細胞遺傳學分析

1、白血病的染色體異常和基因重排,一、白血病染色體的基本特性,（一）獲得性 （二）克隆性 （三）原發(fā)性和繼發(fā)性 （四）平衡性和不平衡性,（一）獲得性,證據(jù)：同卵雙生 子女正常 畸變細胞局限于白細胞 白血病為后天獲得，非先天遺傳性疾病,（二）克隆性,克隆性是指來自同一個惡性轉化細胞的一群白細胞具有相同的染色體異常 ISCN（1995）規(guī)定： 至少2個細胞有相同的染色體增加或結構重排，至少3個細胞有相同的染色體丟失 方可確認存在一個克隆,（三）原發(fā)性和繼發(fā)性,原發(fā)性：疾病早期 白血病發(fā)病有關 白血病細胞學、免疫學改變相關 核型單一出現(xiàn) 繼發(fā)性：克隆演化所致 發(fā)病無關 預后差,（四）平衡性和不平衡性,平

2、衡性： 相互易位或結構重排（ DNA含量不變） 使原不在一起的兩基因并置在一起(2種情況) 1 、原癌基因與DNA激活序列相鄰 （ALL 、染色體易位） 2 、編碼轉錄因子、受體酪氨酸激酶或核孔蛋白的基因和正常時無關的基因融合 （AML染色體易位） 不平衡：癌基因劑量的增加或抑癌基因的丟失,二、慢性粒細胞白血?。–ML）,1、Ph 染色體 1960年Nowell和Hungerford在美國費城首先發(fā)現(xiàn) 9和22號染色體的相互易位t(9；22) (q34；q11),加圖1（示ph）115,大約92的Ph（）CML患者有典型的t(9；22) (q34；q11)易位 其余患者則涉及3條或更多染色體其

3、中必定包括9和22號染色體在內的復雜易位,加圖2（示ph）120,產生BCR/ABL融合基因 9q34的ABL原癌基因易位到22q11上和BCR基因部分融合產生BCR/ABL融合基因 BCR/ABL融合蛋白具激酶活性,2、CML慢性期的染色體改變 Ph見于95%的CML患者（ Ph（+）CML ） Ph（+）CML患者中70%有46，t（9；22）的假二倍體； 30%還可有-Y、+8、+Ph 3、AP/BP-CML 的染色體改變 20%保持46，t（9；22）核型 80%有核型演變（出現(xiàn)額外染色體達47-50） 4、 Ph（-）CML 5%,三、慢性淋巴細胞白血?。–LL）,CLL染色體研究進

4、展緩慢（由于95的CLL為B細胞性，T細胞性僅占5% ） 1979年后采用了B細胞激活劑（EBV、LPS、PWM）才有了進展 CLL患者核型演變很少見，一旦發(fā)生則往往預后不良,圖127,四、急性髓性白血?。ˋML）,兩類：一類是和FAB亞型相關的特異性染色體重排，約占60；另一類是和FAB亞型無關的異常，大多為數(shù)目異常； 和FAB亞型相關的特異性染色體重排 t(8；21)(q22；q22) AMLM2 t(15；17)(q22；q12 or 21) AMLM3 inv(16)(p13q22) AMLM4 t/del(11)(q23) AMLM5 其他少見的染色體重排 和FAB亞型不相關的異常

5、原有異常CR后一般不再檢出，復發(fā)時又可重現(xiàn),t(8；21)(q22；q22)見于15%-20%的AML 和AMLM2有特別聯(lián)系（92%為AMLM2 、7%為AMLM7、另為92%為AMLM1 ） 75%的有額外染色體異常（其中性染色體丟失最多73%） 21q22的AML1基因易位到8q22上和位于該處的ETO基因融合形成AML1- ETO融合基因,1、 t(8；21)(q22；q22) ( AMLM2),圖133,t(15；17)(q22；q12 or 21) t(8；21)只見于AML-M3 約85%AMLM3可檢出t(15；17)（具高特異性遺傳標志） 17q上的維甲酸受體a基因易位到15

6、q的PML基因上融合形成PML- RAR a融合基因 全反式維甲酸治療有效、反之無效,2、t(15；17)(q22；q12 or 21) AMLM3,144,inv(16)(p13q22)見于25%AML-M4 形成CBFB- MYH11融合基因 構成M4EO亞型 M4EO亞型放化療效果好，CR近100%，MS達5年,3、inv(16)(p13q22) AMLM4,圖57,153,五、急性淋巴細胞白血?。ˋLL）,大約60-85的ALL患者可檢出克隆性染色體畸變 其中66為特異性染色體重排,六、骨髓異常增生綜合癥（MDS）,1 、 異常檢出率：30-50%，以缺失（整個或部分缺失）多見，獲得（

7、額外未知起源的物質）其次，易位少見 2 、 缺失：del（5q）最常見，del（20q），del（11q），del（7q）其次，del（13q）少見,七、白血病染色體畸變的臨床和生物學意義,1、克隆性染色體異常的檢出有助于白血病的診斷和鑒別診斷 克隆性染色體異常的發(fā)現(xiàn)是診斷MDS或白血病的主要依據(jù)，據(jù)此可與其他非惡性血液病進行鑒別,2、特異性染色體重排的發(fā)現(xiàn)不但有助于AML和ALL的鑒別，而且有助于進一步識別它們中的各自亞型,MICM(morphologic，immunologic，cytogenetic and molecular biologic)將特異性染色體重排和細胞形態(tài)學特征、免疫學表型和分子生物學特性等一起列為白血病診斷分型的重要指標,3、染色體畸變可作為監(jiān)測急性白血?。ˋL）緩解、復發(fā)和CML急變的重要指標,額外異常染色體一般比臨床或血液學急變征象早2-4個月,4、性染色體體標記可用來驗證異基因骨髓移植是否成功或確定白血病的來源,5、染色體是獨立的預后指標并有助于治療方案的選擇,核型 AML ALL 低危 t(8;21)t(15;17)in(16) 50的超二倍體、t(12;21) 中危 異常、del(9q)del(7q) 6q- 、t(10;14)、t(11;14) 高危 -5、-7、del(5