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第二章非細(xì)胞微生物-病毒主要內(nèi)容:病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu)病毒的繁殖病毒存活的影響因素去除和破壞水中病毒的方法一、病毒的定義病毒:一類由核酸和蛋白質(zhì)等少數(shù)幾種成分組成的超顯微“非細(xì)胞型微生物”,其本質(zhì)是一種只含DNA或RNA的遺傳因子。

病毒與其他細(xì)胞型微生物包括原核微生物和真微生物有著體態(tài)、結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成、生命方式等多方面的明顯區(qū)別。第一節(jié)病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu)及分類二、病毒的特點(diǎn)形體極其微小,需用電子顯微鏡觀察沒(méi)有細(xì)胞構(gòu)造,又稱“分子生物”每種病毒只含一種核酸,DNA或RNA以核酸和蛋白質(zhì)的裝配實(shí)現(xiàn)大量繁殖專性寄生,寄主細(xì)胞內(nèi)才表現(xiàn)出生命特征無(wú)蛋白質(zhì)和核酸合成酶系,利用宿主細(xì)胞內(nèi)的代謝系統(tǒng)離體條件,為無(wú)生命的生物大分子,長(zhǎng)期保持侵染活力對(duì)抗生素不敏感,對(duì)干擾素敏感有的病毒核酸可整合到宿主基因組,誘發(fā)潛伏性感染擬病毒:只含有不具獨(dú)立侵染性的RNA或DNA組分非細(xì)胞生物真病毒:至少含有核酸和蛋白質(zhì)兩種組分亞病毒類病毒:只含獨(dú)立侵染性的RNA組分朊病毒:只含單一蛋白質(zhì)組分三、病毒的分類1、按組分和侵染性分類:2、按專性宿主分類:動(dòng)物病毒寄生在人體和動(dòng)物體內(nèi),引起疾病艾滋病病毒非典冠狀病毒肝炎病毒引起的疾病有:流感、艾滋病、麻疹、腮腺炎、甲肝、乙肝等植物病毒

寄生在植物體內(nèi),引起疾病如煙草花葉病、番茄叢矮病、馬鈴薯退化病、水稻萎縮病和小麥黑穗病等煙草花葉病毒細(xì)菌病毒-噬菌體

1917年D.Herelle在人的糞便中發(fā)現(xiàn);環(huán)境毒理學(xué)中將其作為模式病毒;可評(píng)價(jià)水與廢水的處理效率;殺菌。噬菌體放線菌病毒寄生于放線菌,可使放線菌細(xì)胞裂解的病毒。藻類病毒-噬藻體真菌病毒DNA病毒細(xì)小病毒組的成員一般是ssDNA

其余病毒都是dsDNARNA病毒呼腸孤病毒組的成員是dsRNA

其余的病毒都是ssRNA注:動(dòng)物病毒以線狀的為dsDNA和ssRNA多,植物病毒以ssRNA為多,噬菌體以線狀的為dsRNA多3、按核酸分類1.病毒的大小

多數(shù)能通過(guò)細(xì)菌過(guò)濾器,直徑多數(shù)在100nm(20~200nm)上下;

最大的病毒:牛痘苗病毒,直徑最大300nm最小的病毒:口蹄疫病毒,直徑10~22nm四、病毒的形態(tài)和結(jié)構(gòu)2.病毒的形態(tài)

動(dòng)物病毒的形態(tài)有:球形、卵圓形、磚形等植物病毒的形態(tài)有:桿狀、絲狀和球狀噬菌體的形態(tài)有:蝌蚪狀和絲狀粘病毒痘病毒皰疹病毒噬菌體病毒的形態(tài)和相對(duì)大小付粘病毒槍彈性病毒冠狀病毒五、病毒的化學(xué)組成和結(jié)構(gòu)(一)化學(xué)組成

蛋白質(zhì)和核酸個(gè)體大的病毒除含蛋白質(zhì)和核酸,還含脂類和多糖2、病毒的核酸RNA多為ss,DNA多為ds1、病毒的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)蛋白:位于顆粒外表,起保護(hù)作用;決定病毒的抗原性病毒粒子的結(jié)構(gòu)圖(二)形態(tài)結(jié)構(gòu)病毒粒子有兩種:不具被膜的裸露病毒粒子在核衣殼外面有被膜包圍所構(gòu)成的病毒粒子病毒粒的對(duì)稱體制

病毒粒的對(duì)稱體制只有兩種,即螺旋對(duì)稱和二十面對(duì)稱;另外一些結(jié)構(gòu)復(fù)雜的病毒,實(shí)質(zhì)上是上述兩種對(duì)稱結(jié)合的結(jié)果,也稱為復(fù)合對(duì)稱。

二十面對(duì)稱代表病毒為腺病毒(Adenovirus)二十面體腺病毒模式圖B.螺旋對(duì)稱型代表病毒為煙草花葉病毒(TMV)該病毒核酸外由蛋白質(zhì)衣殼包裹和保護(hù),結(jié)構(gòu)十分穩(wěn)定,室溫下保存50年不喪失侵染力TMV模式圖C.復(fù)合對(duì)稱型二十面體對(duì)稱螺旋對(duì)稱代表病毒為T偶數(shù)噬菌體,有3種,即T2、T4和T6T系噬菌體模式圖病毒不存在個(gè)體的生長(zhǎng)過(guò)程,只有兩種基本成分的合成和進(jìn)一步的裝配過(guò)程(同種病毒粒之間沒(méi)有年齡和大小之分)動(dòng)物病毒、植物病毒和噬菌體的繁殖過(guò)程基本相似第二節(jié)病毒的繁殖吸附、侵入、增值(復(fù)制與生物合成)、粒子成熟(裝配)、寄主細(xì)胞裂解(釋放)。

以大腸桿菌T系噬菌體為例噬菌體與大腸桿菌相對(duì)大小病毒繁殖過(guò)程分為5個(gè)階段:1.吸附

T系噬菌體以尾部末端吸附到敏感細(xì)胞表面的某一特定的化學(xué)成分;吸附位點(diǎn):受體、性菌毛等過(guò)程:隨機(jī)碰撞、尾絲散開(kāi)、固著、刺突插入、基板固定侵入2.侵入尾絲展開(kāi)、釋放溶菌酶,水解細(xì)胞壁的肽聚糖形成孔,尾鞘消耗ATP獲得能量而收縮將尾髓壓入大腸桿菌細(xì)胞,尾髓將頭部的DNA注入宿主細(xì)胞3.復(fù)制與生物合成DNA病毒的復(fù)制(1)核酸復(fù)制(宿主DNA降解)(2)核酸轉(zhuǎn)錄(3)蛋白質(zhì)合成RNA病毒的復(fù)制4.裝配

DNA分子的縮合通過(guò)衣殼包裹DNA而形成頭部尾絲,尾管和尾鞘獨(dú)立裝配完成頭部與尾部相結(jié)合裝上尾絲尾管和尾鞘裝成尾部5.噬菌體的釋放

噬菌體粒子成熟后,其水解酶水解宿主細(xì)胞壁而使宿主細(xì)胞裂解,噬菌體粒子被釋放,進(jìn)而重新感染新的宿主細(xì)胞。噬菌體的釋放第二節(jié)病毒的生長(zhǎng)規(guī)律一步生長(zhǎng):瞬間爆發(fā),過(guò)程可重復(fù)進(jìn)行噬菌斑:烈性噬菌體在混有大量活敏感菌的瓊脂培養(yǎng)基中,經(jīng)培養(yǎng)后,肉眼可見(jiàn)在布滿宿主細(xì)胞的菌苔上,有一個(gè)個(gè)不長(zhǎng)菌的斑塊以時(shí)間為橫坐標(biāo),噬菌斑為縱坐標(biāo)得到一步生長(zhǎng)曲線一步生長(zhǎng)曲線平穩(wěn)期成熟期潛伏期隱晦期裂解量:每個(gè)感染細(xì)菌平均釋放的噬菌體顆粒的數(shù)量裂解期平均噬菌斑數(shù)÷潛伏期的噬菌斑數(shù)與裂解時(shí)間有關(guān)病毒的溶原性a、烈性(毒性)噬菌體:進(jìn)入宿主細(xì)胞后進(jìn)行復(fù)制增殖,導(dǎo)致宿主細(xì)胞裂解的噬菌體。b、溫和噬菌體:噬菌體吸附或侵入細(xì)胞后,其DNA只整合在宿主核染色體組上,并可長(zhǎng)期隨宿主DNA的復(fù)制而同步復(fù)制,一般不進(jìn)行增殖或引起宿主細(xì)胞裂解的噬菌體。根據(jù)噬菌體進(jìn)入宿主細(xì)胞后的行為分為:宿主DNA噬菌體DNA噬菌體DNA和宿主染色體整合病毒的溶原性反應(yīng)原噬菌體

在溶原細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)的溫和噬菌體核酸稱為原噬菌體。原噬菌體隨宿主細(xì)胞分裂傳給子代細(xì)胞。原噬菌體沒(méi)有感染力,一旦脫離溶原性細(xì)菌的染色體后即恢復(fù)復(fù)制能力,形成毒性噬菌體。溶源性細(xì)菌含有原噬菌體的細(xì)菌稱為溶源性細(xì)菌。烈性噬菌體-敏感細(xì)菌-裂解反應(yīng)溫和噬菌體-原噬菌體-溶源性反應(yīng)-溶源性細(xì)菌溶原性噬菌體的命名

在相應(yīng)菌株的名稱后加括號(hào),括號(hào)內(nèi)寫上λ,如:大腸桿菌溶原性噬菌體的全稱

EscherichiacoliK12(λ)株名表示溶原性噬菌體第三節(jié)病毒在水中存活的影響因素一、物理因素溫度、光及其它輻射、濕度二、化學(xué)因素化學(xué)物質(zhì)、抗體、干擾素三、生物因素其它生物產(chǎn)生的抗菌物質(zhì)一、物理因素對(duì)病毒的影響1.溫度宿主細(xì)胞外的病毒,55~65℃范圍內(nèi)1h可滅活高溫滅活病毒的機(jī)理高溫使病毒的核酸和蛋白質(zhì)均受損傷,但滅活蛋白質(zhì)更快;蛋白質(zhì)變性阻礙了病毒吸附在宿主細(xì)胞上,削弱其感染力。注:低溫不會(huì)滅活病毒,通常在-75℃保存病毒。2.光及其他輻射(1)紫外輻射

滅活部位是病毒的核酸,使核酸中的嘧啶環(huán)受到影響。(2)可見(jiàn)光在天然水體和氧化塘中,日光對(duì)腸道病毒有滅活作用。(3)離子輻射

X射線、γ射線等3.干燥

控制環(huán)境中病毒的重要因素。土壤中,水分含量低于10%時(shí),病毒會(huì)迅速滅活。污泥中,當(dāng)固體含量大于65%時(shí),病毒量減低。

相對(duì)濕度(RH)病毒存活時(shí)間7%腺病毒2型8周柯薩奇病毒B32周35%腸病毒20周體外滅活:酚、低滲緩沖溶液、甲醛、亞硝酸、醚類、十二烷基硫酸鈉、氯仿、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、pH及其他氧化劑等。體內(nèi)滅活:抗體和干擾素二、化學(xué)因素對(duì)病毒的影響體外滅活1.破壞病毒蛋白質(zhì)的化學(xué)物質(zhì)酚、低滲緩沖溶液環(huán)境2.破壞核酸的化學(xué)物質(zhì)甲醛、亞硝酸、氨3.影響病毒脂類被膜的化學(xué)物質(zhì)醚、十二烷基硫酸鈉、氯仿等體內(nèi)滅活1.抗體-直接作用宿主產(chǎn)生的特異蛋白(病毒是抗原)2.干擾素-間接作用宿主產(chǎn)生的糖蛋白,進(jìn)而誘導(dǎo)抗病毒蛋白產(chǎn)生三、生物因素對(duì)病毒的影響鏈霉菌、青霉菌、藻類等會(huì)分泌一些抗菌物質(zhì)。但是,各種鏈霉菌產(chǎn)生的抗生素對(duì)大多數(shù)病毒無(wú)滅活作用。藻類產(chǎn)生的抗菌物質(zhì)如丙烯酸和多酚對(duì)病毒有滅活作用。枯草桿菌、大腸桿菌和銅綠假單胞菌等三種菌顯示抗病毒的活性,病毒的蛋白衣殼可被用作細(xì)菌的生長(zhǎng)底物。四、去除和破壞水中病毒的方法1.水體中病毒的存活溫度是主要影響因素,與病毒類型有關(guān)(教材P15)2.污水處理過(guò)程中對(duì)病毒的去除一級(jí)處理:物理過(guò)程(過(guò)篩,除渣,初級(jí)沉淀去除固體廢物)去除病毒效果差,30%左右

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