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文檔簡介

1、For personal use only in study and research; not for commercial use螞高中生物實驗總結(jié)袈實驗一 觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布(必修一P26)螇一、實驗原理:薃1、真核細(xì)胞的DNA主要分布在細(xì)胞核內(nèi),RNA大部分存在于細(xì)胞質(zhì)中。衿2、甲基綠和吡羅紅兩種染色劑對DNA和RNA的親和力不同,甲基綠對DNA親和力強,使DNA顯現(xiàn)出綠色,而吡羅紅對RNA的親和力強,使RNA呈現(xiàn)出紅色。利用甲基綠、吡羅紅的混合染色劑將細(xì)胞染色,可同時顯示DNA和RNA在細(xì)胞中的分布。薀3、鹽酸的作用薆 鹽酸能改變細(xì)胞膜的通透性,加速染色劑進(jìn)入細(xì)胞;蚃

2、鹽酸使染色體中的DNA與蛋白質(zhì)分離,有利于DNA與染色劑結(jié)合芀 4、0.9%的NaCl溶液作用:保持口腔上皮細(xì)胞的正常的形態(tài)肈二、目的要求:芅初步掌握觀察DNA和RNA在細(xì)胞中分布的方法螃三、材料用具:蟻人的口腔上皮細(xì)胞(也可用其他動物或植物細(xì)胞代替,如洋蔥鱗片葉表皮細(xì)胞)蝿大燒杯、小燒杯、溫度計、滴管、消毒牙簽、載玻片、蓋玻片、鐵架臺、石棉網(wǎng)、火柴、酒精燈、吸水紙、顯微鏡莈 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%的NaCl溶液,質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%的鹽酸,吡羅紅甲基綠染色劑(取A液20mL,B液80mL配成染色劑,使用時現(xiàn)配。A液:取吡羅紅甲基綠粉1g,加入100mL蒸餾水中溶解,放入棕色瓶中備用。B液:取乙酸鈉16

3、.4g,用蒸餾水溶解至1000mL。取乙酸12mL,用蒸餾水稀釋至1000mL。取稀釋的乙酸鈉溶液30mL和乙酸20mL,加蒸餾水50mL,配成pH為4.8的溶液),蒸餾水螃五、方法步驟:肁1、取口腔上皮細(xì)胞制片膇在潔凈的載玻片上滴一滴質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%的NaCl溶液。肆 用消毒牙簽在自己漱凈的口腔內(nèi)側(cè)壁上輕輕地刮幾下,把牙簽袃上附有碎屑的一端,放在上述載玻片上的液滴中涂抹幾下。蒂點燃酒精燈,將涂有口腔上皮細(xì)胞的載玻片烘干。(固定細(xì)胞)衿2、水解裊在小燒杯中加入30mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%的鹽酸,將烘干的載玻片放入小燒杯中。羃在大燒杯中加入30溫水。蕿將盛有鹽酸和載玻片的小燒杯放在大燒杯中保溫5mi

4、n。莇3、沖洗涂片蚄用蒸餾水緩水流沖洗載玻片10s。肂4、染色羀用吸水紙吸去載玻片上的水分。聿將吡羅紅甲基綠染色劑滴2滴在載玻片上,染色5min。蚇吸去多余染色劑,蓋上蓋玻片。膂5、觀察莁低倍鏡觀察:選擇染色均勻,色澤淺的區(qū)域,移至視野中央,將物像調(diào)節(jié)清晰。薇換用高倍物鏡觀察:調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋,觀察細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)的染色情況。蒆六、考點提示:節(jié)1、取口腔上皮細(xì)胞之前,應(yīng)先漱口,以避免裝片中出現(xiàn)太多的雜質(zhì);螂2、取洋蔥表皮細(xì)胞時,盡量避免材料上帶有葉肉組織細(xì)胞;艿3、沖洗載玻片時水的流速要盡量慢,切忌直接用水龍頭沖洗;膅4、用酒精燈烘烤載玻片時,不要只集中于材料處,而應(yīng)將載玻片在火焰上來回移動,使載

5、玻片均勻受熱,以免破裂;莂5、烘烤后的載玻片不要馬上放入盛有稀鹽酸的燒杯中,最好先自然冷卻1分鐘。膃蚇實驗二 檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)(必修一P18)羋一、實驗原理:莂某些化學(xué)試劑能使生物組織中的有關(guān)有機化合物產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。莀1、生物組織中普遍存在的可溶性糖類較多,有葡萄糖、果糖、麥芽糖和蔗糖。前三種糖的分子內(nèi)都含有游離的具還原性的半縮醛羥基,因此叫做還原糖;蔗糖分子內(nèi)沒有,為非還原糖。實驗中所用的斐林試劑,只能鑒定生物組織中可溶性還原糖,而不能鑒定可溶性非還原糖。蒈糖類中的還原糖(如葡萄糖、果糖、麥芽糖)與斐林試劑發(fā)生作用,可生成磚紅色的Cu2O沉淀。用斐林試劑鑒定還原糖時,

6、溶液變化過程為:淺藍(lán)色棕色磚紅色沉淀羇淀粉遇碘變藍(lán)色(直鏈)或紫(紅)色(支鏈)。蒂2、脂肪和類脂(磷脂、糖脂、固醇脂等)統(tǒng)稱為脂類。它是構(gòu)成人體組織的正常成分,不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶劑中。在化學(xué)組成上,脂類屬于脂肪酸的酯或與這些酯有關(guān)的物質(zhì)。脂類的主要功能是氧化供能。 脂肪主要存積于脂肪組織中,并以油滴狀的微粒存在脂肪細(xì)胞漿內(nèi)。 螀脂肪可以被蘇丹染液染成橘黃色(或被蘇丹染液染成紅色)。膀3、蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生作用,產(chǎn)生紫色反應(yīng)。(蛋白質(zhì)分子中含有很多肽鍵,在堿性NaOH溶液中能與雙縮脲試劑中的Cu2+作用,產(chǎn)生紫色反應(yīng)。)螅 薂 因此,可以根據(jù)與某些化學(xué)試劑所產(chǎn)生的顏色反

7、應(yīng),檢測生物組織中糖類,脂肪或蛋白質(zhì)的存在。膁二、實驗?zāi)康模?薈嘗試用化學(xué)試劑檢測生物組織中糖類、脂肪和蛋白質(zhì)。薄三、實驗材料:螞1、做可溶性還原性糖鑒定實驗,應(yīng)選含糖高,顏色為白色的植物組織,如蘋果或梨勻漿。(因為組織的顏色較淺,易于觀察。)薂經(jīng)試驗比較,顏色反應(yīng)的明顯程度依次為蘋果、梨、白色甘藍(lán)葉、白蘿卜。芀2、做脂肪的鑒定實驗。應(yīng)選富含脂肪的種子,以花生種子、花生種子勻漿為最好,實驗前一般要浸泡34小時(也可用蓖麻種子)。薇3、做蛋白質(zhì)的鑒定實驗,可用富含蛋白質(zhì)的豆?jié){、鮮肝提取液。螁4、淀粉的鑒定:馬鈴薯勻漿。蠆四、實驗用具:雙面刀片、試管(最好用刻度試管)、試管夾、試管架、大小燒杯、小

8、量筒、滴管、酒精燈、三腳架、石棉網(wǎng)、火柴、載玻片、蓋玻片、毛筆、吸水紙、顯微鏡螈五、實驗試劑:莆1斐林試劑(甲液:質(zhì)量濃度為0.1g/ mL NaOH溶液,乙液:質(zhì)量濃度為0.05g/ mL CuSO4溶液)袁2蘇丹或蘇丹染液肀3雙縮脲試劑(A液:質(zhì)量濃度為0.1g/ mL NaOH溶液,B液:質(zhì)量濃度為0.01g/ mL CuSO4溶液)蒀4體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精溶液膅5碘液膅6蒸餾水蒁六、方法步驟:羈1.實驗材料、儀器和試劑的選擇 每小組從老師提供的實驗材料中選擇一兩種,預(yù)測其中含有哪些化合物,再選擇所需要的儀器和試劑。膈2.設(shè)計記錄表格,記錄預(yù)測結(jié)果,然后按照試驗步驟進(jìn)行檢測,用“+”或

9、“-”記錄實測結(jié)果。芅3.檢測的方法步驟袂(1)可溶性糖的檢測和觀察蝕1. 制備組織樣液。羇(去皮、切塊、研磨、過濾)蘋果或梨組織液必須臨時制備。因蘋果多酚氧化酶含量高,組織液很易被氧化成褐色,將產(chǎn)生的顏色掩蓋。蒞2. 取1支試管,向試管內(nèi)注入2mL待測組織樣液。芃3. 向試管內(nèi)注入1mL新制的斐林試劑,振蕩。(應(yīng)將組成斐林試劑的甲液、乙液分別配制、儲存,使用前才將甲、乙液等量混合均勻后在注入)。 肇(切勿將甲液、乙液分別加入蘋果組織樣液中進(jìn)行檢測。斐林試劑很不穩(wěn)定,甲、乙液混合保存時,生成的Cu ( OH )2在70 900oC下分解成黑色CuO和水,甲、乙液分別加入時可能會與組織樣液發(fā)生反

10、應(yīng),無Cu ( OH )2生成)。蚆4.試管放在盛有50-65oC溫水的大燒杯中,加熱約2min。蒅5.觀察試管中出現(xiàn)的顏色變化:淺藍(lán)色 棕色 磚紅色(沉淀)。葿(好用試管夾夾住試管上部,使試管底部不觸及燒杯底部,試管口不要朝向?qū)嶒炚?。也可用酒精燈對試管直接加熱,短實驗時間。防止試管內(nèi)的溶液沖出試管,造成燙傷。)衿(2)脂肪的檢測和觀察蒄方法一:向待測組織樣液中滴加3滴蘇丹III染液,觀察樣液被染色的情況。薅方法二:制作子葉臨時切片,用顯微鏡觀察子葉細(xì)胞的著色情況(以花生為例)。袀?cè)〔?取一粒浸泡過的花生種子,去掉種皮。(干種子要浸泡34小時,新花生的浸泡時間可縮短。因為浸泡時間短,不易切片;

11、浸泡時間過長,組織較軟,切片不易成形。切片要盡可能薄些,便于觀察)芇切片 用刀片在花生子葉的橫斷面上平行切下若干薄片,放入盛有清水的培養(yǎng)皿中待用。蕆制片從培養(yǎng)皿中選取最薄的切片,用毛筆蘸取放在載玻片中央;在花生子葉薄片上滴23滴蘇丹,染色3min(如果用蘇丹染液,染色1min),(染色時間不宜過長),薄片周圍染液,再滴加12滴體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精溶液,洗去浮色,(酒精用于洗去浮色,不洗去浮色,會影響對橘黃色脂肪滴的觀察。同時,酒精是脂溶性溶劑,可將花生細(xì)胞中的脂肪顆粒溶解成油滴。)用吸水紙吸去花生子葉周圍的酒精,滴上一滴蒸餾水(滴上清水可防止蓋蓋玻片時產(chǎn)生氣泡),蓋上蓋玻片,制成臨時裝片。薅

12、觀察 在低倍顯微鏡下找到花生子葉的最薄處,移至視野中央,將影像調(diào)節(jié)清楚;換高倍鏡觀察,視野中被染成橘黃色的脂肪顆粒清晰可見。(裝片不宜久放,時間一長,油滴會溶解在乙醇中)芁(3)蛋白質(zhì)的檢測和觀察罿制備組織樣液(浸泡、去皮研磨、過濾)。黃豆浸泡1至2天,容易研磨成漿,也可購新鮮豆?jié){以節(jié)約實驗時間??捎玫扒宕娑?jié){,蛋清要先稀釋。如果稀釋不夠,在實驗中蛋清粘在試管壁,與雙縮脲試劑反應(yīng)后會粘固在試管內(nèi)壁上,使反應(yīng)不容易徹底,并且試管也不易洗干凈。芆向試管內(nèi)注入2mL待測組織樣液。蚅向試管內(nèi)注入雙縮脲試劑A液1mL,搖勻。螞向試管內(nèi)注入雙縮脲試劑B液4滴,搖勻。蕆(先加NaOH溶液,為Cu2+與蛋白

13、質(zhì)反應(yīng)提供一個堿性的環(huán)境。A、B液混裝或同時加入,會導(dǎo)致Cu2+變成Cu ( OH ) 2沉淀,而失效。CuSO4溶液不能多加,否則CuSO4的藍(lán)色會遮蓋反應(yīng)的真實顏色)肅觀察試管中出現(xiàn)的顏色變化。(溶液變紫色)螄(4)淀粉的檢測和觀察蝿向試管內(nèi)注入2mL待測組織樣液。腿向試管內(nèi)滴加2滴碘液,觀察顏色變化。(碘液不要滴太多,以免影響顏色觀察)螄七、考點提示:襖1、常見還原性糖與非還原性糖有哪些?膀答:葡萄糖、果糖、麥芽糖都是還原性糖;淀粉、蔗糖、纖維素都是非還原性糖。 莁2、還原性糖植物組織取材條件?薁答:含糖量較高、顏色為白色或近于白色,如:蘋果、梨、白色甘藍(lán)葉、白蘿卜等。 螈3、研磨中為何

14、要加石英砂?不加石英砂對實驗有何影響?蒞 答:加石英砂是為了使研磨更充分。不加石英砂會使組織樣液中還原性糖減少,使鑒定時溶液顏色變化不明顯。 肅4、斐林試劑甲、乙兩液的使用方法?混合的目的?為何要現(xiàn)混現(xiàn)用? 莀答:混合后使用;產(chǎn)生氫氧化銅;氫氧化銅不穩(wěn)定。 螈5、還原性糖中加入斐林試劑后,溶液顏色變化的順序為? 螆答:淺藍(lán)色 棕色 磚紅色。薀6、花生種子切片為何要?。客?答:只有很薄的切片,才能透光,而用于顯微鏡的觀察。 袈7、轉(zhuǎn)動細(xì)準(zhǔn)焦螺旋時,若花生切片的細(xì)胞總有一部分清晰,另一部分模糊,其原因一般是什么?膇 答:切片的厚薄不均勻。 節(jié)8、脂肪鑒定中乙醇作用? 答:洗去浮色。 膁9、雙縮脲試

15、劑A、B兩液是否混合后用?先加A液的目的怎樣通過對比看顏色變化? 羈答:不能混合;先加A液的目的是使溶液呈堿性;先留出一些大豆組織樣液做對比。芃10、在鑒定蛋白質(zhì)的實驗中,若用雞蛋清作實驗材料,必須稀釋,以免實驗后黏住試管,不易洗刷。羄11、斐林試劑與雙縮脲試劑的區(qū)別:羀 (1)溶液濃度不同(斐林試劑乙液:質(zhì)量濃度為0.05g/ mL CuSO4溶液,雙縮脲試劑B液:質(zhì)量濃度為0.01g/ mL CuSO4溶液)肈 (2)使用原理不同蚄 斐林試劑是新配制的Cu(OH)2溶液,它在加熱的條件下與醛基反應(yīng),被還原成磚紅色的Cu2O沉淀,可用于鑒定還原糖的存在,實驗中溶液顏色的變化過程為:淺藍(lán)色-棕

16、色-磚紅色蒂 鑒定生物組織中是否含有蛋白質(zhì)時,常用雙縮脲法,使用的是雙縮脲試劑,發(fā)生的是雙縮脲反應(yīng)。雙縮脲反應(yīng)的實質(zhì)是在堿性條件下,Cu2+與雙縮脲發(fā)生的紫色反應(yīng)。而蛋白質(zhì)分子中有很多與雙縮脲(H2NOC-NH-CONH2)結(jié)構(gòu)相似的肽鍵,所以蛋白質(zhì)都能與雙縮脲發(fā)生顏色反應(yīng),可以使用雙縮脲試劑鑒定蛋白質(zhì)的存在。蝿(3)使用方法不同:斐林試劑的甲液、乙液分別配制、儲存,使用前才將甲、乙液等量混合均勻后在注入;雙縮脲試劑先向試管內(nèi)注入A液1mL,搖勻,再向試管內(nèi)注入B液4滴,搖勻。膈肅實驗三 用顯微鏡觀察多種多樣的細(xì)胞(必修一P7)膄一、目的要求:蒈1.使用高倍顯微鏡觀察幾種細(xì)胞,比較不同細(xì)胞的異

17、同點芇2.運用制作臨時裝片的方法蒆二材料用具:薂 1.建議選用的觀察材料:真菌(如酵母菌)細(xì)胞,低等植物(如水綿的絲狀綠藻)細(xì)胞,高等植物細(xì)胞(如葉的保衛(wèi)細(xì)胞),動物細(xì)胞(如魚的紅細(xì)胞或蛙的皮膚上皮細(xì)胞)。以上這些材料,做成臨時裝片后就可以觀察。也可以使用其他替代材料。薁 2.用具:顯微鏡、載玻片、蓋玻片、鑷子、滴管、清水。如果實驗過程中需要染色,應(yīng)準(zhǔn)備常用的染色液。芇三方法步驟:蚃轉(zhuǎn)動反光鏡使視野明亮。莄在低倍鏡下觀察清楚后,把要放大觀察的物像移至視野中央。芀轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器,換成高倍物鏡。莇觀察并用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋調(diào)焦。肄四:討論:螂 1.使用高倍鏡觀察的步驟和要點是什么?聿 答:(1)首先用低倍鏡觀

18、察,找到要觀察的物像,移到視野的中央。蕆 2.試歸納所觀察到的細(xì)胞在結(jié)構(gòu)上的共同點,并描述它們之間的差異,分析產(chǎn)生差異的可能的原因:蒅 答:這些細(xì)胞在結(jié)構(gòu)上的共同點是:有細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核,植物細(xì)胞還有細(xì)胞壁。蒃各種細(xì)胞之間的差異和產(chǎn)生差異的可能原因是:這些細(xì)胞的位置和功能不同,其結(jié)構(gòu)與功能相適應(yīng),這是個體發(fā)育過程中細(xì)胞分化產(chǎn)生的差異。肂 3.P8圖是一個大腸桿菌的電鏡照片和結(jié)構(gòu)模式圖,大腸桿菌與你在本實驗中觀察到的細(xì)胞有什么主要區(qū)別?薇答:從模式圖中可以看出,大腸桿菌沒有明顯的細(xì)胞核,沒有核膜,細(xì)胞外有鞭毛,等等。袆五、考點提示:羈(1)是低倍鏡還是高倍鏡的視野大,視野明亮?為什么?袀

19、提示:低倍鏡的視野大,通過的光多,放大的倍數(shù)?。桓弑剁R視野小,通過的光少,但放大的倍數(shù)高。蚇 問(2)為什么要先用低倍鏡觀察清楚后,把要放大觀察的物像移至視野的中央,再換高倍鏡觀察?芆 提示:如果直接用高倍鏡觀察,往往由于觀察的對象不在視野范圍內(nèi)而找不到。因此,需要先用低倍鏡觀察清楚,并把要放大觀察的物像移至視野的中央,再換高倍鏡觀察。蚃 問(3)用轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)過高倍鏡后,轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋行不行?蠆 提示:不行。用高倍鏡觀察,只需微調(diào)即可。轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋,容易壓壞玻片。螇注:莃1.目鏡無旋轉(zhuǎn)螺絲,鏡頭越長,放大倍數(shù)越小;物鏡有旋轉(zhuǎn)螺絲,鏡頭越長,放大倍數(shù)越大。膁2.獲取蛙皮膚上皮細(xì)胞的方法,是把蛙養(yǎng)

20、在無水的玻璃缸內(nèi)23h,待蛙的皮膚稍干后,再移入有水的玻璃缸內(nèi)。數(shù)分鐘后,蛙的部分上皮開始龜裂并脫落到水中。用肉眼可以看見水中有淺灰色、透明的上皮膜。取一小塊上皮膜用于制片、觀察,看到的就是蛙皮膚的單層上皮細(xì)胞。這種制備方法不會對蛙造成傷害。莈袇螄實驗四 用高倍鏡觀察線粒體和葉綠體(必修一P47)袃一、實驗原理:蒁1、葉肉細(xì)胞中的葉綠體,散布于細(xì)胞質(zhì)中,呈綠色、扁平的橢球形或球形??梢栽诟弑讹@微鏡下觀察它的形態(tài)和分布。袆2、線粒體普遍存在于動物細(xì)胞和植物細(xì)胞中,線粒體的形態(tài)多樣,有短棒狀、圓球狀、線形、啞鈴形等。健那綠(Janus green B)染液是將活細(xì)胞中線粒體染色的專一性染料,可以使

21、活細(xì)胞中的線粒體呈現(xiàn)藍(lán)綠色,而細(xì)胞質(zhì)接近無色。線粒體能在健那綠染液中維持活性數(shù)小時,通過染色,可以在高倍顯微鏡下觀察到處于生活狀態(tài)的線粒體的形態(tài)和分布。膅二、目的要求:芁使用高倍顯微鏡觀察葉綠體、線粒體的形態(tài)和分布。膀三、材料用具:羆新鮮的蘚類的葉(葉子薄而小,葉片是綠色的單層細(xì)胞,葉綠體清楚,可取整個小葉直接制片,不需加工即可進(jìn)行觀察,所以作為實驗的首選材料)或菠菜葉(若用菠菜葉作實驗材料,要取菠菜葉的下表皮并稍帶些葉肉。因為表皮細(xì)胞不含葉綠體)、黑藻葉等。薆新配制的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的健那綠染液(將0.5g健那綠溶解于50mL生理鹽水中,加溫到30-40攝氏度,使其充分溶解)肅顯微鏡、載玻片、

22、蓋玻片、滴管、鑷子、消毒牙簽罿四、方法步驟:肆 1.制作蘚類葉片臨時裝片 在潔凈的載玻片中央滴一滴清水。用鑷子取一片蘚類的小葉,或者取菠菜葉稍帶些葉肉的下表皮,放入水滴中,蓋上蓋玻片。羇注意:臨時裝片中的葉片不能放干了,要隨時保持有水狀態(tài)(保證細(xì)胞器的正常形態(tài)并能懸浮在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中,否則細(xì)胞或葉綠體失水收縮,將影響對葉綠體形態(tài)和分布的觀察)。蒁 2.觀察葉綠體 將制作好的葉片臨時裝片放在低倍顯微鏡下觀察,找到葉片細(xì)胞后,換用高倍顯微鏡,仔細(xì)觀察葉片細(xì)胞內(nèi)葉綠體的形態(tài)和分布情況。羂 3. 制作人的口腔上皮細(xì)胞臨時裝片 在潔凈的載玻片中央滴一滴健那綠染液。用消毒牙簽在自己漱凈的口腔內(nèi)壁上輕輕地刮幾

23、下,將牙簽上附有碎屑的一端,放在染液中涂抹幾下,蓋上蓋玻片。膆 4.觀察線粒體 在高倍顯微鏡下觀察經(jīng)過染色的人的口腔上皮細(xì)胞臨時裝片,可以看到藍(lán)綠色的線粒體,細(xì)胞質(zhì)接近無色。肄四、討論:膂1、細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體,是不是靜止不動的?為什么?螁答:不是。呈橢球體形的葉綠體在不同光照條件下可以運動,這種運動能隨時改變橢球體的方向,使葉綠體既能接受較多光照,又不至于被強光灼傷。芆2、葉綠體的形態(tài)和分布,與葉綠體的功能有什么關(guān)系?蒄答:葉綠體的形態(tài)和分布都有利于接受光照,完成光合作用。如葉綠體在不同光照條件下改變方向。又如葉子上面的葉肉細(xì)胞中的葉綠體比下面的多,這可以接受更多的光照。襖蕿實驗五 觀察植

24、物細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原(必修一P61探究)莆一、實驗?zāi)康模貉U1學(xué)會觀察植物細(xì)胞質(zhì)壁分離與復(fù)原的方法。莂2了解植物細(xì)胞發(fā)生滲透作用的原理。莈二實驗原理:蒆 把白菜剁碎做餡時,常常要放一些鹽。放鹽后稍等一會就可見有水分滲出。對農(nóng)作物施肥過多,會造成“燒苗”現(xiàn)象。芆1質(zhì)壁分離的原理:當(dāng)細(xì)胞液的濃度小于外界溶液的濃度時,細(xì)胞就會通過滲透作用而失水,細(xì)胞液中的水分就透過原生質(zhì)層進(jìn)入到溶液中,使細(xì)胞壁和原生質(zhì)層都出現(xiàn)一定程度的收縮。由于原生質(zhì)層比細(xì)胞壁的收縮性大,當(dāng)細(xì)胞不斷失水時,原生質(zhì)層就會與細(xì)胞壁分離。肄2質(zhì)壁分離復(fù)原的原理:當(dāng)細(xì)胞液的濃度大于外界溶液的濃度時,細(xì)胞就會通過滲透作用而吸水,外界溶液中的

25、水分就通過原生質(zhì)層進(jìn)入到細(xì)胞液中,整個原生質(zhì)層就會慢慢地恢復(fù)成原來的狀態(tài),緊貼細(xì)胞壁,使植物細(xì)胞逐漸發(fā)生質(zhì)壁分離復(fù)原。莁二、實驗材料:蒅紫色洋蔥鱗片葉的外表皮。因為液泡呈紫色,易于觀察。也可用水綿代替。蒃質(zhì)量濃度為0.3g/ml的蔗糖溶液。用蔗糖溶液做質(zhì)壁分離劑對細(xì)胞無毒害作用。薂刀片、鑷子、滴管、載玻片、蓋玻片、吸水紙、顯微鏡,清水膀三、實驗步驟:薅步 驟襖注 意 問 題芄分 析衿1制作洋蔥表皮的臨時裝片。罿在載玻片上滴一滴水,撕取洋蔥鱗片葉外表皮放在水滴中展平(也可挑取幾條水綿放入水滴中)。蓋上蓋玻片。芅螞蓋蓋玻片應(yīng)讓蓋玻片的一側(cè)先觸及載玻片,然后輕輕放平。羂聿蚆防止裝片產(chǎn)生氣泡。蒄2用低

26、倍顯微鏡觀察洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞中字的的中央液泡的大小,以及原生質(zhì)層的位置蟻可看到:液泡大,呈紫色,原生質(zhì)層緊貼著細(xì)胞壁。(或水綿細(xì)胞中有帶狀葉綠體,原生質(zhì)層呈綠色,緊貼著細(xì)胞壁。腿肇袁液泡含花青素,所以液泡呈紫色。蒀腿膃先觀察正常細(xì)胞與后面的“質(zhì)壁分離”起對照作用。薃3觀察質(zhì)壁分離現(xiàn)象。羋從蓋玻片的一側(cè)滴入03g/ml的蔗糖溶液,在另一側(cè)用吸水紙吸引,重復(fù)幾次。鏡檢。觀察到:液泡由大變小,顏色由淺變深,原生質(zhì)層與細(xì)胞壁分離。原生質(zhì)層與細(xì)胞壁之間充滿蔗糖溶液。艿薄肁芁荿重復(fù)幾次羅糖液濃度不能過高螃蔗糖溶液濃度大于細(xì)胞液濃度,細(xì)胞通過滲透作用失水,細(xì)胞壁伸縮性小原生質(zhì)層的伸縮性大,液泡和原生質(zhì)層

27、不斷收縮,所以發(fā)生質(zhì)壁分離。肀為了使細(xì)胞完全浸入蔗糖溶液中。葿否則,細(xì)胞嚴(yán)重失水死亡,看不到質(zhì)壁分離的復(fù)原。莆4觀察細(xì)胞質(zhì)壁分離的復(fù)原現(xiàn)象。膁從蓋玻片的一側(cè)滴入清水,在另一側(cè)用吸水紙吸引,重復(fù)幾次。鏡檢。觀察到:液泡由小變大,顏色由深變淺,原生質(zhì)層恢復(fù)原狀。蝿薈發(fā)生質(zhì)壁分離的裝片,不能久置,要馬上滴加清水,使其復(fù)原。薃重復(fù)幾次。羃細(xì)胞液的濃度高于外界溶液,細(xì)胞通過滲透作用吸水,所以發(fā)生質(zhì)壁分離復(fù)原現(xiàn)象。薈因為細(xì)胞失水過久,也會死亡。蚈羄為了使細(xì)胞完全浸入清水中。莁四、實驗結(jié)論:薁當(dāng)外界溶液濃度大于細(xì)胞液濃度時,水分會由細(xì)胞液中滲出到外界溶液中,通過滲透作用失水;由于細(xì)胞壁和原生質(zhì)層的伸縮性不同

28、,細(xì)胞壁伸縮性較小,而原生質(zhì)層性較大,從而使二者分開;反之,當(dāng)外界溶液濃度低于細(xì)胞液濃度時,則細(xì)胞通過滲透作用吸水,分離后的質(zhì)和細(xì)胞壁又復(fù)原。螈實驗討論蒞1如果將上述表皮細(xì)胞浸潤在與細(xì)胞液濃度相同的蔗糖溶液中,這些表皮細(xì)胞會出現(xiàn)什么現(xiàn)象?肅答:表皮細(xì)胞維持原狀,因為細(xì)胞液的濃度與外界溶液濃度相等。莀2當(dāng)紅細(xì)胞細(xì)胞膜兩側(cè)的溶液具有濃度差時,紅細(xì)胞會不會發(fā)生質(zhì)壁分離?為什么?螈答:不會。因為紅細(xì)胞不具細(xì)胞壁。螆3.質(zhì)壁分離實驗的拓展應(yīng)用薀(1)判斷成熟植物細(xì)胞的死活腿(2)測定細(xì)胞液濃度范圍袈(3)比較不同植物細(xì)胞的細(xì)胞液濃度膇(剛剛發(fā)生質(zhì)壁分離所需時間越短。細(xì)胞液濃度越?。┕?jié)(4)鑒別不同種類的

29、溶液(如KNO3溶液和蔗糖溶液)膁(5)證明原生質(zhì)層具有選擇透過性羈(6)證明細(xì)胞壁的伸縮性小于原生質(zhì)層的伸縮性芃(7)檢測雜種細(xì)胞是否再生出細(xì)胞壁,是否具有活性羄羀肈蚄實驗六 探究影響酶活性的因素(必修一P78、P83)蒂實例1:比較過氧化氫酶和Fe3+的催化效率蝿一實驗原理:膈新鮮肝臟中有較多的過氧化氫酶。經(jīng)計算,質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3.5%的FeCl3溶液和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20%的肝臟研磨液相比,每滴FeCl3溶液中的Fe3+數(shù),大約是每滴肝臟研磨液中過氧化氫酶分子數(shù)的25萬倍。肅二實驗?zāi)康模耗f通過比較過氧化氫在不同條件下分解的快慢,了解過氧化氫酶的作用和意義。蒈三. 材料用具芇 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20%的肝臟

30、(如豬肝、雞肝)研磨液,新配制的體積分?jǐn)?shù)為3%的過氧化氫溶液,質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3.5%的FeCl3溶液蒆 量筒,試管,滴管,試管夾,試管架,衛(wèi)生香,火柴,酒精燈,大燒杯,三腳架,石棉網(wǎng),溫度計薂四. 方法步驟:薁步驟芇注意問題蚃解釋莄取4支潔凈試管,分別編號1,2,3,4,向試管內(nèi)分別加入2ml過氧化氫溶液,按序號依次放在試管架上芀不讓H2O2接觸皮膚莇H2O2有一定的腐蝕性肄將2號試管放在90左右的水浴中加熱,觀察氣泡冒出的情況,并與1號試管作比較。螂聿蕆向3號試管內(nèi)滴入2滴FeCl3溶液,向4號試管內(nèi)滴入2滴肝臟研磨液,觀察哪支試管產(chǎn)生的氣泡多。蒅蒃不可用同一支滴管肂薇袆肝臟研磨液必須是新鮮的羈

31、袀肝臟要制成研磨液蚇由于酶具有高效性,若滴入的FeCl3溶液中混有少量的過氧化氫酶,會影響實驗準(zhǔn)確性芆蚃因為過氧化氫酶是蛋白質(zhì),放置過久,可受細(xì)菌作用而分解,使肝臟組織中酶分子數(shù)減少,活性降低蠆螇研磨可破壞肝細(xì)胞結(jié)構(gòu),使細(xì)胞內(nèi)的酶釋放出來,增加酶與底物的接觸面積莃23min后,將點燃的衛(wèi)生香分別放在3、4號試管內(nèi)液面的上方,觀察哪支試管中的衛(wèi)生香燃燒更猛烈。膁放衛(wèi)生香時,動作要快,不要插到氣泡中莈現(xiàn)象:3號試管產(chǎn)生氣泡多,冒泡時間短,衛(wèi)生香猛烈復(fù)燃,4號試管產(chǎn)生氣泡少,冒泡時間長,衛(wèi)生香幾乎無變化袇避免衛(wèi)生香因潮濕而熄滅螄實驗:影響酶活性的條件袃 細(xì)胞中幾乎所有的化學(xué)反應(yīng)都是由酶來催化的。酶對

32、化學(xué)反應(yīng)的催化效率稱為酶活性(enzyme activity)。蒁 唾液淀粉酶、胃蛋白酶等消化酶都是在消化道中起作用的。不同部位消化液的pH不一樣。唾液的pH為6.27.4,胃液的pH為0.91.5,小腸液的pH為7.6。唾液淀粉酶會隨胃液流入胃,胃蛋白酶會隨食糜進(jìn)入小腸。袆實例2:溫度對酶活性的影響膅(一)實驗?zāi)康模浩L1初步學(xué)會探索溫度對酶活性的影響的方法。膀2探索淀粉酶在不同溫度下催化淀粉水解的情況。羆(二)實驗原理:薆1淀粉遇碘后,形成紫藍(lán)色的復(fù)合物。肅2淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麥芽糖和葡萄糖(淀粉水解過程中,不同階段的中間產(chǎn)物遇碘后,會呈現(xiàn)紅褐色或紅棕色。)麥芽糖和葡萄糖遇碘后不顯色

33、。注:市售a-淀粉酶的最適溫度約60罿(三)方法步驟:肆操作羇注意問題蒁解釋羂取3支試管,編上號,然后分別注入2mL可溶性淀粉溶液膆肄膂另取3支試管,編上號,然后分別注入1mL新鮮淀粉酶溶液螁芆蒄將裝有淀粉溶液和酶溶液的試管分成3組,分別放入熱水(約60)、沸水和冰塊中,維持各自的溫度5min襖不能只用不同溫度處理淀粉溶液或酶溶液蕿防止混合時,由于兩種溶液的溫度不同而使混合后溫度發(fā)生變化,反應(yīng)溫度不是操作者所要控制的溫度,影響實驗結(jié)果。莆分別將淀粉酶溶液注入相同溫度下的淀粉溶液中,搖勻后,維持各自的溫度5min裊保持各自溫度時間不能太短莂淀粉酶催化淀粉水解需要一定時間莈在3支試管中各滴入1-2

34、滴碘液,搖勻后觀察這3支試管中溶液顏色變化并記錄蒆碘液不能滴加太多芆防止影響實驗現(xiàn)象的觀察肄實例3:PH值對酶活性的影響莁1、取三支潔凈的試管,編上號1,2,3,并分別注入1ml的新鮮的淀粉酶溶液。蒅2、依次向1號,2號,3號試管中注入蒸餾水,氫氧化鈉溶液,稀鹽酸各1ml并搖勻。蒃3、分別向1號,2號,3號試管中各注入2ml可溶性淀粉溶液,震蕩搖勻。薂4、將三支試管的下半部浸到37左右的溫水中,保溫5分鐘。膀5、向三支試管中各加入2ml斐林試劑,震蕩搖勻。薅實驗現(xiàn)象:襖一、溫度對酶活性的影響芄1號試管中的液體未變藍(lán),2號和3號試管中的液體變藍(lán),且2號試管藍(lán)色比3號試管深。衿二、pH對酶活性的影

35、響罿2號和3號試管中的液體未變藍(lán),1號試管中的液體變藍(lán)。芅實驗結(jié)論:螞1、在最適宜的溫度和最適宜的ph條件下,酶的活性最高。羂2、溫度和ph偏高或偏低,酶的活性明顯下降。聿注意:蚆探索淀粉酶對淀粉和蔗糖水解的作用。注意事項:蒄1、實驗?zāi)康模鹤C明酶的專一性2、遵循等量性原則蟻3、酶催化結(jié)果的檢驗:因為淀粉的水解產(chǎn)物中有還原性糖,故可以用斐林試劑檢驗還原糖的存在,從而說明淀粉酶催化水解了淀粉;而蔗糖則不能水解,其本身不能與斐林試劑反應(yīng)。所以此實驗的關(guān)鍵在于蔗糖的純度和新鮮度,如果其中混有少量的葡萄糖或果糖,或蔗糖放置久了受細(xì)菌作用,部分分解成了單糖,則與斐林試劑共熱時能生成磚紅色的沉淀,使人產(chǎn)生錯

36、覺腿肇實驗七 葉綠體色素的提取和分離(必修一P97)袁一、實驗原理蒀 綠葉中的色素能溶解在有機溶劑無水乙醇中,所以,可以用無水乙醇提取葉綠體中的色素。綠葉中的色素不只一種,它們都能溶解在層析液中。然而,它們在層析液中溶解度不同:溶解度高的隨層析液在濾紙上的擴散得快;反之則慢。這樣,幾分之后,綠葉中的色素就會隨著層析液在濾紙上的擴散而分離開。(分子量小的溶解度高)腿二、實驗?zāi)康哪e1.進(jìn)行綠葉中色素的提取和分離。薃2.探索葉綠體中有幾種色素。羋三、材料用具艿新鮮的綠葉(如菠菜的綠葉)薄干燥的定性濾紙,試管,棉塞,試管架,研缽,玻璃漏斗,尼龍布,毛細(xì)吸管,剪刀,藥勺,量筒(10ml),天平。肁無水乙

37、醇(若沒有無水乙醇,也可用體積分?jǐn)?shù)為95%的乙醇,但要加入適量的無水碳酸鈉,除去水分),層析液(由20份在6090下分餾出來的石油醚、2份乙醇和1份苯混合而成。93號汽油也可代用),二氧化硅和碳酸鈣。芁四、方法步驟荿步 驟羅注 意 問 題螃分 析肀1提取色素葿(1)稱取5g綠葉,剪碎,放入研缽中。(2)在研缽中放入少許SiO2、CaCO3,再加入10mL無水乙醇,進(jìn)行迅速、充分研磨。莆加SiO2膁加CaCO3蝿薈薃羃薈蚈羄莁薁加無水乙醇迅速螈加SiO2有助于研磨得充分。蒞加CaCO3防止研磨時葉綠素受到破壞。因為葉綠素含鎂,可被細(xì)胞液中的有機酸產(chǎn)生的氫代替,形成去鎂葉綠素,CaCO3可中和液泡

38、破壞釋放的有機酸,防止葉綠體被破壞。肅葉綠體色素易溶于有機溶劑。莀減少研磨過程葉綠素的分解螈2收集濾液螆將研磨液迅速倒入玻璃漏斗(漏斗基部放一單層尼龍布)中進(jìn)行過濾。將濾液收集到試管中,及時用棉塞將試管口塞嚴(yán)。薀腿袈尼龍布起過濾作用。膇節(jié)試管口用棉花塞塞緊是為了防止揮發(fā)和色素氧化膁3制備濾紙條羈將干燥的定性濾紙剪成略小于試管長與直徑的濾紙條,一端剪去兩個角,并在距這一端1cm處劃一鉛筆線。芃羄干燥羀順著紙紋剪成長條肈一端剪去二個角蚄蒂可吸收更多的濾液。蝿層析時,色素分離效果好。膈可使層析液同時到達(dá)濾液細(xì)線。肅4劃濾液細(xì)線膄用毛細(xì)吸管吸取少量濾液,沿鉛筆線劃出細(xì)、齊、直的一條濾液細(xì)線,待濾液干后

39、再畫一兩次。蒈濾液細(xì)線越細(xì)、越齊越好。芇蒆重復(fù)三次。薂薁芇防止色素帶之間部分重疊。蚃莄增加色素在濾紙上的附著量,使分離的色素帶清晰分明,實驗結(jié)果更明顯。芀5紙層析法分離色素莇將適量的層析液倒入試管中,將濾紙條(有濾液細(xì)線的一端朝下)輕輕插入層析液中,隨后用棉塞塞緊試管口。注意,不能讓濾液細(xì)線觸及層析液。(也可用小燒杯代替試管,用培養(yǎng)皿蓋住小燒杯)肄層析液不能沒及濾紙條。螂燒杯要蓋培養(yǎng)皿蓋。聿防止色素溶解在層析液中蕆層析液中的苯、丙酮、石油醚易揮發(fā)。蒅為避免過多吸入層析液中的揮發(fā)性物質(zhì),本實驗應(yīng)在通風(fēng)條件下進(jìn)行。實驗結(jié)束時及時用肥皂洗手。蒃6觀察實驗結(jié)果肂薇襖最寬:葉綠素a;羀最窄:葉綠素b;衿

40、相鄰色素帶最近:葉綠素a和葉綠素b;蚅相鄰色素帶最遠(yuǎn):胡蘿卜素和葉黃素。芅螞五、考點提示:蚈1、二氧化硅:為了使研磨充分;碳酸鈣:保護(hù)色素免受破壞;丙酮:色素的溶劑。 螅2、擴散最快的是胡蘿卜素(橙黃色),擴散最慢的是葉綠素b(黃綠色)。莂3、裁取定性濾紙時,注意雙手盡量不要接觸紙面,以免手上的油脂或其他臟物污染濾紙。膀4、制備濾紙條時,要將濾紙條的一端剪去兩角,這樣可以使色素在濾紙條上擴散均勻,便于觀察實驗結(jié)果。蕆5、根據(jù)燒杯的高度制備濾紙條,讓濾紙條長度高出燒杯1cm ,高出的部分做直角彎折。裊6、濾紙上的濾液細(xì)線如果觸到層析液,細(xì)線上的色素就會溶解到層析液中,就不會在濾紙上擴散開來,實驗

41、就會失敗。螃7、畫濾液細(xì)線時,用力要均勻,速度要適中袁8、研磨要迅速、充分。a.因為丙酮容易揮發(fā); b.為了使葉綠體完全破裂.從而能提取較多的色素;c.葉綠素極不穩(wěn)定,能被活細(xì)胞中的葉綠素酶水解而被破壞。蒀羅實驗八 探究酵母菌的呼吸方式(必修一P91)膃一實驗原理:荿1酵母菌是一種單細(xì)胞真菌,在有氧和無氧的條件下都能生存,屬于兼性厭氧菌,因此便于用來研究細(xì)胞呼吸的不同方式。羋2 CO2可使澄清石灰水變混濁,也可使溴麝香草酚藍(lán)水溶液由藍(lán)變綠再變黃。根據(jù)石灰水混濁程度或溴麝香草酚藍(lán)水溶液變成黃色的時間長短,可以檢測酵母菌培養(yǎng)CO2的產(chǎn)生情況。肅3橙色的重鉻酸鉀溶液,在酸性條件下與乙醇(酒精)發(fā)生化

42、學(xué)反應(yīng),在酸性條件下,變成灰綠色。薄三方法步驟:肁1酵母菌培養(yǎng)液的配制羇取20g新鮮的食用酵母菌,分成兩等份,分別放入錐形瓶A(500mL)和錐形瓶B(500mL)中 ,再分別向瓶中注入240mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的葡萄糖溶液肅2檢測CO2的產(chǎn)生羅用錐形瓶和其他材料用具組裝好實驗裝置(如圖),并連通橡皮球(或氣泵),讓空氣間斷而持續(xù)地依次通過3個錐形瓶(約50min)。然后將實驗裝置放到25-35的環(huán)境中培養(yǎng)8-10h。葿3檢測灑精的產(chǎn)生肀各取2mL酵母菌培養(yǎng)液的濾液,分別注入2支干凈的試管中。向試管中分別滴加0.5mL溶有0.1g重鉻酸鉀的濃硫酸溶液(體積分?jǐn)?shù)為95%-97%)并輕輕振蕩,使它們

43、混合均勻,觀察試管中溶液的顏色變化。膄膂膁實驗九 觀察細(xì)胞的有絲分裂(必修一P115)蝿一實驗原理:芄1在高等植物體內(nèi),有絲分裂常見于根尖、芽尖等分生區(qū)細(xì)胞。由于各個細(xì)胞的分裂是獨立進(jìn)行的,因此在同一分生組織中可以看到處于不同分裂時期的細(xì)胞。薃2染色體容易被堿性染料(如龍膽紫溶液)著色,通過在高倍顯微鏡下觀察各個時期細(xì)胞內(nèi)染色體(或染色質(zhì))的存在狀態(tài),就可判斷這些細(xì)胞處于有絲分裂的哪個時期,進(jìn)而認(rèn)識有絲分裂的完整過程。羃染色體容易被堿性染料(如龍膽紫染液)著色薈二實驗?zāi)康模呵c1制作洋蔥根尖細(xì)胞(或植物形成層)有絲分裂裝片羄2觀察植物細(xì)胞有絲分裂的過程,識別有絲分裂的不同時期,比較細(xì)胞周期不同時

44、期的時間長短。莁3繪制植物細(xì)胞有絲分裂簡圖。莇三材料用具: 蒄洋蔥(可用蔥、蒜代替)。因為根尖生長點屬于分生組織,細(xì)胞分裂能力強,易觀察到有絲分裂各個時期的細(xì)胞。蒞顯微鏡,載玻片,蓋玻片,玻璃皿,剪子,鑷子,滴管。肅質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸,體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精,質(zhì)量濃度為0.01g/ml或0.02g/ml的龍膽紫溶液(將龍膽紫溶解在質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%的醋酸溶液中配制而成)或醋酸洋紅液,洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂固定裝片。莀四實驗步驟:薄步 驟蒂注 意 問 題薀分 析膈一、根尖的培養(yǎng)蚄實驗前34天,讓洋蔥放在廣口瓶上,底部接觸清水。把這個裝置放在溫暖的地方培養(yǎng)。根長約5cm時,取生長健壯的根尖制成臨時裝片

45、觀察袂節(jié)置于溫暖處,常換水。袇羈因為細(xì)胞分裂和生長需要水分、適宜的溫度和氧氣。芃二、裝片的制作螀(解離漂洗染色制片)羀1解離:上午10時至下午2時(洋蔥根尖分生區(qū)細(xì)胞處于分裂期的較多,這會因洋蔥品種、室溫等的差異而有所不同),剪取洋蔥根尖23mm,立即放入盛有質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸和體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液的混合液(1:1)的玻璃皿中,室溫下解離35min。肈蚄解離時間要保證,細(xì)胞才能分散開來。蒂蝿膇肅解離時間也不宜過長。袀蒈目的:用藥液溶解細(xì)胞間質(zhì)(果膠),使組織中的細(xì)胞相互分離開來。此時,細(xì)胞已被鹽酸殺死。芇膂否則,根尖過于酥軟,無法取出。薂2漂洗:待根尖酥軟后,用鑷子取出,放入盛有清水

46、的玻璃皿中漂洗約10 min。芇漂洗要充分,可換水12次。芇薃目的:洗去解離液,防止解離過度,便于染色。肀芀3染色:把洋蔥根尖放進(jìn)盛有質(zhì)量濃度為0.01g/mL或0.02g/mL的龍膽紫溶液的玻璃皿中染色35min。莇染色時間不宜過長,否則顯微鏡下一片紫色,無法觀察。羄龍膽紫等為堿性染料,可使染色體著色。螂醋酸洋紅溶液也能使染色體著色聿4制片:用鑷子將這段洋蔥根尖取出來,放在載玻片上,加一滴清水,并用鑷子尖把洋蔥根尖弄碎,蓋上蓋玻片,在蓋玻片上再加一片載玻片。然后,用拇指輕輕地壓載玻片,使細(xì)胞分散開來。(壓片法)蕆要弄碎根尖,再垂直向下均勻用力壓片,不可移動蓋玻片, 蒅目的:使細(xì)胞分散,避免細(xì)

47、胞重疊,便于觀察。做得成功的裝片,標(biāo)本被壓成云霧狀。艿三、觀察袇1低倍鏡觀察:把裝片放在低倍鏡下,慢慢移動裝片,找到分生區(qū)細(xì)胞。薇2高倍鏡觀察:移走低倍鏡,換上高倍鏡,用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋和反光鏡把視野調(diào)整清晰,仔細(xì)觀察,找出處于細(xì)胞分裂期中期的細(xì)胞,再找出前期、后期、末期的細(xì)胞。薁調(diào)節(jié)顯微鏡的放大倍數(shù),使你能夠在視野里同時看到約50個細(xì)胞羈一定要找到分生區(qū)。薆在一個視野里,往往不容易找全有絲分裂過程中各個時期的細(xì)胞。如果是這樣,可以慢慢地移動裝片,從鄰近的分生區(qū)細(xì)胞中尋找。蚇分生區(qū)細(xì)胞特點是:細(xì)胞呈正方形,排列緊密,有的細(xì)胞正處于分裂期。羂討論:制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關(guān)鍵是什么?荿答:制作好洋

48、蔥根尖有絲分裂裝片的關(guān)鍵有以下幾點:(1)剪取洋蔥根尖材料時,應(yīng)該在洋蔥根尖細(xì)胞一天之中分裂最活躍的時間;(2)解離時,要將根尖細(xì)胞殺死,細(xì)胞間質(zhì)被溶解,使細(xì)胞容易分離;(3)壓片時,用力的大小要適當(dāng),要使根尖被壓平,細(xì)胞分散開。蠆注意:1、選材:應(yīng)選取有絲分裂旺盛的細(xì)胞,如植物根尖分生區(qū)的細(xì)胞螇 2、解離就是用要藥液使組織的細(xì)胞相互分離開來,便于最后制片時能被壓成一薄層進(jìn)行顯微觀察。解離液中酒精的作用是迅速殺死細(xì)胞,固定細(xì)胞的分裂相;而鹽酸的作用是使洋蔥細(xì)胞的細(xì)胞壁軟化,并使細(xì)胞間的中膠層物質(zhì)溶解,從而達(dá)到分離細(xì)胞的目的。另外解離時間不宜過短,否則根尖未充分解離,壓片時細(xì)胞分不開;但又不能太

49、長,否則使根尖過分酥軟,無法進(jìn)行漂洗和染色,且染色體成分被破壞。這一步是實驗成功與否的關(guān)鍵莃3、漂洗的目的是去除根中多余的解離液,特別是鹽酸,因為染色時用的是堿性染料龍膽紫,酸與堿發(fā)生反應(yīng)會影響染色效果膁4、染色時間亦不能過長,否則會使染色體與周圍的其他結(jié)構(gòu)均被著色,這樣就無法形成顏色上的反差,不便于觀察。莈5、在制片時要用拇指按壓蓋玻片,目的是使細(xì)胞分散,不至于重疊。袆6、顯微鏡下觀察到的細(xì)胞被固定在有絲分裂的某個階段,若在視野中找不到處于某個時期的細(xì)胞時,可以適當(dāng)移動玻片螄實驗十 細(xì)胞大小與物質(zhì)運輸?shù)年P(guān)系(必修一P110)蕿一實驗?zāi)康模耗i通過探究細(xì)胞大小,即細(xì)胞的表面積與體積,與物質(zhì)運輸效

50、率之間的關(guān)系,探討細(xì)胞不能無限長大的原因。袆二實驗原理:膅用瓊脂塊模擬細(xì)胞。瓊脂塊越小,其表面積越大,則其與外界效換物質(zhì)的表面積越大,經(jīng)交換進(jìn)來的物質(zhì)在瓊脂塊中擴散的速度快;瓊脂塊中含有酚酞,與NaOH相遇,呈紫紅色,可顯示物質(zhì)(NaOH)在瓊脂塊中的擴散速度。芁三.材料用具膀3cm3cm6cm的含酚酞的瓊脂塊,質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的NaOH溶液。羆塑料餐刀,防護(hù)手套,毫米尺,塑料勺,紙巾,燒杯。節(jié)四操作步驟:羃操作方法罿注意問題肆解釋蚃用塑料餐刀將含酚酞的瓊脂塊切成三塊邊長分別為3cm、2cm、1cm的正方體蒁螈膆將3塊瓊脂塊放在燒杯內(nèi),加入NaOH溶液,將瓊脂塊淹沒,浸泡10min。用塑料勺

51、不時翻動瓊脂塊。肄不要用勺子將瓊脂塊切開或挖動其表面膂避免干擾實驗結(jié)果蒆戴上手套,用塑料勺將瓊脂塊從NaOH溶液中取出。用紙巾把它們吸干,用塑料刀把瓊脂塊切成兩半。仔細(xì)觀察切面的顏色變化,變成紅色的部分代表NaOH擴散的深度,測量每一塊上NaOH擴散后著色的濃度。記錄測量結(jié)果芆應(yīng)避免NaOH與皮膚和眼睛等接觸。如潑灑出來,應(yīng)立即用水沖洗潑灑處。蒄每兩次操作之間必須把刀擦干蝕NaOH有腐蝕性蕿莆蟻莂避免干擾實驗結(jié)果羋根據(jù)測量結(jié)果進(jìn)行計算,并將結(jié)果填在記錄表中蒆肂螀結(jié)論:瓊脂塊的表面積與體積之比隨著瓊脂塊的增大而減??;NaOH擴散的體積與整個瓊脂塊的體積之比隨著瓊脂塊的增大而減小。肇四課后討論題答

52、案:蒅1.當(dāng)NaOH與含酚酞的瓊脂塊相遇時,其中的酚酞變成紫紅色,這是常用的檢測NaOH的方法,從瓊脂塊的顏色變化就知道NaOH擴散到多遠(yuǎn);在相同時間內(nèi),NaOH在每一瓊脂塊內(nèi)擴散的深度基本相同,說明NaOH在每一瓊脂塊內(nèi)擴散的速率是相同的。蒃2.根據(jù)球體的體積公式V=4/3r3,表面積公式S=4r2,計算結(jié)果如下表。薂細(xì)胞直徑(m)膀表面積(m2)薅體積(m3)襖比值(表面積/體積)羀20衿1 256蚅4 187芅0.30螞30蚈2 826螅14 130莂0.20膀3.細(xì)胞越大,物質(zhì)運輸?shù)男试降?,所以多?xì)胞生物體是由許多細(xì)胞而不是由少數(shù)體積更大的細(xì)胞構(gòu)成的。細(xì)胞越大,需要與外界環(huán)境交流的物質(zhì)越多;但是細(xì)胞體積越大,其表面積相對越小,細(xì)胞

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