩培養(yǎng)的細胞處于不斷分裂的狀態(tài)B.加入纖維素酶和果膠酶的液體培養(yǎng)基需在高壓滅菌鍋中112℃滅菌30分鐘C.分離或提純紫杉醇是制取紫杉醇產品的必經步驟D.紫杉醇可能對癌癥有一定的療效答案B解析大多數(shù)酶對高溫敏感,過高的溫度可能會導致酶失活,因此112℃滅菌30分鐘會破壞纖維素酶和果膠酶的結構,導致其失活,B項錯誤。9.(2024金華十校模擬)急性肝衰竭是一種致命的疾病,死亡率很高。目前,肝移植仍然是治療肝衰竭的唯一有效方法。由于肝臟器官的短缺,肝細胞移植被作為肝移植的替代策略。用海藻酸鹽微膠囊包裹可增殖人肝細胞獲得類器官(eLO)并用于移植,這是治療肝衰竭的一種有前景的策略。下列敘述錯誤的是()A.供體肝組織需先用胰蛋白酶將其分散,再進行原代培養(yǎng)B.開放式培養(yǎng)肝細胞,有利于細胞代謝產生的CO2及時溢出C.異體移植細胞會發(fā)生免疫排斥,用海藻酸鹽包裹有利于形成免疫保護屏障D.若eLO與空微膠囊治療組的效果相當,可證明微膠囊包裹不影響肝細胞功能答案D解析供體肝組織要用機械法或胰蛋白酶和膠原蛋白酶處理分散成單個細胞,再進行原代培養(yǎng),A項正確;開放式培養(yǎng)肝細胞,有利于細胞代謝吸收O2以及產生的CO2及時溢出,防止CO2積累在培養(yǎng)液中,改變培養(yǎng)液pH,B項正確;異體移植細胞會發(fā)生免疫排斥,用海藻酸鹽包裹能夠形成免疫保護屏障,防止被免疫系統(tǒng)識別,C項正確;若eLO與空微膠囊治療組的效果相當,說明空微膠囊也可以治療肝衰竭,不能證明微膠囊包裹不影響肝細胞功能,D項錯誤。10.(2024寧波慈溪期末)多種方法獲得的早期胚胎,均需移植給受體才能獲得后代。如圖列舉了幾項技術成果。據(jù)此分析,下列相關敘述正確的是()A.經胚胎移植產生的后代,其遺傳特性與受體均保持一致B.①過程需獲得MⅡ期的去核卵母細胞C.②能大幅改良動物性狀D.③可通過②技術實現(xiàn)擴大化生產,①②可通過③技術實現(xiàn)性狀改良答案D解析題中幾項技術成果都需要經過胚胎移植。胚胎移植的受體只提供胚胎發(fā)育的場所,對移入胚胎的遺傳特性無任何影響,A項錯誤。①過程為試管動物的培育過程,是由供體母牛超數(shù)排卵后,經發(fā)情配種或人工授精獲得胚胎產生后代的過程,若涉及體外受精技術,采集到的卵母細胞需要培養(yǎng)到MⅡ期,但無需去核,卵母細胞去核屬于②克隆動物操作程序,B項錯誤。②過程為核移植克隆動物,屬于無性生殖,可保持親本的優(yōu)良性狀,所以不能大幅改良動物性狀,C項錯誤。③過程為通過轉基因技術獲得動物,轉基因動物可通過②克隆技術實現(xiàn)擴大化生產,而試管動物和克隆動物均可通過③轉基因技術導入外源基因,實現(xiàn)性狀改良,D項正確。11.(2024臺州二模)某團隊以臺灣榕莖段為材料獲得生根組培苗,通過設置不同移栽基質開展馴化研究。實驗結果如表。下列相關敘述正確的是()不同移栽基質對臺灣榕組培苗移栽馴化的影響組別基質成活率/%生長情況Ⅰ河沙100+++Ⅱ河沙∶黃壤土=1∶195+++Ⅲ河沙∶蛭石∶珍珠巖=1∶1∶197.78++++Ⅳ腐葉土∶河沙∶黃壤土∶珍珠巖=1∶1∶1∶194.44+++++注:+++表示好,++++表示更好,+++++表示最好。A.選取的莖段最好帶有生長能力旺盛的葉片B.對莖段消毒可將其置于50%的酒精中浸泡1minC.第Ⅲ組成活率較高的主要原因是蛭石能提供營養(yǎng)物質D.第Ⅳ組生長情況最好的原因可能是腐葉被分解后能提供更多的營養(yǎng)物質答案D解析由于要獲得生根組培苗,要防止植物過度的蒸騰作用,因此選取的莖段最好不要帶有葉片,A項錯誤;對莖段進行消毒,先在75%酒精中消毒30s,再用無菌水清洗,再置于10%次氯酸鈉溶液中消毒10min,最后再用無菌水清洗,B項錯誤;組培苗鍛煉時采用蛭石作為栽培基質的原因是蛭石比較松軟,持水性也較好,有利于幼苗的生根和葉片的生長,但蛭石不能提供營養(yǎng)物質,C項錯誤;第Ⅳ組生長情況最好的原因可能是腐葉中含有有機物,被分解后能提供更多的營養(yǎng)物質,D項正確。12.(2024寧波鎮(zhèn)海期末)第三代試管嬰兒技術(PGD/PGS)是對早期胚胎細胞進行基因診斷和染色體檢測后再進行胚胎移植,流程如圖所示。圖中檢測包括PGD(胚胎植入前的基因診斷)和PGS(胚胎植入前的染色體數(shù)目和結構檢測)。下列敘述正確的是()A.為獲得更多的卵子,可注射適宜濃度的雌激素B.PGD和PGS技術可分別用于篩選21-三體綜合征、白化病C.圖中單精子注入受精需要借助顯微操作技術D.鑒定后“理想胚胎”植入子宮的時期為囊胚期或原腸胚期答案C解析超數(shù)排卵應該注射促性腺激素,A項錯誤。PGD(胚胎植入前基因診斷)用于篩選特定的基因疾病,如白化病;PGS(胚胎植入前染色體篩查)用于檢測染色體數(shù)目和結構異常,如21-三體綜合征,B項錯誤。由題圖可知,需要采用顯微操作技術將單精子注入受精卵,C項正確?！袄硐肱咛ァ敝踩胱訉m的時期為桑葚胚期或囊胚期,D項錯誤。13.(2024浙江A9協(xié)作體開學考)如圖所示,將由2種不同的抗原分別制備的單克隆抗體分子,在體外解偶聯(lián)后重新偶聯(lián)可制備雙特異性抗體,簡稱雙抗。下列敘述正確的是()A.雙抗可同時與2種抗原結合,因此不具有特異性B.篩選雙抗時只需要使用制備單抗時所用的其中1種抗原C.同時注射2種抗原可刺激B細胞增殖分化為產雙抗的漿細胞D.將分泌兩種抗體的雜交瘤細胞進行融合,可能得到分泌雙抗的融合細胞答案D解析根據(jù)抗原和抗體發(fā)生特異性結合的原理可知,雙抗可同時與2種抗原結合,仍然具有特異性,A項錯誤;篩選雙抗時需要使用制備單抗時所用的2種抗原,B項錯誤;雙抗是在2種不同的抗原刺激下,B細胞增殖分化產生不同的漿細胞,分泌2種抗體,C項錯誤;將分泌兩種抗體的雜交瘤細胞進行融合,所形成的雜交細胞中相關基因可能均能表達,從而可能得到分泌雙抗的融合細胞,D項正確。作業(yè)20(分值:60分)素養(yǎng)升級練P051

1.(2024麗水期末)生物技術成果進入了人類的生產和生活,它在造福人類的同時,也可能帶來一些負面影響。我國相關法規(guī)明令禁止的是()A.生產基因芯片B.培育試管嬰兒C.生殖性克隆D.利用生物反應器生產抗凝血酶答案C2.DNA粗提取時,向雞血細胞培養(yǎng)液中加入一定量的蒸餾水并攪拌,過濾后得到濾液甲,在濾液甲中加入適量的物質X、氯化鈉后,再次過濾得到濾液乙,在濾液乙中加入物質Y,獲得DNA相對含量較高的白色絲狀物。下列敘述錯誤的是()A.加入蒸餾水的目的是使細胞破裂B.物質X可以是蛋白酶C.物質Y可以是95%的冷酒精D.濾液甲和濾液乙的成分基本相同答案D解析雞血細胞中無細胞壁,在蒸餾水中容易吸水漲破,故加入蒸餾水的目的是使細胞破裂,A項正確;蛋白酶可分解濾液中的雜質蛋白,故推測物質X可以是蛋白酶,B項正確;加入物質Y獲得DNA相對含量較高的白色絲狀物,故物質Y可以是95%的冷酒精,C項正確;濾液甲和濾液乙的基本成分不同,其中濾液甲中主要含有蛋白質等雜質,而濾液乙中DNA含量較多,D項錯誤。3.(2024杭州及周邊重點中學期中改編)PCR技術能對實驗對象的基因特征進行分析和判定。PCR技術與體內DNA復制的相同點是()A.需要DNA連接酶B.需要解旋酶將DNA雙鏈打開C.需要引物D.需要變換溫度來進行DNA片段擴增答案C解析PCR技術為體外DNA復制,復制片段相對較短,不需要DNA連接酶,A項不符合題意;PCR技術通過加熱使DNA雙鏈打開,不需要DNA解旋酶,B項不符合題意;DNA聚合酶只能從引物的3'端連接脫氧核苷酸,PCR技術與體內DNA復制都需要引物,C項符合題意;PCR技術需要變換溫度,體內DNA復制不需要變換溫度,D項不符合題意。4.(2024杭州上城區(qū)模擬)為了對重金屬污染的土壤進行生物修復,研究者將從楊樹中克隆的重金屬轉運蛋白(HMA3)基因與外源高效啟動子連接,導入楊樹基因組中(如圖)。為檢測獲得的轉基因楊樹苗中是否含有導入的HMA3基因,同時避免內源HMA3基因的干擾,在進行PCR擴增時,應選擇的引物組合是()注:①②③④表示引物。A.①+③B.①+②C.③+② D.③+④答案B解析引物①③同向,另一端缺少引物,A項不符合題意;引物①擴增的片段含有啟動子和HMA3基因,引物②擴增的片段既含有啟動子,又含有HMA3基因序列,B項符合題意;引物③擴增的片段不含啟動子,不含外源高效啟動子片段,C、D兩項不符合題意。5.(2024湖南卷)某同學將質粒DNA進行限制酶酶切時,發(fā)現(xiàn)DNA完全沒有被酶切,分析可能的原因并提出解決方法。下列敘述錯誤的是()A.限制酶失活,更換新的限制酶B.酶切條件不合適,調整反應條件如溫度和酶的用量等C.質粒DNA突變導致酶識別位點缺失,更換正常質粒DNAD.酶切位點被甲基化修飾,換用對DNA甲基化不敏感的限制酶答案B解析限制酶失活會使DNA完全不被酶切,此時應更換新的限制酶,A項正確。酶切條件不合適通常會使切割效果下降,此時應有部分DNA被酶切,B項錯誤。質粒DNA突變會導致限制酶識別位點缺失,進而造成限制酶無法進行切割,此時應更換為正常質粒,C項正確。質粒DNA上酶切位點被甲基化修飾,會導致對DNA甲基化敏感的限制酶無法進行酶切,此時應換用對DNA甲基化不敏感的限制酶,D項正確。6.(2024浙江精誠聯(lián)盟適應考)基因芯片技術是一種可同時檢測不同基因片段的新型檢測技術,芯片制作和使用過程如圖所示:下列敘述錯誤的是()A.探針和樣品都必須是單鏈B.基因芯片上具有多種不同序列的探針C.探針和樣品上都需攜帶相同的熒光標記D.洗脫的目的是去除未與探針雜交的樣品答案C解析基因芯片利用核酸分子雜交的原理進行基因檢測,因此探針和樣品都必須是單鏈,同時應該在樣品上放置熒光標記的探針,才能通過是否出現(xiàn)熒光來判定是否有特定序列,A項正確,C項錯誤;基因芯片的測序原理是雜交測序,基因芯片上可以放置多種探針,檢測多種不同序列,B項正確;樣品和探針雜交后,需要將未結合的樣品去除,避免影響信號檢測,D項正確。7.(2024嘉興平湖月考)如圖是利用PCR技術對A、B兩個跳蟲的DNA進行分析的過程,下列相關敘述錯誤的是()A.提取細胞DNA時加入蛋白酶有助于釋放出DNAB.PCR不同循環(huán)過程中變性的溫度及時間相同以使DNA充分解旋C.用已知長度的DNA片段作為參考物,可估測樣本DNA片段的大小D.陰性對照是未加入DNA模板但加入PCR擴增所需混合物,以檢測試劑是否被污染答案B解析蛋白酶可以分解組織中的蛋白質而不能分解DNA,在提取DNA時加入蛋白酶有助于釋放出DNA,A項正確;PCR不同循環(huán)過程中變性的溫度及時間一般相同,但如果模板的G和C堿基含量較高,變性時間可能延長,以使DNA充分解旋,B項錯誤;用已知長度的DNA片段作為參照物,可估測樣本DNA片段的大小,C項正確;陰性對照是未加DNA模板但加入PCR擴增過程所需的混合物,也完成了PCR過程,通過凝膠電泳檢測是否擴增出DNA,以檢測試劑是否被污染,D項正確。8.(2024浙江A9協(xié)作體聯(lián)考)將山核桃miRNA169基因轉入擬南芥中,可促進擬南芥提前開花,部分流程如圖。下列敘述錯誤的是()A.過程①通常需要逆轉錄酶催化B.過程②中可利用PCR技術擴增并篩選出目的基因C.過程③中轉化農桿菌一般需要農桿菌的Ti質粒作為表達載體D.過程④需經植物組織培養(yǎng)才能獲得提前開花的植株答案D解析過程①為RNA通過逆轉錄得到cDNA的過程,需要逆轉錄酶的催化,A項正確;過程②序列已知,可利用PCR技術篩選并擴增出目的基因,B項正確;過程③中轉化農桿菌一般需要農桿菌的Ti質粒作為表達載體,C項正確;過程④為收獲轉化的種子,直接在土壤中培養(yǎng)也可以長成植株,D項錯誤。9.(2024寧波慈溪期末)當前生物技術發(fā)展非常迅速,與我們日常生活的聯(lián)系日益密切,但安全性不容忽視。下列有關生物技術的說法,錯誤的是()A.由于技術問題,生殖性克隆可能孕育出有嚴重生理缺陷的克隆人B.為避免可能產生的基因歧視,基因檢測機構不能隨意泄露基因檢測的結果C.為避免倫理問題,我國政府禁止一切生殖性克隆,支持治療性克隆D.消除生物武器威脅、防止生物武器擴散是生物安全防控的重要方面答案C解析我國政府一再重申四不原則:不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實驗,我國政府同樣重視治療性克隆所涉及的倫理問題,主張對治療性克隆進行有效監(jiān)控和嚴格審查,C項錯誤。10.斑點印跡雜交是一種簡單的DNA分子雜交技術,其技術流程如圖。據(jù)此分析,下列說法正確的是()A.放射性自顯影技術可顯示原培養(yǎng)皿中含目的基因的菌落位置B.p和q片段能夠雜交的主要原因是兩單鏈的堿基排列順序相同C.p和q片段的雜交雙鏈區(qū)域形成過程中有氫鍵和磷酸二酯鍵生成D.斑點印跡雜交技術可用于檢測目的基因是否在受體細胞中成功表達答案A解析斑點印跡雜交技術是將目的基因片段用放射性同位素或熒光進行標記,與受體細胞的基因組DNA進行雜交,如果目的基因整合到受體細胞上,那么標記基因就會與其結合,通過放射性自顯影就可以檢測出整合有目的基因的受體細胞。所以該技術可以顯示原培養(yǎng)基中含目的基因的菌落位置,A項正確;p和q片段能雜交是因為兩單鏈的堿基可以互補配對,B項錯誤;在雜交過程中,雙鏈區(qū)域會有氫鍵形成,但不會形成磷酸二酯鍵,C項錯誤;斑點印跡雜交是一種簡單的DNA分子雜交技術,該技術可以檢測目的基因的導入和轉錄,但無法檢測目的基因是否在受體細胞中表達,檢測目的基因是否在受體細胞中表達常用抗原-抗體雜交法,D項錯誤。閱讀下列材料,回答11、12題。產腸毒素大腸桿菌(ETEC)能引起幼畜發(fā)生急性腹瀉,其直接致病因子為腸毒素,包括熱不穩(wěn)定腸毒素(LT)和熱穩(wěn)定腸毒素(ST)兩種。LT由兩類功能性亞單位(LTA、LTB)組成,其中LTB具有免疫原性;ST包括ST1、ST2兩個亞型,均為小分子多肽,免疫原性弱。構建ST1基因與LTB基因的融合表達質粒,使其表達的ST1具有免疫原性,為研制抗毒素疫苗做好上游工作。11.從ETEC中擴增得到LTB和ST1兩個基因片段,并設計引物:P1、P2為擴增LTB基因序列的引物,P3、P4為擴增ST1基因序列的引物。其中P2、P3中的部分是人工合成的能互補的Linker(連接基團)。制備LTB-ST1融合基因的過程如圖所示。下列敘述錯誤的是()A.PCR1和PCR2通常在一個反應體系中同時進行B.設計引物時,應該將Linker添加在P2、P3的5'端C.獲得①中的兩條鏈至少經過2輪PCR1和PCR2D.①→②過程利用Linker獲得的融合基因不需要DNA連接酶答案A解析PCR1和PCR2通常在不同的反應體系中同時進行,A項錯誤;脫氧核苷酸連接到引物的3'端,因此引物的5'端可修飾,則設計引物時,應該將Linker添加在P2、P3的5'端,B項正確;根據(jù)DNA半保留復制方式可知,至少經過2輪PCR1和PCR2,才能得到圖中①所示的DNA鏈,C項正確;①→②過程利用Linker通過PCR過程獲得的融合基因,不需要DNA連接酶,D項正確。12.下列有關“LTB-ST1融合基因工程菌的構建與表達”的敘述,錯誤的是()A.選用的質粒載體中需包含復制起點、多種限制酶的識別位點和標記基因等B.構建重組質粒表達載體時,LTB-ST1融合基因兩端需要包含啟動子和終止子C.在篩選重組菌時,通常應設置未經轉化的菌株作為陰性對照D.檢測到重組菌能表達融合抗原時,即可作為重組工程菌株用于發(fā)酵制備抗腸毒素疫苗答案D解析選用的質粒載體中需要包括復制起點(便于目的基因的擴增)、多種限制酶酶切位點(便于目的基因的插入)和標記基因(便于篩選出含有目的基因的受體細胞)等,A項正確;構建重組質粒表達載體時,LTB-ST1融合基因兩端需要包含啟動子和終止子,利于目的基因的表達,B項正確;在篩選重組菌時,通常應設置未經轉化的菌株作為陰性對照,以檢測重組質粒是否導入受體菌,C項正確;檢測到重組菌能表達融合抗原時,還要篩選高產菌株,然后作為重組工程菌株用于發(fā)酵制備抗腸毒素疫苗,D項錯誤。13.(18分)(2024浙江A9協(xié)作體聯(lián)考)紹興有“黃酒之鄉(xiāng)”之稱,黃酒是中國最古老的酒種,有“酒中之祖、酒中之王”的美譽,深得大眾喜愛。但研究發(fā)現(xiàn)黃酒中的潛在致癌物質——氨基甲酸乙酯(EC)的含量遠高于其他酒。已知酒液中的EC主要由尿素和乙醇反應生成,而尿素主要由酵母菌代謝產生。圖1圖2酵母菌-大腸桿菌穿梭質粒圖3圖1為酵母菌細胞中尿素的來源與去路,請回答下列問題。(1)降低黃酒中EC含量的關鍵是。

(2)從基因角度分析,降低黃酒中EC含量的方法有:或增強DUR1,2基因的表達。

(3)強啟動子具有與結合,并多次啟動過程的功能,將目的基因(DUR1,2基因)與強啟動子結合可以增強目的基因的表達。

①要獲取目的基因,可以從中獲取,獲得的目的基因不含啟動子,再進行擴增。

②如圖2為目的基因部分序列。應選擇的一對引物是:。

A.5'-ATGACAGTTAGT-3'B.5'-TACTGCCGGTGA-3'C.5'-TCACCGGCAGTA-3'D.5'-ACTAACTGTCAT-3'③如圖3所示,構建基因表達載體時為避免反向拼接,應選擇識別并切割質粒,再用連接。已知目的基因上無相關酶切位點,應在引物的(填“5'”或“3'”)端設計酶切序列,目的基因上游設計的酶切序列+引物序列為5'--3'。

④已知DUR1,2基因的轉錄模板鏈為A鏈,若DUR1,2基因反向連接,構建出反義DUR1,2基因,則其轉錄模板鏈為鏈。造成的結果是轉反義DUR1,2基因酵母工程菌中內源的DUR1,2基因表達受阻,原因可能是

。

答案(1)降低黃酒中尿素的含量(2)抑制CAR1基因的表達或敲除CAR1基因(3)RNA聚合酶轉錄①cDNA文庫PCR②AC③EcoRⅠ和BamHⅠDNA連接酶5'GAATTCATGACAGTTAGT④B以B鏈為模板轉錄出的RNA與以A鏈為模板轉錄出的RNA配對形成雙鏈,抑制了DUR1,2基因的表達解析(1)已知酒液中的EC主要由尿素和乙醇反應生成,而尿素主要由酵母菌代謝產生,因此降低黃酒中EC含量的關鍵是降低黃酒中尿素的含量。(2)為了降低黃酒中尿素的含量(降低黃酒中EC含量),由題圖可知,可以抑制CAR1基因的表達或敲除CAR1基因或增強DUR1,2基因的表達。(3)強啟動子具有結合RNA聚合酶且能多次啟動轉錄過程的功能。①要獲取目的基因,可從基因組文庫中獲取,也可從cDNA文庫中獲取,從cDNA文庫中獲取的目的基因不含啟動子,將目的基因進行PCR擴增,可獲取大量的目的基因。②PCR過程需要兩種引物,能分別與目的基因兩條鏈的3'端通過堿基互補配對結合,A、C兩項符合題意。③由題圖可知,在強啟動子和終止子中間含有限制酶EcoRⅠ和BamHⅠ的識別位點,因此構建基因表達載體時為避免反向拼接,應選擇EcoRⅠ和BamHⅠ識別并切割質粒,再用DNA連接酶連接。引物使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸,故應在引物的5'端設計酶切序列;擴增目的基因時其左邊需要添加EcoRⅠ識別序列5'-GAATTC-3',且引物需要與模板鏈堿基序列3'端進行互補配對,故擴增目的基因時所用引物的堿基序列是5'-GAATTCATGACAGTTAGT-3'。④已知DUR1,2基因的轉錄模板鏈為A鏈,反義DUR1,2基因的轉錄模板鏈為B鏈。以B鏈為模板轉錄出的RNA與以A鏈為模板轉錄出的RNA配對形成雙鏈,抑制了DUR1,2基因的表達,因此轉反義DUR1,2基因酵母工程菌中內源的DUR1,2基因表達受阻。14.(18分)(2024浙江五校聯(lián)盟聯(lián)考)結核病是由結核桿菌引起的人畜共患病。結核桿菌通常以氣溶膠的形式傳播,氣溶膠顆粒被肺泡吞噬細胞吞噬,吞噬細胞破裂導致結核桿菌在機體內進一步傳播。羊癢病是由正常細胞的非致病性朊蛋白異構化為癢病朊蛋白所致。為研制既能抗結核病又能抗羊癢病的雙抗羊,科學家進行了如下操作。(1)小鼠SP110基因是目前發(fā)現(xiàn)的具有抗結核桿菌感染功能的基因。研究人員為了驗證SP110基因的功能,同時也為了驗證山羊吞噬細胞特異性啟動子MSR可以啟動SP110基因在吞噬細胞內的表達,將MSR啟動子與小鼠SP110基因形成融合基因,設計了下表所示的三組實驗。組別主要操作培養(yǎng)細胞后,使之破裂對照組1空質粒導入山羊肺泡吞噬細胞,接種適量結核桿菌細胞培養(yǎng)72小時后,加入③,使吞噬細胞破裂,釋放結核桿菌

對照組2含有能廣泛表達SP110基因的山羊肺泡吞噬細胞,①

實驗組②,接種等量的結核桿菌

取三組實驗等量的細胞裂解液,用法培養(yǎng),結果如圖1所示。由圖可知,小鼠SP110基因可用于雙抗羊的研制,依據(jù)的實驗現(xiàn)象是。

圖1圖2注:限制酶BamHⅠ的識別序列為GGATTC。圖3基因敲入的原理圖4供體DNA表達載體(2)非致病性朊蛋白是由山羊13號染色體上的PRNP基因的第三外顯子控制合成的,PRNP基因的結構如圖2。研究人員用新型基因敲除技術對體外培養(yǎng)的山羊成纖維細胞PRNP基因的外顯子3序列實施定點敲除。請根據(jù)上述信息,設計一個檢測敲除是否成功的思路:提取山羊成纖維細胞的DNA,根據(jù)設計引物進行PCR,并用作用于PCR產物后進行凝膠電泳,若僅獲得一條電泳條帶,說明定點敲除成功。

(3)用TALEN敲除載體與供體DNA表達載體(圖4)共同轉化體外培養(yǎng)的幼羊成纖維細胞,可將融合基因定點敲入PRNP基因的外顯子3部位,原理如圖3。請指出圖4中數(shù)字1和2的分別代表的結構:、。用檢測,山羊成纖維細胞中非致病性朊蛋白基因和SP110基因的表達情況是(填“兩者均增加”“兩者均減少或不表達”“前者減少,后者增加”或“前者增加,后者減少”)。

(4)欲用上述細胞獲得雙抗羊,需要用到的技術有(至少寫出兩項)。

答案(1)①接種等