體外皮膚變態(tài)反應(yīng)ARE-Nrf2熒光素酶LuSens試驗(yàn)方法；化妝品中鋰等43種元素的檢驗(yàn)方法

附件6體外皮膚變態(tài)反應(yīng)ARE-Nrf2熒光素酶LuSens試驗(yàn)方法InChemicoSkinSensitisationTheARE-Nrf2LuciferaseLuSensTest1范圍本方法規(guī)定了體外皮膚變態(tài)反應(yīng)ARE-Nrf2熒光素酶LuSens試驗(yàn)的基本原理、試驗(yàn)方法和技術(shù)要求。本方法適用于化妝品用化學(xué)原料潛在致敏性的評(píng)價(jià)。2試驗(yàn)?zāi)康谋驹囼?yàn)通過(guò)檢測(cè)體外培養(yǎng)的LuSens細(xì)胞熒光素酶的表達(dá)變化，以評(píng)價(jià)受試物引起皮膚變態(tài)反應(yīng)的可能性。3定義3.175%細(xì)胞存活率濃度值theestimatedconcentrationresultingin75%cellviability（CV75）受試物染毒后，細(xì)胞存活率為75%時(shí)對(duì)應(yīng)的受試物濃度值。3.2抗氧化反應(yīng)元件antioxidantresponseelement（ARE）存在于細(xì)胞保護(hù)基因的啟動(dòng)子區(qū)域，能夠響應(yīng)氧化應(yīng)激并調(diào)控相關(guān)基因表達(dá)的作用元件。3.3熒光素酶活性誘導(dǎo)倍數(shù)foldluciferaseactivityinduction（FoldInduction）扣除空白對(duì)照后，受試物和溶劑對(duì)照的細(xì)胞發(fā)光比值。4試驗(yàn)的基本原理致敏物質(zhì)接觸皮膚后，角質(zhì)形成細(xì)胞被激活，誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)及特定細(xì)胞信號(hào)通路相關(guān)基因的表達(dá)。體外培養(yǎng)含有熒光素酶報(bào)告基因的人角質(zhì)形成細(xì)胞（LuSens細(xì)胞），暴露于受試物，通過(guò)計(jì)算細(xì)胞相對(duì)存活率和熒光素酶活性，從而預(yù)測(cè)受試物是否具有皮膚致敏性。5試驗(yàn)材料與試劑5.1細(xì)胞含有ARE熒光素酶報(bào)告基因的人角質(zhì)形成細(xì)胞株（LuSens細(xì)胞株）。5.2培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)液1：DMEM培養(yǎng)液中加入10%胎牛血清，1%抗生素，0.005%的嘌呤霉素鹽酸鹽。細(xì)胞培養(yǎng)液2：DMEM培養(yǎng)液中加入10%胎牛血清。細(xì)胞培養(yǎng)液3：DMEM培養(yǎng)液中加入1%胎牛血清。5.3噻唑藍(lán)（MTT）檢測(cè)液稱(chēng)取MTT適量，加入不含鈣鎂的磷酸鹽緩沖液（Phosphate-BufferedSaline，PBS），溶解并稀釋至5mg/mL的溶液，作為儲(chǔ)存液。工作液：取9mL細(xì)胞培養(yǎng)液3加入1mLMTT儲(chǔ)備液，臨用現(xiàn)配。5.4細(xì)胞裂解液十二烷基硫酸鈉（SDS）10g二甲基亞砜（DMSO）99.6mL冰醋酸（100%）0.4mL6試驗(yàn)方法6.1細(xì)胞培養(yǎng)LuSens細(xì)胞使用細(xì)胞培養(yǎng)液1，于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，倒置顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞狀態(tài)。細(xì)胞達(dá)80%~90%融合時(shí)可用于測(cè)試，傳代次數(shù)不超過(guò)15代。6.2受試物處理6.2.1溶劑：二甲基亞砜（DMSO）和細(xì)胞培養(yǎng)液3。6.2.2細(xì)胞毒性預(yù)試驗(yàn)受試物儲(chǔ)備液：采用DMSO為溶劑配制受試物儲(chǔ)備液，最大濃度為200mM，不同劑量間比值為2，一般設(shè)12個(gè)濃度。受試物工作液：采用細(xì)胞培養(yǎng)液3將儲(chǔ)備液稀釋100倍，最終測(cè)試濃度分別為0.976、1.953、3.906、7.812、15.625、31.25、62.5、125、250、500、1000、2000μM。若不能得到CV75值，則重復(fù)試驗(yàn)降低最大濃度，直到得到CV75值。若2000μM濃度時(shí)仍未觀(guān)察到細(xì)胞毒性，則正式試驗(yàn)中使用2000μM為最大濃度。6.2.3正式試驗(yàn)受試物儲(chǔ)備液：根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，用DMSO為溶劑配制受試物儲(chǔ)備液，最大濃度為1.2×CV75（或2000μM），不同劑量間比值為1.2，共設(shè)6個(gè)濃度。受試物工作液：采用細(xì)胞培養(yǎng)3將儲(chǔ)備液稀釋100倍，最終測(cè)試濃度分別為CV75/2.074、CV75/1.728、CV75/1.44、CV75/1.2、CV75、CV75×1.2μM。6.3陽(yáng)性對(duì)照溶液配制試驗(yàn)前一天，用DMSO配制12mM陽(yáng)性對(duì)照物乙二醇二甲基丙烯酸酯（EGDMA）的儲(chǔ)存液，試驗(yàn)時(shí)用細(xì)胞培養(yǎng)液3稀釋至檢測(cè)濃度為120μM。6.4陰性對(duì)照溶液配制試驗(yàn)前一天，用DMSO配制500mM陰性對(duì)照物DL-乳酸的儲(chǔ)存液，試驗(yàn)時(shí)用細(xì)胞培養(yǎng)液3稀釋至檢測(cè)濃度為5mM。6.5試驗(yàn)步驟6.5.1細(xì)胞毒性預(yù)試驗(yàn)6.5.1.1細(xì)胞接種細(xì)胞生長(zhǎng)至80%～90%融合后，棄去培養(yǎng)基，用適量PBS洗2遍，胰酶-EDTA消化后加入適量細(xì)胞培養(yǎng)液2，收集細(xì)胞于離心管中，800～1000轉(zhuǎn)/分鐘離心5min，棄上清液后用細(xì)胞培養(yǎng)液2重懸，調(diào)整細(xì)胞濃度為8.3×104個(gè)/mL。96孔板中每孔加入120μL細(xì)胞懸液，37℃，5%CO2繼續(xù)培養(yǎng)24h。6.5.1.2受試物染毒試驗(yàn)設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照組、陰性對(duì)照組、受試物組、溶劑對(duì)照組、空白對(duì)照組（只加細(xì)胞培養(yǎng)液3），每組至少3個(gè)重復(fù)孔。將細(xì)胞培養(yǎng)板從培養(yǎng)箱中取出，去除培養(yǎng)基，每孔預(yù)先加入150μL細(xì)胞培養(yǎng)液3，再依次加入50μL受試物或?qū)φ杖芤海?7℃、5%CO2繼續(xù)培養(yǎng)48h。6.5.1.3MTT孵育染毒結(jié)束后，去除細(xì)胞培養(yǎng)液，每孔加入200μLMTT工作液，37℃、5%CO2孵育2h。6.5.1.4MTT檢測(cè)孵育結(jié)束后，去除MTT工作液，每孔加入100μL細(xì)胞裂解液，震搖5min，采用酶標(biāo)儀檢測(cè)，吸收波長(zhǎng)為570nm，參考波長(zhǎng)為690nm。6.5.1.5細(xì)胞存活率（CV75）計(jì)算由得到的吸光度值，計(jì)算與溶劑對(duì)照相比細(xì)胞存活率為75%的受試物濃度。計(jì)算方法如下：選擇兩個(gè)連續(xù)濃度，一個(gè)細(xì)胞存活率大于75%，一個(gè)細(xì)胞存活率低于75%，則CV75=（Cb?Ca）Ca（μM）：細(xì)胞存活率高于75%的最大受試物測(cè)試濃度Cb（μM）：細(xì)胞存活率低于75%的最小受試物測(cè)試濃度Va：Ca對(duì)應(yīng)的細(xì)胞存活率Vb：Cb對(duì)應(yīng)的細(xì)胞存活率6.5.2正式試驗(yàn)6.5.2.1細(xì)胞接種細(xì)胞生長(zhǎng)至80～90%融合后，棄去培養(yǎng)基，用適量PBS洗2遍，胰酶-EDTA消化細(xì)胞后加入適量細(xì)胞培養(yǎng)液2，收集細(xì)胞于離心管中，800～1000轉(zhuǎn)/分鐘離心5min，棄上清液后用細(xì)胞培養(yǎng)液2重懸調(diào)整細(xì)胞濃度為8.3×104個(gè)/mL。正式試驗(yàn)中，每個(gè)受試物使用一個(gè)平底透明的96孔板（用于MTT檢測(cè)），一個(gè)白色不透明的96孔板（用于LuSens檢測(cè)），96孔板中每孔加入120μL細(xì)胞懸液，37℃、5%CO2繼續(xù)培養(yǎng)24h。6.5.2.2受試物染毒試驗(yàn)設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照組、陰性對(duì)照組、受試物組、溶劑對(duì)照組、空白對(duì)照組（只加細(xì)胞培養(yǎng)液3），每組至少3個(gè)重復(fù)孔。將細(xì)胞培養(yǎng)板從培養(yǎng)箱中取出，去除培養(yǎng)基，每孔預(yù)先加入150μL細(xì)胞培養(yǎng)液3，再依次加入50μL受試物或?qū)φ杖芤海?7℃、5%CO2繼續(xù)培養(yǎng)48h。6.5.2.3MTT孵育染毒結(jié)束后，透明96孔板中去除培養(yǎng)基，每孔加入200μLMTT工作液，37℃、5%CO2孵育2h。6.5.2.4MTT檢測(cè)孵育結(jié)束后，去除培養(yǎng)液，每孔加入100μL細(xì)胞裂解液，震搖5min，酶標(biāo)儀檢測(cè)，吸收波長(zhǎng)為570nm，參考波長(zhǎng)為690nm。6.5.2.5熒光素酶表達(dá)檢測(cè)染毒48h后，白色96孔板中去除培養(yǎng)基，每孔加入300μLPBS（含鈣鎂）洗滌2遍后，按照熒光素酶報(bào)告基因檢驗(yàn)檢測(cè)試劑盒要求檢測(cè)熒光素酶表達(dá)。6.5.2.6結(jié)果計(jì)算誘導(dǎo)倍數(shù)=Lsample：受試孔的熒光讀數(shù)Lblank：不包含細(xì)胞和給予受試物的空白孔的熒光讀數(shù)Lsolvent：包含細(xì)胞和溶劑對(duì)照孔的熒光讀數(shù)7結(jié)果評(píng)價(jià)7.1試驗(yàn)成立的條件與溶劑對(duì)照相比，陽(yáng)性對(duì)照組誘導(dǎo)倍數(shù)（FoldInduction）≥2.5，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，且細(xì)胞存活率≥70%。與溶劑對(duì)照相比，陰性對(duì)照組誘導(dǎo)倍數(shù)（FoldInduction）＜1.5。所有溶劑對(duì)照組細(xì)胞存活率SD值＜20%。正式試驗(yàn)中，受試物至少有3個(gè)測(cè)試濃度細(xì)胞存活率＞70%。7.2結(jié)果判定與溶劑對(duì)照組相比，當(dāng)受試物至少有一個(gè)測(cè)試濃度細(xì)胞毒性＜70%（或者最大無(wú)細(xì)胞毒性測(cè)試濃度達(dá)到2000μM），且平均誘導(dǎo)倍數(shù)＜1.5，則判定結(jié)果陰性。與溶劑對(duì)照組相比，當(dāng)受試物至少三個(gè)測(cè)試濃度無(wú)細(xì)胞毒性時(shí)，且其中兩個(gè)連續(xù)無(wú)毒性濃度誘導(dǎo)倍數(shù)≥1.5，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，則判定結(jié)果陽(yáng)性。要進(jìn)行致敏性判斷，需進(jìn)行滿(mǎn)足7.1條件的重復(fù)試驗(yàn)，當(dāng)兩次重復(fù)試驗(yàn)結(jié)果一致時(shí)，不需要進(jìn)行第三次試驗(yàn)；若不一致，則進(jìn)行第三次試驗(yàn)。當(dāng)兩次試驗(yàn)結(jié)果均為陰性/陽(yáng)性，才可最終判定受試物致敏性陰性/陽(yáng)性。附件7化妝品中鋰等43種元素的檢驗(yàn)方法DeterminationofLiand42KindsofElementsinCosmetics1范圍本方法規(guī)定了電感耦合等離子體質(zhì)譜法測(cè)定化妝品中鋰等43種元素的含量。本方法適用于化妝品中鋰等43種元素的測(cè)定。本方法所指的43種元素為鋰（Li）、鈹（Be）、硼（B）、鈧（Sc）、釩（V）、鉻（Cr）、錳（Mn）、鈷（Co）、鎳（Ni）、銅（Cu）、砷（As）、硒（Se）、銣（Rb）、鍶（Sr）、釔（Y）、鋯（Zr）、銀（Ag）、鎘（Cd）、銦（In）、錫（Sn）、銻（Sb）、碲（Te）、銫（Cs）、鋇（Ba）、鑭（La）、鈰（Ce）、鐠（Pr）、釹（Nd）、釤（Sm）、銪（Eu）、釓（Gd）、鋱（Tb）、鏑（Dy）、鈥（Ho）、鉺（Er）、銩（Tm）、鐿（Yb）、镥（Lu）、汞（Hg）、鉈（Tl）、鉛（Pb）、鉍（Bi）、釷（Th）。2方法提要樣品經(jīng)酸消解處理成溶液后，經(jīng)氣動(dòng)霧化器以氣溶膠的形式進(jìn)入氬氣為基質(zhì)的高溫射頻等離子體中，經(jīng)過(guò)蒸發(fā)、解離、原子化、電離等過(guò)程，轉(zhuǎn)化為帶正電荷的正離子，經(jīng)離子采集系統(tǒng)進(jìn)入質(zhì)譜儀，質(zhì)譜儀根據(jù)質(zhì)荷比進(jìn)行分離，質(zhì)譜積分面積與進(jìn)入質(zhì)譜儀中的離子數(shù)成正比。即待測(cè)元素濃度與各元素產(chǎn)生的信號(hào)強(qiáng)度CPS成正比，與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。若取0.2g樣品，定容體積至50mL，本方法檢出濃度和最低定量濃度見(jiàn)表1。表1各元素的檢出限、檢出濃度、定量下限和最低定量濃度元素檢出限（μg/L）檢出濃度（mg/kg）定量下限（μg/L）最低定量濃度（mg/kg）鋰（Li）0.30.0310.1鈹（Be）0.30.0310.1硼（B）1.50.1550.5鈧（Sc）0.030.0030.10.01釩（V）0.30.0310.1鉻（Cr）0.30.0310.1錳（Mn）1.50.1550.5鈷（Co）0.030.0030.10.01鎳（Ni）0.30.0310.1銅（Cu）1.50.1550.5砷（As）0.30.0310.1硒（Se）0.30.0310.1銣（Rb）0.30.0310.1鍶（Sr）0.30.0310.1釔（Y）0.030.0030.10.01鋯（Zr）1.50.1550.5銀（Ag）0.30.0310.1鎘（Cd）0.030.0030.10.01銦（In）0.030.0030.10.01錫（Sn）0.30.0310.1銻（Sb）0.030.0030.10.01碲（Te）1.50.1550.5銫（Cs）0.030.0030.10.01鋇（Ba）1.50.1550.5鑭（La）0.030.0030.10.01鈰（Ce）0.030.0030.10.01鐠（Pr）0.030.0030.10.01釹（Nd）0.030.0030.10.01釤（Sm）0.030.0030.10.01銪（Eu）0.030.0030.10.01釓（Gd）0.030.0030.10.01鋱（Tb）0.030.0030.10.01鏑（Dy）0.030.0030.10.01鈥（Ho）0.030.0030.10.01鉺（Er）0.030.0030.10.01銩（Tm）0.030.0030.10.01鐿（Yb）0.030.0030.10.01镥（Lu）0.030.0030.10.01汞（Hg）0.030.0030.10.01鉈（Tl）0.030.0030.10.01鉛（Pb）0.30.0310.1鉍（Bi）0.30.0310.1釷（Th）0.30.0310.13試劑和材料除另有規(guī)定外，本方法所用試劑均為優(yōu)級(jí)純或以上規(guī)格，水為GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。3.1硝酸（ρ20＝1.42g，優(yōu)級(jí)純或以上規(guī)格。3.2硝酸（0.5mol/L）：取硝酸（3.1）3.2mL加入50mL水中，稀釋至100mL。3.3汞標(biāo)準(zhǔn)穩(wěn)定劑：取2mL金元素（Au）溶液（1000mg/L），用硝酸（3.2）稀釋至1000mL，用于汞標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制。3.4元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000mg/L或100mg/L）：鋰（Li）、鈹（Be）、硼（B）、鈧（Sc）、釩（V）、鉻（Cr）、錳（Mn）、鈷（Co）、鎳（Ni）、銅（Cu）、砷（As）、硒（Se）、銣（Rb）、鍶（Sr）、釔（Y）、鋯（Zr）、銀（Ag）[注1]、鎘（Cd）、銦（In）、錫（Sn）、銻（Sb）、碲（Te）、銫（Cs）、鋇（Ba）、鑭（La）、鈰（Ce）、鐠（Pr）、釹（Nd）、釤（Sm）、銪（Eu）、釓（Gd）、鋱（Tb）、鏑（Dy）、鈥（Ho）、鉺（Er）、銩（Tm）、鐿（Yb）、镥（Lu）、汞（Hg）、鉈（Tl）、鉛（Pb）、鉍（Bi）、釷（Th）。選用經(jīng)國(guó)家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書(shū)的單元素或多元素標(biāo)準(zhǔn)溶液。3.5內(nèi)標(biāo)元素標(biāo)準(zhǔn)溶液：銠（Rh）、錸（Re）。選用經(jīng)國(guó)家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書(shū)的標(biāo)準(zhǔn)溶液。4儀器和設(shè)備4.1電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS），微機(jī)工作站。4.2微波消解儀及其配件。4.3具塞比色管[注2]，50mL。4.4天平（精度0.0001g）。4.5控溫電熱板。5分析步驟5.1標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的制備吸取適量元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（3.4），用硝酸（3.2）逐級(jí)稀釋配成混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液系列。其中，汞元素標(biāo)準(zhǔn)系列溶液可用汞標(biāo)準(zhǔn)穩(wěn)定劑（3.3）逐級(jí)稀釋配成標(biāo)準(zhǔn)工作溶液系列。各元素質(zhì)量濃度見(jiàn)表2。表2標(biāo)準(zhǔn)溶液系列質(zhì)量濃度元素單位標(biāo)準(zhǔn)系列質(zhì)量濃度系列1系列2系列3系列4系列5鋰（Li）μg/L151050100鈹（Be）μg/L151050100硼（B）μg/L1050100200500鈧（Sc）μg/L151050100釩（V）μg/L151050100鉻（Cr）μg/L151050100錳（Mn）μg/L151050100鈷（Co）μg/L151050100鎳（Ni）μg/L151050100銅（Cu）μg/L151050100砷（As）μg/L151050100硒（Se）μg/L151050100銣（Rb）μg/L151050100鍶（Sr）μg/L151050100釔（Y）μg/L151050100鋯（Zr）μg/L1050100200500銀（Ag）μg/L151050100鎘（Cd）μg/L151050100銦（In）μg/L151050100錫（Sn）μg/L151050100銻（Sb）μg/L151050100碲（Te）μg/L1050100200500銫（Cs）μg/L151050100鋇（Ba）μg/L151050100鑭（La）μg/L151050100鈰（Ce）μg/L151050100鐠（Pr）μg/L151050100釹（Nd）μg/L151050100釤（Sm）μg/L151050100銪（Eu）μg/L151050100釓（Gd）μg/L151050100鋱（Tb）μg/L151050100鏑（Dy）μg/L151050100鈥（Ho）μg/L151050100鉺（Er）μg/L151050100銩（Tm）μg/L151050100鐿（Yb）μg/L151050100镥（Lu）μg/L151050100汞（Hg）μg/L0.51245鉈（Tl）μg/L151050100鉛（Pb）μg/L151050100鉍（Bi）μg/L151050100釷（Th）μg/L1510501005.2內(nèi)標(biāo)使用液制備吸取適量?jī)?nèi)標(biāo)元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（3.5），用硝酸（3.2）配制成為適當(dāng)濃度的銠（Rh）、錸（Re）混合內(nèi)標(biāo)使用液。樣液混合后的內(nèi)標(biāo)元素參考濃度范圍為10μg/L~100μg/L[注3][注4]。5.3樣品處理稱(chēng)取樣品0.2g~0.5g（精確到0.0001g），置于清洗好的消解罐內(nèi)，同時(shí)做試劑空白。含乙醇等揮發(fā)性物質(zhì)的樣品先在電熱板上低溫加熱揮發(fā)。油脂類(lèi)和膏粉類(lèi)等干性物質(zhì)，如唇膏、睫毛膏、眉筆、胭脂、唇線(xiàn)筆、粉餅、眼影、爽身粉、痱子粉等，取樣后先加水0.5mL~1.0mL，潤(rùn)濕搖勻。根據(jù)樣品消解難易程度，樣品或經(jīng)預(yù)處理的樣品，先加入硝酸（3.1）2.0mL~8.0mL，放入溫度可調(diào)的100oC恒溫電加熱器，充分作用約30min~60min，至無(wú)肉眼可見(jiàn)明顯塊狀固體，冷卻。按照微波消解系統(tǒng)操作建議，可加入1.0mL~2.0mL過(guò)氧化氫[注5]。將消解罐輕輕晃動(dòng)幾次，使樣品充分浸沒(méi)。把裝有樣品的消解罐擰上罐蓋，放進(jìn)微波消解儀中。同時(shí)嚴(yán)格按照微波消解系統(tǒng)操作手冊(cè)進(jìn)行操作。根據(jù)樣品消解難易程度可在20min~60min內(nèi)消解完畢，冷卻后取出，開(kāi)罐，將消解好的含樣品的消解罐放置于控溫電熱板上，于100℃加熱數(shù)分鐘，驅(qū)除樣品中多余的氮氧化物。表3為樣品消解時(shí)溫度—時(shí)間的參考程序[注6]表3消解時(shí)溫度時(shí)間參考程序溫度（℃）升溫時(shí)間（min）保持時(shí)間（min）10010513055180[注7]515將樣品移至50mL具塞比色管中，用水洗滌消解罐數(shù)次，合并洗滌液，用水定容至50mL，備用。如樣品消解后存在一些沉淀物或懸濁物，定容后過(guò)濾，待測(cè)。若待測(cè)溶液超出標(biāo)曲范圍，可根據(jù)實(shí)際濃度進(jìn)行適當(dāng)再稀釋。5.4儀器參考條件[注8]用調(diào)諧液調(diào)整儀器各項(xiàng)指標(biāo)[注9]，使儀器靈敏度、氧化物、雙電荷、分辨率等指標(biāo)達(dá)到要求。射頻功率：1550w；等離子體氬氣流速：14L/min；霧化器氬氣流速：1mL/min；采樣深度：5mm；霧化室溫度：4℃；采樣錐與截取錐類(lèi)型：鎳/鉑錐；模式：碰撞反應(yīng)模式。5.5測(cè)定在“5.4”儀器條件下，引入在線(xiàn)內(nèi)標(biāo)使用液（5.2），取“5.1”項(xiàng)下的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液和“5.3”項(xiàng)下待測(cè)溶液同時(shí)進(jìn)行ICP-MS分析。每一樣品定量需三次積分，取平均值。以標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，待測(cè)元素與所選內(nèi)標(biāo)元素響應(yīng)信號(hào)值的比值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。按“6”計(jì)算樣品中各組分的含量。對(duì)各元素，應(yīng)測(cè)定可能影響數(shù)據(jù)的每一同位素，以減少干擾造成的分析誤差。表4中下劃線(xiàn)為推薦用于定量的同位素質(zhì)量數(shù)。表4推薦測(cè)定的同位素元素質(zhì)量數(shù)元素質(zhì)量數(shù)鋰（Li）7銫（Cs）133鈹（Be）9鋇（Ba）137硼（B）11鑭（La）139鈧（Sc）45鈰（Ce）140釩（V）51鐠（Pr）141鉻（Cr）5253釹（Nd）143145146錳（Mn）55釤（Sm）147149鈷（Co）59銪（Eu）151153鎳（Ni）60釓（Gd）155157銅（Cu）63鋱（Tb）159砷（As）75鏑（Dy）161163硒（Se）77鈥（Ho）165銣（Rb）85鉺（Er）166167鍶（Sr）88銩（Tm）169釔（Y）89鐿（Yb）171172173鋯（Zr）90镥（Lu）175銀（Ag）107汞（Hg）202