2024-2025學(xué)年高二生物人教版選擇性必修3上課課件 第1章 第2節(jié) 第1課時 微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)

第1課時微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)第1章發(fā)酵工程<<<學(xué)習(xí)目標(biāo)1.概述培養(yǎng)基的成分和配制方法。2.區(qū)分消毒和滅菌，掌握不同物品的滅菌方法。3.概述微生物純培養(yǎng)的基本操作要求。內(nèi)容索引一、培養(yǎng)基的配制三、微生物的純培養(yǎng)二、無菌技術(shù)課時對點(diǎn)練

培養(yǎng)基的配制一1.培養(yǎng)基的概念：人們按照微生物對

的不同需求，配制出供其

的營養(yǎng)基質(zhì)——培養(yǎng)基，用以培養(yǎng)、

、鑒定、

微生物或積累其代謝物。營養(yǎng)物質(zhì)梳理教材新知生長繁殖分離保存2.培養(yǎng)基的種類培養(yǎng)基種類劃分標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基特點(diǎn)作用

培養(yǎng)基________加凝固劑，如_____微生物的分離與鑒定，活菌計數(shù)，保藏菌種半固體培養(yǎng)基容器放倒不致流出，劇烈震動則破散觀察微生物的運(yùn)動、分類鑒定

培養(yǎng)基不加凝固劑常用于工業(yè)生產(chǎn)固體液體物理性質(zhì)瓊脂特別提醒固體培養(yǎng)基中的瓊脂僅作為凝固劑，不能為微生物生長提供能量和碳源。組分含量提供的主要營養(yǎng)牛肉膏5g

等蛋白胨10g

等NaCl5g無機(jī)鹽H2O定容至1000mL水碳源、氮源、磷酸鹽和維生素碳源、氮源和維生素3.培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成(1)主要營養(yǎng)物質(zhì)：水、

(提供碳元素的物質(zhì))、

(提供氮元素的物質(zhì))和無機(jī)鹽。(2)某種常見的細(xì)菌培養(yǎng)基——牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成碳源氮源(3)培養(yǎng)基還需滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及O2的需求。例如，在培養(yǎng)乳酸桿菌時，需要在培養(yǎng)基中添加

；在培養(yǎng)霉菌時，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至

；在培養(yǎng)細(xì)菌時，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至______

；在培養(yǎng)厭氧微生物時，需要提供

的條件。維生素酸性中性或弱堿性無氧特別提醒培養(yǎng)基的配制原則：目的要明確；營養(yǎng)要協(xié)調(diào)；pH要適宜。提示培養(yǎng)自生固氮菌的培養(yǎng)基中可以不添加氮源。(1)牛肉膏和蛋白胨來源于動物，含有糖、維生素和有機(jī)氮等營養(yǎng)物質(zhì)(

)(2)所有微生物在培養(yǎng)時，培養(yǎng)基中都需加入氮源(

)××√提示培養(yǎng)不同微生物的培養(yǎng)基成分不完全一樣，如培養(yǎng)自養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基不需要碳源，培養(yǎng)自生固氮菌的培養(yǎng)基中可以不添加氮源。(3)培養(yǎng)不同微生物的培養(yǎng)基成分完全一樣(

)任務(wù)一：概述培養(yǎng)基的種類和營養(yǎng)構(gòu)成1.結(jié)合提供的資料和教材中的“1000mL牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成”，分析并回答下列問題：資料一配制培養(yǎng)酵母菌的培養(yǎng)基：稱取去皮的馬鈴薯200g，切成小塊，加水1000mL，加熱煮沸至馬鈴薯軟爛，用紗布過濾。向濾液中加入20g葡萄糖(也可用蔗糖代替)、15～20g瓊脂，用蒸餾水定容至1000mL。資料二

100g馬鈴薯中含有80g水、2g蛋白質(zhì)、16g碳水化合物，還有維生素、無機(jī)鹽等。探究核心知識(1)按物理性質(zhì)劃分，培養(yǎng)酵母菌的培養(yǎng)基是

培養(yǎng)基，判斷的依據(jù)是

；而牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是

培養(yǎng)基，判斷的依據(jù)是

。(2)上述兩種培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：都含有____________________________

等，其中培養(yǎng)酵母菌的培養(yǎng)基中主要由

提供碳源，

提供氮源，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中能為細(xì)菌同時提供碳源和氮源的物質(zhì)是

。固體培養(yǎng)基成分中有瓊脂(凝固劑)液體培養(yǎng)基中未加凝固劑水、碳源、氮源、無機(jī)鹽和維生素糖類蛋白質(zhì)牛肉膏和蛋白胨(3)為什么培養(yǎng)基需要氮源？提示培養(yǎng)基中的氮元素是微生物合成蛋白質(zhì)、核酸等物質(zhì)所必需的。2.如表是某微生物培養(yǎng)基的成分，該培養(yǎng)基可用來培養(yǎng)

型微生物。若除去①，此培養(yǎng)基

(填“能”或“不能”)用來培養(yǎng)圓褐固氮菌，原因是_________________________________________________________

。編號①②③④⑤成分(NH4)2SO4KH2PO4FeSO4CaCl2H2O用量0.4g4.0g0.5g0.5g100mL自養(yǎng)不能圓褐固氮菌雖可以固氮，但其同化作用類型為異養(yǎng)型，培養(yǎng)基中必須提供有機(jī)碳源3.培養(yǎng)微生物時，培養(yǎng)基中是否必須有碳源和氮源？提示不一定。例如，培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物時，一般不需要添加碳源，微生物可以利用空氣中的二氧化碳；培養(yǎng)固氮微生物時，一般不需要添加氮源，微生物可以利用空氣中的氮?dú)狻追N微生物的營養(yǎng)和能量來源核心歸納微生物碳源氮源能源藍(lán)細(xì)菌CO2

等光能硝化細(xì)菌CO2NH3NH3的氧化根瘤菌糖類等有機(jī)物N2有機(jī)物大腸桿菌糖類、蛋白質(zhì)等有機(jī)物蛋白質(zhì)等有機(jī)物1.關(guān)于微生物的營養(yǎng)，下列說法正確的是A.同一種物質(zhì)不可能既作碳源又作氮源B.凡是碳源都能提供能量C.除水以外的無機(jī)物僅提供無機(jī)鹽D.無機(jī)氮源也可能提供能量√落實思維方法對一些微生物來說，含C、H、O、N的有機(jī)化合物可以既是碳源，又是氮源，A錯誤；CO2是光能自養(yǎng)型細(xì)菌的碳源，但不能提供能量，B錯誤；除水以外的無機(jī)物種類繁多、功能多樣，如CO2可作自養(yǎng)型微生物的碳源，C錯誤；硝化細(xì)菌所利用的氮源是無機(jī)氮源——氨氣，同時氨氣的氧化過程也為硝化細(xì)菌提供用以化能合成作用的能量，D正確。2.(多選)下列有關(guān)微生物培養(yǎng)基種類及配制原則的敘述，不正確的是A.任何培養(yǎng)基都必須含有碳源、氮源、水、無機(jī)鹽及特殊的營養(yǎng)物質(zhì)B.液體培養(yǎng)基可用于觀察菌落，固體培養(yǎng)基可用于工業(yè)生產(chǎn)C.微生物的生長除受營養(yǎng)因素影響外，還受pH、O2、滲透壓等的影響D.淀粉可作為所有微生物的碳源√√√培養(yǎng)基不一定都含有碳源、氮源，如培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基中不需要加入碳源，培養(yǎng)自生固氮菌的培養(yǎng)基中不需要加入氮源；一般固體培養(yǎng)基可用于觀察菌落，液體培養(yǎng)基可用于工業(yè)生產(chǎn)；某些微生物不能利用淀粉，而只能利用葡萄糖、果糖、蔗糖和麥芽糖等糖類。

二無菌技術(shù)獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染，無菌技術(shù)主要包括消毒和滅菌。1.消毒(1)概念：指使用較為

的物理、化學(xué)或

等方法殺死物體表面或內(nèi)部

微生物。(2)適用對象：操作的

、操作者的

和手等。(3)常用方法：

消毒、

消毒等。梳理教材新知溫和生物一部分空間衣著煮沸巴氏2.滅菌(1)概念：指使用

的理化方法殺死物體內(nèi)外

的微生物，包括____和孢子。(2)適用對象：用于微生物培養(yǎng)的器皿、

用具和

等。(3)常用方法：

滅菌、干熱滅菌和

滅菌等。強(qiáng)烈所有芽孢接種培養(yǎng)基濕熱灼燒知識拓展芽孢：有些細(xì)菌在一定的條件下，細(xì)胞里面形成一個橢圓形的休眠體(不是繁殖體)，叫作芽孢。芽孢的壁很厚，對干旱、低溫、高溫等惡劣的環(huán)境有很強(qiáng)的抵抗力。例如，有的細(xì)菌的芽孢煮沸3小時以后才死亡。芽孢又小又輕，可以隨風(fēng)飄散。當(dāng)環(huán)境適宜(如溫度、水分適宜)的時候，芽孢又可以萌發(fā)，形成一個細(xì)菌。孢子：細(xì)菌、原生動物、真菌和植物等產(chǎn)生的一種有繁殖或休眠作用的生殖細(xì)胞。孢子的特點(diǎn)是能直接長成新個體。芽孢和孢子(1)消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對細(xì)胞的傷害(

)(2)與消毒相比，滅菌對微生物的殺滅更徹底(

)(3)無菌操作的對象只要是沒有生物活性的材料(如培養(yǎng)基、接種環(huán)等)，都可采用干熱滅菌法進(jìn)行滅菌(

)√×√提示培養(yǎng)基的滅菌一般采用濕熱滅菌法。項目主要方法應(yīng)用范圍消毒巴氏消毒法

℃消毒30min或

℃處理15s或80～85℃處理10～15s牛奶、啤酒、果酒和醬油等不耐高溫的液體煮沸消毒法100℃煮沸

min家庭餐具等生活用品紫外線消毒30W紫外燈照射

min(損傷細(xì)菌的DNA)

、

或__________任務(wù)二：消毒和滅菌的比較及無菌技術(shù)的其他作用1.請完善表格中消毒和滅菌的主要方法及應(yīng)用范圍。探究核心知識63～6572～765～630接種室接種箱超凈工作臺項目主要方法應(yīng)用范圍消毒化學(xué)藥物消毒用體積分?jǐn)?shù)為70%的_____擦拭實驗者雙手______水源滅菌灼燒滅菌直接在酒精燈火焰的

層灼燒接種工具，如

、_____

、

或其他金屬用具、

或

等干熱滅菌干熱滅菌箱中，

℃的熱空氣中維持______

的物品，如玻璃器皿、金屬用具等高壓蒸汽滅菌(濕熱滅菌)

的條件下，維持__________

等酒精氯氣充分燃燒涂布器接種環(huán)接種針試管口瓶口160～1701～2h耐高溫的、需要保持干燥100kPa、121℃15～30min培養(yǎng)基2.牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法，與煮沸消毒法相比，這兩種方法的優(yōu)點(diǎn)是什么？提示在達(dá)到消毒目的的同時，營養(yǎng)物質(zhì)損失較少。3.體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精殺菌效果最好，若酒精濃度過高，___________

，酒精不能滲入其中；若酒精濃度過低，

。菌體表面蛋白質(zhì)變性過快而凝固成一層保護(hù)膜殺菌能力減弱4.無菌技術(shù)除了用來防止實驗室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還有什么作用？提示無菌技術(shù)還能有效避免污染環(huán)境以及操作者自身被微生物感染。無菌技術(shù)的關(guān)鍵是防止雜菌污染，A錯誤；無菌技術(shù)中，若處理對象為液體，可以用濕熱滅菌法滅菌，D錯誤。3.下列有關(guān)無菌技術(shù)的說法，正確的是A.無菌技術(shù)的關(guān)鍵是殺滅實驗室中所有的微生物B.培養(yǎng)微生物的試劑和器具都要進(jìn)行濕熱滅菌C.經(jīng)巴氏消毒法處理的食品因微生物未被徹底消滅，不能在常溫下長期

保存D.無菌技術(shù)中，若處理對象為液體，則只能消毒，不能滅菌√落實思維方法4.(2024·滄州高二月考)下列關(guān)于實驗室無菌技術(shù)的敘述，錯誤的是A.接種室、超凈工作臺可以用紫外線照射進(jìn)行消毒B.在100℃條件下煮沸5～6min屬于滅菌方法C.實驗結(jié)束后使用過的培養(yǎng)基應(yīng)滅菌處理后再丟棄D.金屬接種工具直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒滅菌√在100℃條件下煮沸5～6min屬于煮沸消毒法，B錯誤。

三微生物的純培養(yǎng)1.概念(1)培養(yǎng)物：在微生物學(xué)中，將接種于培養(yǎng)基內(nèi)，在合適條件下形成的含特定種類

稱為培養(yǎng)物。(2)純培養(yǎng)物：由

繁殖所獲得的微生物群體。(3)純培養(yǎng)：獲得

的過程。2.步驟：微生物的純培養(yǎng)包括

、

、

、

和

等步驟。微生物的群體梳理教材新知單一個體純培養(yǎng)物配制培養(yǎng)基滅菌接種分離培養(yǎng)3.酵母菌的純培養(yǎng)(1)原理：微生物群體分散或稀釋成單個細(xì)胞，單個細(xì)胞繁殖成單個菌落。菌落：分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部可以繁殖形成肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的

，這就是菌落。(2)獲得單菌落的方法：采用

法和

法將單個微生物分散在固體培養(yǎng)基上，之后經(jīng)培養(yǎng)得到的單菌落一般是由單個微生物繁殖形成的純培養(yǎng)物。子細(xì)胞群體平板劃線稀釋涂布平板(3)步驟①制備培養(yǎng)基：配制培養(yǎng)基―→滅菌―→

。倒平板注意事項：a.溫度：50℃左右；b.操作：在

附近；c.冷凝后平板倒置。②接種和分離酵母菌通過接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面

的操作，將聚集的菌種逐步____

到培養(yǎng)基的表面。經(jīng)數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離得到單菌落。③培養(yǎng)酵母菌完成平板劃線后，待菌液被培養(yǎng)基吸收，將接種后的平板和一個_______的平板倒置，放入28℃左右的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24～48h。倒平板酒精燈火焰連續(xù)劃線稀釋分散未接種(1)培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后再進(jìn)行濕熱滅菌(

)提示應(yīng)將配制好的培養(yǎng)基先進(jìn)行濕熱滅菌，再在無菌環(huán)境中將其分裝到培養(yǎng)皿中。(2)倒平板時，應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上(

)提示倒平板時，將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，立即蓋上皿蓋。(3)配制培養(yǎng)基時應(yīng)先滅菌再調(diào)pH(

)提示配制培養(yǎng)基時應(yīng)先調(diào)pH再滅菌。×××任務(wù)三：分析酵母菌的純培養(yǎng)1.在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，最好不要再用這個平板培養(yǎng)微生物，防止___________________________

。2.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？探究核心知識提示平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，將平板倒置，既可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，又可以避免培養(yǎng)基中的水分過快揮發(fā)?？諝庵械奈⑸镌诿笊w與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生3.下列接種過程，正確的順序是

。b、a、e、f、c、g、d灼燒時期目的取菌種前殺死接種環(huán)上______________每次劃線前殺死上次劃線時殘留的菌種，使下一次劃線的菌種直接來源于

，從而使___________________

，直至得到__________接種結(jié)束后殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免微生物污染環(huán)境和感染操作者4.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？請完善下方的表格。原有的微生物上次劃線的末端每次劃線時菌種數(shù)目逐漸減少單個細(xì)胞5.上述問題3中，圖d中共劃了

個區(qū)域，在每次劃線

(填“前”“后”或“前后”)均需要對接種環(huán)灼燒滅菌，因此共需要灼燒接種環(huán)

次。6.為什么最后一次的劃線與第一次的劃線不能相連？提示最后一次的劃線已經(jīng)將微生物稀釋成單個的細(xì)胞，如果與第一次的劃線相連則增加了微生物的數(shù)目，得不到純化的效果。7.設(shè)置未接種平板組的意義是什么？提示通過觀察未接種平板是否有菌落存在以確定培養(yǎng)基是否被污染或滅菌是否徹底。5前后6核心歸納1.配制培養(yǎng)基的注意事項(1)如果需要調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，應(yīng)該在定容完成之后，滅菌之前進(jìn)行操作。(2)培養(yǎng)基滅菌后要冷卻到50℃左右時開始倒平板。其原因是瓊脂是一種多糖，在98℃以上熔化，在44℃以下凝固，倒平板時溫度高于50℃會燙手，低于50℃時，若不及時操作，瓊脂會凝固。(3)倒平板時，要使錐形瓶的瓶口迅速通過火焰。通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。核心歸納2.平板劃線法接種菌種時，可防止雜菌污染的操作(1)接種前將接種環(huán)放在酒精燈火焰上灼燒。(2)劃線操作在酒精燈火焰旁進(jìn)行。(3)接種環(huán)蘸取菌液前后，要將試管口通過火焰。(4)劃線時將培養(yǎng)皿的皿蓋打開一條縫隙，用接種環(huán)在培養(yǎng)基表面迅速劃線，劃線后及時蓋上皿蓋。核心歸納3.實驗結(jié)果的分析(1)培養(yǎng)未接種的培養(yǎng)基的目的是檢測培養(yǎng)基是否被雜菌污染(或檢查培養(yǎng)基制備是否合格)。未接種的培養(yǎng)基表面若有菌落生長，則說明培養(yǎng)基被污染，應(yīng)該重新制備；若無菌落生長，則說明未被污染。(2)在接種酵母菌的培養(yǎng)基上可觀察到獨(dú)立的菌落，這些菌落在顏色、形狀和大小上相似，酵母菌菌落一般表面光滑，多呈乳白色。(3)若在培養(yǎng)基中觀察到不同形態(tài)的菌落，原因可能是菌液不純，混入其他雜菌，或在實驗操作過程中被雜菌污染。5.(2023·徐州高二期末)下列有關(guān)微生物的分離與培養(yǎng)的敘述，錯誤的是A.獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染B.倒置平板可防止培養(yǎng)皿皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基C.倒平板時將培養(yǎng)皿的皿蓋拿開，以便于將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿D.檢驗培養(yǎng)基是否被雜菌污染的最有效方法是將未接種的培養(yǎng)基放在恒

溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)√倒平板時用食指和拇指夾住培養(yǎng)皿的皿蓋并開啟一條縫隙，使其恰好能讓錐形瓶瓶口伸入，隨后倒入培養(yǎng)基，C錯誤。落實思維方法6.(多選)(2024·黑吉遼，19)某些香蕉植株組織中存在的內(nèi)生菌可防治香蕉枯萎病，其篩選流程及抗性檢測如圖。下列操作正確的是A.在大量感染香蕉枯萎病的香蕉種植園內(nèi)，從感病植株上采集樣品B.將采集的樣品充分消毒后，用蒸餾水沖洗，收集沖洗液進(jìn)行無菌檢測C.將無菌檢測合格的樣品研磨，經(jīng)稀釋涂布平板法分離得到內(nèi)生菌的單菌落D.判斷內(nèi)生菌的抗性效果需比較有無接種內(nèi)生菌的平板上的病原菌菌斑大小√√由題干信息“某些香蕉植株組織中存在的內(nèi)生菌可防治香蕉枯萎病”可知，在大量感染香蕉枯萎病的香蕉種植園內(nèi)，從未感病植株上采集樣品，A錯誤；獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染；將采集的樣品充分消毒后，用無菌水沖洗，收集沖洗液進(jìn)行無菌檢測，B錯誤；由題圖可知，樣品研磨后進(jìn)行了稀釋涂布，可見將無菌檢測合格的樣品研磨，經(jīng)稀釋涂布平板法分離得到內(nèi)生菌的單菌落，C正確；由題圖抗性檢測可知，判斷內(nèi)生菌的抗性效果需設(shè)置對照組和實驗組，對照組不接種內(nèi)生菌得到病原菌菌斑，實驗組接種內(nèi)生菌得到病原菌菌斑，然后比較對照組和實驗組的菌斑大小，實驗組病原菌菌斑越小表明內(nèi)生菌抗性效果越好，D正確。網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

課時對點(diǎn)練四題組一培養(yǎng)基的配制1.(2024·長治高二質(zhì)檢)下列有關(guān)培養(yǎng)基的敘述，錯誤的是A.培養(yǎng)基中一般都含有碳源、氮源、水和無機(jī)鹽等主要營養(yǎng)物質(zhì)B.根據(jù)微生物對碳源需求上的差別，可在培養(yǎng)基中增減不同的碳源C.某些細(xì)菌生長過程中需要額外補(bǔ)充營養(yǎng)物質(zhì)，如在培養(yǎng)乳酸桿菌時，

需要在培養(yǎng)基中添加維生素D.微生物只能在瓊脂固體培養(yǎng)基表面生長并產(chǎn)生菌落√1234567891011121314微生物可以在瓊脂固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長，形成肉眼可見的菌落，D錯誤。1234567891011121314培養(yǎng)該菌時，需要加入蒸餾水；該微生物為異養(yǎng)生物，需要葡萄糖作為碳源；培養(yǎng)該微生物需要無機(jī)鹽，故需要加入氯化鈉；該微生物可以自己固氮，不需要加入氮源，故不需要加入蛋白胨，D符合題意。2.某異養(yǎng)自生固氮菌能將大氣中的氮還原成氨，若在實驗室中分離土壤中的該菌，則配制培養(yǎng)基時，一般不需要加入的物質(zhì)是A.蒸餾水

B.葡萄糖

C.氯化鈉

D.蛋白胨√1234567891011121314固體培養(yǎng)基中含有凝固劑瓊脂，加入水不會制成液體培養(yǎng)基，C錯誤；在培養(yǎng)細(xì)菌時，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至中性或弱堿性，D錯誤。3.(2023·唐山高二檢測)下列關(guān)于微生物培養(yǎng)基的敘述，正確的是A.培養(yǎng)基是為微生物的生長繁殖提供營養(yǎng)的基質(zhì)B.培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)濃度越高，對微生物的生長越有利C.固體培養(yǎng)基中加入少量水即可制成液體培養(yǎng)基D.在培養(yǎng)細(xì)菌時，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至酸性√1234567891011121314接種中試管口等易被污染的部位通過火焰，屬于灼燒滅菌，D符合題意。題組二無菌技術(shù)4.(2024·寧德高二期中)下列操作不屬于消毒方法的是A.牛奶在63～65℃下煮30min以殺死其中的微生物B.用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精擦拭實驗者雙手C.接種室、接種箱使用前用紫外線照射30minD.接種中試管口等易被污染的部位通過火焰√12345678910111213145.微生物的實驗室培養(yǎng)要進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌和消毒。下列關(guān)于滅菌和消毒的敘述，正確的是A.煮沸消毒法中100℃煮沸5～6min可以殺死全部微生物的細(xì)胞和芽孢、

孢子B.培養(yǎng)皿用酒精直接擦拭即可達(dá)到徹底滅菌的目的C.灼燒滅菌的對象是金屬器具，不可以是玻璃器具D.消毒和滅菌的原理是相同的√1234567891011121314滅菌可以殺死環(huán)境中的一切微生物，包括芽孢和孢子，消毒只能殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物，A錯誤；玻璃器皿等耐高溫、需要保持干燥的實驗器具，應(yīng)采用干熱滅菌法進(jìn)行滅菌，而用酒精直接擦拭達(dá)不到徹底滅菌的目的，B錯誤；灼燒滅菌的對象可以是金屬器具，也可以是玻璃器具，C錯誤；消毒和滅菌的原理是相同的，都是使微生物的蛋白質(zhì)變性，D正確。1234567891011121314題組三微生物的純培養(yǎng)6.(2023·南通高二期中)下列關(guān)于實驗室培養(yǎng)和純化酵母菌過程中的部分操作的說法，正確的是A.培養(yǎng)酵母菌的試劑和器具都要進(jìn)行濕熱滅菌B.制作培養(yǎng)基時，濕熱滅菌后還需要調(diào)pHC.倒好的平板要立即使用，以免表面干燥，影響酵母菌生長D.將平板倒置放入適宜溫度的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)√1234567891011121314接種環(huán)等常用灼燒滅菌法處理，吸管、培養(yǎng)皿等常用干熱滅菌法處理，培養(yǎng)基及多種器材用濕熱滅菌法處理，A錯誤；制作培養(yǎng)基時，應(yīng)先調(diào)pH再滅菌，B錯誤；倒好的平板需要冷卻后再使用，C錯誤。12345678910111213147.采用平板劃線法能將單個微生物分散在固體培養(yǎng)基上，下列有關(guān)平板劃線操作的敘述，錯誤的是A.第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物B.每次劃線前，灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留

的菌種C.在第二區(qū)域內(nèi)劃線時，接種環(huán)上的菌種直接來源于菌液D.劃線結(jié)束后，灼燒接種環(huán)，能及時殺死接種環(huán)上的菌種，避免微生物

污染環(huán)境和感染操作者√1234567891011121314從第二次劃線開始，每次劃線時接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，C錯誤。12345678910111213148.(2024·三明高二期末)如圖是實驗室培養(yǎng)和純化酵母菌過程中的部分操作步驟，下列說法錯誤的是A.①步驟使用的培養(yǎng)基已經(jīng)

滅菌B.①②③步驟操作時均需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行C.④步驟操作時，不能將第1區(qū)和第5區(qū)的劃線相連D.④操作過程中，需灼燒接種環(huán)5次√1234567891011121314每次劃線前后都要灼燒接種環(huán)，因此④操作過程中，需灼燒接種環(huán)6次，D錯誤。1234567891011121314注：“＋”表示含有該物質(zhì)，“－”表示不含有該物質(zhì)。9.如表中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用來培養(yǎng)微生物的三種培養(yǎng)基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生長繁殖；甲能在Ⅰ中正常生長繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生長繁殖，甲、丙都不能。下列說法正確的是1234567891011121314序號粉狀硫10gK2HPO44gFeSO40.5g蔗糖10g(NH4)2SO40.4gH2O100mLMgSO49.25gCaCl20.5gⅠ＋＋＋＋－＋＋＋Ⅱ＋＋＋－＋＋＋＋Ⅲ＋＋＋＋＋＋＋＋序號粉狀硫10gK2HPO44gFeSO40.5g蔗糖10g(NH4)2SO40.4gH2O100mLMgSO49.25gCaCl20.5gⅠ＋＋＋＋－＋＋＋Ⅱ＋＋＋－＋＋＋＋Ⅲ＋＋＋＋＋＋＋＋A.甲、乙、丙都是異養(yǎng)型微生物B.甲、乙都是自養(yǎng)型微生物、丙是異養(yǎng)型微生物C.甲是固氮微生物、乙是自養(yǎng)型微生物、丙是異養(yǎng)型微生物D.甲是異養(yǎng)型微生物、乙是固氮微生物、丙是自養(yǎng)型微生物√1234567891011121314根據(jù)表格分析，甲能在Ⅰ中正常生長繁殖，而乙和丙都不能，而Ⅰ培養(yǎng)基缺氮，說明甲屬于固氮微生物；乙能在Ⅱ中正常生長繁殖，而甲和丙都不能，Ⅱ培養(yǎng)基中沒有有機(jī)碳源，說明乙屬于自養(yǎng)微生物；而丙不能在Ⅰ培養(yǎng)基中生長，說明不能固氮，又不能在Ⅱ培養(yǎng)基中生長，說明不能合成有機(jī)物，只能在Ⅲ培養(yǎng)基中生長，說明丙屬于異養(yǎng)微生物，C正確。123456789101112131410.(多選)生長圖形法是一種測定微生物營養(yǎng)需求的簡便方法。為探究某嗜熱菌所需生長因子的種類，某研究小組把該菌的懸浮液與不含任何特殊營養(yǎng)物質(zhì)但含有其他必需營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基混合后倒平板，然后在平板上劃分?jǐn)?shù)區(qū)，將甲、乙、丙三種生長因子分別添加到不同區(qū)域，培養(yǎng)結(jié)果如圖所示。下列說法正確的是A.倒平板后直接培養(yǎng)可判斷有無污染B.將所有平板放置在適宜的37℃下倒置培養(yǎng)并觀察C.圖示結(jié)果表明該菌需要特殊營養(yǎng)物質(zhì)乙和丙D.生長圖形法還可用于某些菌種的篩選√1234567891011121314√√倒平板后不接種任何菌種直接進(jìn)行培養(yǎng)觀察有無菌落的出現(xiàn)，可以判斷培養(yǎng)基有無污染，A正確；該菌為嗜熱菌，應(yīng)放置在其適宜的高溫條件下培養(yǎng)，而不是37℃，B錯誤；圖中嗜熱菌在添加了乙、丙特殊營養(yǎng)物質(zhì)的區(qū)域生長，故該菌需要的特殊營養(yǎng)物質(zhì)是乙和丙，C正確；1234567891011121314不同的菌種所需的特殊營養(yǎng)物質(zhì)不同，利用生長圖形法可用于某些菌種的篩選，菌種只會在提供其需要的生長因子的區(qū)域生長，D正確。1234567891011121314消毒也可以殺死物體內(nèi)部的部分微生物，A錯誤；操作者的雙手需要進(jìn)行消毒處理，不能進(jìn)行滅菌處理，D錯誤。11.(多選)(2024·石家莊高二期中)關(guān)于無菌技術(shù)，下列敘述錯誤的是A.消毒只能殺死物體表面的部分微生物B.消毒采用較溫和的物理、化學(xué)或生物方法C.滅菌能殺死物體內(nèi)外所有微生物，包括芽孢和孢子D.操作者的雙手需要用化學(xué)藥物進(jìn)行滅菌處理，避免操作過程中的污染√1234567891011121314√12.(多選)某研究小組用平板劃線法從有機(jī)廢水中分離微生物用于廢水處理。下列敘述不正確的是A.倒平板后應(yīng)立即將培養(yǎng)皿倒置B.轉(zhuǎn)換劃線角度時不需灼燒接種環(huán)即可進(jìn)行劃線C.接種時不能劃破培養(yǎng)基，否則難以達(dá)到分離單菌落的目的D.劃線操作時完全打開皿蓋，劃完立即蓋上√1234567891011121314√√倒平板后應(yīng)等平板冷凝后，再將培養(yǎng)皿倒置，A錯誤；轉(zhuǎn)換劃線角度后要對接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌，接種環(huán)冷卻后再進(jìn)行劃線，B錯誤；劃線時左手將皿蓋打開一條縫隙，右手于酒精燈火焰旁將接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，在培養(yǎng)基表面迅速劃三至五條平行線，蓋上皿蓋，不可完全打開皿蓋，D錯誤。123456789101112131413.請根據(jù)所學(xué)微生物培養(yǎng)的知識，回答下列問題：(1)在液體培養(yǎng)基中加入____________后制成的固體培養(yǎng)基，是實驗室最常用的培養(yǎng)基。(2)實驗室中常用_________法對培養(yǎng)基及器皿進(jìn)行滅菌。不同培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、_______、______和無機(jī)鹽。(3)培養(yǎng)微生物時，將培養(yǎng)皿倒置的目的是__________________________。實驗結(jié)束后，應(yīng)對使用過的培養(yǎng)基進(jìn)行______處理。瓊脂(凝固劑)濕熱滅菌碳源氮源防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基滅菌123456789101112131414.(2022·全國乙，37)化合物S被廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品和化工工業(yè)。用菌株C可生產(chǎn)S，S的產(chǎn)量與菌株C培養(yǎng)所利用的碳源關(guān)系密切。為此，某小組通過實驗比較不同碳源對菌體生長和S產(chǎn)量的影響，結(jié)果見表。1234567891011121314碳源細(xì)胞干重/(g·L－1)S產(chǎn)量/(g·L－1)葡萄糖3.120.15淀粉0.010.00制糖廢液2.300.18回答下列問題：(1)通常在實驗室培養(yǎng)微生物時，需要對所用的玻璃器皿進(jìn)行滅菌，滅菌的方法有___________________________________(答出2點(diǎn)即可)。1234567891011121314碳源細(xì)胞干重/(g·L－1)S產(chǎn)量/(g·L－1)葡萄糖3.120.15淀粉0.010.00制糖廢液2.300.18干熱滅菌、濕熱滅菌(或高壓蒸汽滅菌)獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染，對所需的玻璃器皿進(jìn)行滅菌，滅菌的方法有干熱滅菌、濕熱滅菌(或高壓蒸汽滅菌)、灼燒滅菌。1