【DB地方標(biāo)準(zhǔn)】db33 t 735-2009 摻假山茶油定性鑒別 氣相色譜法.doc

ics 71.040x 14備案號(hào)：db33浙江省地方標(biāo)準(zhǔn)db33/t 7352009摻假山茶油定性鑒別 氣相色譜法qualitative identification of adulteration of camellia seed oil gas chromatography2009-03-23 發(fā)布2009-04-01 實(shí)施浙江 省 質(zhì) 量 技 術(shù) 監(jiān) 督 局 發(fā) 布db33/t 7352009前言本標(biāo)準(zhǔn)附錄a為資料性附錄。 本標(biāo)準(zhǔn)由浙江省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局提出。 本標(biāo)準(zhǔn)由浙江省食品工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口。 本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：浙江省果品質(zhì)量檢驗(yàn)中心（常山）。 本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：徐昕、嚴(yán)曉麗。i摻假山茶油定性鑒別氣相色譜法1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了以氣相色譜法對(duì)摻假山茶油進(jìn)行定性鑒別的方法。 本標(biāo)準(zhǔn)適用于摻入了一種或幾種其它植物油（菜籽油、大豆油、棕櫚油）后的山茶油定性鑒別。2規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的 修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究 是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。gb/t 6682 分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法3原理3.1測定原理樣品中的各脂肪酸甘油酯經(jīng)氫氧化鉀-甲醇溶液進(jìn)行酯交換反應(yīng)生成脂肪酸甲酯后，氣相色譜法對(duì) 各脂肪酸甲酯進(jìn)行分離測定，利用各脂肪酸甲酯的標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行定性，直接面積歸一化法確定各脂肪酸的 百分含量。3.2鑒別原理不同的植物油具有各自特殊的脂肪酸組成和含量，根據(jù)脂肪酸組成及含量的差異進(jìn)行摻假山茶油的 定性鑒別。4試劑與材料4.1實(shí)驗(yàn)用水應(yīng)符合gb/t 6682三級(jí)水標(biāo)準(zhǔn)。除另有規(guī)定外，所有試劑均為分析純。4.2甲醇：含水量不超過 0.5%（m/m）。4.3正庚烷或正己烷。4.4氫氧化鉀-甲醇溶液：約 2mol/l，稱取氫氧化鉀 11.2 g，用甲醇（4.1）溶解定容至 100 ml。4.5脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)混合溶液：脂肪酸甲酯-包括軟脂酸（即棕櫚酸 c16:0）、硬脂酸（c18:0）、油酸 (c18:1) 、亞油酸(c18:2)、亞麻酸(c18:3)、花生酸(c20:0)、花生一烯酸(c20:1)、山崳酸(c22:0)、芥 酸 (c22:1) 的甲酯標(biāo)準(zhǔn)品，純度99.0%，分別稱取以上各脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品 0.1g（精確到 0.0001g）于同一容量 瓶中，以正庚烷或正己烷（4.2）定容至 10ml。5儀器與設(shè)備5.1氣相色譜儀：配有氫火焰檢測器。5.2天平：感量 0.1mg 和 0.01 g。6色譜條件6.1色譜柱：毛細(xì)管柱，300.25mm0.25m，柱內(nèi)膜涂布 50苯基 50二甲基聚硅氧烷；或等 效色譜柱。6.2檢測器：氫火焰檢測器，檢測器溫度 250。6.3載氣流速（氮?dú)猓?.0ml/min，空氣：300ml/min，氫氣：30ml/min。1db33/t 73520096.4柱溫：240。6.5氣化室溫度：250。6.6分流比：130。7分析步驟7.1脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)混合溶液的測定以微量進(jìn)樣器直接取脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)混合溶液（4.4）1l進(jìn)氣相色譜儀分析。7.2樣品預(yù)處理-脂肪酸甲酯的制備稱取0.5-1.0g（精確到0.01g）樣品置于20ml具塞試管中，加入10ml 正庚烷或正己烷（4.2）溶解 油脂，再加入0.5ml氫氧化鉀-甲醇溶液（4.3），搖勻，靜置30分鐘澄清后，上層溶液用于氣相色譜儀 測定。7.3樣品的測定微量進(jìn)樣器直接取0.5l樣液進(jìn)氣相色譜儀分析，以脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)混合溶液各組分保留時(shí)間定 性，直接面積歸一化法計(jì)算樣品中各脂肪酸組成的百分含量。7.4計(jì)算脂肪酸含量xi% 按公式（1）進(jìn)行計(jì)算，用脂肪酸甲酯的質(zhì)量百分比表示。a 100x % = i （1）i a式中：xi % 脂肪酸的百分含量；ai 脂肪酸甲酯的響應(yīng)峰面積； a各脂肪酸甲酯響應(yīng)峰面積的總和。 計(jì)算結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。7.5精密度在重復(fù)性條件下對(duì)同一試樣連續(xù)進(jìn)行兩次測定的誤差，含量大于5%的組分，兩次測定結(jié)果的絕對(duì) 差值不得超過1%；含量小于5%的組分，兩次測定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過算術(shù)平均值的10%。7.6摻假山茶油的定性判定根據(jù)待測樣品的脂肪酸組成與含量，按照表1進(jìn)行摻假山茶油的定性判定：表 1摻假山茶油定性鑒別的脂肪酸指標(biāo)脂肪酸組成棕櫚酸（c16:0）油酸(c18:1)亞麻酸(c18:3)芥酸(c22:1)脂肪酸含量要求(%) 10 740.600.50待測樣品的脂肪酸組成中如果有一項(xiàng)或一項(xiàng)以上的脂肪酸含量符合表1要求，則該樣品判定為摻假 山茶油定性鑒別結(jié)果為陽性；如待測樣品的脂肪酸含量均不符合表1要求，則該樣品判定為摻假山茶油 定性鑒別結(jié)果為陰性，同時(shí)注明摻假判定限。山茶油、菜籽油、大豆油、棕櫚油和脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)混合溶液的色譜圖參見附錄a。8判定限2本標(biāo)準(zhǔn)的摻假判定限為10。db33/t 73520093db33/t 7352009附錄a235（資料性附錄） 色譜圖280260240220200180mv1601401201008060402000121463456789101112min713141516171819201-棕櫚酸(c16:0); 2-硬脂酸(c18:0); 3-油酸(c18:1) ; 4-亞油酸(c18:2); 5-亞麻酸(c18:3); 6 花生一烯酸(c20:1); 7-芥酸(c22:1).36789圖 a.1 山茶油色譜圖500450400350mv30025020015010015500012345678910111224min13141516171819201-棕櫚酸(c16:0); 2- 硬脂酸(c18:0); 3-油酸(c18:1); 4- 亞油酸(c18:2); 5-亞麻酸(c18:3); 6-花生酸(c20:0); 7- 花生一烯酸(c20:1); 8-山崳酸(c22:0); 9-芥酸(c22:1).圖 a.2 菜籽油色譜圖4db33/t 7352009500450400350mv300250200315015100506001234567891011124min1314151617181920211-棕櫚酸c16:0); 2-硬脂酸(c18:0); 3-油酸(c18:1) ; 4-亞油酸(c18:2); 5-亞麻酸(c18:3); 6-花生酸(c20:0).2圖 a.3 大豆油色譜圖500450400350mv3001250320015025610045000123456789101112min1314151617181920211-棕櫚酸(c16:0); 2-硬脂酸(c18:0); 3-油酸(c18:1) ; 4-亞油酸(c18:2); 5-花生酸(c20:0); 6-花生一烯酸(c20:1).圖 a.4 棕櫚油色譜圖5db33/t 73520097016560555045mv40353025201510501223434567567891011min89121314151617181-棕櫚酸(c16:0); 2-硬脂酸(c18:0); 3-油酸(