




已閱讀5頁,還剩7頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀
版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)
文檔簡介
酶聯(lián)免疫吸附實驗 (ELISA) 目的和要求 v掌握ELISA的原理、操作過程及注意事項 v了解ELISA實驗結(jié)果的讀取和分析 實驗原理 v借助酶標記抗體(或抗原)在體外與 抗原(或抗體)結(jié)合,通過相應(yīng)底物被 酶解后出現(xiàn)顯色反應(yīng)。反應(yīng)顏色深淺與 抗原(或抗體)量的多少有關(guān)。 v特點:靈敏、特異 v類型: 雙抗體夾心法、競爭法、間接法等 雙抗夾心法ELISA 競爭法 ELISA 實驗材料 vBSA包被的測定板 v酶標抗鼠IgG抗體 v待檢血清,陽性血清,陰性血清 v洗滌液: PBS吐溫-20 v底物液:鄰苯二胺(OPD) v終止液:10% H2S04 實驗步驟 加入稀釋好的待測血清每孔100ul, 37孵育40min 加入100ul酶標抗體, 37孵育30min 洗板3次,每次1min 洗板3次,每次1min 實驗步驟 加入100ulTMB底物液避光室 溫孵育15min 終止反應(yīng):每孔加1滴10硫酸 結(jié)果觀察 注意事項 u加樣:應(yīng)將所加物加在ELISA板孔的底部,并 注意不可濺出,不可產(chǎn)生氣泡。 u洗板:每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘使清洗 更加徹底。末次洗板盡量將水甩干。 u液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕 輕晃動30秒,混勻液體。 u底物有毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,盡量避 免接觸。 將待測血清1:100稀釋后,再做倍比稀釋到各孔 ,每孔100l,見表。注意混勻。 1: 100 1: 200 1: 400 1: 800 1: 1600 1: 3200 1: 6400 1: 12800 陰性 血清 陰性 血清 100ul 血清稀釋及加樣 1: 100 1: 200 1: 400 1: 800 1: 1600
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 殘疾人專職委員聘用合同(含工作績效與晉升)
- 智能停車場車位租賃與廣告投放合同
- 成都市二手房買賣稅費繳納協(xié)議范本
- 餐飲業(yè)食品安全信息共享與合作合同
- 動植物典當借款合同范本:活體抵押版
- 廠房出租安全監(jiān)管與技術(shù)服務(wù)協(xié)議
- 電子產(chǎn)品采購合同附屬協(xié)議范本
- 武術(shù)文化介紹
- 人教版三年級語文下冊《鹿角和鹿腿》示范教學課件
- 羊水細胞形態(tài)圖譜解讀
- 熱力管網(wǎng)施工組織設(shè)計方案標書
- 納豆激酶知識講座
- 蘇教版三下第十單元期末復習教材分析
- 機械通氣基礎(chǔ)知識及基礎(chǔ)操作課件
- 打印版醫(yī)師執(zhí)業(yè)注冊健康體檢表(新版)
- 老年癡呆護理
- 1.3.1動量守恒定律課件(共13張PPT)
- DB36_T 420-2019 江西省工業(yè)企業(yè)主要產(chǎn)品用水定額(高清無水印-可復制)
- 中小學教育懲戒規(guī)則(試行)全文解讀ppt課件
- TCECS 850-2021 住宅廚房空氣污染控制通風設(shè)計標準
- 印度尼西亞煤炭購銷合同
評論
0/150
提交評論