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文檔簡介

實(shí)驗(yàn)五：粗蛋白含量的測定（微量凱氏定氮法）,1實(shí)驗(yàn)原理 樣品與濃硫酸、催化劑一同加熱消化，使蛋白質(zhì)分解，其中碳和氫被氧化為二氧化碳和水逸出，而樣品中的有機(jī)氮轉(zhuǎn)化為氨與硫酸結(jié)合成硫酸銨。然后加堿蒸餾，使氨蒸出，用硼酸吸收后再以標(biāo)準(zhǔn)鹽酸或硫酸溶液滴定。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)酸消耗量可計(jì)算出蛋白質(zhì)的含量。,消化：NH2(CH2)2COOH+3H2SO42CO2+3SO2+4H2O+NH3 2NH3+H2SO4 (NH4)2SO4 蒸餾：(NH4)2SO4 +2NaOH2H2O+Na2SO4+2NH3 吸收：NH3+4H3BO3 NH4HB4O7+5H2O 滴定：NH4HB4O7+HCl+5H2O NH4Cl+4H3BO3,2. 實(shí)驗(yàn)材料、儀器與試劑 材料：豆奶粉 儀器：消化爐，100mL容量瓶，微量凱氏定氮蒸餾器，125mL三角瓶，酸性滴定管，移液管。 試劑：濃硫酸，硫酸銅，硫酸鉀，40%氫氧化鈉，2%硼酸溶液，0.1mol/L鹽酸溶液，溴甲酚綠甲基紅混合指示劑。,3. 實(shí)驗(yàn)步驟 （1）消化： 準(zhǔn)確稱取豆奶粉樣品0.5g左右，置于消化管中，加入6g硫酸鉀、0.2g硫酸銅，再加20mL濃硫酸搖勻，待劇烈反應(yīng)結(jié)束后，在消化爐上消化，待溶液澄清透明后再消化30min，然后將消化液無損地轉(zhuǎn)移到100mL容量瓶中，定容。,樣品0.5g 0.2g硫酸銅 6g硫酸鉀 20mL濃硫酸,搖勻,小火炭化至 泡沫完全停止,大火加熱 保持液體微沸,消化液藍(lán)綠色并澄清透明，繼續(xù)消化0.5h,冷卻后定容至100mL,（2）蒸餾、吸收與滴定：裝好微量定氮裝置，準(zhǔn)確移取消化稀釋液5mL于反應(yīng)管內(nèi)，經(jīng)漏斗再加入10mL40%氫氧化鈉溶液，用少量蒸餾水洗漏斗數(shù)次，夾好漏斗夾，進(jìn)行水蒸汽蒸餾。冷凝管下端預(yù)先插入盛有10mL 2%硼酸吸收液的液面下。蒸餾至吸收液中所加的混合指示劑變?yōu)榫G色開始計(jì)時(shí)，繼續(xù)蒸餾5min后，將冷凝管尖端提離液面再蒸餾1min，用蒸餾水沖洗冷凝管尖端后停止蒸餾。然后用0.01mol/L鹽酸滴定吸收

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