T-CACM 1379-2022 中藥注射劑超濾工藝技術(shù)規(guī)范

中藥注射劑超濾工藝技術(shù)規(guī)范2022-01-11發(fā)布2022-03-11實(shí)施I前言 Ⅲ 1 13術(shù)語和定義 14超濾膜選擇 34.1材質(zhì)選擇 3 34.3溶出物測(cè)試 3 44.5標(biāo)準(zhǔn)水通量測(cè)定 44.6完整性測(cè)試 45超濾前流體性質(zhì)要求 45.1分子量分布 45.2澄清度 45.3黏度 4 4 56超濾工藝參數(shù)選擇 56.1超濾工藝關(guān)鍵參數(shù) 56.2流體預(yù)處理 56.3切割分子量 56.4流速參數(shù) 56.5黏度范圍 56.6溫度范圍 56.7超濾工藝驗(yàn)證 57超濾效果的判定 67.1溶液澄清度 67.2溶液顏色 67.3蛋白質(zhì) 67.4樹脂 67.5鞣質(zhì) 67.6高分子物質(zhì) 67.7細(xì)菌內(nèi)毒素 6 77.9主要成分含量 77.10指紋圖譜 78超濾膜清洗維護(hù) 78.1清洗維護(hù)方法 78.2清洗操作步驟 78.3清洗效果確認(rèn) 88.4保存 88.5廢棄及更換 8附錄A(規(guī)范性)技術(shù)路線示意圖 9附錄B(規(guī)范性)模型溶劑選擇 附錄C(規(guī)范性)標(biāo)準(zhǔn)水通量計(jì)算 附錄D(規(guī)范性)完整性測(cè)試 參考文獻(xiàn) 本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請(qǐng)注意本文件中的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由創(chuàng)新天然藥物與中藥注射劑國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、南京中醫(yī)藥大學(xué)共同提出。本文件由中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)歸口。本文件起草單位：創(chuàng)新天然藥物與中藥注射劑國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、南京中醫(yī)藥大學(xué)、江西青峰藥業(yè)有限公司、上海中醫(yī)藥大學(xué)、暨南大學(xué)、中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所、神威藥業(yè)集團(tuán)有限公司、廣西梧州中恒集團(tuán)股份有限公司、天津天士力之驕藥業(yè)有限公司、山東丹紅制藥有限公司、無錫濟(jì)煜山禾藥業(yè)股份有限公司、麗珠集團(tuán)利民制藥廠、上海凱寶藥業(yè)股份有限公司、華潤(rùn)三九(雅安)藥業(yè)有限公司、安徽華潤(rùn)金蟾藥業(yè)股份有限公司、默克化工技術(shù)(上海)有限公司、杭州科百特過濾器材有限公司。本文件主要起草人：謝寧、彭國平、劉堯奇、張衛(wèi)東、葉文才、劉地發(fā)、鄧雙炳、李存玉、王章偉、姜國志、陳明、李德坤、王臣臣、黃冰峰、王云、朱音、黃文華、劉紹勇、董禮、羅川、王立志、龔玲莉、嚴(yán)永武、王振、方禮、劉芳芳。為貫徹落實(shí)《國務(wù)院關(guān)于加快培育和發(fā)展戰(zhàn)略性新興產(chǎn)業(yè)的決定》等文件指示精神，全面提高中藥注射劑質(zhì)量，更好滿足人民群眾的健康需求，推進(jìn)中藥注射劑產(chǎn)業(yè)鏈標(biāo)準(zhǔn)體系建設(shè)，引領(lǐng)中藥注射劑產(chǎn)業(yè)整體提質(zhì)增效，特編制本文件。中藥注射劑大多由植物藥或動(dòng)物藥提取精制而成，存在蛋白質(zhì)、多糖、鞣質(zhì)等高分子物質(zhì)，高分子物質(zhì)給中藥注射劑帶來過敏反應(yīng)/類過敏反應(yīng)等不良反應(yīng)風(fēng)險(xiǎn)(注：部分小分子物質(zhì)也會(huì)帶來不良反應(yīng)風(fēng)險(xiǎn)，不在本文件技術(shù)范圍),采用溶劑沉淀、萃取技術(shù)、樹脂純化等傳統(tǒng)工藝很難將高分子物質(zhì)徹底去除。國食藥監(jiān)辦[2010]395號(hào)頒布的《中藥注射劑安全性再評(píng)價(jià)生產(chǎn)工藝評(píng)價(jià)技術(shù)原則(試行)》中要求“中藥注射劑生產(chǎn)工藝過程中應(yīng)對(duì)高分子雜質(zhì)進(jìn)行控制”,并對(duì)超濾工藝方法去除注射劑中高分子雜質(zhì)明確了基本技術(shù)要求。超濾技術(shù)自20世紀(jì)80年代以來越來越多地應(yīng)用于中藥注射劑的生產(chǎn)，對(duì)中藥注射劑高分子物質(zhì)、熱原或細(xì)菌內(nèi)毒素、可見異物等安全性質(zhì)量控制起到了關(guān)鍵作用，顯示出獨(dú)特的技術(shù)優(yōu)勢(shì)。但是超濾工藝基礎(chǔ)研究薄弱，沒有統(tǒng)一的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)與超濾工藝技術(shù)規(guī)范，指導(dǎo)行業(yè)的推廣應(yīng)用。本文件規(guī)定了超濾工藝中超濾膜的選擇、超濾工藝參數(shù)選擇、超濾膜的清洗及維護(hù)等關(guān)鍵工藝參數(shù)，并結(jié)合中藥注射劑關(guān)鍵質(zhì)量控制項(xiàng)(澄清度、溶液顏色、樹脂、鞣質(zhì)、高分子物質(zhì)、熱原或細(xì)菌內(nèi)毒素、主要成分含量、指紋圖譜)規(guī)范超濾效果判定，為超濾技術(shù)在中藥注射劑領(lǐng)域的應(yīng)用提供技術(shù)規(guī)范。1本文件界定了超濾法制備中藥注射劑工藝過程中的術(shù)語和定義，規(guī)定了超濾膜選擇、超濾前流體本文件適用于科研單位、藥品生產(chǎn)及研發(fā)企業(yè)、設(shè)備制造企業(yè)，采用超濾技術(shù)去除中藥注射劑中下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注明日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)GB/T20103—2006膜分離技術(shù)術(shù)語中華人民共和國藥典(2020年版二部)中華人民共和國藥典(2020年版四部)中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)(2012版)GB/T20103—2006界定2溶質(zhì)在超濾膜中達(dá)到吸附平衡時(shí)，根據(jù)溶液中溶質(zhì)濃度變化，按公式(1)計(jì)算吸附率：A=(Co-C')/Co×100%………C'——平衡液中溶質(zhì)濃度。溶質(zhì)在超濾膜中達(dá)到吸附平衡時(shí)，根據(jù)溶液中溶質(zhì)在超濾起始階段、中間階段、結(jié)束階段成分濃度變化，按公式(2)計(jì)算透過率：T=(C1濾液/C?+C2濾液/C?+C3濾液/C?)/3分離過程中，料液中的溶液在壓力驅(qū)動(dòng)下透過膜，溶質(zhì)(離子或不同分子量溶質(zhì))被截留，在膜與本體溶液界面或臨近膜界面區(qū)域濃度越來越高；在濃度梯度作用下，溶質(zhì)又會(huì)由膜面向本體溶液擴(kuò)注1:減少濃差極化的方法有粗濾或離心。注2:超濾的濃差極化會(huì)影響成分透過率的準(zhǔn)確性，在測(cè)定膜分子量及成分透過率時(shí)，操作上應(yīng)盡量避免濃差極化影響。在單位面積、單位時(shí)間、單位跨膜壓力(TransmembranePressure,TMP)在標(biāo)準(zhǔn)溫度下水通過膜注：?jiǎn)挝粸樯科椒矫酌啃r(shí)每巴(L/m2/h/bar)。3因膜或組件的產(chǎn)水量隨水溫度變化而變化，為把不同溫度下的產(chǎn)水量校正到以25℃為基礎(chǔ)的標(biāo)稱等)的超濾膜，超濾膜材質(zhì)包括但不限于聚砜(PS)、聚醚砜(PES)、改性聚醚砜(mPES)、聚偏氟乙用的超濾膜應(yīng)對(duì)中藥注射劑主要成分無顯著影響，對(duì)主要成分的吸附率應(yīng)小于10%。技術(shù)路線示意圖見附錄A。按照GB/T32360—2015超濾膜測(cè)試方法，如：聚乙二醇法、卵清蛋白法、牛血清白蛋白法或葡聚4.3溶出物測(cè)試根據(jù)待超濾流體溶液的乙醇濃度及pH值，選擇合適的模型溶劑(見附錄B),按第4章4.3.2的方件下靜態(tài)提取至少24h;e)當(dāng)提取完全時(shí)，超濾膜包內(nèi)的提取溶液再循環(huán)約5min,以確保提取溶液的均一性；按照《中華人民共和國藥典》2020年版二部純化水的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，檢測(cè)提取溶液的不揮發(fā)物。按照《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則“0682制藥用水中總有機(jī)碳測(cè)定法”,檢測(cè)提取4參照《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則“0402紅外分光光度法”,檢測(cè)提取溶液。參照《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則“0512高效液相色譜法”,檢測(cè)提取溶液。4.4.1溶出物超濾膜在待超濾流體溶液環(huán)境中，按照第4章4.3.3的方法進(jìn)行檢測(cè)，不得檢出超濾膜組成材料根據(jù)各品種含量測(cè)定的方法進(jìn)行檢測(cè)，超濾膜對(duì)中藥注射劑主要成分吸附率應(yīng)小于10%。按照附錄C的方法測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)水通量。初次清洗后的標(biāo)準(zhǔn)水通量記為NWP?,第n次清洗后的標(biāo)準(zhǔn)水按照附錄D的方法，對(duì)超濾膜的完整性進(jìn)行測(cè)試，應(yīng)完整。參照《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則“0514分子排阻色譜法”,對(duì)超濾前的流體進(jìn)行參照《中華人民共和國藥典》2020年版四部“0902澄清度檢查法”(第一法),對(duì)超濾前的流體進(jìn)行檢測(cè)，應(yīng)不超過3號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液的濁度。參照《中華人民共和國藥典》2020年版四部“0633黏度測(cè)定法”,對(duì)超濾前的流體進(jìn)行檢測(cè)，黏超濾前流體pH值應(yīng)在超濾膜耐受的范圍內(nèi)，耐受范圍應(yīng)參照超濾膜的使用說明書。5超濾膜耐受溫度一般在4℃~50℃,流體在不同溫度下應(yīng)無明顯渾濁，若有明顯渾濁應(yīng)按照第6章6.2進(jìn)行預(yù)處理。超濾工藝關(guān)鍵參數(shù)應(yīng)包括(但不限于)超濾膜的切割分子量、流速、流體的黏度、溫度、跨膜壓力等。應(yīng)根據(jù)具體品種選擇性對(duì)比超濾前后流體的蛋白質(zhì)、樹脂、鞣質(zhì)、高分子物質(zhì)、熱原、細(xì)菌內(nèi)預(yù)處理方法包括過濾、水提醇沉、醇提水沉、高速離心等。預(yù)處理后流體澄清度應(yīng)達(dá)到的標(biāo)準(zhǔn)見第5章5.2。根據(jù)第5章5.1測(cè)定的流體分子量分布情況，選取超濾膜孔徑一般應(yīng)為擬去除物質(zhì)最小分子量的1/5～1/3;選取一定的流速、跨膜壓力、溫度及黏度的條件下進(jìn)行預(yù)超濾，參照附錄C的方法計(jì)算單位面積、單位時(shí)間下流體的通量；按照第7章中7.6、7.9及7.10檢測(cè)超濾前流體、回流液及透過液，考察高分子物質(zhì)去除情況、主要成分截留情況及指紋圖譜相似度情況，選取適宜切割分子量的膜進(jìn)行根據(jù)待超濾流體的批量及超濾時(shí)間，并結(jié)合超濾膜推薦的進(jìn)液流速，選擇合適的初始流速，調(diào)節(jié)回流閥和透過液閥門，參照附錄C的方法計(jì)算單位面積、單位時(shí)間下流體的通量，確定合適的流速、根據(jù)上述確定流速、跨膜壓力參數(shù)，對(duì)不同黏度的流體進(jìn)行考量，參照《中華人民共和國藥典》2020年版四部“0633黏度測(cè)定法”對(duì)超濾前的流體進(jìn)行檢測(cè)，記錄透過液流量、壓力等參數(shù)，計(jì)算單根據(jù)上述確定的工藝參數(shù)，推薦采用中試以上批量，對(duì)流體的預(yù)處理、切割分子量、流速、黏度及溫度等關(guān)鍵工藝參數(shù)進(jìn)行三批驗(yàn)證，確認(rèn)超濾工藝穩(wěn)定性及超濾后流體的質(zhì)量情況。超濾工藝參數(shù)6T/CACM13應(yīng)穩(wěn)定可控，超濾后流體的質(zhì)量應(yīng)穩(wěn)定均一，應(yīng)滿足第7章超濾效果的判定標(biāo)準(zhǔn)。參照《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則“0902澄清度檢查法(第一法)”進(jìn)行檢測(cè)，超濾后流體應(yīng)不超過2號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液的濁度。除另有規(guī)定外，參照《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則“0901溶液顏色檢查法(第一法)”除另有規(guī)定外，參照《中華人民共和國藥典》2020年版四部“2400注射劑有關(guān)物質(zhì)檢查法”進(jìn)行除另有規(guī)定外，參照《中華人民共和國藥典》2020年版四部“2400注射劑有關(guān)物質(zhì)檢查法”進(jìn)行除另有規(guī)定外，參照《中華人民共和國藥典》2020年版四部“2400注射劑有關(guān)物質(zhì)檢查法”進(jìn)行除另有規(guī)定外，參照《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則“0514分子排阻色譜法”下測(cè)定法(3)高分子雜質(zhì)測(cè)定法③限量法，需進(jìn)行相應(yīng)方法學(xué)驗(yàn)證。推薦測(cè)定方法如下：以凝膠為填充劑(TSKG2000SWx1凝膠色譜柱，7.8mm×300mm,5μm);以乙腈-0.03%三氟乙酸溶液(30:70)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為214nm。采用生長(zhǎng)抑素作為對(duì)照品，分子量為1638;在凝膠色譜柱上，理論上分子量越大保留時(shí)間越小。除另有規(guī)定外，不應(yīng)在生長(zhǎng)抑素峰之前檢出分子量大于超濾后流體每1mL含細(xì)菌內(nèi)毒素的量不應(yīng)大于0.50EU或單次給藥劑量含細(xì)菌內(nèi)毒素應(yīng)不得大于257細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法如不適用，除另有規(guī)定外，參照《中華人民共和國藥典》2020年版四部“1142根據(jù)各品種項(xiàng)下的含量測(cè)定方法進(jìn)行檢測(cè)，超濾后流體主要成分含量應(yīng)不低于超濾前流體主要成分含量的90%。除另有規(guī)定外，根據(jù)各品種項(xiàng)下指紋圖譜的檢測(cè)方法進(jìn)行測(cè)定，采用國家藥典委員會(huì)發(fā)布的《中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)》(2012版),以超濾前流體的指紋圖譜為對(duì)照?qǐng)D譜，超濾后流體的指紋圖譜相似度應(yīng)不低于0.90,各主成分峰面積的相應(yīng)比值應(yīng)不低于0.90。先用純化水或注射用水進(jìn)行沖洗，關(guān)閉透過端閥門，完全開放回流端閥門，循環(huán)清洗至符合第8章8.3的要求；如無效，達(dá)不到第4章4.5標(biāo)準(zhǔn)水通量的要求時(shí)，可參照表1推薦清洗試劑進(jìn)行清洗。清洗用的純化水或注射用水應(yīng)符合《中華人民共和國藥典》2020年版二部純化水或注射用水的質(zhì)污染物質(zhì)1%以下0.1N5000mg/L以下a)按照第8章8.1先用純化水或注射用水沖洗整個(gè)超濾系統(tǒng)，清洗時(shí)間一般為15min～60min,溫度不宜超過50℃,再用清洗試劑進(jìn)行清洗，具體品種的清洗時(shí)間、次數(shù)、溫度及清洗試劑b)測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)水通量，若達(dá)到第4章4.5的要求，則可按照第8章8.4的方法進(jìn)行保存；c)若標(biāo)準(zhǔn)水通量未達(dá)到第4章4.5的要求，則需更換清洗試劑進(jìn)行清洗；e)再次測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)水通量，若達(dá)到第4章4.5的要求，則可按照第8章8.4的方法進(jìn)行保存。8按照第4章4.5測(cè)定超濾膜清洗后的標(biāo)準(zhǔn)水通量值，應(yīng)符合要求。8.3.2完整性確認(rèn)按照第4章4.6選擇合適的方法測(cè)定超濾膜的完整性，應(yīng)符合要求。除另有規(guī)定外，參照《中華人民共和國藥典》2020年版四部“0682制藥用水中總有機(jī)碳測(cè)定法”,取清洗后回流端和透過端的水檢測(cè)總有機(jī)碳，推薦應(yīng)不大于0.5mg/mL。除另有規(guī)定外，參照《中華人民共和國藥典》2020年版四部“0681制藥用水電導(dǎo)率測(cè)定法”,取清洗后回流端和透過端的水檢測(cè)電導(dǎo)率，宜符合純化水或注射用水的限度值。8.3.5其他項(xiàng)目確認(rèn)應(yīng)根據(jù)選用的不同清洗試劑，建立相應(yīng)的方法，規(guī)定其殘留限度值。其他項(xiàng)目根據(jù)不同品種而定，但應(yīng)進(jìn)行方法學(xué)研究。超濾膜長(zhǎng)時(shí)間不用或在生產(chǎn)間隙期間的保存，選擇超濾膜可耐受的保存試劑見表2,浸泡在保存試劑溶液中，推薦在2℃~18℃(但注意不能結(jié)冰)進(jìn)行保存。表2保存試劑0.1N6個(gè)月0.1N26個(gè)月2個(gè)月8.5廢棄及更換按照第8章8.2的清洗操作步驟進(jìn)行清洗，若標(biāo)準(zhǔn)水通量及完整性達(dá)不到第4章4.5及4.6條的要求，應(yīng)更換新的超濾膜。9(規(guī)范性)技術(shù)路線示意圖技術(shù)路線示意圖見圖A.1。材質(zhì)、切割分子量、溶出物、兼容性、標(biāo)準(zhǔn)水通量、完整性澄清度高分子物質(zhì)、主要成分、指紋圖譜不同流速不同粘度不同溫度預(yù)處理、切割分子量、流速、黏度及溫度溶液澄清度、顏色，等吸附率、生物毒性、溶出物小于等于3號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液的濁度去除情況、截留情況、相似度工藝參數(shù)應(yīng)穩(wěn)定可控、質(zhì)量應(yīng)穩(wěn)定均一小于等于2號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液的濁度、色差應(yīng)不超過±2說明：—判定——主要指標(biāo)圖A.1技術(shù)路線示意圖(規(guī)范性)模型溶劑選擇見表B.1。表B.1模型溶劑選擇鹽酸或氫氧化鈉調(diào)pH=6.0～8.0的注：水：為純化水或注射用水；乙醇：達(dá)到分析級(jí)以上要求；鹽酸：達(dá)到分析級(jí)以上要求；(規(guī)范性)標(biāo)準(zhǔn)水通量的計(jì)算見公式(C.1)。NWP=R×TCF/A/TMP……TCF——溫度校正系數(shù)(通常以25℃為標(biāo)準(zhǔn)溫度，溫度校準(zhǔn)系數(shù)為1)見表C.1;其中TMP的計(jì)算見公式(C.2)。TMP=(Pin+Pout)/2-P…………………P?！高^端壓力，單位為巴(bar)(如果透過端完全開放，則為0bar)。表C.1溫度校正系數(shù)TCF(以25℃為基準(zhǔn))表C.1溫度校正系數(shù)TCF(以25℃為基準(zhǔn))(續(xù))98765b)新超濾膜第1次使用之后且按照清洗規(guī)程完成清洗后測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)水通量值。c)新超濾膜前2次至4次使用之后且按照清洗規(guī)程完成清洗后測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)水通量值的平均值。超濾膜第n次清洗后測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)水通量記為NWPn,應(yīng)當(dāng)與上一次清洗后測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)水通量記為NWP.應(yīng)為NWP-1的80%～120%,若低于80%,清洗效果未達(dá)到要求，需進(jìn)一步處理；若超過120%,NWP,應(yīng)為NWP?的50%以上，若NWP.低于NWP的50%,則推薦更換超濾膜。 (規(guī)范性)完整性測(cè)試D.1完整性測(cè)試方法D.1.1擴(kuò)散空氣流法可在跨膜壓力在2.1bar(30psi)條件下用水循環(huán)