動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體(1)精選教學(xué)PPT課件.ppt

1、22.2掌握動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體、科長導(dǎo)航1動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)。 2了解單克隆抗體技術(shù)。 3了解動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體技術(shù)的應(yīng)用。 【重點(diǎn)】動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)單克隆抗體技術(shù)。 【難點(diǎn)】雜交瘤細(xì)胞的篩選過程。 情景引導(dǎo)20世紀(jì)90年代初，英國科學(xué)家利用“生物導(dǎo)彈”單克隆抗體瞄準(zhǔn)癌細(xì)胞并將其殺死，奇跡般地消滅了患血癌的67歲退休教授和女性患者的癌細(xì)胞。 名為“生物導(dǎo)彈”的單克隆抗體能夠追蹤并殺死細(xì)菌、病毒或癌細(xì)胞。、核心要點(diǎn)突破、基礎(chǔ)自主整理、合格訓(xùn)練、2.2.2動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體、基礎(chǔ)自主整理、2個(gè)以上、雜交、DNA、雜交、4意義：二、獲得單克隆抗體1的傳統(tǒng)抗體(1)方法：在動(dòng)物體內(nèi)反復(fù)

2、注射某種_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _生于動(dòng)物從動(dòng)物中分離必要的抗體。 (2)特點(diǎn)：純度低，差。 遠(yuǎn)親、遺傳、細(xì)胞免疫、新品種、抗原、抗體、血清、產(chǎn)量低、特異性、2單克隆抗體的制備、脾、骨髓瘤細(xì)胞、b淋巴細(xì)胞、雜交瘤細(xì)胞、增殖、產(chǎn)生抗體、克隆化、抗體(2)應(yīng)用作為診斷試劑，具有正確、_、簡易、_ _ _的優(yōu)點(diǎn)。 “特異性強(qiáng)，靈敏度高，效率高，迅速，治病，運(yùn)輸藥物，思考什么是單克隆抗體”用日語怎么說？ 小鼠的單克隆抗體能用于治療人體疾病嗎？ 為什么？ 單克隆抗體是一種高度特異的抗體，是由單雜交瘤細(xì)胞增殖產(chǎn)生的。 不行。 因?yàn)樾∈蟮腷淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的抗體和人體b淋巴細(xì)

3、胞產(chǎn)生的抗體不同。 突破關(guān)鍵，動(dòng)物細(xì)胞融合，1原理：膜流動(dòng)性。 2誘導(dǎo)方法：物理法離心、振動(dòng)、電擊化學(xué)法聚乙二醇； 用生物方法滅活的病毒。 3動(dòng)物細(xì)胞融合的過程，4個(gè)優(yōu)點(diǎn)：動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。 特別是失活是指通過物理或化學(xué)手段使病毒或細(xì)菌失去感染能力，但不會(huì)破壞這些病原體的抗原結(jié)構(gòu)。 5植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合的比較(2010年安慶高二檢查)某同學(xué)在學(xué)習(xí)“細(xì)胞工程學(xué)”時(shí)，將有關(guān)動(dòng)植物細(xì)胞工程學(xué)的內(nèi)容列表進(jìn)行了比較，我認(rèn)為有些地方錯(cuò)了()，A.1B2 C3 D4【試解】b【解析】植物細(xì)胞工程學(xué)常采用的技術(shù)手段是動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

4、、細(xì)胞融合、單克隆抗體制備、胚胎移植、核移植等。 動(dòng)物、植物細(xì)胞工程學(xué)都需要對(duì)采集的材料進(jìn)行特殊處理，植物細(xì)胞工程學(xué)利用酶解法去除細(xì)胞壁，得到生動(dòng)的原生質(zhì)體，動(dòng)物細(xì)胞工程學(xué)需要用胰蛋白酶處理動(dòng)物組織。 動(dòng)、植物細(xì)胞工程使用的培養(yǎng)基不同，植物細(xì)胞工程利用固體或半固體培養(yǎng)基，含有蔗糖、植物所需的礦物質(zhì)元素、植物激素等，動(dòng)物細(xì)胞工程利用液體培養(yǎng)基，含有動(dòng)物所需的營養(yǎng)物質(zhì)、無機(jī)鹽、維生素、動(dòng)物血清等。 【互動(dòng)方法】動(dòng)物細(xì)胞融合中2種不同的細(xì)胞融合，融合方式有多少種？融合完成的標(biāo)志是什么？ 【提示】3種細(xì)胞核融合為一個(gè)核。 【容易誤警報(bào)】(1)常用的病毒誘導(dǎo)劑有仙臺(tái)病毒、新城雞傳染病病毒、皰疹病毒等，其

5、中仙臺(tái)病毒最常用。 (2)作為誘導(dǎo)劑使用的病毒事先失活，雖然失去了病毒的感染活性、增殖能力，但必須不破壞病毒的抗原結(jié)構(gòu)。隨訪訓(xùn)練(2011年溥縣高二檢查)能融合動(dòng)物細(xì)胞的特有誘導(dǎo)因子是： () a離心b失活的病毒c電刺激d振蕩解答： b，單克隆抗體的制備，1關(guān)鍵思路和操作依據(jù)(1)關(guān)鍵思路克隆單個(gè)b淋巴細(xì)胞，形成細(xì)胞群。 b淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，獲得雜交瘤細(xì)胞。 (2)由于b淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合的原因，每一個(gè)b淋巴細(xì)胞只能分泌一種特異性抗體。 不同種類的b淋巴細(xì)胞分泌的抗體不同。 b淋巴細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)無法無限增殖的骨髓瘤細(xì)胞可無限增殖。 2單克隆抗體的制備過程、3單克隆抗體的制備過程中

6、的篩選及原因(1)初級(jí)篩選有b淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合后，b淋巴細(xì)胞與b淋巴細(xì)胞融合、骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合3種融合情況。 (2)第2次篩選，首先在多孔培養(yǎng)皿中培養(yǎng)，各孔中只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞時(shí)開始培養(yǎng)，然后篩選可產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群。 由于該細(xì)胞群是從單一雜交瘤細(xì)胞克隆而來，產(chǎn)生的抗體是一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的單克隆抗體。 尤其要注意上述b淋巴細(xì)胞是免疫的b淋巴細(xì)胞。 (2011年青島市高二檢驗(yàn))圖展示了利用生物工程制造人抗a抗體的過程。 請(qǐng)回答下面的問題。 (1)人的紅細(xì)胞膜表面被稱為凝聚原的特異。 從免疫學(xué)的觀點(diǎn)來看，這個(gè)凝聚原因是 (2)圖中的細(xì)胞1是向小鼠的體內(nèi)注入人a型血液

7、紅細(xì)胞而得到的細(xì)胞，在該細(xì)胞中培養(yǎng)的細(xì)胞2是從患有骨髓瘤的小鼠得到的骨髓瘤細(xì)胞，在體外培養(yǎng)時(shí)該細(xì)胞是 (3)為了充分發(fā)揮上述兩種細(xì)胞的各自特征，經(jīng)過特殊處理，在細(xì)胞融合促進(jìn)因子的作用下，使兩種細(xì)胞融合，形成圖中的細(xì)胞3，將該細(xì)胞稱為。 在乙培養(yǎng)皿中培養(yǎng)這個(gè)可以產(chǎn)生大量的細(xì)胞群，這個(gè)方法叫做 (4)進(jìn)程的主要目的是：通過進(jìn)程或培養(yǎng)方法，可以生成大量的抗體。 (1)糖蛋白抗原；(2)B淋巴單一抗a抗體(或單一特異性抗體)快速大量增殖；(3)雜交瘤細(xì)胞單克?。?4)篩選可產(chǎn)生單一抗a抗體的雜交瘤細(xì)胞的抗a單克隆；(1)紅細(xì)胞表面聚集原參與細(xì)胞識(shí)別從免疫學(xué)的觀點(diǎn)來看是抗原。 (2)小鼠受抗原刺激可產(chǎn)生

8、b淋巴細(xì)胞，該細(xì)胞可產(chǎn)生單一的抗體，但不能增殖，骨髓瘤細(xì)胞可無限增殖，而不能產(chǎn)生抗體。 (3)動(dòng)物細(xì)胞融合后可獲得雜交瘤細(xì)胞，產(chǎn)生單克隆抗體。 (4)工藝的目的是篩選可產(chǎn)生單一抗a抗體的雜交瘤細(xì)胞，通過或大量產(chǎn)生抗a單克隆抗體。 (1)使用的b淋巴細(xì)胞是否為免疫的b淋巴細(xì)胞，特別是在解決單克隆抗體的相關(guān)課題時(shí)。 (2)細(xì)胞融合后，獲得能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞需要2次篩選。 (3)利用單克隆抗體制的“生物導(dǎo)彈”，其選擇性由抗體決定，與藥物無關(guān)。、應(yīng)用跟蹤訓(xùn)練(2011年惠州高二檢驗(yàn))動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)獲得單克隆抗x抗體的具體操作步驟如下。 其中，在單克隆抗體制備的相關(guān)記述中，錯(cuò)誤的是將x抗原注入() 小鼠體內(nèi)，得到能夠產(chǎn)生抗x抗體的b淋巴細(xì)胞，從患有骨腫瘤的小鼠體內(nèi)得到骨腫瘤細(xì)胞利用促進(jìn)細(xì)胞融合因子，將兩細(xì)胞融合后注入小鼠腹腔培養(yǎng)， 篩選可產(chǎn)生抗x抗體的雜交瘤細(xì)胞，從腹水中提取抗體a的實(shí)驗(yàn)順序是，b過程中產(chǎn)生多個(gè)雜交瘤細(xì)胞的過程和克隆c過程中所得到的細(xì)胞能夠無限增殖的過程通常需要經(jīng)過2次篩選分析。 本問題研究了單克隆抗