耳聾基因檢測(cè)

1、耳聾基因檢測(cè),主要內(nèi)容,背景介紹 耳聾基因檢測(cè)的意義 產(chǎn)品介紹 案例分享,2,什么是耳聾？,聽(tīng)覺(jué)障礙，不能聽(tīng)到外界聲響的表現(xiàn)，輕者聽(tīng)而不真，重者不聞外聲。 WHO 耳聾分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：,4,耳聾分類(lèi),耳聾分為傳導(dǎo)性耳聾、感音性耳聾、混合性耳聾,耳聾的致病因素,遺傳因素； 母親懷孕期間的藥物使用史； 孕母宮內(nèi)感染:如巨細(xì)胞病毒、皰疹、毒漿體原蟲(chóng)??； 母親的生產(chǎn)史； 新生兒高膽紅素血癥； 顱面部畸形； 早產(chǎn)或體重低； 各種后天因素，如外傷,6,我生育下一個(gè)孩子還會(huì)耳聾嗎？,7,常染色體隱性遺傳方式：有25%的幾率 生育聾兒。,線(xiàn)粒體母系遺傳：母系成員 均會(huì)有聾病,常染色體顯性遺傳：有50%的幾率 生育聾

2、兒。,背景介紹耳聾發(fā)病情況,聽(tīng)力障礙的發(fā)病率：新生兒1；青年人1%；45-64歲人群14%；65-75歲為30%-60%；75歲以后達(dá)50%-70%存在不同程度的聽(tīng)力損失。 中國(guó)殘疾人聯(lián)合會(huì)公布： 1987年的第一次全國(guó)殘疾人抽樣調(diào)查各類(lèi)殘疾人總數(shù)約為5164萬(wàn)，其中聽(tīng)力言語(yǔ)殘疾為1770萬(wàn)人，占總殘疾人總數(shù)的34.28%，是各類(lèi)殘疾的首位。 2006年的第二次全國(guó)殘疾人抽樣調(diào)查，全國(guó)各類(lèi)殘疾人總數(shù)為8296萬(wàn)人，聽(tīng)力殘疾2004萬(wàn)人占?xì)埣踩丝倲?shù)24.16%，位于第二位，僅次于肢體殘疾。,在對(duì)四歲及四歲以?xún)?nèi)的聽(tīng)力損失患兒病因進(jìn)行分析時(shí)，遺傳因素所占比例為71%，高于出生時(shí),新生兒聽(tīng)力損失中遺傳

3、因素占據(jù)了65%的病因,N Engl J Med, 2006. 354: p. 2151-2164.,背景介紹耳聾發(fā)病原因,背景介紹流行病學(xué)的警示意義,確立了中國(guó)聾啞人群常見(jiàn)的3個(gè)易感基因及突變熱點(diǎn) 藥物敏感性耳聾（mtDNA 1555AG)： 占我國(guó)2780萬(wàn)聽(tīng)力殘疾者的5-12%,意味著139-333萬(wàn)人可以通過(guò)用藥警示而避免致聾。 先天性重度耳聾(GJB2)： 占聽(tīng)力殘疾者的20%,意味著556萬(wàn)人可以明確病因，早期發(fā)現(xiàn)，早期干預(yù)，聾而不“啞”。 大前庭水管綜合征(SLC26A4)： 占聽(tīng)力殘疾者的16%,意味著445萬(wàn)人通過(guò)早期發(fā)現(xiàn)可以避免永久性聽(tīng)力損失。,背景介紹干預(yù)措施,助聽(tīng)器：

4、純音測(cè)聽(tīng)，閾值在4090dB（中度重度耳聾）都應(yīng)建議配用。 人工耳蝸移植 目前對(duì)于感音神經(jīng)性重度耳聾的有效治療方法-人工耳蝸植入手術(shù)，20萬(wàn)元/只 適應(yīng)癥： 1）先天性雙耳重度-極重度感音性耳聾； 耳蝸移植的最佳時(shí)間是：2歲以?xún)?nèi)（Audiol Neurootol. 2004 Jul-Aug;9(4):224-33）。 2）語(yǔ)后聾及成年患者有基本語(yǔ)言識(shí)別能力及辨音能力且佩戴助聽(tīng)器無(wú)效者。,耳聾基因檢測(cè)意義,指導(dǎo)婚育。實(shí)現(xiàn)優(yōu)生優(yōu)育 早發(fā)現(xiàn)、早干預(yù)，實(shí)現(xiàn)聾而不啞,產(chǎn)品匯總,三個(gè)耳聾基因高通量測(cè)序,四個(gè)基因20個(gè)位點(diǎn)-飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF-MS)技術(shù)原理,C,ddATP,ddCTP,ddG

5、TP,ddTTP,G,單堿基延伸技術(shù) （iPLEX）,檢測(cè)位點(diǎn)多：可同時(shí)檢測(cè)20個(gè)基因位點(diǎn)； 靈敏度高：能分辨質(zhì)量差別為1 Da的分子； 準(zhǔn)確率高：99%； 通量大：每天可檢測(cè)3000份以上； 自動(dòng)化程度高：檢測(cè)數(shù)據(jù)自動(dòng)分析； 檢測(cè)周期短：收到樣本后5個(gè)工作日可出報(bào)告。,技術(shù)特點(diǎn),適用人群,新生兒 婚前、孕前和產(chǎn)前人群 各種原因不明的耳聾，包括先天性聾 和后天性聾人群 聽(tīng)力正常，但有耳聾家族史的人群,受檢人群,檢測(cè)醫(yī)院,初篩TEOAE/DPOAE,結(jié)果不通過(guò),結(jié)果通過(guò),復(fù)篩(TEOAE/DPOAE )+AABR/ABR閾值)篩選聽(tīng)力異常,知情同意、自愿選擇,采取最少3個(gè)采血斑,自愿選擇， 知情

6、同意,臨床檢驗(yàn)中心,耳聾基因檢測(cè),出具檢測(cè)報(bào)告,檢測(cè)結(jié)果正常,檢測(cè)結(jié)果為雜合突變或純合突變,隨訪,檢測(cè)醫(yī)院確診,出具確診報(bào)告,確診結(jié)果為突變,確診結(jié)果正常,干預(yù)追蹤,隨訪,基因檢測(cè)流程,5個(gè)工作日,聽(tīng)力及基因聯(lián)合篩查的臨床實(shí)施模式,51個(gè)基因+2個(gè)位點(diǎn),PCR、 第一代測(cè)序,目標(biāo)區(qū)域捕獲、第二代高通量測(cè)序,適用范圍： 1）基因診斷：對(duì)于臨床表型難以確診的病例給予分子水平的鑒別診斷； 2）攜帶者篩查：對(duì)于無(wú)臨床表型的致病突變攜帶者進(jìn)行基因篩查； 檢測(cè)周期：35工作日,檢測(cè)流程,檢測(cè)周期：35個(gè)工作日,檢測(cè)基因/位點(diǎn),單個(gè)耳聾基因全測(cè)序,檢測(cè)基因 GJB2 GJB3 SLC26A4 測(cè)序采用san

7、ger法，在以下情況可建議進(jìn)行單個(gè)基因全測(cè)序 1）耳聾患者檢測(cè)某個(gè)耳聾基因雜合子突變，為明確病因做該基因的全測(cè)序 2）若胎兒母親為某個(gè)耳聾基因的攜帶者，為了評(píng)估胎兒患有耳聾的風(fēng)險(xiǎn)，對(duì)父親做該耳聾基因的全測(cè)序。,遺傳因素的具體分析,遺傳性耳聾基因檢測(cè)內(nèi)容,臨床服務(wù)：127個(gè)基因（重復(fù)11個(gè)基因）,技術(shù)簡(jiǎn)介：采用新一代高通量測(cè)序技術(shù)，對(duì)受檢者的耳聾相關(guān)基因區(qū)域進(jìn)行檢測(cè)和分析。,目標(biāo)區(qū)域捕獲測(cè)序,遺傳性耳聾基因檢測(cè)技術(shù),檢測(cè)時(shí)間：35個(gè)工作日（7周） 檢測(cè)樣本：全血：5ml，EDTA抗凝 (紫蓋)； DNA：6ug，OD在1.7-2.0，未降解 運(yùn)輸條件：冰袋+干冰運(yùn)輸 檢測(cè)結(jié)果：形成報(bào)告文件,27

8、,服務(wù)流程,適用條件,主要適用于以下情況： 1：通過(guò)熱點(diǎn)突變檢測(cè)未能發(fā)現(xiàn)致病原因的耳聾患者 2：非綜合征型耳聾，無(wú)法確定致病基因及遺傳方式的 3：綜合征型耳聾患者 4：存在耳聾家族史的人群,篩查案例,一家9口人，6人是耳聾,佛山家系為3代遺傳的耳聾家系，現(xiàn)有家系成員9人，其中6名為耳聾患者，除由于婚姻關(guān)系成為該家系成員的2名耳聾患者外，剩余的4名患者均為母系家庭成員。,家系基因,30,外婆 同質(zhì)突變,外公 正常,姨媽 同質(zhì)突變,祖父 雜合突變,祖母 雜合突變,叔叔 純和突變,女：1555A純和 235delc雜合,12SrRNA A1555G,GJB2 235delc,母親重聾 同質(zhì)突變,父親重聾 純和突變,啟示,非常值得警惕的是：這個(gè)孩子通過(guò)了聽(tīng)力篩查，如果沒(méi)有做基因篩查，一旦誤用了氨基糖苷類(lèi)藥物將一針致聾，導(dǎo)致嚴(yán)重后果,31,臨床案例,患兒杜某，女，11歲； 自述4歲左右，“感冒”后出現(xiàn)耳聾癥狀； 臨床診斷：大前庭水管綜合征； 否認(rèn)孕期病毒感染及耳聾家族史； 檢測(cè)結(jié)果： 患兒：SLC26A4基因1174AT+2168AG復(fù)合突變； 患兒父親： SLC26A4基因1174AT雜合突變； 患兒母親：