《現(xiàn)代生物化學實驗技術(shù)》課程教學大綱

ADDINCNKISM.UserStyle《現(xiàn)代生物化學實驗技術(shù)》課程教學大綱（實驗課程）一、課程基本信息課程號1223S00027開課單位生命科學學院課程名稱（中文）現(xiàn)代生物化學實驗技術(shù)（英文）ModernBiochemistryExperimentalTechnique課程性質(zhì)選修考核類型考查課程學分2課程學時68課程類別專業(yè)拓展課適用專業(yè)（類）生物技術(shù)專業(yè)、生物科學專業(yè)、生物信息學專業(yè)二、課程描述及目標（一）課程簡介生物化學是生命的化學，是研究生命的化學組成和生命過程中化學變化規(guī)律的科學，是生命科學體系的重要基礎(chǔ)課，生物化學為生物學科其他分支學科提供重要的理論基礎(chǔ)和實驗技術(shù)?，F(xiàn)代生物化學實驗技術(shù)是學習了生物化學和生物化學實驗課的基礎(chǔ)上開設(shè)的重要專業(yè)實驗課。根據(jù)學生的生物化學基礎(chǔ)，生物化學的發(fā)展現(xiàn)狀，實際擁有的實驗條件，再結(jié)合學生深造和就業(yè)所需，本課程擬開設(shè)包括蛋白質(zhì)提取技術(shù)、離心技術(shù)、可見分光光度技術(shù)、紫外分光光度技術(shù)、離子交換層析技術(shù)、親和層析技術(shù)、Western-blotting技術(shù)、酶動力學參數(shù)分析技術(shù)等的綜合性實驗。（二）教學目標現(xiàn)代生物化學實驗技術(shù)是生命學科許多領(lǐng)域如分子生物學、生物工程、食品、醫(yī)藥等研究的重要技術(shù)手段。本實驗課均為綜合性實驗，每個綜合性實驗包括多種生化技術(shù)，在強化學生的動手能力的同時，更著重培養(yǎng)學生綜合運用所學知識解決實際問題的能力。本課程要求學生掌握重要的生物化學原理及技術(shù)，包括蛋白質(zhì)提取技術(shù)、紫外-可見分光光度技術(shù)、離子交換層析技術(shù)、高效液相色譜技術(shù)、親和層析技術(shù)、Western-blotting技術(shù)、酶動力學參數(shù)分析技術(shù)等，達到如下教學目標：課程目標1：蛋白質(zhì)和酶的提取技術(shù)。課程目標2：紫外-可見分光光度技術(shù)。課程目標3：離子交換層析技術(shù)。課程目標4：親和層析技術(shù)。課程目標5：蛋白質(zhì)電泳技術(shù)。課程目標6：高效液相色譜技術(shù)。課程目標7：Western-blotting技術(shù)。課程目標8：酶動力學參數(shù)分析技術(shù)。課程目標9：實驗設(shè)計能力、數(shù)據(jù)作圖與分析能力、批判性思維能力、團結(jié)協(xié)作能力。三、課程目標對畢業(yè)要求的支撐關(guān)系畢業(yè)要求指標點課程目標1：掌握扎實的生物科學與生物技術(shù)的基礎(chǔ)理論、基本知識和基本技能，熟悉生物技術(shù)及其產(chǎn)業(yè)的相關(guān)方針、政策、法規(guī)。課程目標1-92：具有綜合運用所掌握的理論知識和技能，從事生物技術(shù)、生物工程及其相關(guān)領(lǐng)域科學研究的能力。課程目標1-93：具備良好的專業(yè)素質(zhì)，受到嚴格的科學思維訓練，有求實創(chuàng)新的精神、批判性思維和可持續(xù)發(fā)展理念。課程目標1-9四、教學方式與方法本課程采用的教學方式有：講授式、重點難點歸納式、討論式，綜合運用多媒體課件、實驗視頻、實驗操作指導(dǎo)等方式。教學方法：多媒體教學與傳統(tǒng)板書相結(jié)合、集中示范與個別指導(dǎo)相結(jié)合、基礎(chǔ)理論與實踐技術(shù)相結(jié)合、老師幫助與學生自己動手相結(jié)合。課前進行實驗預(yù)習、課堂結(jié)合教師講解進行實驗操作，掌握實驗技能，課后對實驗結(jié)果、實驗數(shù)據(jù)匯總分析，完成實驗報告。每一實驗后的思考題，幫助學生鞏固課堂知識，加深對問題的理解和掌握。五、教學重點與難點（一）教學重點本課程的重點和難點是各項生化技術(shù)的原理及應(yīng)用這些原理所進行的操作以及對實驗結(jié)果的分析。生物大分子制備部分包括蛋白質(zhì)和酶的基本性質(zhì)、粗分離、純化的一般原理和技術(shù)；電泳部分主要是聚丙烯酰胺凝膠電泳的原理、鑒定蛋白質(zhì)純度及測定分子量的應(yīng)用；柱層析包括常用的離子交換劑的性質(zhì)、特點、應(yīng)用方法，柱層析的操作和核酸蛋白檢測儀的使用；蛋白質(zhì)的Western-blotting包括目的蛋白的提取、親和層析純化、蛋白質(zhì)的電泳、轉(zhuǎn)移及顯色。高效液相色譜方法的建立和運行；酶動力學研究包括酶的提取、純化，進一步掌握柱層析操作，掌握線性梯度洗脫方法，學習酶的重要參數(shù)米氏常數(shù)Km和最大反應(yīng)速度Vmax的測定。（二）教學難點本課程的教學難點是指導(dǎo)學生對綜合性實驗結(jié)果的正確規(guī)范表述及分析。如柱層析純化蛋白質(zhì)層析圖譜的繪制，純化總表的填寫，蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的計算，Western-blotting的原理及影響結(jié)果的因素分析，酶促反應(yīng)進程曲線測定條件選擇及雙倒數(shù)作圖法中對底物濃度的選擇等。六、實驗內(nèi)容、基本要求與學時分配序號實驗項目名稱實驗內(nèi)容與要求學時類型對應(yīng)課程目標1雞卵類黏蛋白的提取純化及性質(zhì)測定掌握有機溶劑沉淀雜蛋白和分級沉淀目標蛋白的方法；掌握透析袋及透析的操作；掌握DEAE-Cellulose純化蛋白的方法；掌握蛋白質(zhì)濃度測定的方法；理解并掌握BAEE法測定CHOM活性的方法；掌握并會熟練操作SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）的方法及測定蛋白質(zhì)分子量的技術(shù)原理。28綜合性、設(shè)計性課程目標1-62大腸桿菌重組蛋白純化及蛋白質(zhì)免疫印跡檢測掌握Western-blotting技術(shù)的原理、操作及應(yīng)用，包括蛋白的提取、SDS、轉(zhuǎn)移、顯色。理解親和層析的原理，掌握組氨酸標簽蛋白的純化流程。12綜合性、設(shè)計性課程目標6-83HPLC檢測保健品CoQ10的含量掌握超臨界萃取技術(shù)和高效液相色譜技術(shù)12綜合性、設(shè)計性課程目標6和94蔗糖酶的提取純化及酶動力學研究掌握蔗糖酶的提取和粗酶液制備方法、理解酶反應(yīng)進程曲線條件確定的方法、掌握酶的動力學的測定方法和動力學參數(shù)的計算。16綜合性、設(shè)計性課程目標1-4,9合計68注：實驗要求包括必修、選修；實驗類型包括“驗證性”、“設(shè)計性”、“綜合性”等。七、學業(yè)評價和課程考核（一）考核類型：考試√考查（二）考核方式：√實驗報告實驗作品√其它：實驗操作（填寫具體考核方式）（三）成績評定：考核依據(jù)建議分值（百分比）考核/評價細則對應(yīng)課程目標平時考核出勤10%全勤滿分，曠課三次0分。課程目標1-9作業(yè)40%按時提交實驗報告，視完成情況給分。課程目標1-9表現(xiàn)10%根據(jù)聽講、操作、實驗完成、值日等情況給分。課程目標1-9期末考核40%根據(jù)實驗操作的規(guī)范、完成速度、結(jié)果的正確性等給分。課程目標1-9八、課程目標達成評價課程目標的實際達成效果計算方式如下，達成值越高，教學效果越好。課程目標達成度畢業(yè)要求指標點達成度九、教材與教學參考書（一）教材《生物化學實驗教程》，武金霞，科學出版社，2012年，第一