編制說(shuō)明 藥用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)規(guī)程

藥用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)規(guī)程

編制說(shuō)明

提出單位：珍稀瀕危藥用植物國(guó)家地方聯(lián)合工程研究中心

歸口單位：中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)

起草單位：珍稀瀕危藥用植物國(guó)家地方聯(lián)合工程研究中心，

中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中藥資源中心，大連普瑞康生物技術(shù)有限公

司，廣西藥用植物園，安徽中醫(yī)藥大學(xué)，大連源盛泰醫(yī)療投

資股份有限公司、北京同仁堂健康藥業(yè)有限公司、浙江中醫(yī)

藥大學(xué)

主要起草人：黃璐琦、劉漢石、袁媛

起草人：黃璐琦、劉漢石、袁媛、劉雅萍、秦雙雙、劉禹、

李曉琳、謝冬梅、陳梓、金銀兵、趙玉洋、張顯林、周駿輝、

吳俊罡、趙喬、黃利、張宏、朱愛(ài)松

二〇二一年十二月

目次

一、工作簡(jiǎn)況……………………1

二、主要技術(shù)內(nèi)容……………2

三、主要編制過(guò)程……………2

四、與國(guó)內(nèi)外同類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)的對(duì)比和最新標(biāo)準(zhǔn)采用情況…………14

五、與現(xiàn)行強(qiáng)制性國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或政策法規(guī)的關(guān)系…14

六、代表性分歧意見(jiàn)的處理經(jīng)過(guò)和依據(jù)……………14

七、宣傳、貫徹標(biāo)準(zhǔn)和后效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)的要求和措施…………14

八、廢止現(xiàn)行有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的建議…………16

九、相關(guān)附錄……………………16

一、工作簡(jiǎn)況

1.任務(wù)背景

藥用植物細(xì)胞工程已越來(lái)越多應(yīng)用到中藥資源開(kāi)發(fā)中。利用

藥用植物細(xì)胞培養(yǎng)來(lái)生產(chǎn)藥用活性成分或補(bǔ)充藥物資源已成為

稀瀕危藥用植物可持續(xù)發(fā)展的重要途徑。2019年“天山雪蓮、

人參等藥用植物細(xì)胞和不定根培養(yǎng)及產(chǎn)業(yè)化關(guān)鍵技術(shù)”獲得國(guó)家

科技進(jìn)步二等獎(jiǎng)。迄今通過(guò)植物細(xì)胞工程培養(yǎng)的藥用植物細(xì)胞已

有400多種，其中有60多種代謝物含量高于或等于原植物。人

參、紫草、報(bào)春花、洋地黃、天山雪蓮等藥用植物細(xì)胞已實(shí)現(xiàn)了

工業(yè)化生產(chǎn)，以藥用植物細(xì)胞為原料開(kāi)發(fā)出的保健品、化妝品產(chǎn)

值已超過(guò)30億。因此，我國(guó)藥用植物細(xì)胞培養(yǎng)具有很大的開(kāi)發(fā)

潛力。

藥用植物細(xì)胞培養(yǎng)是用來(lái)生產(chǎn)藥用活性成分或進(jìn)行藥用植

物無(wú)性系快速繁殖的生物技術(shù)。完全采用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)得到

的細(xì)胞可能會(huì)缺乏生成產(chǎn)物的能力或生產(chǎn)能力不穩(wěn)定，有時(shí)需要

選擇性誘導(dǎo)環(huán)節(jié)，以增加活性成分的產(chǎn)量。

目前國(guó)內(nèi)動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)成熟，已建立相關(guān)的國(guó)家標(biāo)

準(zhǔn)，如GB/T24863-2010禽畜動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)和保存技術(shù)規(guī)程。

植物組培技術(shù)也已制定了相關(guān)行業(yè)和地方標(biāo)準(zhǔn)，如LY/T

1882-2010林木組織培養(yǎng)育苗技術(shù)規(guī)程、NY/T2306-2013花卉種

苗組培快繁技術(shù)規(guī)程、DB/T752-2009植物種苗快繁技術(shù)規(guī)程等。

但藥用植物細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)的技術(shù)規(guī)程或標(biāo)準(zhǔn)尚處于空白，缺乏規(guī)

范的培養(yǎng)技術(shù)規(guī)程，會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)過(guò)程出現(xiàn)污染、褐變、玻璃化、

細(xì)胞缺乏生成產(chǎn)物的能力或生產(chǎn)能力不穩(wěn)定、生產(chǎn)中質(zhì)控混亂等

問(wèn)題，最終造成人力、物力、財(cái)力和時(shí)間上的巨大浪費(fèi)。例如清

洗與滅菌、培養(yǎng)基配制等操作不規(guī)范易造成污染。培養(yǎng)基組成和

配制的差異會(huì)造成玻璃化、缺乏生成產(chǎn)物能力等。因此亟需制定

一個(gè)統(tǒng)一的的藥用植物細(xì)胞培養(yǎng)的標(biāo)準(zhǔn)總則。

本標(biāo)準(zhǔn)的建立和實(shí)施，可指導(dǎo)和規(guī)范藥用植物細(xì)胞培養(yǎng)的科

學(xué)研究和生產(chǎn)，提高藥用植物細(xì)胞培養(yǎng)物的品質(zhì)，與國(guó)際接軌，

1

有助于促進(jìn)國(guó)際貿(mào)易，具有廣闊的應(yīng)用前景。

2.任務(wù)來(lái)源

任務(wù)來(lái)源于國(guó)家863計(jì)劃《藥食同源重要功能因子提取、分

離及規(guī)?；锖铣申P(guān)鍵技術(shù)研究》（2014AA022201）。

3.標(biāo)準(zhǔn)起草單位

珍稀瀕危藥用植物國(guó)家地方聯(lián)合工程研究中心，中國(guó)中醫(yī)科

學(xué)院中藥資源中心，大連普瑞康生物技術(shù)有限公司，廣西藥用植

物園，安徽中醫(yī)藥大學(xué)，大連源盛泰醫(yī)療投資股份有限公司、北

京同仁堂健康藥業(yè)有限公司、浙江中醫(yī)藥大學(xué)。

二、主要技術(shù)內(nèi)容

主要技術(shù)內(nèi)容為藥用植物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中的條件和技術(shù)方

法，包括工作區(qū)條件、清洗與滅菌、試劑與培養(yǎng)基、藥用植物細(xì)

胞的培養(yǎng)與保存等。其中，工作區(qū)條件包括洗滌間、消毒間、培

養(yǎng)基制備間、接種間、培養(yǎng)間、細(xì)胞保存間；試劑與培養(yǎng)基包括

水、消毒滅菌劑、培養(yǎng)基、培養(yǎng)基配制；藥用植物細(xì)胞的培養(yǎng)與

保存包括外植體的選擇及處理、接種、藥用植物細(xì)胞的初代培養(yǎng)、

繼代培養(yǎng)和保存，適用于苔蘚植物、蕨類(lèi)植物、種子植物中的藥

用植物細(xì)胞的培養(yǎng)。詳見(jiàn)《藥用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)規(guī)程》文本部

分。

三、主要編制過(guò)程

遵循“沒(méi)有記錄，就沒(méi)有發(fā)生”的原則。列出標(biāo)準(zhǔn)制定過(guò)程

中全部工作步驟及工作內(nèi)容，召開(kāi)會(huì)議要提供會(huì)議紀(jì)要。以“成

立起草組”為例，如下：

（一）文獻(xiàn)和現(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)、應(yīng)用情況梳理

2021年1月~2月，標(biāo)準(zhǔn)起草的負(fù)責(zé)人團(tuán)隊(duì)在中國(guó)知網(wǎng)學(xué)術(shù)文

獻(xiàn)總庫(kù)（CNKI）、萬(wàn)方數(shù)據(jù)知識(shí)服務(wù)平臺(tái)（Wanfang）、Pubmed

等數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)植物細(xì)胞工程、植物組織培養(yǎng)及植物細(xì)胞培養(yǎng)的概念、

植物細(xì)胞工程的應(yīng)用、植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用、藥用植

2

物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)與植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的差異、存在問(wèn)題進(jìn)行了系

統(tǒng)的檢索和文獻(xiàn)梳理，共查找中英文文獻(xiàn)相關(guān)文獻(xiàn)112篇。同時(shí)

在全國(guó)標(biāo)準(zhǔn)信息公共服務(wù)平臺(tái)、標(biāo)準(zhǔn)網(wǎng)等對(duì)相關(guān)的現(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行

了檢索。最終形成了文獻(xiàn)/標(biāo)準(zhǔn)調(diào)研報(bào)告（附件1《藥用植物細(xì)胞

培養(yǎng)技術(shù)規(guī)程》文獻(xiàn)/標(biāo)準(zhǔn)調(diào)研報(bào)告）。

1.植物細(xì)胞工程的應(yīng)用

植物細(xì)胞工程技術(shù)的應(yīng)用，催生了一大批先進(jìn)實(shí)用的研究成

果和技術(shù)，培育了一批優(yōu)良品種，包括植物細(xì)胞工程與植物來(lái)

源生物產(chǎn)品的生產(chǎn)、植物體細(xì)胞無(wú)性系變異與植物改良、細(xì)胞突

變體的篩選、植物干細(xì)胞培養(yǎng)、原生質(zhì)體培養(yǎng)、植物細(xì)胞培養(yǎng)或

生物反應(yīng)器生產(chǎn)藥用成分、植物快速繁殖技術(shù)、體細(xì)胞胚胎發(fā)生

及人工種子、作物育種技術(shù)、組織或細(xì)胞培養(yǎng)物的超低溫保存及

種質(zhì)庫(kù)的建立。在大力推廣常規(guī)脫毒和快繁技術(shù)的同時(shí)，加快發(fā)

展植物快繁生物反應(yīng)器和光自養(yǎng)微繁技術(shù)，將為種業(yè)帶來(lái)新的變

革。生產(chǎn)微型營(yíng)養(yǎng)器官的人工種子可能成為最先規(guī)?；瘧?yīng)用的人

工種子技術(shù)，以體細(xì)胞胚為繁殖體的人工種子技術(shù)需要進(jìn)一步研

究和完善。應(yīng)用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)植物來(lái)源的生物產(chǎn)品，盡

管目前僅在少數(shù)植物上實(shí)現(xiàn)了商業(yè)化生產(chǎn)，但隨著植物細(xì)胞工程

生物反應(yīng)器技術(shù)的完善，其應(yīng)用領(lǐng)域?qū)⑦M(jìn)一步擴(kuò)大。

2.藥用植物細(xì)胞培養(yǎng)

藥用植物細(xì)胞中含有各種特殊的代謝產(chǎn)物、藥用成分和各種

香精等。其中有些是人工所不能合成的物質(zhì)；有些是整體植物中

含量甚微或整株植物十分缺乏，而培養(yǎng)細(xì)胞中的含量卻很高，如

檸檬葉、雞眼藤的培養(yǎng)細(xì)胞中蒽醌含量比完整植株中高10倍。

因此，培養(yǎng)藥用植物細(xì)胞并生產(chǎn)這些有用成分已受到生物學(xué)、醫(yī)

學(xué)及商業(yè)界人士的極大關(guān)注。

近50年來(lái)，這一領(lǐng)域的研究取得了飛速的發(fā)展。目前已經(jīng)

對(duì)400多種藥用植物進(jìn)行了相關(guān)研究，從培養(yǎng)細(xì)胞中分離到600

多種次級(jí)代謝產(chǎn)物，其中60多種在含量上超過(guò)或等于其原植物，

3

20種以上干重超過(guò)1%。紫草、人參、黃連、老鸛草細(xì)胞等已達(dá)

到商品化水平；長(zhǎng)春花、毛地黃細(xì)胞等已實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)；牙簽

草、三分三、紅花等20多種藥用植物細(xì)胞正在向商品化過(guò)渡。

在我國(guó)，人參細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)也已實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化；三分三細(xì)胞在80

年代即完成了10L發(fā)酵罐中試；紫草、三七等的細(xì)胞培養(yǎng)也取

得較大的進(jìn)展。西洋參、云南蘿芙木、三尖杉、盾葉薯芋、九連

小檗、薄荷、柴胡、丹參、當(dāng)歸、青蒿、長(zhǎng)春花、紫背天葵、延

胡索、水仙、粗榧、水飛薊、羅鍋底、重樓等的細(xì)胞培養(yǎng)研究也

已進(jìn)行。

3.現(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)情況

植物細(xì)胞工程技術(shù)呈現(xiàn)發(fā)展規(guī)?；?、管理規(guī)范化和操作自動(dòng)

化的趨勢(shì)。目前國(guó)外一些國(guó)家在組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室、種苗快繁的質(zhì)

量管理、植物來(lái)源生物產(chǎn)品的生產(chǎn)和質(zhì)量管理中已實(shí)行良好的實(shí)

驗(yàn)室規(guī)范(GLP)、生產(chǎn)規(guī)范(GMP)、危害分析和關(guān)鍵控制點(diǎn)

(HACCP)系統(tǒng)。我國(guó)一些植物快繁企業(yè)也開(kāi)展了GMP認(rèn)證。

植物細(xì)胞工程技術(shù)在產(chǎn)生巨大的社會(huì)經(jīng)濟(jì)效益的同時(shí)，必然

對(duì)其技術(shù)產(chǎn)品的質(zhì)量管理提出更高的要求。目前國(guó)內(nèi)動(dòng)物細(xì)胞體

外培養(yǎng)技術(shù)成熟，已建立相關(guān)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，如GB/T24863-2010

禽畜動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)和保存技術(shù)規(guī)程。植物組培技術(shù)也已制定

了相關(guān)行業(yè)和地方標(biāo)準(zhǔn)，如LY/T1882-2010林木組織培養(yǎng)育苗

技術(shù)規(guī)程、NY/T2306-2013花卉種苗組培快繁技術(shù)規(guī)程、DB/T

752-2009植物種苗快繁技術(shù)規(guī)程等。但藥用植物細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)

的技術(shù)規(guī)程或標(biāo)準(zhǔn)尚處于空白，缺乏規(guī)范的培養(yǎng)技術(shù)規(guī)程，會(huì)導(dǎo)

致培養(yǎng)過(guò)程出現(xiàn)污染、褐變、玻璃化、細(xì)胞缺乏生成產(chǎn)物的能力

或生產(chǎn)能力不穩(wěn)定、生產(chǎn)中質(zhì)控混亂等問(wèn)題，最終造成人力、物

力、財(cái)力和時(shí)間上的巨大浪費(fèi)。例如清洗與滅菌、培養(yǎng)基配制等

操作不規(guī)范易造成污染。培養(yǎng)基組成和配制的差異會(huì)造成玻璃化、

缺乏生成產(chǎn)物能力等。尤其是藥用植物因含有較高含量的次生代

謝產(chǎn)物，其細(xì)胞培養(yǎng)更易產(chǎn)生褐變、玻璃化等狀況，因此亟需制

定一個(gè)規(guī)范的藥用植物細(xì)胞培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)通則。

4

（二）成立標(biāo)準(zhǔn)起草組

1.標(biāo)準(zhǔn)起草組成立方式

標(biāo)準(zhǔn)起草組由負(fù)責(zé)人召集相關(guān)科研院所、標(biāo)準(zhǔn)使用企業(yè)推薦

及面向相關(guān)企業(yè)征集專(zhuān)家等方式召集起草組成員，于2021年2

月1日通過(guò)召開(kāi)線上會(huì)議和電話溝通的方式成立項(xiàng)目組（詳見(jiàn)附

件2天山雪蓮培養(yǎng)物等2個(gè)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)起草組成立會(huì)議紀(jì)要）。

2.標(biāo)準(zhǔn)起草組組成情況

①標(biāo)準(zhǔn)起草組組成情況：

標(biāo)準(zhǔn)起草單位由珍稀瀕危藥用植物國(guó)家地方聯(lián)合工程研究

中心（發(fā)改委批準(zhǔn)的珍稀瀕危藥用植物研究機(jī)構(gòu)），中國(guó)中醫(yī)科

學(xué)院中藥資源中心（國(guó)家級(jí)研究中藥的專(zhuān)門(mén)機(jī)構(gòu)），大連普瑞康

生物技術(shù)有限公司（主要藥用植物細(xì)胞生產(chǎn)企業(yè)），廣西藥用植

物園（省級(jí)中藥的研究機(jī)構(gòu)），安徽中醫(yī)藥大學(xué)（省級(jí)中藥的研

究機(jī)構(gòu)），大連源盛泰醫(yī)療投資股份有限公司（主要藥用植物細(xì)

胞使用企業(yè)）、北京同仁堂健康藥業(yè)有限公司（主要藥用植物細(xì)

胞使用企業(yè)）、浙江中醫(yī)藥大學(xué)（省級(jí)中藥的研究機(jī)構(gòu)），包括中

藥鑒定、中藥生產(chǎn)、中藥分析、中醫(yī)臨床應(yīng)用等不同領(lǐng)域?qū)＜夜?/p>

18人，共有高級(jí)職稱(chēng)9人，中級(jí)職稱(chēng)3人，其他職稱(chēng)6人（附

件3《藥用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)規(guī)程》起草組成員知情同意書(shū)、。

②標(biāo)準(zhǔn)起草組成員名單及分工：見(jiàn)表1。

表1標(biāo)準(zhǔn)起草組成員及其工作內(nèi)容

序

姓名單位職務(wù)/職稱(chēng)專(zhuān)業(yè)學(xué)位工作內(nèi)容

號(hào)

中藥資源和分

1黃璐琦中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院研究員博士總體設(shè)計(jì)

子生藥學(xué)

大連普瑞康生物技術(shù)技術(shù)流程管

2劉漢石高級(jí)工程師經(jīng)濟(jì)學(xué)碩士

有限公司控

中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中藥中藥資源與鑒總體負(fù)責(zé)、

3袁媛研究員博士

資源中心定標(biāo)準(zhǔn)起草

珍稀瀕危藥用植物國(guó)

正高級(jí)工程

4劉雅萍家地方聯(lián)合工程研究生物工程碩士標(biāo)準(zhǔn)起草

師

中心

標(biāo)準(zhǔn)起草及

5秦雙雙廣西藥用植物園副研究員中藥資源博士

宣講

5

大連普瑞康生物技術(shù)

6劉禹中級(jí)生物化工博士標(biāo)準(zhǔn)起草

有限公司

中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中藥標(biāo)準(zhǔn)起草及

7李曉琳副研究員中藥資源博士

資源中心宣講

標(biāo)準(zhǔn)起草及

8謝冬梅安徽中醫(yī)藥大學(xué)教授中藥資源博士

宣講

大連普瑞康生物技術(shù)

9陳梓-生物工程碩士標(biāo)準(zhǔn)起草

有限公司

大連普瑞康生物技術(shù)生物化學(xué)與分

10金銀兵-碩士標(biāo)準(zhǔn)起草

有限公司子生物學(xué)

中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中藥

11趙玉洋助理研究員生物技術(shù)本科草案修改

資源中心

大連普瑞康生物技術(shù)食品科學(xué)與工

12張顯林-碩士標(biāo)準(zhǔn)起草

有限公司程

中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中藥

13周駿輝助理研究員生物技術(shù)碩士草案修改

資源中心

大連普瑞康生物技術(shù)

14吳俊罡-發(fā)酵碩士標(biāo)準(zhǔn)起草

有限公司

中科院深圳先進(jìn)技術(shù)

15趙喬-植物學(xué)博士草案修改

研究院

大連源盛泰醫(yī)療投資化學(xué)工程與工

16黃利-碩士草案修改

股份有限公司藝

北京同仁堂健康藥業(yè)正高級(jí)工程

17張宏醫(yī)學(xué)博士草案修改

有限公司師

18朱愛(ài)松浙江中醫(yī)藥大學(xué)教授中醫(yī)學(xué)博士草案修改

3.利益沖突聲明

標(biāo)準(zhǔn)起草組包含了科研、生產(chǎn)和醫(yī)療等不同領(lǐng)域的專(zhuān)家，不

存在利益沖突，可避免標(biāo)準(zhǔn)推薦意見(jiàn)的影響。

（三）標(biāo)準(zhǔn)制定的可行性論證、編制計(jì)劃制定及項(xiàng)目調(diào)研

2021年2月1日在標(biāo)準(zhǔn)起草組的線上會(huì)議上，對(duì)天山雪蓮

培養(yǎng)物等2個(gè)擬進(jìn)行起草團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)的研制背景、標(biāo)準(zhǔn)框架等進(jìn)行

了匯報(bào)，與會(huì)專(zhuān)家聽(tīng)取了匯報(bào)，對(duì)《藥用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)規(guī)程》

團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)研制的意義、目的、可行性進(jìn)行了探討和論證，認(rèn)為具

有編制需求和廣泛的應(yīng)用前景。根據(jù)起草組專(zhuān)家意見(jiàn)確定了標(biāo)準(zhǔn)

編制工作的整體框架和詳細(xì)計(jì)劃，并對(duì)標(biāo)準(zhǔn)研制、標(biāo)準(zhǔn)推廣等項(xiàng)

目?jī)?nèi)容進(jìn)行了分工（詳見(jiàn)附件1天山雪蓮培養(yǎng)物等2個(gè)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)

起草組成立會(huì)議紀(jì)要）。會(huì)后起草組成員對(duì)藥用植物細(xì)胞培養(yǎng)的

技術(shù)要求包括：工作區(qū)條件、清洗與滅菌要求、試劑與培養(yǎng)基、

細(xì)胞培養(yǎng)、保存標(biāo)準(zhǔn)等進(jìn)行了調(diào)研、整理形成了《藥用植物細(xì)胞

6

培養(yǎng)技術(shù)規(guī)程》項(xiàng)目調(diào)研報(bào)告（附件4《藥用植物細(xì)胞培養(yǎng)技

術(shù)規(guī)程》團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)目調(diào)研報(bào)告）。

（四）提案、申請(qǐng)、立項(xiàng)

2021年2月23日中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中藥資源中心向中華中醫(yī)

藥學(xué)會(huì)提出立項(xiàng)申請(qǐng)，中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)開(kāi)始了立項(xiàng)

的三次形式審查，按反饋表的要求，標(biāo)準(zhǔn)編寫(xiě)組逐條認(rèn)真填寫(xiě)修

改意見(jiàn)表，并經(jīng)過(guò)了質(zhì)詢(xún)、說(shuō)明和修改，于2021年4月9日通

過(guò)了形式審查。2021年4月13日-20日以專(zhuān)家函審的形式進(jìn)行

了立項(xiàng)審查，共9位專(zhuān)家無(wú)記名投票，贊成、有建議8票，贊成

票過(guò)3/4多數(shù)，審查專(zhuān)家認(rèn)為該標(biāo)準(zhǔn)可行性高，擬解決的問(wèn)題需

求巨大，對(duì)推動(dòng)中藥產(chǎn)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化有重要意義，建議同意立項(xiàng)。此

后又通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)秘書(shū)長(zhǎng)會(huì)，獲準(zhǔn)立項(xiàng)。2021年6月3日，

正式發(fā)布立項(xiàng)公告。

（五）標(biāo)準(zhǔn)草案起草

1.標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)研究

外植體選擇、愈傷組織誘導(dǎo)、細(xì)胞培養(yǎng)是藥用植物細(xì)胞培養(yǎng)

的主要步驟，嚴(yán)格控制組織培養(yǎng)過(guò)程中培養(yǎng)基的各營(yíng)養(yǎng)成分用量，

以及激素濃度和配比是保證藥用植物細(xì)胞大規(guī)模生產(chǎn)成功的關(guān)

鍵。2021年3月~2021年12月，工作組以天山雪蓮、黃芩、紅

豆杉開(kāi)展了藥用植物細(xì)胞培養(yǎng)條件優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)研究。上述實(shí)驗(yàn)數(shù)

據(jù)為草案的撰寫(xiě)提供了依據(jù)。具體的方法及結(jié)果如下：

1.1天山雪蓮細(xì)胞培養(yǎng)條件的優(yōu)化

配制植株誘導(dǎo)MS培養(yǎng)基和誘導(dǎo)愈傷組織MS培養(yǎng)基，選取

生長(zhǎng)良好的天山雪蓮植株作為外植體，接種于誘導(dǎo)愈傷組織MS

培養(yǎng)基上

1.1.1天山雪蓮細(xì)胞誘導(dǎo)方法的比較

分別稱(chēng)取硝酸鉀190重量份、硝酸銨165重量份、硫酸鎂

37重量份、磷酸二氫鉀17重量份、氯化鈣44重量份，分別加

水1000體積份，并加熱至完全溶解；將5種溶液混合，加水至

7

5000體積份，混合均勻，得MS培養(yǎng)基母液A，4℃保存?zhèn)溆茫?/p>

分別稱(chēng)取硫酸錳6.76重量份、硫酸鋅3.44重量份、硼酸2.48重

量份、碘化鉀0.332重量份、鉬酸鈉0.1重量份、硫酸銅0.00005

重量份、氯化鈷0.00005重量份，分別加水200體積份，并加熱

到完全溶解；將7種溶液混合，加水至2000體積份，混合均勻，

得MS培養(yǎng)基母液B，4℃保存?zhèn)溆?；分別稱(chēng)取EDTANa27.45重

量份、硫酸亞鐵5.57重量份，分別加水1000體積份，并加熱至

完全溶解；將2種溶液混勻，加熱，加水至2000體積份，得MS

培養(yǎng)基母液C，4℃保存?zhèn)溆?；稱(chēng)取甘氨酸0.4重量份、鹽酸硫胺

素0.08重量份、鹽酸吡哆素0.1重量份、煙酸0.1重量份和肌醇

20重量份，加水1000體積份，并加熱至完全溶解，加水至1000

體積份，混合均勻，得MS培養(yǎng)基母液D，4℃保存?zhèn)溆?；取?/p>

糖120重量份，加水2000體積份溶解，加熱至沸騰，加入MS

培養(yǎng)基母液A100體積份、MS培養(yǎng)基母液B10體積份、MS培

養(yǎng)基母液C20體積份和MS培養(yǎng)基母液D10體積份，得混合培

養(yǎng)基母液；取瓊脂24重量份，加水2000體積份攪拌后，加入上

述混合培養(yǎng)基母液中，加熱至沸騰，瓊脂全部溶化；加水至4000

體積份；滴加4％氫氧化鈉，調(diào)pH至5.8，得植株誘導(dǎo)MS培養(yǎng)

基；分裝；滅菌；備用。

配制MS培養(yǎng)基母液，母液比例為A:B:C:D=5:2:2:1，4℃

保存?zhèn)溆?；?.15～0.25g的2,4-D，滴加4％氫氧化鈉至完全

溶解，加水至1000體積份，搖勻，得2，4-D母液，4℃保存?zhèn)?/p>

用；取0.05～0.15重量份6-BA，滴加4％氫氧化鈉至完全溶解，

加水至500體積份，搖勻，得6-BA母液，4℃保存?zhèn)溆?；取?/p>

糖120重量份，加水2000體積份溶解，加熱至沸騰，加入上述

MS培養(yǎng)基母液A200體積份、MS培養(yǎng)基母液B20體積份、MS

培養(yǎng)基母液C40體積份、MS培養(yǎng)基母液D20體積份、2,4-D母

液20體積份和6-BA母液4體積份，得混合培養(yǎng)基母液；取瓊

脂24重量份，加水2000體積份，攪拌，加入上述混合培養(yǎng)基母

液中，加熱至沸騰，瓊脂全部溶化；加水至4000體積份；滴加4％

氫氧化鈉，調(diào)pH至5.8，得誘導(dǎo)愈傷組織MS培養(yǎng)基；分裝；滅

8

菌；備用。

將保藏的天山雪蓮種子滅菌，徹底滅菌的天山雪蓮種子在無(wú)

菌條件下接種在配好的植株誘導(dǎo)MS培養(yǎng)基上，每25ml培養(yǎng)基

中接種8～15粒種子；在25℃，連續(xù)光照的條件下培養(yǎng)10天，

出芽后，培養(yǎng)成天山雪蓮植株。1%升汞滅菌11min，無(wú)菌水清

洗5次，染菌率最低，出芽率為100%，滅菌效果最好。

天山雪蓮植株繼續(xù)培養(yǎng)至5～8cm，選取生長(zhǎng)良好的天山雪

蓮植株作為外植體；將外植體接種于誘導(dǎo)愈傷組織MS培養(yǎng)基上，

每25ml培養(yǎng)基中接種6～10塊直徑為0.5cm的外植體，暗培養(yǎng)

5～10d；誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織，愈傷組織在光照條件下培養(yǎng)，光

照條件為8～12小時(shí)/天，溫度為22～28℃。

1.1.2穩(wěn)定高產(chǎn)天山雪蓮細(xì)胞系篩選

通過(guò)對(duì)天山雪蓮愈傷組織的誘導(dǎo)和培養(yǎng)得到了4種新疆天

山雪蓮細(xì)胞系：白色系、黃色系、綠色系和紫紅色系；對(duì)4種細(xì)

胞系分別進(jìn)行了繼代培養(yǎng)，通過(guò)對(duì)其生長(zhǎng)速度、總黃酮含量的檢

測(cè)，確定紫紅色細(xì)胞系為長(zhǎng)勢(shì)較好，總黃酮化合物含量最高的細(xì)

胞系。用無(wú)菌苗的根、莖、葉以及子葉也均能獲得上述紫紅色細(xì)

胞系，優(yōu)選采用莖作為外植體。

選取紫紅色細(xì)胞系為原始細(xì)胞系，用目測(cè)法從固體培養(yǎng)基中

挑選顏色較深、色彩鮮亮的紫紅色愈傷組織在MS中添加6-BA、

NAA、0.6g/L瓊脂及30g/L蔗糖的固體培養(yǎng)基上繼續(xù)繼代培養(yǎng)。

培養(yǎng)條件為25℃，光照10~12小時(shí)、2000Lux。為更好的優(yōu)化

細(xì)胞系，繼代時(shí)接種塊大小控制在3mm以下。對(duì)所選擇細(xì)胞系

逐步馴化，經(jīng)過(guò)近100代篩選獲得了可以傳代培養(yǎng)的穩(wěn)定高產(chǎn)天

山雪蓮細(xì)胞系，該細(xì)胞系生長(zhǎng)旺盛、顏色鮮艷、呈紫紅色，結(jié)構(gòu)

致密、團(tuán)粒狀，質(zhì)地均一、容易分離；其高效液相指紋圖譜與野

生天山雪蓮基本吻合，且綠原酸的含量高于野生天山雪蓮；天山

雪蓮總黃酮含量為細(xì)胞干重的8~12％。

1.1.3天山雪蓮細(xì)胞系的繼代培養(yǎng)

比較3種繼代培養(yǎng)基：①M(fèi)S培養(yǎng)基；②B5培養(yǎng)基；③

N6培養(yǎng)基。培養(yǎng)基中均添加0.2～0.5mg/L6-BA、2~4mg/LNAA，

9

pH值5.2~5.8；培養(yǎng)時(shí)間15～20天。天山雪蓮細(xì)胞系繼代培養(yǎng)

時(shí)，使用MS培養(yǎng)基獲得的天山雪蓮培養(yǎng)物干重較多，天山雪蓮

總黃酮含量較高；使用N6培養(yǎng)基中獲得的天山雪蓮培養(yǎng)物中天

山雪蓮總黃酮含量遠(yuǎn)高于其它兩個(gè)培養(yǎng)基，但獲得的天山雪蓮培

養(yǎng)物干重最低。綜合上述指標(biāo)，繼代培養(yǎng)中選擇MS培養(yǎng)基。

1.1.4液固交替生產(chǎn)方法

1.1.4.1液體搖床培養(yǎng)制種

①選種

選取培養(yǎng)10~14天，長(zhǎng)勢(shì)較好，顏色鮮艷，呈紫紅色，顆粒

均勻，質(zhì)地均一的細(xì)胞系作種子細(xì)胞。

②培養(yǎng)基配制

采用500ml培養(yǎng)瓶，每瓶裝120~150ml培養(yǎng)液，培養(yǎng)液成

分為MS中添加6-BA、NAA及30g/L蔗糖，pH值為5.5；高溫

滅菌：121℃，20min。

③接種

無(wú)菌條件下，將培養(yǎng)物用鑷子夾碎后接種到裝有120~150ml

培養(yǎng)液的500ml培養(yǎng)瓶中，接種量5％(W/V，g·FW/ml)。

④搖床培養(yǎng)

培養(yǎng)條件：培養(yǎng)溫度為25℃，搖床轉(zhuǎn)速110rpm，培養(yǎng)時(shí)間

9d，光照11h、2000Lux。培養(yǎng)過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)染菌立即挑出。

1.1.4.2固體培養(yǎng)

①液態(tài)種子細(xì)胞的選取

用顯微鏡觀察檢測(cè)，選取顏色鮮艷、呈紫紅色、長(zhǎng)勢(shì)較好、

分散性好、顆粒均勻無(wú)污染的培養(yǎng)物作生產(chǎn)用種子細(xì)胞。

②培養(yǎng)基

MS中添加6-BA、NAA、0.6g/L瓊脂及30g/L蔗糖的固體

培養(yǎng)基。

③接種

無(wú)菌條件下，將培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液濾除，將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到墊

有無(wú)菌濾紙的無(wú)菌培養(yǎng)皿中，挑取生長(zhǎng)旺盛、顏色鮮艷、呈紫紅

色，分散性好、顆粒均勻、無(wú)污染的細(xì)胞團(tuán)轉(zhuǎn)接至固態(tài)培養(yǎng)基上，

10

接種塊大小為4~6mm。

④固體培養(yǎng)

培養(yǎng)溫度：25℃，光照11h、2000Lux；培養(yǎng)周期：15天。

1.1.4.3培養(yǎng)物的收集及循環(huán)生產(chǎn)

①留種

大規(guī)模生產(chǎn)的同時(shí)，可以從中選擇生長(zhǎng)旺盛、顏色鮮艷、呈

紫紅色，結(jié)構(gòu)致密、呈團(tuán)粒狀，質(zhì)地均勻?yàn)樘卣鞯挠鷤M織留種，

用于液體搖床培養(yǎng)，選種量以不超過(guò)總生產(chǎn)量的15％為宜。

②培養(yǎng)物的收集

收集剩余培養(yǎng)物，低溫真空干燥，即可。根據(jù)需要，可以將

干燥的培養(yǎng)物磨成粗粉或細(xì)粉，或者用來(lái)提取黃酮及其他活性成

分。

1.2黃芩細(xì)胞培養(yǎng)條件的優(yōu)化

1.2.1黃芩細(xì)胞系培養(yǎng)

將在MS固體培養(yǎng)基上穩(wěn)定繼代的愈傷組織，轉(zhuǎn)入到MS液

體培養(yǎng)基（3％蔗糖，pH5.8）中進(jìn)行懸浮培養(yǎng)，光照16h/黑暗8

h進(jìn)行培養(yǎng)，以黑暗條件作為對(duì)照，搖床轉(zhuǎn)速120r/min，培養(yǎng)

溫度（25±1）℃，接種量約為2g/L鮮重，設(shè)3個(gè)重復(fù)。培養(yǎng)液

中附加0.5mg/L2,4-D和3mg/LTDZ。

1.2.2黃芩細(xì)胞系有效成分的積累

1.2.2.1黃芩苷、黃芩素的測(cè)定

取黃芩懸浮細(xì)胞液5mL，4℃、12000g離心后，除去上清，

沉淀中精密加入甲醇1mL，稱(chēng)定質(zhì)量，超聲提取120min，取出，

再稱(chēng)定質(zhì)量，用甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，過(guò)濾，取續(xù)濾液，

0.45um濾膜濾過(guò)。色譜柱：TC-C18(4.6mmx250mm,5um)。

流動(dòng)相：乙腈-水-甲酸（23:77:10)(A)；乙腈-水-甲酸（80:20:10)

(B)；梯度洗脫，梯度洗脫程序?yàn)椋?-15min，100%(A)；15-25min，

100%-87%(A)；25-40min，87%-52%(A)；40-60min，52%-0%(A)。

檢測(cè)波長(zhǎng)280nm；分析時(shí)間60min：柱溫30℃。

1.2.2.2光照對(duì)黃芩細(xì)胞系中黃芩苷含量的影響

在光照條件下，黃芩苷含量在第20天含量最高，達(dá)到218.31

11

μg/g，隨后呈逐漸降低趨勢(shì)，在第26天下降為148.95μg/g，降幅

達(dá)31.77%；在黑暗條件下，黃芩苷的變化趨勢(shì)與光照條件一致，

第20天為183.78μg/g，到第26天降為96.32μg/g，降幅達(dá)47.59%。

圖1黃芩懸浮細(xì)胞中黃芩苷含量的動(dòng)態(tài)變化（P≤0.05）

1.3紅豆杉細(xì)胞培養(yǎng)條件的優(yōu)化

1.3.1紅豆杉細(xì)胞培養(yǎng)

取葉及子葉、胚芽作為外植體，在無(wú)菌條件下，用無(wú)菌手術(shù)

剪刀和無(wú)菌鑷子將無(wú)菌苗根、莖、葉及子葉、胚芽切成2~5mm

長(zhǎng)的小段，將外植體接種于培養(yǎng)基上，每30ml培養(yǎng)基中接種8～

10塊直徑為0.5cm的外植體，將外植體放于22℃，暗培養(yǎng)5～

10d；之后轉(zhuǎn)移至溫度為25℃的培養(yǎng)室培養(yǎng)10～20d；最后轉(zhuǎn)移

至溫度28℃的培養(yǎng)室培養(yǎng)10～15d，獲得紅豆杉愈傷組織。其

中幼嫩葉片和胚芽作為外植體誘導(dǎo)率最高。

1.3.2高產(chǎn)細(xì)胞系篩選

選取生長(zhǎng)旺盛、無(wú)褐變、黃白色特征的愈傷組織進(jìn)行周期性

的繼代培養(yǎng)，愈傷組織的培養(yǎng)條件為：20g愈傷組織于1000ml

培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)周期為35d，培養(yǎng)溫度為23℃。選取生長(zhǎng)旺

盛、無(wú)褐變、黃白色特征的愈傷組織作為種子細(xì)胞，每培養(yǎng)基中

接種8塊直徑為0.8～1.0m的種子細(xì)胞進(jìn)行光培養(yǎng)，光照條件為

3～6小時(shí)/天，培養(yǎng)溫度為22～28℃，培養(yǎng)30～35d后收獲。

2.撰寫(xiě)標(biāo)準(zhǔn)草案

12

2021年12月，根據(jù)項(xiàng)目工作組專(zhuān)家研討確定的標(biāo)準(zhǔn)范圍、調(diào)

研結(jié)果、文獻(xiàn)證據(jù)和實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，項(xiàng)目組起草了《藥用植物細(xì)胞培

養(yǎng)技術(shù)規(guī)程》草案、編制說(shuō)明。

草案成稿于2022年12月下旬，完成后進(jìn)行了組內(nèi)專(zhuān)家的論證，

論證采用通訊形式通過(guò)微信將草案發(fā)送給組內(nèi)其他主要成員，除

撰寫(xiě)人外的其他起草組主要成員對(duì)草案暫無(wú)修改意見(jiàn)。

（六）專(zhuān)家征求意見(jiàn)

2022年1月下旬標(biāo)準(zhǔn)起草單位以網(wǎng)絡(luò)形式，通過(guò)電子郵件向

北京中醫(yī)藥大學(xué)、福建農(nóng)林大學(xué)、南方醫(yī)科大學(xué)、南京中醫(yī)藥大

學(xué)、江蘇大學(xué)、甘肅中醫(yī)藥大學(xué)、沈陽(yáng)藥科大學(xué)、成都中醫(yī)藥大

學(xué)、中國(guó)藥科大學(xué)、安徽省食品藥品檢驗(yàn)研究院、廣東省藥品檢

驗(yàn)所、國(guó)家藥典委員會(huì)、中國(guó)食品藥品檢定研究院、黑龍江中醫(yī)

藥大學(xué)等不同領(lǐng)域的非參與單位專(zhuān)家征求意見(jiàn)，共收到30名專(zhuān)家

“征求意見(jiàn)稿”，回函并有建議的專(zhuān)家30名。

（七）草案修訂

2022年4月-7月，起草組對(duì)專(zhuān)家意見(jiàn)進(jìn)行匯總和研究處理，

給出“采納”、“部分采納”或“未采納”的處理意見(jiàn)，匯總形成

意見(jiàn)匯總處理表”（詳見(jiàn)征求意見(jiàn)匯總處理表-藥用植物細(xì)胞培養(yǎng)

技術(shù)規(guī)程）。經(jīng)過(guò)匯總研究《藥用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)規(guī)程》（草案）

修改意見(jiàn)后，根據(jù)專(zhuān)家意見(jiàn)對(duì)《藥用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)規(guī)程》（草

案）中涉及的名稱(chēng)、術(shù)語(yǔ)、定義、工作區(qū)條件、清洗與滅菌、培

養(yǎng)基配制、細(xì)胞培養(yǎng)與保存等進(jìn)行了規(guī)范，修改完善了《藥用植

物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)規(guī)程》（草案），最終擬定《藥用植物細(xì)胞培養(yǎng)技

術(shù)規(guī)程》送審稿，完成定稿工作。

（八）草案送審

2022年7月23日，起草組向中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)報(bào)送了送審材料，

包括送審稿、編制說(shuō)明、征求意見(jiàn)匯總處理表、推廣方案。

四、與國(guó)內(nèi)外同類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)的對(duì)比和最新標(biāo)準(zhǔn)采用情況

13

（一）描述國(guó)內(nèi)外是否有已發(fā)布且正在實(shí)施中的同領(lǐng)域標(biāo)準(zhǔn)？本

標(biāo)準(zhǔn)與其相比，有什么區(qū)別？

目前國(guó)內(nèi)外并無(wú)正在實(shí)施或已發(fā)布的植物細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)標(biāo)

準(zhǔn)。本標(biāo)準(zhǔn)是新制定的藥用植物細(xì)胞培養(yǎng)的技術(shù)規(guī)程。在母液的

配制和保存、培養(yǎng)基的配置、接種前的操作準(zhǔn)備上與LY/T

1882-2010林木組織培養(yǎng)育苗技術(shù)規(guī)程和DB/T752-2009植物種

苗快繁技術(shù)規(guī)程有相似之處，參考了上述標(biāo)準(zhǔn)。但藥用植物細(xì)胞

培養(yǎng)和組織培養(yǎng)存在差異，因此在操作規(guī)程的其它部分與上述標(biāo)

準(zhǔn)存在差異。

（二）是否引用相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)？引用的內(nèi)容是什么？

1.GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

引用內(nèi)容為“實(shí)驗(yàn)用水要求”。

2.LY/T1882-2010林木組織培養(yǎng)育苗技術(shù)規(guī)程

引用內(nèi)容為“母液的配制和保存”及“培養(yǎng)基的配置”。

3.DB/T752-2009植物種苗快繁技術(shù)規(guī)程

引用內(nèi)容為“接種前的操作準(zhǔn)備”。

五、與現(xiàn)行強(qiáng)制性國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或政策法規(guī)的關(guān)系

本標(biāo)準(zhǔn)草案與現(xiàn)行強(qiáng)制性國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)及政策法規(guī)無(wú)矛盾或沖

突。

六、代表性分歧意見(jiàn)的處理經(jīng)過(guò)和依據(jù)

項(xiàng)目編制過(guò)程中無(wú)重大分歧，關(guān)于方法細(xì)節(jié)的分歧可通過(guò)會(huì)

議討論處理。

七、宣傳、貫徹標(biāo)準(zhǔn)和后效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)的要求和措施

（一）宣傳、貫徹標(biāo)準(zhǔn)的措施

1.標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)施單位

本標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布后，擬在珍稀瀕危藥用植物國(guó)家地方聯(lián)合工程研

14

究中心，中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中藥資源中心，大連普瑞康生物技術(shù)有

限公司，廣西藥用植物園，安徽中醫(yī)藥大學(xué)，大連源盛泰醫(yī)療投

資股份有限公司、北京同仁堂健康藥業(yè)有限公司、浙江中醫(yī)藥大

學(xué)實(shí)施。

2.其他宣傳、貫徹本標(biāo)準(zhǔn)的措施

2.1標(biāo)準(zhǔn)培訓(xùn)

通過(guò)網(wǎng)絡(luò)的形式或借助學(xué)術(shù)會(huì)議舉辦每年至少一次全國(guó)范

圍的標(biāo)準(zhǔn)培訓(xùn)班，面向全國(guó)植物細(xì)胞培養(yǎng)物生產(chǎn)企業(yè)、原料使用

企業(yè)、銷(xiāo)售企業(yè)、科研院所的相關(guān)人員宣傳、推廣《藥用植物細(xì)

胞培養(yǎng)技術(shù)規(guī)程》這一團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)，指導(dǎo)如何運(yùn)用標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)、質(zhì)控

和開(kāi)展科學(xué)研究等。此外，通過(guò)郵件、電話、微信等形式指導(dǎo)標(biāo)

準(zhǔn)應(yīng)用，并對(duì)標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用過(guò)程中的問(wèn)題進(jìn)行咨詢(xún)和解答。

2.2標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用

面向全國(guó)植物細(xì)胞培養(yǎng)物生產(chǎn)企業(yè)、原料使用企業(yè)、銷(xiāo)售企

業(yè)、科研院所推廣《藥用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)規(guī)程》這一團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)，

指導(dǎo)標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用，并對(duì)標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用過(guò)程中的問(wèn)題進(jìn)行咨詢(xún)和解答。

2.3媒體宣傳

通過(guò)網(wǎng)頁(yè)、微信公眾號(hào)、中藥相關(guān)的網(wǎng)絡(luò)平臺(tái)等進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)的

宣傳和推廣；通過(guò)在學(xué)術(shù)會(huì)議做相關(guān)報(bào)告、發(fā)放宣傳資料來(lái)進(jìn)行

標(biāo)準(zhǔn)的宣傳和推廣。

（二）標(biāo)準(zhǔn)的用戶(hù)評(píng)價(jià)

擬于標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施2年后，通過(guò)發(fā)放調(diào)查問(wèn)卷的模式開(kāi)展標(biāo)準(zhǔn)的

用戶(hù)評(píng)價(jià)，評(píng)價(jià)內(nèi)容包括：

（1）該標(biāo)準(zhǔn)的應(yīng)用情況，應(yīng)用規(guī)模；

（2）該標(biāo)準(zhǔn)的適用性，是否適用于貴單位的產(chǎn)品或技術(shù)服

務(wù)；

（3）實(shí)施標(biāo)準(zhǔn)的過(guò)程中，是否遇到問(wèn)題;

15

（4）對(duì)標(biāo)準(zhǔn)的建議和意見(jiàn)。

（三）標(biāo)準(zhǔn)的修訂

擬于標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施3年后根據(jù)執(zhí)行情況開(kāi)展標(biāo)準(zhǔn)的更新或修訂工

作。

八、廢止現(xiàn)行有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的建議

無(wú)。

九、相關(guān)附錄

附件1《藥用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)規(guī)程》文獻(xiàn)/標(biāo)準(zhǔn)調(diào)研報(bào)告

附件2《天山雪蓮培養(yǎng)物》等2個(gè)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)起草組成立會(huì)議紀(jì)

要

附件3《藥用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)規(guī)程》起草人知情同意書(shū)

附件4《藥用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)規(guī)程》團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)目調(diào)研報(bào)告

16

附件1

《藥用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)規(guī)程》文獻(xiàn)

/標(biāo)準(zhǔn)調(diào)研報(bào)告

17

目錄

1植物細(xì)胞工程、植物組織培養(yǎng)及植物細(xì)胞培養(yǎng).............................................................1

1.1植物細(xì)胞工程..................................................................................................................1

1.2植物組織培養(yǎng)..................................................................................................................1

1.2.1植物組織培養(yǎng)概述.......................................................................................................1

1.2.2植物組織培養(yǎng)技術(shù)原理...............................................................................................1

1.3植物細(xì)胞培養(yǎng)..................................................................................................................2

1.4植物細(xì)胞工程的應(yīng)用......................................................................................................2

1.4.1原生質(zhì)體培養(yǎng)...............................................................................................................2

1.4.2植物細(xì)胞培養(yǎng)或生物反應(yīng)器生產(chǎn)藥用成分...............................................................3

1.4.3植物快速繁殖技術(shù).......................................................................................................4

1.4.4體細(xì)胞胚胎發(fā)生及人工種子.......................................................................................4

1.4.5作物育種技術(shù)...............................................................................................................5

1.4.6組織或細(xì)胞培養(yǎng)物的超低溫保存及種質(zhì)庫(kù)的建立...................................................7

2植物細(xì)胞培養(yǎng).....................................................................................................................8

2.1植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展..............................................................................................8

2.1.1基礎(chǔ)理論發(fā)展階段.......................................................................................................8

2.1.2基本技術(shù)發(fā)展階段.......................................................................................................9

2.1.3應(yīng)用研究發(fā)展階段.......................................................................................................9

2.2植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用..............................................................................................9

2.2.1植物細(xì)胞工程與植物來(lái)源生物產(chǎn)品的生產(chǎn)...............................................................9

2.2.2植物體細(xì)胞無(wú)性系變異與植物改良.........................................................................10

2.2.3細(xì)胞突變體的篩選.....................................................................................................11

2.2.4植物干細(xì)胞培養(yǎng).........................................................................................................11

2.3藥用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)................................................................................................12

2.3.1藥用植物細(xì)胞培養(yǎng).....................................................................................................12

2.3.2藥用植物細(xì)胞培養(yǎng)與植物細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)的比較.....................................................13

2.3.3存在問(wèn)題及展望.........................................................................................................14

1

1植物細(xì)胞工程、植物組織培養(yǎng)及植物細(xì)胞培養(yǎng)

1.1植物細(xì)胞工程

細(xì)胞工程是應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)、遺傳學(xué)和分子生物學(xué)的理論和方法，從細(xì)胞水

平上對(duì)細(xì)胞進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)和分子水平上的基因改造[1]。根據(jù)研究材料的不同，

可分為植物細(xì)胞工程和動(dòng)物細(xì)胞工程。植物細(xì)胞工程是以植物細(xì)胞全能性為理論

基礎(chǔ)，以植物組織與細(xì)胞培養(yǎng)為技術(shù)支持，在細(xì)胞和亞細(xì)胞水平對(duì)植物進(jìn)行遺傳

操作，實(shí)現(xiàn)植物改良和利用，或獲得植物來(lái)源的生物產(chǎn)品的科學(xué)技術(shù)[2]。植物細(xì)

胞工程的基本技術(shù)包括組織培養(yǎng)技術(shù)和體細(xì)胞雜交技術(shù)。

1.2植物組織培養(yǎng)

1.2.1植物組織培養(yǎng)概述

植物組織培養(yǎng)即植物的離體培養(yǎng)，是指在無(wú)菌和人工控制的環(huán)境條件下，利

用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，對(duì)離體的植物器官、組織、細(xì)胞及原生質(zhì)體進(jìn)行培養(yǎng)，使其生

成完整植株的技術(shù)。植物組織培養(yǎng)廣義上是指對(duì)植物的植株、器官、組織以及原

生質(zhì)體進(jìn)行培養(yǎng)的技術(shù)；狹義上是指對(duì)植物的組織及培養(yǎng)產(chǎn)生的愈傷組織進(jìn)行培

養(yǎng)的技術(shù)[3]。植物組織培養(yǎng)是植物生物技術(shù)的重要組成部分和基本研究手段，已

滲透到生物學(xué)科的各個(gè)領(lǐng)域，在植物的快繁、脫毒、植物育種、種質(zhì)資源的保存

和次生代謝物的生產(chǎn)等領(lǐng)域發(fā)揮著巨大的作用，產(chǎn)生了巨大的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效

益，是現(xiàn)代生物學(xué)科中最有生命力的學(xué)科之一。

1.2.2植物組織培養(yǎng)技術(shù)原理

植物組織培養(yǎng)的原理是細(xì)胞全能性。細(xì)胞全能性是指高度分化的植物體細(xì)胞

具有全能性，細(xì)胞經(jīng)分裂和分化后，均具有同樣的或基本相同的成套的遺傳物質(zhì)，

只不過(guò)在特定條件下才會(huì)表達(dá)，如一定營(yíng)養(yǎng)的物質(zhì)、激素和其他適宜條件[4]。組

織培養(yǎng)基于此原理誘導(dǎo)形成愈傷組織，在傷口表面新生的組織，再在愈傷組織上

形成新的叢生芽。

1

1.3植物細(xì)胞培養(yǎng)

植物細(xì)胞培養(yǎng)是應(yīng)用生物工程研究成果，在細(xì)胞水平上生產(chǎn)植物生物制品

的技術(shù)。植物細(xì)胞培養(yǎng)是指在離體條件下，將愈傷組織或其它易分離的組織置于

液體培養(yǎng)基或固體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，得到分散成游離的懸浮細(xì)胞或細(xì)胞群，通

過(guò)繼代培養(yǎng)使細(xì)胞增殖，從而獲得大量的細(xì)胞群體的一種技術(shù)[3]。早在20世紀(jì)

50年代人們就發(fā)現(xiàn)離體培養(yǎng)的高等植物細(xì)胞具有合成并積累次生代謝產(chǎn)物的潛

力。在當(dāng)前植物資源短缺和需求量不斷加大的形勢(shì)下，靠提取分離途徑已很難滿(mǎn)

足市場(chǎng)需求，利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)植物產(chǎn)品已成為工業(yè)化生產(chǎn)植物產(chǎn)品的

一條有效途徑。這些產(chǎn)品既可用作藥物生產(chǎn)的原料，也可作為工業(yè)、農(nóng)業(yè)、食品

添加劑等的原料。自紫草細(xì)胞培養(yǎng)提取出紫草寧成為第一個(gè)植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)商

品至今，國(guó)內(nèi)外動(dòng)、植物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)研究很快遍布各個(gè)醫(yī)藥領(lǐng)域。運(yùn)用工程

細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)有價(jià)值的新型藥物和分離有效成分的技術(shù)越來(lái)越得到了醫(yī)藥界廣

泛關(guān)注和認(rèn)可。該技術(shù)尤其適合于資源短缺、采集困難、種植要求高的名貴藥材。

運(yùn)用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)研制與開(kāi)發(fā)現(xiàn)代天然產(chǎn)物是當(dāng)今國(guó)際細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)產(chǎn)業(yè)

化的熱點(diǎn)問(wèn)題和主要發(fā)展方向之一，也是我國(guó)實(shí)現(xiàn)中藥現(xiàn)代化，開(kāi)創(chuàng)低成本、高

產(chǎn)出、無(wú)污染的工業(yè)化生產(chǎn)天然植物藥的新思路。

1.4植物細(xì)胞工程的應(yīng)用

植物細(xì)胞工程技術(shù)的應(yīng)用，催生了一大批先進(jìn)實(shí)用的研究成果和技術(shù)，培

育了一批優(yōu)良品種。在大力推廣常規(guī)脫毒和快繁技術(shù)的同時(shí)，加快發(fā)展植物快繁

生物反應(yīng)器和光自養(yǎng)微繁技術(shù)，將為種業(yè)帶來(lái)新的變革。生產(chǎn)微型營(yíng)養(yǎng)器官的人

工種子可能成為最先規(guī)模化應(yīng)用的人工種子技術(shù)，以體細(xì)胞胚為繁殖體的人工種

子技術(shù)需要進(jìn)一步研究和完善。應(yīng)用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)植物來(lái)源的生物產(chǎn)品，

盡管目前僅在少數(shù)植物上實(shí)現(xiàn)了商業(yè)化生產(chǎn)，但隨著植物細(xì)胞工程生物反應(yīng)器技

術(shù)的完善，其應(yīng)用領(lǐng)域?qū)⑦M(jìn)一步擴(kuò)大。

1.4.1原生質(zhì)體培養(yǎng)

原生質(zhì)體培養(yǎng)和體細(xì)胞雜交是植物細(xì)胞工程的核心技術(shù)之一，為克服植物遠(yuǎn)

2

緣雜交不親和性，創(chuàng)造新的種質(zhì)資源，實(shí)現(xiàn)植物遺傳轉(zhuǎn)化和進(jìn)行細(xì)胞學(xué)的基礎(chǔ)研

究提供了重要的技術(shù)支撐。自1971年Takebe等首次報(bào)道獲得煙草葉肉原生質(zhì)體

再生植株以來(lái)，原生質(zhì)體培養(yǎng)和體細(xì)胞雜交技術(shù)一直是植物細(xì)胞工程的重要研究

領(lǐng)域，在分離原生質(zhì)體的材料選擇、培養(yǎng)基與培養(yǎng)環(huán)境控制、體細(xì)胞雜交技術(shù)等

方面進(jìn)行了大量研究，建立了原生質(zhì)體培養(yǎng)和體細(xì)胞雜交的技術(shù)程序。到1976

年，有12種植物的原生質(zhì)體能再生植株，1983年增加到70種，1986年超過(guò)80

種，到90年代初期達(dá)到100種以上。原生質(zhì)體培養(yǎng)是80年代的一個(gè)研究熱點(diǎn)。

日本和中國(guó)在這一領(lǐng)域做出了很大的貢獻(xiàn)。日本科學(xué)家成功地進(jìn)行了大約70個(gè)

植物品種的原生質(zhì)體培養(yǎng)。我國(guó)獲得了30個(gè)以上品種的原生質(zhì)體再生植株，其

中包括難度較大的重要糧食作物和經(jīng)濟(jì)作物大豆、水稻、玉米、小麥、谷子、高

粱、大麥、棉花、油菜、馬鈴薯等[5]。在木本植物、藥用植物、蔬菜和真菌原生

質(zhì)體培養(yǎng)方面的進(jìn)展也十分迅速。

1.4.2植物細(xì)胞培養(yǎng)或生物反應(yīng)器生產(chǎn)藥用成分

植物細(xì)胞培養(yǎng)是指利用植物細(xì)胞，以現(xiàn)代生物工程技術(shù)手段來(lái)進(jìn)行大規(guī)模工

業(yè)生產(chǎn)，來(lái)獲得人類(lèi)所需產(chǎn)品的技術(shù)。1956年Routier與Nickell首次提出以植

物細(xì)胞培養(yǎng)物來(lái)合成藥物，而后在1967年Kaul與Staba采用了多升發(fā)酵罐對(duì)牙

簽草進(jìn)行了大規(guī)模細(xì)胞和組織培養(yǎng)的研究，并通過(guò)培養(yǎng)得到了呋喃色酮[6]。植物

細(xì)胞生物反應(yīng)器由于技術(shù)、工藝和成本等原因，目前僅有少數(shù)產(chǎn)品(人參皂苷、

紫草寧、紫紅素、紫杉醇等)在韓國(guó)、日本、德國(guó)等國(guó)家實(shí)現(xiàn)了商業(yè)化應(yīng)用。隨

著技術(shù)的進(jìn)一步完善和生產(chǎn)成本的降低，該技術(shù)在植物來(lái)源生物產(chǎn)品的生產(chǎn)方面

將有廣闊的發(fā)展前景。

植物生物反應(yīng)器是指通過(guò)植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)，培養(yǎng)的天然的或轉(zhuǎn)基因的

植物細(xì)胞，組織或整個(gè)植株作為“工廠”來(lái)大量生產(chǎn)人類(lèi)所需產(chǎn)品。在我國(guó)植物生

物反應(yīng)器的研究于20世紀(jì)90年代初期開(kāi)始，目前在培育轉(zhuǎn)基因植物和構(gòu)建高效

植物表達(dá)載體等主要技術(shù)方面與國(guó)外技術(shù)相差很小，但是對(duì)于植物生物反應(yīng)器研

究與應(yīng)用的積累上與國(guó)外發(fā)達(dá)國(guó)家還存在較大差距，在國(guó)家通過(guò)“九五”計(jì)劃對(duì)植

物生物反應(yīng)器進(jìn)行政策扶持后，目前已經(jīng)取得的成果有：①使馬鈴薯與番茄導(dǎo)入

乙型肝炎病毒包膜蛋白的基因，并獲得高效表達(dá)的外源基因植株。②使馬鈴薯導(dǎo)

3

入產(chǎn)毒素大腸桿菌熱敏毒素b亞基及定居因子CS6B抗原蛋白基因，并獲得高效

表達(dá)重組抗原蛋白的馬鈴薯植株。③得到了口蹄疫流行株的基因文庫(kù)并得到了O

型口蹄疫口服疫苗VP1基因，可作為疫苗研究進(jìn)行轉(zhuǎn)基因表達(dá)蛋白[7]。

1.4.3植物快速繁殖技術(shù)

60年代，法國(guó)的Morel用莖尖培養(yǎng)的方法大量繁殖蘭花獲得成功。植物快

速繁殖技術(shù)、試管苗工廠化生產(chǎn)和無(wú)病毒種苗生產(chǎn)技術(shù)在70年代得到了快速的

發(fā)展。通過(guò)離體培養(yǎng)獲得小植株并且具有快速繁殖潛力的植物已有100多科、

1000種以上，有的已經(jīng)發(fā)展成為工業(yè)化生產(chǎn)的商品。植物快繁技術(shù)包括用于快

速繁殖優(yōu)良品種、瀕危物種及轉(zhuǎn)基因植物的組織培養(yǎng)技術(shù)以及通過(guò)切取莖尖進(jìn)行

組織培養(yǎng)，從而獲得脫毒苗的作物脫毒技術(shù)。種類(lèi)也由以觀賞植物為主逐漸發(fā)展

到果樹(shù)、林木、蔬菜和大田作物。美國(guó)、法國(guó)、意大利、荷蘭等歐美國(guó)家試管苗

的年產(chǎn)量均在數(shù)千萬(wàn)株以上，并且以每年7%-8%的速度增加。

我國(guó)快速繁殖和無(wú)病毒種苗生產(chǎn)的研究始于70年代?！傲濉逼陂g主要是研

究、積累階段，到“七五”期間研究成果開(kāi)始向應(yīng)用轉(zhuǎn)化并大見(jiàn)成效。馬鈴薯無(wú)毒

種薯和甘蔗種苗已在生產(chǎn)上大面積種植。蘭花、香石竹、月季、菊花、唐菖蒲、

百合、花燭、非洲菊、蒲包花、大花萱草、非洲紫羅蘭、大巖桐、重瓣玉簪、花

葉芋、瑞香、橡皮樹(shù)、草莓、茶花、桉樹(shù)、楊樹(shù)、蘋(píng)果、柑桔、棗樹(shù)、枸杞、醋

栗、葡萄、木薯、無(wú)籽西瓜已進(jìn)行規(guī)?；a(chǎn)或中間試驗(yàn)。試管苗的年產(chǎn)量已由

90年代初期的2000萬(wàn)株左右發(fā)展到現(xiàn)在的5000萬(wàn)到1億株以上。此外，一些

作物脫毒技術(shù)也不斷被開(kāi)發(fā)出來(lái)，如微型脫毒馬鈴薯生產(chǎn)技術(shù)、馬鈴薯脫毒小薯

的噴霧無(wú)基質(zhì)栽培技術(shù)等。

1.4.4體細(xì)胞胚胎發(fā)生及人工種子

據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，能大量產(chǎn)生胚狀體的植物已有43科、92屬、100多種。

一些重要作物如水稻、小麥、玉米、珍珠谷等，也能通過(guò)離體培養(yǎng)產(chǎn)生胚狀體。

1977年，Murashige第一次提出利用植物組織培養(yǎng)中體細(xì)胞胚胎發(fā)生的特點(diǎn)，把

胚狀體包埋在膠囊內(nèi)形成球狀結(jié)構(gòu)，使其具有種子的機(jī)能并可直接播種于田間的

設(shè)想。人工種子是以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料，

4

經(jīng)過(guò)人工薄膜包裝得到的種子。80年代初，美、日、法等國(guó)相繼開(kāi)展了人工種

子的研究，并且在胡蘿卜、苜蓿、芹菜、花椰菜、萵苣、花旗松等植物上獲得了

初步的成功。歐洲將人工種子研究納入“尤里卡計(jì)劃”。印度、芬蘭、瑞士、韓國(guó)

等國(guó)也開(kāi)展了研究。我國(guó)人工種子的研究開(kāi)始于“七五”期間，并且被列入了“863

高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃”。對(duì)胡蘿卜、芹菜、黃連、苜蓿、西洋參、云杉、華腺萼

木、四會(huì)貢桃、番木瓜、芫荽等十幾種材料進(jìn)行了系統(tǒng)的研究。目前這一領(lǐng)域存

在的最主要的問(wèn)題是模擬人工種皮。相信隨著人工種皮制作和其它一些問(wèn)題的突

破，人工種子總有一天會(huì)實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)，給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)帶來(lái)根本性的變革。

1.4.5作物育種技術(shù)

應(yīng)用于作物育種的植物細(xì)胞工程技術(shù)包括細(xì)胞融合與體細(xì)胞雜交、胚胎培養(yǎng)、

單倍體育種、體細(xì)胞無(wú)性系變異、細(xì)胞突變體的篩選等。

(1)細(xì)胞融合與體細(xì)胞雜交

第一棵體細(xì)胞雜種植株是在1972年建立的，美國(guó)的Carlson誘導(dǎo)粉藍(lán)煙草和

郎氏煙草的原生質(zhì)體融合并獲得了雜種植株。早期的研究對(duì)象主要集中在茄科的

煙草屬、曼陀羅屬和矮牽牛屬，以后逐漸轉(zhuǎn)移到茄屬、番茄屬、顛茄屬和十字花

科的蕓苔屬、擬南芥屬和傘形科的胡蘿卜屬、歐芹屬。隨著重要糧油作物的原生

質(zhì)體再生植株的成功，研究對(duì)象又再一次轉(zhuǎn)移。用于融合的親本細(xì)胞也由最初的

品種間進(jìn)展到種間、屬間甚至科間。

亞太地區(qū)大約誘導(dǎo)了50多個(gè)種間和屬間的原生質(zhì)體融合形成植株，其中日

本占一半。通過(guò)木本植物柑桔類(lèi)種屬間的體細(xì)胞雜交，培育出新的柑桔雜交品種，

有性雜交不親和的番茄+馬鈴薯間的體細(xì)胞雜交也獲得了雜種植株。通過(guò)馬鈴薯

的栽培品種與野生種的體細(xì)胞雜交，得到了抗晚疫病和卷葉病的體細(xì)胞雜種。白

菜型油菜與甘藍(lán)的體細(xì)胞雜交，得到了甘藍(lán)型油菜?？崎g的大豆+粉藍(lán)煙草、大

豆+煙草也產(chǎn)生了連續(xù)增殖的雜種細(xì)胞系，更遠(yuǎn)緣的大豆+水稻產(chǎn)生了愈傷組織。

日本科學(xué)家還利用不對(duì)稱(chēng)細(xì)胞融合技術(shù)培育獲得世界上第一個(gè)商品煙草雄性不

育系，應(yīng)用這種雄性不育系，又開(kāi)發(fā)了胡蘿卜、卷心菜和茄子的F1代雜種。我

國(guó)科學(xué)家利用煙草與黃花煙草和粉藍(lán)煙草的體細(xì)胞雜交開(kāi)發(fā)出新的煙草商品品

種。

5

(2)胚胎培養(yǎng)

植物胚胎培養(yǎng)是胚、胚珠、子房和胚乳的離體培養(yǎng)技術(shù)，其應(yīng)用領(lǐng)域包括胚

胎的發(fā)育機(jī)理、克服雜交不親合性和胚拯救、克服珠心胚的干擾、打破種子休眠，

縮短育種周期，獲得體細(xì)胞胚和人工種子，建立植物高效再生體系等，并在農(nóng)作

物、園藝作物、林木和藥用植物上廣泛應(yīng)用。胚乳培養(yǎng)的主要目的是獲得具有利

用價(jià)值的三倍體植株，還可作為研究淀粉等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)合成和代謝的實(shí)驗(yàn)體系。植

物離體受精技術(shù)是植物細(xì)胞工程中的重要實(shí)驗(yàn)技術(shù)，為研究植物胚胎發(fā)育機(jī)理提

供了新的實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，為開(kāi)發(fā)新的植物轉(zhuǎn)基因途徑提供了可能。目前，已經(jīng)有100

篇以上幼胚培養(yǎng)成為植株的報(bào)道，有40多個(gè)雜種胚培養(yǎng)成功。印度科學(xué)家在栽

培種菜豆、黃麻和花生的遠(yuǎn)緣雜交中獲得了理想的重組體。日本科學(xué)家獲得了3

個(gè)柑桔屬、李屬和蕓苔屬品種和5個(gè)百合栽培種。中國(guó)農(nóng)科院蔬菜所培養(yǎng)結(jié)球甘

藍(lán)和大白菜的雜種胚得到了種間雜種。中科院植物所和北京市農(nóng)科院合作育成早

熟桃新品種“京早3號(hào)”，成熟期比一般早熟桃提前15-20天。西北植物所得到了

節(jié)節(jié)草和普通小麥的屬向雜種。中國(guó)農(nóng)科院棉花所獲得了栽培棉和野生棉的種間

雜種。大麥+小麥、大麥+提莫菲維小麥、小麥+冰草(育成新品種小堰6號(hào))、小

麥+大賴(lài)草、小麥+簇毛麥、小麥+黑麥、硬粒小麥+簇毛麥等也通過(guò)胚培養(yǎng)獲得

了雜種。煙草屬間雜種、水稻品種間雜種也已經(jīng)得到。

(3)單倍體育種

加倍單倍體技術(shù)(DoublehaploidTechnology)是指利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)

單倍體植物材料(花藥、花粉、未受精的子房和胚珠)獲得單倍體植物，然后通過(guò)

自然或人工加倍的方法獲得雙倍體植株的技術(shù)。其中以花藥和花粉培養(yǎng)應(yīng)用最為

廣泛。利用加倍單倍體技術(shù)進(jìn)行花藥和花粉培養(yǎng)，已在250多種植物上獲得成功，

中國(guó)、加拿大、澳大利亞、歐盟等在花卉育種中取得了突出的研究成果。

我國(guó)于1970年開(kāi)始這方面的研究，并在70年代成為一個(gè)熱點(diǎn)，也取得了很

大的成果。培育40種以上植物的花粉或花藥發(fā)育成單倍體植株，其中小麥、黑

麥、小冰麥、玉米、橡膠樹(shù)、楊樹(shù)、辣椒、甜菜、白菜、油菜、柑桔、甘蔗