生物化學(xué)分析基本原理和技巧測(cè)試卷

生物化學(xué)分析基本原理和技巧測(cè)試卷姓名_________________________地址_______________________________學(xué)號(hào)______________________密封線1.請(qǐng)首先在試卷的標(biāo)封處填寫(xiě)您的姓名，身份證號(hào)和地址名稱(chēng)。2.請(qǐng)仔細(xì)閱讀各種題目，在規(guī)定的位置填寫(xiě)您的答案。一、單選題1.生物化學(xué)分析中的光譜分析法主要依據(jù)哪種性質(zhì)？

A.物質(zhì)的光吸收性質(zhì)

B.物質(zhì)的熱性質(zhì)

C.物質(zhì)的電導(dǎo)性質(zhì)

D.物質(zhì)的磁性性質(zhì)

2.蛋白質(zhì)電泳分離技術(shù)中，哪一項(xiàng)不是決定分離效果的因素？

A.pH值

B.電場(chǎng)強(qiáng)度

C.染料的種類(lèi)

D.溶液的離子強(qiáng)度

3.在紫外可見(jiàn)光譜法中，哪種波長(zhǎng)范圍用于測(cè)定蛋白質(zhì)的最大吸收峰？

A.200400nm

B.400500nm

C.500600nm

D.260280nm

4.生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中，常用于緩沖溶液制備的物質(zhì)是什么？

A.鹽酸

B.硫酸銨

C.氯化鈉

D.磷酸氫二鈉/磷酸二氫鈉

5.紅外光譜法主要用于檢測(cè)物質(zhì)的哪種官能團(tuán)？

A.酮基

B.醛基

C.羰基

D.酯基

6.色譜分析中，哪一項(xiàng)不是影響分離效果的因素？

A.柱溫

B.檢測(cè)器類(lèi)型

C.柱子長(zhǎng)度

D.溶液的流速

7.生物大分子物質(zhì)的分子量通常用什么方法進(jìn)行測(cè)定？

A.質(zhì)譜法

B.紫外可見(jiàn)光譜法

C.核磁共振法

D.氣相色譜法

8.氨基酸自動(dòng)分析儀的主要原理是？

A.氣相色譜法

B.質(zhì)譜法

C.液相色譜法

D.比色法

9.親和層析中，常用的配基是什么？

A.醋酸纖維

B.活性炭

C.親和樹(shù)脂

D.硅膠

10.比色法中，光吸收強(qiáng)度與溶液中物質(zhì)濃度的關(guān)系遵循哪個(gè)定律？

A.摩爾定律

B.勒夏特列原理

C.雷德伯定律

D.比爾定律

答案及解題思路：

1.答案：A.物質(zhì)的光吸收性質(zhì)

解題思路：光譜分析法是通過(guò)分析物質(zhì)對(duì)光的吸收情況來(lái)鑒定物質(zhì)的，因此依據(jù)的是物質(zhì)的光吸收性質(zhì)。

2.答案：C.染料的種類(lèi)

解題思路：蛋白質(zhì)電泳分離效果主要受pH值、電場(chǎng)強(qiáng)度和溶液離子強(qiáng)度影響，染料的種類(lèi)不影響分離效果。

3.答案：D.260280nm

解題思路：蛋白質(zhì)在紫外可見(jiàn)光譜中最大吸收峰通常在260280nm范圍內(nèi)。

4.答案：D.磷酸氫二鈉/磷酸二氫鈉

解題思路：磷酸鹽常用于制備緩沖溶液，因?yàn)樗鼈兛梢蕴峁┓€(wěn)定的pH環(huán)境。

5.答案：C.羰基

解題思路：紅外光譜法通過(guò)檢測(cè)分子的振動(dòng)來(lái)識(shí)別官能團(tuán)，羰基是典型的可被紅外光譜檢測(cè)的官能團(tuán)。

6.答案：B.檢測(cè)器類(lèi)型

解題思路：色譜分析的分離效果受多種因素影響，但檢測(cè)器類(lèi)型通常不影響分離過(guò)程，而是用于檢測(cè)。

7.答案：A.質(zhì)譜法

解題思路：質(zhì)譜法可以直接測(cè)定分子量，適用于生物大分子物質(zhì)的分子量測(cè)定。

8.答案：C.液相色譜法

解題思路：氨基酸自動(dòng)分析儀通常采用液相色譜法進(jìn)行氨基酸的分離和檢測(cè)。

9.答案：C.親和樹(shù)脂

解題思路：親和層析是利用配基與目標(biāo)分子之間的特異性相互作用來(lái)分離分子，親和樹(shù)脂常用作配基。

10.答案：D.比爾定律

解題思路：比色法中，光吸收強(qiáng)度與溶液中物質(zhì)濃度之間的關(guān)系遵循比爾定律。二、多選題1.以下哪些是生物化學(xué)分析中的定性分析方法？

A.紫外可見(jiàn)光譜法

B.熒光光譜法

C.薄層色譜法（TLC）

D.氣相色譜法（GC）

E.質(zhì)譜法（MS）

2.生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中，哪些溶液可以用來(lái)終止蛋白質(zhì)的電泳過(guò)程？

A.10%三氯乙酸（TCA）

B.50%乙醇

C.5%硫酸銨

D.1M碘乙酸

E.1M氫氧化鈉

3.在電化學(xué)分析法中，哪些電極可以用來(lái)測(cè)定生物分子？

A.工作電極

B.參比電極

C.對(duì)電極

D.鈀電極

E.銀電極

4.以下哪些因素會(huì)影響分光光度法的測(cè)量結(jié)果？

A.溶液的pH值

B.溶液的濃度

C.光的波長(zhǎng)

D.檢測(cè)器的靈敏度

E.溶液的純度

5.在薄層色譜法中，如何選擇合適的展開(kāi)劑？

A.根據(jù)樣品的極性選擇極性展開(kāi)劑

B.根據(jù)樣品的分子量選擇合適的溶劑

C.根據(jù)樣品的沸點(diǎn)選擇合適的溶劑

D.根據(jù)Rf值來(lái)調(diào)整溶劑的極性

E.根據(jù)實(shí)驗(yàn)條件調(diào)整溶劑的比例

6.氨基酸分析中，哪些氨基酸含有紫外吸收基團(tuán)？

A.脯氨酸

B.色氨酸

C.酪氨酸

D.丙氨酸

E.甘氨酸

7.生物化學(xué)分析中，常用的沉淀劑有哪些？

A.硫酸銨

B.醋酸鉛

C.碘化鉀

D.鋇鹽

E.硫酸銅

8.以下哪些因素會(huì)影響氣相色譜法中的峰面積？

A.柱溫

B.檢測(cè)器的靈敏度

C.柱長(zhǎng)

D.進(jìn)樣量

E.柱的線性

答案及解題思路：

1.答案：A,B,C,E

解題思路：定性分析方法通常用于識(shí)別和確認(rèn)化合物，紫外可見(jiàn)光譜法、熒光光譜法、薄層色譜法和質(zhì)譜法都是常用的定性分析方法。

2.答案：A,B,C,D

解題思路：終止蛋白質(zhì)電泳的溶液需要能夠迅速沉淀蛋白質(zhì)，常用的是10%TCA、50%乙醇、5%硫酸銨和1M碘乙酸。

3.答案：A,B,D,E

解題思路：在電化學(xué)分析法中，工作電極、參比電極和檢測(cè)特定生物分子的電極（如銀電極）都是常用的。

4.答案：A,B,C,D,E

解題思路：分光光度法受多種因素影響，包括溶液的pH值、濃度、光波長(zhǎng)、檢測(cè)器靈敏度和溶液純度。

5.答案：A,D,E

解題思路：選擇合適的展開(kāi)劑需考慮樣品的極性、Rf值和溶劑比例，以達(dá)到最佳的分離效果。

6.答案：B,C

解題思路：色氨酸和酪氨酸含有紫外吸收基團(tuán)，而其他氨基酸則不含。

7.答案：A,B,C,D

解題思路：硫酸銨、醋酸鉛、碘化鉀和鋇鹽都是常用的沉淀劑，用于從溶液中沉淀出特定的生物分子。

8.答案：A,B,C,D

解題思路：氣相色譜法中峰面積受柱溫、檢測(cè)器靈敏度、柱長(zhǎng)、進(jìn)樣量和柱的線性等因素的影響。三、判斷題1.光密度（OD）與物質(zhì)的濃度成正比。（√）

解題思路：光密度（OD）是指溶液的吸光度，其與物質(zhì)的濃度在一定濃度范圍內(nèi)成正比關(guān)系，根據(jù)比爾定律（Beer'sLaw），光密度與物質(zhì)的濃度、溶液的厚度以及溶液的摩爾吸光系數(shù)成正比。

2.生物大分子物質(zhì)在電泳過(guò)程中，其遷移速率與其分子量成反比。（√）

解題思路：在電泳過(guò)程中，生物大分子物質(zhì)如蛋白質(zhì)的遷移速率與其分子量成反比。分子量大的蛋白質(zhì)遷移速度較慢，分子量小的遷移速度較快，這是由于分子量的增加導(dǎo)致分子在電場(chǎng)中的遷移阻力增加。

3.親和層析是利用抗原抗體特異性結(jié)合進(jìn)行分離的技術(shù)。（√）

解題思路：親和層析是一種利用生物分子之間的特異性相互作用，如抗原抗體結(jié)合，來(lái)分離混合物中的目標(biāo)分子的層析技術(shù)。

4.在高效液相色譜法中，流動(dòng)相的流速越快，分離效果越好。（×）

解題思路：在高效液相色譜法中，流動(dòng)相的流速會(huì)影響分離效果。流速過(guò)快可能會(huì)導(dǎo)致分離效果下降，因?yàn)榉肿釉谥鶅?nèi)的保留時(shí)間變短，難以充分分離。

5.蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)是其生物活性的決定因素。（×）

解題思路：蛋白質(zhì)的生物活性不僅取決于其一級(jí)結(jié)構(gòu)，還與其二級(jí)、三級(jí)和四級(jí)結(jié)構(gòu)密切相關(guān)。一級(jí)結(jié)構(gòu)只是決定其空間構(gòu)象的基礎(chǔ)。

6.比色法是一種靈敏度高、重現(xiàn)性好的分析方法。（×）

解題思路：雖然比色法是一種常用的分析方法，但它不一定具有很高的靈敏度，且重現(xiàn)性受多種因素影響，因此不能一概而論。

7.氨基酸分析中，色氨酸具有紫外吸收基團(tuán)。（√）

解題思路：在氨基酸分析中，色氨酸含有共軛雙鍵，因此在紫外光區(qū)具有吸收能力，是唯一具有紫外吸收基團(tuán)的氨基酸。

8.在生物化學(xué)分析中，熒光分析法主要用于檢測(cè)熒光物質(zhì)。（√）

解題思路：熒光分析法是一種檢測(cè)具有熒光特性物質(zhì)的常用方法，廣泛用于生物化學(xué)分析中，不僅限于檢測(cè)熒光物質(zhì)本身，也用于研究其與生物大分子的相互作用等。四、填空題1.生物化學(xué)分析中的光譜分析法主要依據(jù)物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)光的選擇性吸收性質(zhì)。

2.蛋白質(zhì)電泳分離技術(shù)中，電壓大小不是決定分離效果的因素。

3.在紫外可見(jiàn)光譜法中，250400納米波長(zhǎng)范圍用于測(cè)定蛋白質(zhì)的最大吸收峰。

4.生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中，終止緩沖液物質(zhì)可以用來(lái)終止蛋白質(zhì)的電泳過(guò)程。

5.紅外光譜法主要用于檢測(cè)物質(zhì)的基團(tuán)振動(dòng)官能團(tuán)。

6.色譜分析中，實(shí)驗(yàn)條件設(shè)置不是影響分離效果的因素。

7.生物大分子物質(zhì)的分子量通常用凝膠滲透色譜法（GPC）方法進(jìn)行測(cè)定。

8.氨基酸自動(dòng)分析儀的主要原理是熒光檢測(cè)法結(jié)合化學(xué)降解法。

答案及解題思路：

答案1：解題思路光譜分析法通過(guò)物質(zhì)對(duì)特定波長(zhǎng)光的吸收，反映出物質(zhì)內(nèi)部的分子結(jié)構(gòu)和組成信息。

答案2：解題思路蛋白質(zhì)電泳分離主要依賴電荷、分子大小和形狀等物理特性，而電壓的大小主要用于啟動(dòng)和維持電場(chǎng)。

答案3：解題思路蛋白質(zhì)在紫外光下的吸收光譜主要集中在260nm左右，該波段可以用于定量分析蛋白質(zhì)濃度。

答案4：解題思路終止緩沖液中的化學(xué)成分能夠穩(wěn)定蛋白質(zhì)，同時(shí)防止進(jìn)一步的電泳分離，保證樣品不擴(kuò)散。

答案5：解題思路紅外光譜分析是通過(guò)測(cè)定分子振動(dòng)來(lái)識(shí)別不同的化學(xué)鍵和官能團(tuán)。

答案6：解題思路色譜分離效果受多種因素影響，包括流動(dòng)相的選擇、柱子特性、流速等，但實(shí)驗(yàn)條件設(shè)置更多是影響實(shí)驗(yàn)操作而非分離本身。

答案7：解題思路生物大分子通常較大，難以通過(guò)質(zhì)譜法進(jìn)行精確測(cè)量，凝膠滲透色譜法則基于分子大小來(lái)分離并測(cè)定分子量。

答案8：解題思路氨基酸分析儀通常將樣品分解成氨基酸，并通過(guò)熒光法測(cè)定各氨基酸的量，結(jié)合化學(xué)降解可以保證氨基酸完全分解。五、簡(jiǎn)答題1.簡(jiǎn)述生物化學(xué)分析中的光譜分析法及其應(yīng)用。

光譜分析法是一種利用物質(zhì)分子或原子的特定波長(zhǎng)電磁輻射與物質(zhì)相互作用的性質(zhì)來(lái)定量或定性分析物質(zhì)的技術(shù)。其應(yīng)用廣泛，包括：

定性分析：通過(guò)分析樣品的光譜特征，可以識(shí)別分子結(jié)構(gòu)或元素組成。

定量分析：根據(jù)光譜信號(hào)的強(qiáng)度，可以計(jì)算出樣品中某一組分的含量。

結(jié)構(gòu)解析：通過(guò)光譜解析，可以確定分子結(jié)構(gòu)中的官能團(tuán)、鍵的類(lèi)型等。

2.簡(jiǎn)述生物化學(xué)分析中的電泳技術(shù)及其原理。

電泳技術(shù)是一種利用電場(chǎng)力將帶電粒子在溶液中移動(dòng)，從而分離混合物中不同帶電粒子的一種方法。其原理

電場(chǎng)力：當(dāng)電場(chǎng)作用于帶電粒子時(shí)，粒子將受到電場(chǎng)力的作用。

粒子遷移：在電場(chǎng)力的作用下，帶電粒子將沿著電場(chǎng)方向移動(dòng)。

分離：不同帶電粒子由于電荷、質(zhì)量、形狀等差異，在電場(chǎng)中遷移速度不同，從而實(shí)現(xiàn)分離。

3.簡(jiǎn)述生物化學(xué)分析中的色譜技術(shù)及其原理。

色譜技術(shù)是一種利用固定相和流動(dòng)相之間的相互作用來(lái)分離混合物中各組分的分析方法。其原理

分子間的相互作用：固定相和流動(dòng)相之間的分子間相互作用力（如吸附、分配、親和力等）導(dǎo)致不同組分在兩相中的移動(dòng)速度不同。

分離：根據(jù)組分在兩相中的遷移速度差異，可以實(shí)現(xiàn)分離。

4.簡(jiǎn)述生物化學(xué)分析中的光譜分析法與色譜法的主要區(qū)別。

光譜分析法與色譜法的主要區(qū)別包括：

基本原理：光譜分析法基于物質(zhì)分子或原子的特定波長(zhǎng)電磁輻射與物質(zhì)相互作用的性質(zhì)；色譜法基于固定相和流動(dòng)相之間的相互作用。

分離機(jī)制：光譜分析法通過(guò)物質(zhì)的特定波長(zhǎng)來(lái)分離物質(zhì)；色譜法通過(guò)組分在固定相和流動(dòng)相中的遷移速度差異來(lái)分離物質(zhì)。

應(yīng)用范圍：光譜分析法適用于定性分析和定量分析；色譜法適用于分離和鑒定復(fù)雜混合物。

5.簡(jiǎn)述生物化學(xué)分析中的熒光分析法及其原理。

熒光分析法是一種基于物質(zhì)在激發(fā)光照射下發(fā)射熒光的特性來(lái)進(jìn)行定性和定量分析的方法。其原理

激發(fā)過(guò)程：物質(zhì)在激發(fā)光照射下吸收能量，電子從基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài)。

發(fā)射過(guò)程：激發(fā)態(tài)的電子在返回基態(tài)的過(guò)程中釋放能量，以光子的形式發(fā)射出來(lái)。

定性和定量分析：通過(guò)測(cè)量發(fā)射光的波長(zhǎng)和強(qiáng)度，可以確定物質(zhì)的種類(lèi)和含量。

答案及解題思路：

1.答案：光譜分析法是一種利用物質(zhì)分子或原子的特定波長(zhǎng)電磁輻射與物質(zhì)相互作用的性質(zhì)來(lái)定量或定性分析物質(zhì)的技術(shù)。應(yīng)用包括定性分析、定量分析和結(jié)構(gòu)解析。

解題思路：光譜分析法基于物質(zhì)與特定波長(zhǎng)電磁輻射的相互作用，通過(guò)分析光譜特征，可以確定物質(zhì)的種類(lèi)、含量和結(jié)構(gòu)。

2.答案：電泳技術(shù)是一種利用電場(chǎng)力將帶電粒子在溶液中移動(dòng)，從而分離混合物中不同帶電粒子的一種方法。其原理基于電場(chǎng)力作用下粒子的遷移。

解題思路：電泳技術(shù)利用電場(chǎng)力使帶電粒子移動(dòng)，根據(jù)粒子遷移速度的差異實(shí)現(xiàn)分離。

3.答案：色譜技術(shù)是一種利用固定相和流動(dòng)相之間的相互作用來(lái)分離混合物中各組分的分析方法。其原理基于分子間的相互作用。

解題思路：色譜技術(shù)通過(guò)固定相和流動(dòng)相之間的相互作用，導(dǎo)致不同組分在兩相中的遷移速度不同，從而實(shí)現(xiàn)分離。

4.答案：光譜分析法與色譜法的主要區(qū)別在于基本原理、分離機(jī)制和應(yīng)用范圍。

解題思路：光譜分析法基于物質(zhì)與特定波長(zhǎng)電磁輻射的相互作用，色譜法基于固定相和流動(dòng)相之間的相互作用，兩者在分離機(jī)制和應(yīng)用范圍上有所不同。

5.答案：熒光分析法是一種基于物質(zhì)在激發(fā)光照射下發(fā)射熒光的特性來(lái)進(jìn)行定性和定量分析的方法。其原理基于激發(fā)過(guò)程和發(fā)射過(guò)程。

解題思路：熒光分析法利用物質(zhì)在激發(fā)光照射下發(fā)射熒光的特性，通過(guò)測(cè)量發(fā)射光的波長(zhǎng)和強(qiáng)度，可以確定物質(zhì)的種類(lèi)和含量。六、計(jì)算題1.已知某種蛋白質(zhì)在特定波長(zhǎng)下的吸光度為0.4，求該蛋白質(zhì)在該波長(zhǎng)下的濃度（假設(shè)摩爾吸光系數(shù)為10000M^1cm^1，光程為1cm）。

2.某一蛋白質(zhì)在SDSPAGE電泳中的遷移速率與其分子量為10^6g/mol時(shí)，遷移率為5cm/s。求該蛋白質(zhì)的分子量。

3.某生物大分子物質(zhì)的分子量為50000g/mol，已知其摩爾消光系數(shù)為