pcr考試試題及答案

pcr考試試題及答案

一、單項選擇題（每題2分，共10題）1.PCR的中文名稱是（）A.聚合酶鏈反應B.基因測序反應C.核酸雜交反應答案：A2.PCR反應中，哪種酶起到關鍵的催化作用（）A.逆轉(zhuǎn)錄酶B.TaqDNA聚合酶C.限制酶答案：B3.PCR反應體系中，引物的作用是（）A.提供起始合成的3'-OH末端B.提供能量C.穩(wěn)定反應體系答案：A4.以下哪個不是PCR反應的基本步驟（）A.變性B.轉(zhuǎn)錄C.延伸答案：B5.在PCR反應中，變性溫度一般為（）A.90-95℃B.70-75℃C.50-55℃答案：A6.PCR反應的延伸時間主要取決于（）A.引物長度B.模板長度C.酶的活性答案：B7.以下哪種物質(zhì)會抑制PCR反應（）A.鎂離子B.乙二胺四乙酸（EDTA）C.核苷酸答案：B8.PCR技術可用于（）A.基因克隆B.蛋白質(zhì)合成C.細胞培養(yǎng)答案：A9.如果PCR沒有得到預期的產(chǎn)物，可能的原因不包括（）A.引物設計錯誤B.反應體系中模板過多C.退火溫度不合適答案：B10.實時熒光定量PCR主要用于（）A.檢測DNA的含量B.檢測蛋白質(zhì)的含量C.檢測RNA的含量答案：A二、多項選擇題（每題2分，共10題）1.PCR反應體系的主要成分包括（）A.模板DNAB.引物C.TaqDNA聚合酶D.dNTPs答案：ABCD2.影響PCR反應特異性的因素有（）A.引物特異性B.退火溫度C.模板純度D.鎂離子濃度答案：ABCD3.以下哪些應用是基于PCR技術的（）A.遺傳病診斷B.病原體檢測C.基因分型D.法醫(yī)鑒定答案：ABCD4.在設計PCR引物時，需要考慮的因素有（）A.引物長度B.引物的GC含量C.引物的特異性D.引物的退火溫度答案：ABCD5.PCR反應中，鎂離子的作用包括（）A.作為酶的輔助因子B.影響引物退火C.影響產(chǎn)物特異性D.穩(wěn)定反應體系答案：ABC6.以下關于PCR的描述正確的是（）A.是一種體外擴增DNA的技術B.具有高靈敏度C.可以在短時間內(nèi)獲得大量目的DNAD.操作復雜答案：ABC7.可能導致PCR出現(xiàn)非特異性擴增的因素有（）A.引物濃度過高B.退火溫度過低C.循環(huán)次數(shù)過多D.模板污染答案：ABCD8.用于PCR產(chǎn)物分析的方法有（）A.瓊脂糖凝膠電泳B.聚丙烯酰胺凝膠電泳C.測序D.酶切分析答案：ABCD9.提高PCR反應產(chǎn)量的方法有（）A.增加模板量B.優(yōu)化引物設計C.適當提高鎂離子濃度D.增加循環(huán)次數(shù)答案：ABCD10.PCR反應中的退火過程（）A.引物與模板結合B.溫度一般低于變性溫度C.是特異性結合過程D.受引物長度影響答案：ABCD三、判斷題（每題2分，共10題）1.PCR反應只能擴增雙鏈DNA。（）答案：錯誤2.TaqDNA聚合酶具有熱穩(wěn)定性。（）答案：正確3.引物在PCR反應中可以反復使用。（）答案：錯誤4.PCR反應的延伸溫度通常為72℃左右。（）答案：正確5.模板DNA的純度對PCR反應結果沒有影響。（）答案：錯誤6.實時熒光定量PCR比普通PCR更能準確地定量分析。（）答案：正確7.在PCR反應中，dNTPs的濃度越高越好。（）答案：錯誤8.只要引物特異性好，PCR反應就不會出現(xiàn)非特異性擴增。（）答案：錯誤9.PCR反應中的變性過程是使雙鏈DNA變?yōu)閱捂淒NA。（）答案：正確10.不同的基因在進行PCR擴增時，退火溫度是相同的。（）答案：錯誤四、簡答題（每題5分，共4題）1.簡述PCR反應的基本原理。答案：PCR是一種體外擴增DNA的技術。在PCR反應中，首先通過高溫變性使雙鏈DNA變?yōu)閱捂淒NA，然后在退火溫度下引物與模板特異性結合，最后在延伸溫度下，TaqDNA聚合酶以引物為起始點，按照模板鏈的序列合成新的DNA鏈，不斷重復這三個步驟，從而使目的DNA得到大量擴增。2.寫出PCR反應體系中引物設計的基本原則。答案：引物長度一般為15-30bp；GC含量在40%-60%；避免引物內(nèi)部形成二級結構；引物之間不能互補；引物應具有特異性，與模板有唯一的互補序列。3.說明PCR反應中出現(xiàn)非特異性擴增的原因有哪些？答案：引物特異性差；退火溫度過低；引物濃度過高；模板污染；循環(huán)次數(shù)過多；鎂離子濃度不合適等都可能導致非特異性擴增。4.簡述實時熒光定量PCR與普通PCR的區(qū)別。答案：實時熒光定量PCR可實時監(jiān)測PCR反應過程中的產(chǎn)物量，能準確進行定量分析；普通PCR主要用于擴增目的DNA，不能直接定量，需要后續(xù)通過凝膠電泳等方法對產(chǎn)物進行定性分析。五、討論題（每題5分，共4題）1.討論如何優(yōu)化PCR反應條件以提高擴增效率。答案：可從調(diào)整引物設計，如優(yōu)化引物長度、GC含量等；調(diào)整鎂離子濃度到合適范圍；選擇合適的退火溫度；保證模板的純度和合適的量；控制循環(huán)次數(shù)等方面來提高擴增效率。2.分析PCR技術在疾病診斷中的應用前景。答案：PCR可快速檢測病原體核酸，早期診斷疾病；能檢測基因變異，用于遺傳病診斷；隨著技術發(fā)展，其檢測靈敏度和特異性不斷提高，在疾病的快速、準確診斷方面有廣闊前景。3.闡述PCR反應中引物的重要性。答案：引物為DNA合成提供起始的3'-OH末端，決定了擴增的起始位置；引物的特異性影響PCR反應的特異性，只