《毒理學(xué)基礎(chǔ)》第八章化學(xué)致癌預(yù)防大綱

第八章

化學(xué)致癌作用

總體內(nèi)容

?一、序言

?二、致癌化學(xué)過(guò)程

?三、化學(xué)致癌機(jī)制(遺傳毒性和非遺傳毒性)

?四、化學(xué)致癌相關(guān)的分子事件

?五、化學(xué)致癌物的分類(lèi)

?六、化學(xué)致癌物篩查的基本方法

第Zk一-PW-

序言

腫瘤是一類(lèi)嚴(yán)重影響人類(lèi)健康和生命的疾病

外因

(病原因素)

ABoykmd指出：“人類(lèi)腫瘤由病毒等生物因素引起的不足5%,放射線和紫外線等

物理因素引起的也不超過(guò)5%,約有90%是化學(xué)物引起的。

AHigginson提出：環(huán)境因素引起的腫瘤占人類(lèi)腫瘤的70%?90%,遺傳所引起的

腫瘤不超過(guò)5%。

幾個(gè)概念

?化學(xué)致癌作用(chemicalcarcinogenesis)是指化學(xué)物質(zhì)引起生物體產(chǎn)生腫瘤

的過(guò)程。

?化學(xué)致癌物(chemicalCarcinogen):是指能引起腫瘤的或使腫瘤發(fā)生率增加的

化學(xué)物。

第二節(jié)化學(xué)致癌過(guò)程

化學(xué)致癌作用——一個(gè)多基因、多因素參與的多階段過(guò)程

一、細(xì)胞癌變的多階段學(xué)說(shuō)

目前比較公認(rèn)的學(xué)說(shuō)是化學(xué)致癌過(guò)程至少包括三個(gè)階段：

A啟動(dòng)階段(initiation)

'*促進(jìn)階段(promotion)

*演變階段(progression)

(-)啟動(dòng)階段

在此階段中，致癌物直接作用于DNA的序列，引起基因突變或表觀遺傳變

異，使單個(gè)細(xì)胞或少量細(xì)胞發(fā)生永久性的、不可逆的遺傳性改變，此種細(xì)胞稱(chēng)

為“啟動(dòng)細(xì)胞”(initiatedcell),誘發(fā)細(xì)胞突變的因素稱(chēng)為啟動(dòng)劑。

目為腫瘤的潛能。

或啟動(dòng)過(guò)程的特點(diǎn)之一是不可逆性，就是說(shuō)它的突變已經(jīng)固定下來(lái)了。

（二）促進(jìn)階段

啟動(dòng)細(xì)胞在某些因素作用下，以相對(duì)于周?chē)＜?xì)胞的選擇優(yōu)勢(shì)（使啟動(dòng)

細(xì)胞比正常細(xì)胞增殖增多或細(xì)胞凋亡相對(duì)減少）進(jìn)行克隆擴(kuò)展，形成細(xì)胞群，

即良性腫瘤，這就是致癌作用的第二階段，稱(chēng)為促進(jìn)階段，起促進(jìn)作用的因素

稱(chēng)作促進(jìn)劑或促癌劑。

促進(jìn)劑的特點(diǎn)：

A器官特異性

A物種特異性

A具有閾劑量

A是一個(gè)可逆的過(guò)程

＞大多數(shù)促進(jìn)劑是通過(guò)受體介導(dǎo)起作用的

啟動(dòng)劑和促進(jìn)劑的關(guān)系特點(diǎn)：

1.啟動(dòng)劑作用之后，促癌劑的慢性作用將引起腫瘤；

2.啟動(dòng)劑單獨(dú)作用一般不會(huì)引起腫瘤；

3.只有促癌劑的慢性作用而沒(méi)有啟動(dòng)劑的作用也不會(huì)引起腫瘤；

4.啟動(dòng)劑與促癌劑的作用先后次序十分重要，啟動(dòng)必須發(fā)生在促進(jìn)之前；

5.啟動(dòng)產(chǎn)生的是不可逆的改變，促進(jìn)在早期階段的改變是可逆的。

常見(jiàn)的促進(jìn)劑

/弗波醇酯（TPA）：12■鄰十四烷酰大戟二菇醇?13?乙酸酯,用于小鼠皮膚癌模型

的促進(jìn)劑

/苯巴比妥肝臟腫瘤

/TCDD大鼠肝臟腫瘤，皮膚和肺

/雌、雄激素靶器官及肝臟腫瘤

/膽汁酸促進(jìn)結(jié)腸的癌前病變和惡性改變

促進(jìn)劑的作用機(jī)制

?腫瘤促進(jìn)過(guò)程作用機(jī)制復(fù)雜，很可能通過(guò)非遺傳過(guò)程而發(fā)生。

》促癌劑不與DNA發(fā)生反應(yīng)，不會(huì)引起基因突變，促進(jìn)階段似乎不涉及到遺傳物

質(zhì)的結(jié)構(gòu)改變，而是依賴(lài)于基因表達(dá)的改變。

DNA甲基化和低甲基化

。在脊椎動(dòng)物中，CpG二核甘酸是DNA甲基化發(fā)生的主要位點(diǎn)。CpG常成簇存

在,人們將基因組中富含CpG的一段DNA稱(chēng)為CpG島（CpGisland）

CpG甲基化

》TPA通過(guò)與蛋白激酶C（proteinkinaseCZPKC）高度特異性可逆結(jié)合。PKC參

與膜上信號(hào)的信號(hào)傳遞或刺激反應(yīng)。

（三）演變階段

啟動(dòng)和促進(jìn)兩個(gè)階段所引起瀛性損傷并不是致死性的。良性腫瘤需要通

過(guò)一個(gè)稱(chēng)作演變的過(guò)程才能轉(zhuǎn)變?yōu)閻盒阅[瘤。

隨著惡性度的增加，腫瘤開(kāi)始獲得一些新的性質(zhì)：

＞侵襲性

＞免疫抗性

＞耐藥性

＞產(chǎn)生新的血管使肺癌細(xì)胞能從血液中獲得營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和氧分

?良性腫瘤演變?yōu)楦叨葠盒缘?、致死性的癌往往涉及一系列遺傳改變，概括為核

型不穩(wěn)定和表型的異質(zhì)性。

?使細(xì)胞由促進(jìn)階段進(jìn)入到演變階段的因素稱(chēng)為演變劑。

A有些化學(xué)致癌物同時(shí)具有啟動(dòng)、促進(jìn)和演變的作用，稱(chēng)為完全致癌物。

微衛(wèi)星不穩(wěn)定microsatalliteinstability^MSI）

微衛(wèi)星（microsatellite,MS）是指DNA基因組中小于10個(gè)核苜酸的簡(jiǎn)單

重復(fù)序列，又稱(chēng)短串聯(lián)重復(fù)，如（CA）n、（GT）n、（CAG）n等，尤以（CA）n重復(fù)序列

最為常見(jiàn)。

微衛(wèi)星不穩(wěn)定性是指由于DNA復(fù)制錯(cuò)誤引起的簡(jiǎn)單重復(fù)序列的增加或丟失，

是腫瘤中基因不穩(wěn)定性一項(xiàng)靈敏的標(biāo)志。

第三節(jié)、化學(xué)致癌機(jī)制

箱體細(xì)胞突變學(xué)說(shuō)

或非突變致癌機(jī)制

一體細(xì)胞突變學(xué)說(shuō)

①DNA加合物誘導(dǎo)基因突變；

②大多數(shù)的致癌物在致突變實(shí)驗(yàn)中呈陽(yáng)性；

③DNA修復(fù)缺陷可以導(dǎo)致腫瘤發(fā)生；

④在許多腫瘤組織中發(fā)生染色體畸變或基因組不穩(wěn)定性；

⑤腫瘤細(xì)胞來(lái)源于單細(xì)胞克??；

⑥癌基因的突變以及抑癌基因突變或缺失在腫瘤細(xì)胞中普遍存在，而且突變的基

因型可以通過(guò)細(xì)胞分裂傳遞給子代細(xì)胞。

（一）DNA加合物

DNA加合物形成的后果取決于加合物在DNA鏈上的位置和加合物的

性質(zhì)

接觸標(biāo)志物和效應(yīng)標(biāo)志物

（二）基因與癌變

腫瘤是細(xì)胞中多種基因突變累積的結(jié)果。這些基因突變主要發(fā)生在兩

類(lèi)細(xì)胞基因：

》癌基因(oncogene)

>抑癌基因(tumorsuppressorgene)

火病毒癌基因（viraloncogene,V-onc）:某些RNA病毒能在動(dòng)物迅速誘發(fā)腫瘤并

能在體外轉(zhuǎn)化細(xì)胞，其含有能夠轉(zhuǎn)化細(xì)胞的RNA片斷

火細(xì)胞癌基因（cellularoncogere,C-onc）:正常細(xì)胞的DNA中也發(fā)現(xiàn)存在與病

毒癌基因幾乎完全相同的DNA序列

X由于細(xì)胞癌基因在正常細(xì)胞中以非激活的形式存在，故又稱(chēng)為原癌基因

TIG遺傳命名指南

細(xì)菌：基因符號(hào)由三個(gè)小寫(xiě)斜體字母組成。具有相同表型的不同基因座突變

用斜體大寫(xiě)字母后綴相區(qū)別，如NWA、uvrB

等位基因用緊隨基因座名稱(chēng)后的一系列特定的數(shù)據(jù)表示，如waA/、

araA2

蛋白質(zhì)產(chǎn)物的名稱(chēng)與對(duì)應(yīng)的基因或等位基因相同，但不用斜體，而

且首字母大寫(xiě)，如UvrA、UvrB

（一）原癌基因的分類(lèi)

1.編碼生長(zhǎng)因子的原癌基因

猴肉瘤病毒中的v?sis是第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)能編碼生長(zhǎng)因子的癌基因。原癌

基因S/S的異常表達(dá)，可引起具有PDGF（血小板衍生生長(zhǎng)因子）受體細(xì)胞的轉(zhuǎn)化

原癌基因/AT?2、8ST的表達(dá)產(chǎn)物與成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子有40%?50%的同

源性

2.編碼生長(zhǎng)因子受體的原癌基因

AERB與上皮生長(zhǎng)因子的受體同源

>MET屬于肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體

》FMS為單核巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體

——這類(lèi)受體均屬于受體蛋白酪氨酸激酶

3.編碼細(xì)胞內(nèi)信號(hào)分子的原癌基因

起“第二信使”作用，引起細(xì)胞增殖。分為：

①非受體酪塞酸蛋白激轉(zhuǎn)如"sre

②胞漿絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶如創(chuàng)麗的S

③三磷酸鳥(niǎo)甘結(jié)合蛋白如創(chuàng)德族

A創(chuàng)5g因家族有，-創(chuàng)S、芥池卵心創(chuàng)個(gè)成員，都編碼G蛋白，主要調(diào)節(jié)激素等

信號(hào)通路。

?G蛋白與GDP、GTP和刺激信號(hào)的關(guān)系

A股建因突變的后果

4.編碼轉(zhuǎn)錄因子的原癌基因

>初々基因,神經(jīng)細(xì)胞瘤基因）和小細(xì)胞肺癌（L-〃%基因）

>CFO^C期癌基因的產(chǎn)物結(jié)合形成轉(zhuǎn)錄因子AP1

（二）原癌基因的激活

1.原癌基因點(diǎn)突變

RAS基因的點(diǎn)突變主要發(fā)生于12位密碼子，其次是13位，再就是59和61

位，多是三連密碼子第二位堿基發(fā)生置換，改變了G蛋白的構(gòu)象。

例：亞硝基甲基服誘發(fā)的鼠乳腺癌中，”?凡4s基因的12密碼子的GGC變成了

GAC

2.染色體易位和重排

易位或基因重排，都可以激活癌基因，引起原癌基因的高度表達(dá)。如

Burkitt淋巴瘤t(8;14),6sm曲8號(hào)易位到了14號(hào)染色體免疫球蛋白重鏈

基因附近

3.基因擴(kuò)增

A原癌基因的擴(kuò)增是指在致癌因素作用下，基因的結(jié)構(gòu)基本正常，但基因的拷貝

數(shù)增多，導(dǎo)致基因產(chǎn)物大量增加。

/雙微體(double-minutechromosome,DMS)和染色質(zhì)均染區(qū)(homogeneous

stainingreguibsm,HSRs)

(三)抑癌基因

正常細(xì)胞與癌細(xì)胞溶合后成瘤力和轉(zhuǎn)移能力均受抑制，表明正常細(xì)胞中存在

抑制癌細(xì)胞特征性表達(dá)的某種機(jī)制。以后又發(fā)現(xiàn)融合的細(xì)胞的核型不穩(wěn)定，容

易發(fā)生染色體丟失，當(dāng)失去源于正常細(xì)胞的染色體時(shí)，腫瘤的成痛性又恢復(fù)。

匕抑癌基因必須一對(duì)等位基因丟失或突變后失活，才能對(duì)細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化起作

用，故又稱(chēng)為隱性癌基因。

匕到目前為止發(fā)現(xiàn)的抑癌基因少于癌基因，已被克隆和尚未被克隆的候選抑癌基

因，總共只有30余種。

幾種抑癌基因簡(jiǎn)介

R5基因

?定位于人類(lèi)染色體的12ql4

?二次突變學(xué)說(shuō)和雜合性丟失(lossofhatcrozygosity,LOH)

?功能：抑制轉(zhuǎn)錄因子E2F以抑制細(xì)胞周期。E2F能活化DNA聚合酶等與DNA合

成密切相關(guān)的重要酶類(lèi)基因的轉(zhuǎn)錄，使細(xì)胞從G1期進(jìn)入S期。

尸因

尸53基因位于人類(lèi)染色體17Pl3,野生型P53蛋白是一種核結(jié)合蛋

白。

P53的生物學(xué)功能：①抑制細(xì)胞增殖：正常的P53蛋白在DNA損傷或缺氧時(shí)

活化DNA修復(fù)基因等上調(diào)性轉(zhuǎn)錄，使細(xì)胞周期在Gi期停滯，進(jìn)入DNA修復(fù)。

②誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡

③P53誘導(dǎo)分化發(fā)育

(二)DNA修復(fù)與化學(xué)致癌

二、非遺傳毒性致癌機(jī)制

(-)表觀遺傳調(diào)控失常導(dǎo)致腫瘤發(fā)生

在基因組中除了DNA和RNA序列以外，還有許多調(diào)控基因的信息，它們

雖然本身不改變基因的序列，但是可以通過(guò)基因修飾，蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)、

DNA和其它分子的相互作用，而影響和調(diào)節(jié)遺傳基因的功能和特性，并且通

過(guò)細(xì)胞分裂和增殖周期影響遺傳。

(二)細(xì)胞異常增生致癌

為什么細(xì)胞增殖會(huì)引起腫瘤？

，A.細(xì)胞分裂過(guò)程中S期細(xì)抱DNA處于解螺旋狀態(tài)，富含電子的部位大量暴露，易

受到親電物的攻擊；

細(xì)胞增殖速度加快，使細(xì)胞周期縮短，進(jìn)入S期前用于DNA修復(fù)的時(shí)間減少；

/C.啟動(dòng)細(xì)胞需要增殖才能繼續(xù)演變?yōu)閻盒阅[瘤

(三),免疫抑制劑致癌

由腫瘤的發(fā)生是免疫監(jiān)視功能喪失的結(jié)果

機(jī)制：選擇性放任痛前細(xì)胞存在和增生。

(四).內(nèi)分泌激素失衡

有絲分裂劑主要通過(guò)以下途徑促進(jìn)有絲分裂：

①與受體結(jié)合后，或通過(guò)第二信使，或者直接調(diào)節(jié)與生長(zhǎng)有關(guān)基因的表達(dá)

②通過(guò)改變DNA甲基化水平而影響基因的表達(dá)

(五)過(guò)氧化酶體增殖劑激活受體

?過(guò)氧化酶體是位于細(xì)胞質(zhì)中的單層膜的細(xì)胞器，肝細(xì)胞中最多。其作用除了清

除ROS外，對(duì)脂質(zhì)代謝有作用，對(duì)脂肪酸的分解過(guò)程中釋放ROS。部分化學(xué)物

有刺激肝臟過(guò)氧化物酶體增生的作用，這類(lèi)物質(zhì)統(tǒng)稱(chēng)為過(guò)氧化酶體增殖劑。故

認(rèn)為過(guò)氧物酶體增殖劑可通過(guò)ROS損傷DNA而啟動(dòng)肝細(xì)胞。

?過(guò)氧化酶體增殖劑具有刺激細(xì)胞增生的功能，主要通過(guò)與一種雌激素樣核受體

一過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體Y(peroxisomeproliferator-activatedreceptor-

Y,PPAR-Y)結(jié)合并激活此受體。

第四節(jié)

化學(xué)致癌相關(guān)的分子事件

一、端粒危機(jī)與癌變關(guān)系

?細(xì)胞的復(fù)制次數(shù)是由一種位于染色體末端的叫做端粒(telomeres)的DNA重復(fù)序

列(TTAGGG)控制的?！?xì)胞的生命計(jì)時(shí)器

端粒對(duì)染色體結(jié)構(gòu)的完整性和整個(gè)基因群的穩(wěn)定性是必需的。

?腫瘤的發(fā)生：與端?？s短和端粒酶的激活有密切的關(guān)系

?端粒序列的縮短會(huì)造成染色體不穩(wěn)定性增加，導(dǎo)致染色體結(jié)構(gòu)異常。

?“端粒假說(shuō)”：

端?？s短M,M2細(xì)胞永生

抑癌基因失活激活端粒酶

A端粒酶是催化端區(qū)DNA合成的酶，以連續(xù)或非連續(xù)方式延伸端粒DNA

》在大多數(shù)體細(xì)胞中，不含有端粒酶

A腫瘤細(xì)胞能夠幾乎無(wú)限制的復(fù)制

A絕大多數(shù)的惡性腫瘤細(xì)胞都含有一定程度的端粒酶活性

（二）細(xì)胞周期調(diào)控系統(tǒng)紊亂與癌變的關(guān)系

腫瘤是一種細(xì)胞周期異常的疾病

參與細(xì)胞周期調(diào)控的分子主要有：

》細(xì)胞周期蛋白（cyclin）

?細(xì)胞周期蛋白依賴(lài)性激酶（CDK）

A細(xì)胞周期蛋白依賴(lài)性激酶抑制蛋白（CKI）

《邪細(xì)胞周期

&期，S期，G期和M期

＜第細(xì)胞周期的兩個(gè)關(guān)卡：G-S轉(zhuǎn)換和G2-雌換

。嶼檢測(cè)點(diǎn)：

DNA損傷用3為1轉(zhuǎn)錄

P21抑制CDK的激活，阻滯G1/S

（四）細(xì)胞凋亡與癌變的關(guān)系

“細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化是由于細(xì)胞增殖與/或細(xì)胞死亡調(diào)控功能失調(diào)所致”。

0凋亡受到抑制，也可使細(xì)胞的數(shù)目增多

控制細(xì)胞凋亡的基因有兩大類(lèi)：

?第一類(lèi)是促進(jìn)細(xì)胞凋亡的基因，如尸53、RB,WT-1

A第二類(lèi)是能抑制細(xì)胞調(diào)亡的基因，如、RAS和SRC。

第五節(jié)

化學(xué)致癌物的分類(lèi)

—,分類(lèi)

（一）.按對(duì)人和動(dòng)物致癌作用分類(lèi)（IARC）

組1：對(duì)人類(lèi)是致癌物，109種

組2：對(duì)人很有可能致癌或可能致癌，又分為兩組：

2A；對(duì)人很有可能致癌物

2B：對(duì)人可能致癌物

組3：對(duì)人的致癌性尚無(wú)法分類(lèi)，即可疑致癌物

組4：對(duì)人很可能是非致癌物，1種（己內(nèi)酰胺）

1.EPA和IARC分類(lèi)

2.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證據(jù)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

＞致癌性證據(jù)充分

＞致癌性證據(jù)有限

＞致癌性證據(jù)不足

＞致癌性證據(jù)陰性

＞沒(méi)有可用資料

(二)按化學(xué)致癌作用模式分類(lèi)

1.直接致癌物(dirctionactingcarcinogen)

2.間接致癌物(indirctactingcarcinogen)

3.促癌劑(tumorpromotingagent)

間接致癌物

?前致癌物(precarcinogens)本身并不致癌，必須在體內(nèi)經(jīng)代謝轉(zhuǎn)化，其形成的

代謝產(chǎn)物才具有致癌作用。

?近致癌物(proximatecarcinogens)指前致癌物經(jīng)代謝活化過(guò)程形成一種或一系

列中間代謝產(chǎn)物。

?終致癌物(ultimatecarcinogens)指不需代謝活化的直接致癌物和間接致癌物

經(jīng)代謝活化所形成的具有致癌作用的代謝物的總稱(chēng)。

第六節(jié)化學(xué)物致癌物篩查的基本方法

一、構(gòu)效關(guān)系分析預(yù)測(cè)致癌性

構(gòu)效關(guān)系分析(structureactivityrelationshipanalysis)是把已知生物活性

的化學(xué)物的有關(guān)結(jié)構(gòu)參數(shù)與其生物需性歸納分析，得.一定規(guī)律，以此來(lái)推測(cè)

與其結(jié)構(gòu)相似的化合物的生物活性。

二、遺傳毒性試驗(yàn)

近年來(lái)以致癌機(jī)理中最重要的DNA為靶分子為基礎(chǔ)，提出了以簡(jiǎn)單快速的致

突變?cè)囼?yàn)作為檢測(cè)化學(xué)致癌物篩試手段。

假陽(yáng)性(falsepositive)和假陰性(falsenegative)

/假陽(yáng)性是指一些非致癌物在致突變?cè)囼?yàn)中表現(xiàn)出陽(yáng)性結(jié)果

/假陰性是指一些致癌物在致突變?cè)囼?yàn)中表現(xiàn)出陰性結(jié)果

靈敏度與特異度

?靈敏度=陽(yáng)性結(jié)果的致癌物數(shù)/致癌物總數(shù)

A特異性=陰性結(jié)果的非致癌物數(shù)/非致癌物總數(shù)

三、細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化試驗(yàn)

A利用培養(yǎng)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞接觸化學(xué)物后，觀察細(xì)胞轉(zhuǎn)化為癌細(xì)胞的試驗(yàn)。

A三類(lèi)細(xì)胞：①原代細(xì)胞；②細(xì)胞系；③病毒感染細(xì)胞

A目的：了解化學(xué)物能否使體外培養(yǎng)的細(xì)胞自控生長(zhǎng)能力喪失。

A觀察終點(diǎn)：惡性變的細(xì)胞。

觀察指標(biāo)

/永生化細(xì)胞系：BALB/C-3T3轉(zhuǎn)化細(xì)胞系

/永生化細(xì)胞的形態(tài)

/惡性變細(xì)胞的形態(tài)

,進(jìn)一步鑒定

BALB/C-3T3

黑色素瘤

四、哺乳動(dòng)物致癌試驗(yàn)

分為兩種：終身動(dòng)物試驗(yàn)和短期動(dòng)物試驗(yàn)

(-)短期動(dòng)物致癌試驗(yàn)

園快速動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)芸s短實(shí)驗(yàn)期限的關(guān)鍵是觀察終點(diǎn)不是惡性腫瘤為目的，而是以

癌前病變?yōu)槟康摹?/p>

A.幾種短期動(dòng)物致癌試驗(yàn)方法簡(jiǎn)介

(1)小鼠皮膚腫瘤誘發(fā)試驗(yàn)

A試驗(yàn)所用的染毒途徑為皮膚涂抹或皮下注射。染毒一次或多次，20周即可觀察

結(jié)果。

＞本試驗(yàn)也可作為促癌試驗(yàn)使用。

(2)小鼠肺腫瘤誘發(fā)試驗(yàn)

用對(duì)肺腫瘤誘發(fā)特別敏感的A/J系小鼠作誘發(fā)試驗(yàn)，所誘發(fā)的是肺腺瘤和乳

頭狀瘤，陽(yáng)性結(jié)果不單是表現(xiàn)為發(fā)生率增加，而且有多發(fā)傾向。本試驗(yàn)染毒時(shí)

間只需30~35周，最短12~16周即可結(jié)束。

(3)大鼠肝臟轉(zhuǎn)變?cè)钫T發(fā)短期試驗(yàn)

?原理：是利用實(shí)驗(yàn)性肝癌與原發(fā)性肝癌的發(fā)生都有明顯的階段性，其中癌前病

灶能用酶組織化學(xué)來(lái)檢測(cè)。正常的肝細(xì)胞中丫一谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(YGT)活性極

低不能檢出，葡萄糖6磷酸酶(G?6?Pase)和三磷酸腺昔酶(ATPase)活性較

高，而轉(zhuǎn)變?cè)顒t表現(xiàn)為YGT活性升高，G?6?Pase和ATPase活性降低。

(4)雌性大鼠乳腺癌誘發(fā)試繚

?雌性大鼠乳腺癌誘發(fā)試驗(yàn)常用來(lái)檢測(cè)多環(huán)芳尼等化學(xué)物的致癌性，因這類(lèi)物質(zhì)

?？梢鸫菩源笫笕橄侔┌l(fā)生率增高，而且在6個(gè)月內(nèi)即可出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果，除發(fā)

瘤率增高外也有多發(fā)性?xún)A向。

B.試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果評(píng)價(jià)

A陽(yáng)性

A陰性

(二)長(zhǎng)期動(dòng)物致癌試驗(yàn)

在致癌物危險(xiǎn)評(píng)估中，兩年鼠類(lèi)實(shí)驗(yàn)的腫瘤發(fā)生率是主要指標(biāo)。

A.動(dòng)物選擇

在長(zhǎng)期動(dòng)物致癌試驗(yàn)中動(dòng)物的選擇最重要的一點(diǎn)是對(duì)腫瘤的感受性，

特別是受檢物有特定的靶器官時(shí)尤為重要。

近交系較遠(yuǎn)交系好：腫瘤自發(fā)率穩(wěn)定，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重現(xiàn)性好，較易得到良

好的劑量反應(yīng)關(guān)系。

缺點(diǎn)：抵抗力下降，其營(yíng)養(yǎng)與飼養(yǎng)條件要求增高，生育能力下降，適應(yīng)

環(huán)境能力下降。

年齡：剛斷乳或斷乳不久的動(dòng)物，斷乳后1?2周更好，

B.動(dòng)物數(shù)量

?長(zhǎng)期致癌試驗(yàn)每一劑量組每種性別不得少于50只。