標(biāo)準(zhǔn)解讀

《DB32/T 3683-2019 豬鏈球菌9型PCR檢測技術(shù)規(guī)程》是江蘇省地方標(biāo)準(zhǔn),旨在規(guī)范豬鏈球菌9型(Streptococcus suis serotype 9)的聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測方法。該標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)規(guī)定了從樣本采集、DNA提取到最終結(jié)果分析的一系列操作流程和技術(shù)要求,以確保檢測過程的準(zhǔn)確性和可靠性。

在樣本采集方面,標(biāo)準(zhǔn)明確了適用的樣本類型包括但不限于血液、腦脊液、關(guān)節(jié)液等,并對不同類型的樣本給出了具體的采集方法和保存條件。例如,對于血液樣本,推薦使用無菌采血針從靜脈或心臟抽取一定量的新鮮血液,并立即放入含有抗凝劑的試管中;而腦脊液則需通過腰椎穿刺獲取,并注意避免污染。

DNA提取部分描述了幾種常見的DNA提取方法及其適用范圍,強(qiáng)調(diào)選擇合適的DNA提取試劑盒的重要性,同時指出應(yīng)根據(jù)所用試劑盒說明書進(jìn)行操作。此外,還特別提到了如何處理可能存在的PCR抑制物問題,建議采用適當(dāng)?shù)募兓襟E來提高后續(xù)擴(kuò)增效率。

PCR反應(yīng)體系構(gòu)建及條件設(shè)置是整個檢測過程中最為關(guān)鍵的部分之一。本標(biāo)準(zhǔn)提供了針對豬鏈球菌9型特異性引物序列設(shè)計的基本原則,以及推薦使用的退火溫度、循環(huán)次數(shù)等參數(shù)。同時,也指出了對照實驗設(shè)置的重要性,如陽性對照、陰性對照和空白對照,用于驗證實驗的有效性和排除假陽性或假陰性結(jié)果的可能性。


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....

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  • 現(xiàn)行
  • 正在執(zhí)行有效
  • 2019-12-03 頒布
  • 2019-12-25 實施
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DB32/T 3683-2019豬鏈球菌9型PCR檢測技術(shù)規(guī)程_第1頁
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DB32/T 3683-2019豬鏈球菌9型PCR檢測技術(shù)規(guī)程_第3頁
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文檔簡介

ICS11220

B41.

江蘇省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB32/T3683—2019

豬鏈球菌9型PCR檢測技術(shù)規(guī)程

TechnicalregulationforPCRdetectingStreptococcussuistype9

2019-12-03發(fā)布2019-12-25實施

江蘇省市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB32/T3683—2019

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院提出并歸口

。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院

:。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人倪艷秀何孔旺周俊明祝昊丹呂立新俞正玉王丹丹張雪寒溫立斌

:、、、、、、、、、

李彬

。

DB32/T3683—2019

豬鏈球菌9型PCR檢測技術(shù)規(guī)程

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了豬鏈球菌型檢測所用的儀器設(shè)備和主要試劑引物方法步驟結(jié)果判定廢

9PCR、、、、

棄物處理和防止污染的措施等要求

本標(biāo)準(zhǔn)適用于豬鏈球菌型的檢測

9PCR。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法

GB/T6682

獸醫(yī)診斷樣品采集保存與運(yùn)輸技術(shù)規(guī)范

NY/T541、

病死及病害動物無害化處理技術(shù)規(guī)范農(nóng)醫(yī)發(fā)號

(〔2017〕25)

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件

。

31

.

豬鏈球菌9型Streptococcussuistype9

鏈球菌屬的一種細(xì)菌根據(jù)其莢膜多糖抗原的差異可分為及共個血清型豬鏈

,,1-31、331/233。

球菌型是豬鏈球菌的一個血清型不僅對豬致病性很強(qiáng)而且可以感染特定的人群是一種人獸共患

9,,,

病病原菌

。

32

.

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)polymerasechainreactionPCR

,

在聚合酶催化下以母鏈為模板以特定引物為延伸起點通過變性退火延伸等步

DNA,DNA,,、、

驟體外復(fù)制出與母鏈模板互補(bǔ)的子鏈的過程是一項體外合成放大技術(shù)能快速

,DNADNA。DNA,

特異地在體外擴(kuò)增任何目的

DNA。

4儀器設(shè)備和主要試劑

41儀器設(shè)備

.

儀器設(shè)備包括高速離心機(jī)水浴鍋儀核酸電泳儀凝膠成像系統(tǒng)

:、、PCR、、。

42主要試劑

.

主要試劑包括生理鹽水超純水蛋白酶瓊脂糖電泳級分子量標(biāo)準(zhǔn)

:

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