二乙基二硫代氨基甲酸鈉柱前衍生化HPLC法測一捻金中朱砂的含量.doc

二乙基二硫代氨基甲酸鈉柱前衍生化hplc法測一捻金中朱砂的含量?204?齊魯藥事?qilupharmaceuticalaffairs201lvo1.30,no.4二乙基二硫代氨基甲酸鈉柱前衍生化hplc法測一捻金中朱砂的含量張建業(yè),馮向東(南陽市食品藥品檢驗所,河南南陽473000)摘要:目的建立用高效液相色譜測定一捻金中朱砂含量的方法.方法以二乙基二硫代氨基甲酸鈉(naddc)為衍生化試劑,樣品經(jīng)消解,衍生化和有機溶劑提取后測定.采用高效液相色譜法,使用c,柱,流動相為甲醇一水(含0.02mmol?l的naddc)(87:13);檢測波長272nm;流速1ml?rain,柱溫35.結(jié)果hg在0.10520.6312g范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,平均加樣回收率99.23%.結(jié)論本法結(jié)果準(zhǔn)確,便于操作,可作為一捻金的質(zhì)量控制方法之一.關(guān)鍵詞:一捻金;朱砂;柱前衍生化;二乙基二硫代氨基甲酸鈉;高效液相色譜法中圖分類號:r927.2文獻標(biāo)識碼:a文章編號:16727738(2011)04020403determinationofcinnabarinyinianjinbyhplcwithpre-columnderivatizationofsodiumdiethyldithiocarbamatezhangjianye.fengxiangaong(nanyanginstituteforfoodanddrugcontrol,nanyang473000,china)abstract:objec6vetoestablishanhplcmethodwithprecolumnderivatizationfordeterminationofcinnabarinyinian?jin.methodssodiumdiethyldithioearbamate(naddc)wasusedasaderivatizationreagent,thesamplesweretreatedbydigested,derivatizedandextractedbyorganicsolvent.thedeterminationwascarriedoutbyhplcmethod,usingcl8column,andmobilephasewasmethanolwater(including0.02mmol?lofnaddc)(87:13);thedetectionwavelengthwas272am;theflowratewas1l?rain,thecolumntemperaturewas35.resultshghadgoodlinearrelationshipintherangeof0.10520.6312g,theaveragerecoverywas99.23%.conclusionthemethodwassimpleandaccurate,itwassuitableforqualitycontrolofyinianjin.keywords:yinianjin;cinnabar;precolumnderivatization;sodiumdiethyldithioearbamate;hplc朱砂是我國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中常用的鎮(zhèn)驚安神藥,主成分為硫化汞,補心安神類中成藥常含有此藥味,但朱砂有毒,藥典規(guī)定不宜大量服用,不宜久服.現(xiàn)代藥理及毒理學(xué)證明hg能與蛋白質(zhì)結(jié)合而蓄積,很難被再釋放,可引起慢性汞中毒,所以汞的測定在人體健康評價和診斷,成方制劑的藥效評價方面非常重要.汞的含量測定方法主要有:滴定法,比色法,原子吸收分光光度法(aas)等,其中滴定法干擾因素多,不適用于中成藥類分析,比色法誤差較大,aas法需要昂貴的原子吸收分光光度計而難于普及.本文參考文獻,建立了柱前衍生化hplc法分離,測定一捻金中朱砂主要成分硫化汞的含量,適合含汞制劑的質(zhì)量控制.1儀器與試藥waters26952996高效液相色譜儀,empowertwo色譜管理軟件;sigmall4小型臺式離心機(北京華威興業(yè)科技有限公司).甲醇為色譜純,水為重蒸餾水,二乙基二硫代氨基甲酸鈉(天津試劑二廠);硝酸汞(分析純,用基準(zhǔn)氯化鈉標(biāo)定,干燥品含量99.7%,生產(chǎn)廠家:貴州省銅仁化學(xué)試劑廠,批號930605);硫化汞(生產(chǎn)廠家:貴州省銅仁化學(xué)試劑廠,批號950302,含hgs99.9%).其余試劑為分析純.一捻金市場購得(太原大寧堂藥業(yè)有限公司);缺朱砂的陰性樣品自制.2方法與結(jié)果2.1色譜條件色譜柱:agilentods(4.6mmx250mm,5ixm);流動相為甲醇一水(含0.02tool?lnaddc)(87:13);檢測波長272nm;流速1.0ml?rain;柱溫35;理論板數(shù)不低于3000.2.2供試品溶液制備取本品10袋,精密稱定每袋裝量,計算平均裝量,研細,取約1.0g,置錐形瓶中,加硫酸25ml,硝酸鉀2g,緩緩加熱使成乳白色,放冷,將消解液轉(zhuǎn)移至50ml容量瓶中,用稀硝酸洗滌錐形瓶,合并洗滌液置上述容量瓶中,用稀硝酸定容.精密量取0.5ml,置聚四氟乙烯離心管中,加5tool?l氫氧化鈉溶液1ml,混勻,加酚酞指示液2滴,繼續(xù)用0.5mol?l氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)至粉紅色.加naddc10mg,充分振搖,離心(6000r?min,10min),棄齊魯藥事?qilupharmaceuticalaffaits2011vo1.30,no.4去上清液.沉淀加甲醇5ml溶解,轉(zhuǎn)移至25ml容量瓶中,用甲醇定容,搖勻.用0.45/a,m濾膜濾過,即得.2.3對照品溶液制備分別精密稱取經(jīng)五氧化二磷減壓干燥24h的硝酸汞9o.12mg,置50ml容量瓶中,加水至刻度,得對照品貯備液.取貯備液0.5ml,置聚四氟乙烯離心管中,加naddc10mg,充分振搖,離心(6000r?rain,10min),棄去上清液.沉淀加甲醇5ml溶解,轉(zhuǎn)移至25ml容量瓶中,用甲醇定容,搖勻.用0.45txm濾膜濾過,即得每1ml含hg0.02104mg的對照品溶液.2.4陰性對照溶液制備按一捻金制備方法制備不含朱砂的陰性樣品,按2.2項制得陰性對照溶液.2.5色譜條件2.5.1空白試驗取對照品溶液10,注入色譜儀中,測定,hg(ddc),保留時間約為16rain,見圖1;取一捻金供試品溶液及陰性對照溶液同法測定,見圖2,3,在陰性對照品溶液中未檢出與對照品保留時間相同的成分.圖1對照品色譜圖1一hg圖2供試品色譜圖:il叫jlo/o叫/搿/,一了贏-麗:圖3陰性樣品色譜圖2.5.2專屬性試驗按照2.3項下對照品溶液配制方法,制備fe,fe,pb,cu,co,hg,cr,cd離子與naddc的螯合物,進樣測定,結(jié)果見圖4,hg螯合物與其他金屬螯合物完全分離,證明該條件其他離子不干擾測定.3方法學(xué)考察3.1標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制分別取上述對照品溶液5,10,15,20,25,30進樣,按上述條件與方法進樣測定,分別以對照品的6個進樣量為橫坐標(biāo),以峰面積為縱坐標(biāo),進行線性回歸,回歸方程為y=4671.3x一33.12,r=0.9995;表明h進樣量在0.10520.6312btg范圍線性關(guān)系良好.?205?八/八/.一一廠/?j一,一八4j15/八n/圖4專屬性試驗色譜圖1一co;2一pb;3一樣品溶液;4一cr3;5一hg;6一fe2;7一fe;8一cd2;9一cu23.2精密度試驗取對照品溶液,按2.1項下重復(fù)進樣5次,測定峰面積,rsd為0.87%.3.3穩(wěn)定性試驗取同一批供試品溶液,室溫下放置,按2.1項下測定方法和條件,分別于0,2,4,8,16h測峰面積,結(jié)果表明在16h內(nèi)具有良好穩(wěn)定性,rsd為1.91%.3.4重復(fù)性試驗取同一批樣品5份,按2.2項下制成供試品溶液,按2.1項下分別測定,rsd為1.82%.3.5回收率試驗取已知含量的樣品(批號090402,平均裝量1.2418g,含量68.45m袋)9份,每份0.5g,分別按標(biāo)示量的90%,100%,110%精密加入硫化汞,按2.2項下制成供試品溶液,按2.1項下分別測定.計算回收率,結(jié)果平均回收率為99.23%,rsd為1.86%,見表1.表1硫化汞加樣回收率3.6樣品含量測定取一捻金樣品3批(090112,090402,090701平均裝量分別為1.2042g,1.2418g,1.2102g.),按2.2項下制成供試品溶液,按2.1項下分別測定.計算含量,結(jié)果3個批號的樣品含朱砂以(hgs)計(n=3)分別為66.12mg/袋,68.45m袋,70.20mg/袋,rsd分別為1.75%,2.o1%,1.80%.4討論4.1hg若用高效液相法分離,測定要進行適當(dāng)衍生化處理,二乙基二硫代氨基甲酸鈉(銅試劑)是常用的金屬離子沉淀劑,相當(dāng)多的金屬離子能與之螯合而形成不同顏色的沉淀,此類沉淀大部分難溶于水,(如hg(ddc)2pk.=43.5,cu(ddc)2pk.=29.6,20oc),易溶于丙酮,甲醇,因此可直接從水中分離,提取該螯合物.該螯合物穩(wěn)定,紫外區(qū)有吸收,可以用hplc及uv法檢測.采用柱前衍生化高效液相法測金屬離子,就可以不使用價格昂貴,實驗條件要求高?2o6?齊魯藥事?qilupharmaceuticalaffaits2011vo1.30,no.4hplc法測定元胡止痛軟膠囊中歐前胡素的含量蔣亞萍(鎮(zhèn)江市第三人民醫(yī)院,江蘇鎮(zhèn)江212003)摘要:目的采用高效液相色譜法對元胡止痛軟膠囊中歐前胡素含量進行測定.方法kromasilc.(150mmx4.6mm,5m)為色譜柱,甲醇一水(68:32)為流動相;流速:1.0ml?min;檢測波長:301nm;柱溫:30.結(jié)果歐前胡素濃度在11.1455.70mg?l之間線性關(guān)系良好,回歸方程為y=27.953x一3.03(r=1),平均回收率99.24%,rsd=1.2%(n=6),重現(xiàn)性好,rsd:1.0%(n=5),供試品溶液在loh內(nèi)穩(wěn)定,rsd為0.4%.結(jié)論該方法簡單,可靠,專屬性強,可用于元胡止痛軟膠囊的質(zhì)量控制.關(guān)鍵詞:元胡止痛軟膠囊;歐前胡素;高效液相色譜法;含量測定中圖分類號:r927.2文獻標(biāo)識碼:a文章編號:16727738(2011104020603determinationofimperatorininyuanhuzhitongsoftcapsulesbyhplcjiangya-ping(thirdpeopleshospitalofzhenfiang,zhenfiang212003,china)abstract:0bjectivetoestablishanhplcmethodforthedeterminationofimperatorininyuanhuzhitongsoftcapsulesmethodsthehplcsystemconsistedofkromasilcl8column(150mmx4.6mm,5m),methanolwater(68:32)asmobilephase,theflowratewas1.0ml?min,thedetectionwavelengthat301nmandcolumntemperatureat30.resultsimperatorinshowedagoodlinearrelationshipwitharangeof11.1455.70mg?landregressionequationwasy=27.953x一3.o3(r=1).theaveragerecoverywas99.24%,rsd=1.2%(n=6),withgoodrepeatability(rsd=1.o%.n=5).andthersdwithin10hourswas0.4%.conclusionthehplcmethodwassimple,reliable,withgoodspeeifiction,andcanbeusedforthequalitycontrolofyuanhuzhitongsoftcapsules.keywords:yuanhuzhitongsoftcapsules;imperatorin;hplc;contentdetermination元胡止痛軟膠囊的處方組成為醋制延胡索和白芷,具有理氣,活血散瘀,止痛的功能,適用于氣滯血瘀的胃痛,脅痛,頭痛及月經(jīng)痛等.處方中重要藥味白芷為傘型科植物白芷和杭自芷的干燥根,具有散風(fēng)除濕,通竅止痛,消腫排膿的功效.延胡索乙素為延胡索的活性成分,而白芷的活性成分為香豆素類化合物.2j,如異歐前胡素,歐前胡素等.歐前胡素的含量是確保本品功效的一個重要指標(biāo).原標(biāo)準(zhǔn)中有對元胡止痛軟膠囊中延胡索乙素的含量測定,而對歐前胡素僅進行了薄層色譜鑒別,尚無含量測定內(nèi)容j.對于歐前胡素(imperatorin)的含量測定方法,文獻報道的有薄層掃描法,高效液相色譜法等.,本文參考了藥典及文獻,采用高效液相色譜法測定了元胡止痛軟膠囊中歐前胡素的含量,從而為該制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范化研究提供科學(xué)依據(jù).1儀器與試藥1.1儀器agilentl100高效液相色譜儀,g1314awd檢測器(安捷倫公司),kromasilcl8(150mm4.6mm,5m)的原子吸收分光光度法達到測定目的.因此該方法具有經(jīng)濟,高效,操作簡便特點,易于推廣普及.4.2naddc與大多數(shù)金屬