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ICS65.020CCSB1522吉林省地方標(biāo)準(zhǔn)DB22/T3315—2021利用共寄生繁育赤眼蜂生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程CodeofpracticeforTrichogrammabreedingbySymparasitism吉林省市場監(jiān)督管理廳??發(fā)布DB22/T3315—2021前言本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由吉林省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并歸口。本文件起草單位:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)(農(nóng)業(yè)現(xiàn)代化綜合技術(shù)研究所)。本文件主要起草人:張雪、張俊杰、杜文梅、阮長春。IDB22/T3315—2021利用共寄生繁育赤眼蜂生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程1范圍本文件確立了利用柞蠶卵共寄生繁育螟黃赤眼蜂和松毛蟲赤眼蜂的工藝流程,規(guī)定了生產(chǎn)計劃、工廠化生產(chǎn)等階段的操作指示,描述了過程記錄等追溯方法。本文件適用于工廠化生產(chǎn)共寄生赤眼蜂。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中,注日期的引用文件,僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。本文件沒有規(guī)范性引用文件。3術(shù)語和定義以柞蠶卵為中間寄主,將螟黃赤眼蜂和松毛蟲赤眼蜂同時寄生在一粒柞蠶卵內(nèi)的寄生方式。利用共寄生繁育赤眼蜂生產(chǎn)分為2個階段,準(zhǔn)備工作階段分為6個步驟,工廠化生產(chǎn)階段分為7個步驟。程序流程圖如圖1所示。每年的11月~12月份,根據(jù)蟲情預(yù)測預(yù)報信息和實際情況,及時調(diào)整,主要內(nèi)容包括:1DB22/T3315—2021a)所需廠房、設(shè)備;b)蜂種、蠶繭等生產(chǎn)資料;c)用工數(shù)量和時間;d)組織生產(chǎn)及應(yīng)急保障措施。5.2廠房及規(guī)模按照150億頭共寄生赤眼蜂生產(chǎn)規(guī)模應(yīng)包括:a)蜂種繁育室不低于40m;2b)暖繭車間不低于300m;2c)采卵室不低于50md)洗卵室不低于20me)消毒室不低于10mf)接種室不低于10m2;2;2;2;g)暗室不低于60m;2h)發(fā)育室不低于50m2;i)保鮮冷藏室不低于100m;2j)物品保存庫不低于20m2。5.3設(shè)備藥品保存箱、攪拌器、脫水機、烘干機、柞蠶卵色選機、空調(diào)、排風(fēng)機、點暖氣、加濕器、溫濕度自控儀、電腦機打印機、發(fā)育盤架、手推運輸車。在靶標(biāo)害蟲產(chǎn)卵季節(jié),于不同生境廣泛采集被赤眼蜂寄生的靶標(biāo)害蟲卵,并做好標(biāo)記,經(jīng)室內(nèi)培養(yǎng),篩選出寄生率高、適應(yīng)性強的蜂種。a)在規(guī)格10mm×70mm試管中投放米蛾卵200粒,再放入單頭雌蜂,用棉球或紗布封口后置b)發(fā)育條件:光照16h,(25±1)℃、RH(75±5)%;黑暗8h,(20±1)℃、RH(75±5)%;2DB22/T3315—2021c)將確定的螟黃赤眼蜂和松毛蟲赤眼蜂分別合并,繼續(xù)繁殖。5.5.4蜂種保存純化的蜂種,經(jīng)3代~5代篩選繁殖,建立實驗種群后按下列方法保存:a)將發(fā)育到幼蟲中期的蜂種,置入12℃、RH(75±5)%的條件下,誘導(dǎo)滯育30d;b)置入(3±1)℃、RH(75±5)%的條件下,進行解除滯育60d~90d;c)經(jīng)10℃2d、15℃1d過渡后,按5.5.3b)變溫發(fā)育至出蜂。5.6柞蠶繭準(zhǔn)備5.6.1備繭5.6.1.1備繭時期在生產(chǎn)前1年的11月~12月份開始按預(yù)定計劃備繭。5.6.1.2繭質(zhì)量繭質(zhì)量要求如下:a)健康雌繭率≥90%;b)雄繭率≤7%;c)死傷繭率≤3%;d)割口繭率≤8%;5.6.1.3備繭數(shù)量c)將繁蜂工具等置于繁蜂車間內(nèi),用毒消散或硫磺等熏蒸消毒。保持室溫24℃以上,RH75%以上,時間24h。3DB22/T3315—20216.2種蜂準(zhǔn)備6.2.1種蜂復(fù)壯根據(jù)生產(chǎn)計劃,定期對螟黃赤眼蜂和松毛蟲赤眼蜂種蜂以米蛾卵和柞蠶卵交替繁育復(fù)壯:a)螟黃赤眼蜂:1)接蜂比例:米蛾卵蜂卵比未1:80,柞蠶卵蜂卵比為1:1;2)接蜂時間:1d~2d;3)發(fā)育條件:同5.5.3b);4)復(fù)壯周期:30d~40d。b)松毛蟲赤眼蜂:1)接蜂比例:米蛾卵蜂卵比未1:200,柞蠶卵蜂卵比為1:1;2)接蜂時間:1d~2d;3)發(fā)育條件:同5.5.3b);4)復(fù)壯周期:30d~40d。6.2.2種蜂擴繁以柞蠶卵為中間寄主,將種蜂擴繁2代~3代:a)接蜂比例:螟黃赤眼蜂為1:25,松毛蟲赤眼蜂為1:30(種蜂寄生柞蠶卵:新鮮柞蠶卵);b)接蜂時間:1d;在柞蠶蛾羽化期內(nèi),隨時采收杠羽化(展翅前)雄蛾,避免交尾,次日清晨人工收雌蛾,用于當(dāng)天繁蜂或儲存在(3±1)℃的冷庫中備用。用人工方法將柞蠶雌蛾腹部與頭胸部分離,剖腹取卵。6.3.4洗卵及消毒4DB22/T3315—2021消毒后的新鮮卵用紗網(wǎng)袋裝好,用脫水機進行初步脫水,然后用烘干機烘干,溫度不超過25℃~28℃。6.3.6清除綠卵烘干的新鮮卵用色選機等專用設(shè)備清除綠卵后,再用于接蜂,綠卵率≤4%。6.4接蜂6.4.1比例松毛蟲赤眼蜂寄生卵、螟黃赤眼蜂寄生卵、新鮮柞蠶卵比例為3:7:210。6.4.2時間當(dāng)種蜂羽化率達到25%~30%時,將兩種赤眼蜂種蜂卵均勻撒在接蜂盤中,鋪上2mm孔徑的紗網(wǎng),再將定量的新鮮柞蠶卵平鋪到紗網(wǎng)上,送入(25±1)℃、RH(75±5)%的暗室內(nèi)產(chǎn)卵寄生,接蜂48h后,去除種蜂,標(biāo)明日期送入發(fā)育室。6.5培養(yǎng)發(fā)育在(25±1)℃、RH(75±5)%條件下繼續(xù)發(fā)育24h至幼蟲后期。6.6寄生卵冷藏將發(fā)育至幼蟲后期的螟黃赤眼蜂和松毛蟲赤眼蜂的共寄生卵,平鋪到卵盤中置于冷庫內(nèi)貨架上a)鋪卵厚度3mm~4mm;b)冷藏溫度(3±1)℃、RH(75±5)%,全黑暗;c)冷藏時間不應(yīng)超過24d。將精選后的寄生卵,置于發(fā)育室按5.5.3b)變溫發(fā)育至蛹后期。根據(jù)田間放蜂時間,必要時再按6.6的方法冷藏,冷藏時間不應(yīng)超過3d。5DB22/T3315—2021建立共寄生繁育松毛蟲赤眼蜂和螟黃赤眼蜂工廠化生產(chǎn)檔案,對整個生產(chǎn)過程進行詳實記錄,保存2年以上,做到可追溯,記錄并保持一下內(nèi)容:a)執(zhí)行各個階段程序的人員姓名;b)執(zhí)行各個階段程序的時間;c)執(zhí)行各個階段程序的地點;d)執(zhí)行的具體操作內(nèi)容;e)記錄執(zhí)行的結(jié)果或觀察到的現(xiàn)象;f)其它。6DB22/T3315—2021附錄A(資料性)螟黃赤眼蜂及松毛蟲赤眼蜂形態(tài)學(xué)鑒定方法A.1制作鑒定撥片及觀察測量將用濃度75%~95%酒精浸泡的雄性赤眼蜂標(biāo)本按下列方法制作為玻片:a)在5%的KOH溶液中浸泡8h~15h,并用水清洗干凈,置于載玻片上;b)在解剖鏡下,用昆蟲針挑取雄蜂的外生殖器,清除其他組織,蓋好蓋玻片;c)在顯微鏡下觀察并測量陽基背突、腹中突及D值。A.2鑒定a)螟黃赤眼蜂在顯微鏡下觀察赤眼蜂雄性
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