微生物32章皰疹病毒.ppt

第32章 人皰疹病毒 Human herpes viruses, HHV,學習要求,1熟悉皰疹病毒的種類、共同特點。 2掌握單純皰疹病毒種類、致病性；水痘-帶狀皰疹病毒的潛伏感染特性；巨細胞病毒感染特點；EB病毒的特異性抗原、引起的疾病。 3熟悉皰疹病毒與腫瘤的關系；EB病毒致病機理；皰疹病毒防治原則。 4了解皰疹病毒微生物學檢查方法。,概 述,皰疹病毒(HPV)是一群中等大小的雙鏈DNA病毒,現有114個成員，其中8個對人致?。?人類皰疹病毒1型:單純皰疹病毒I型（HSV1） 人類皰疹病毒2型:單純皰疹病毒II型（HSV 2） 人類皰疹病毒3型:水痘帶狀皰疹病毒（VZV） 人類皰疹病毒4型: EB 病毒（EBV） 人類皰疹病毒5型:巨細胞病毒（CMV） 人類皰疹病毒6型（HHV 6） 人類皰疹病毒7型（HHV 7） 人類皰疹病毒8型（HHV 8）,皰疹病毒分為三個亞群： 亞群（HSV1，HSV 2，VZV）：病毒增殖快，復制周期短；迅速破壞宿主細胞，宿主細胞范圍廣。 亞群（CMV，HHV 6）：病毒增殖慢，復制周期長；宿主細胞范圍局限。 亞群（EBV）：宿主細胞范圍極受局限。,人類皰疹病毒的種類及其所致疾病,1. 形態(tài)結構：球形，直徑為120300nm。核衣殼的結構包括雙股線形DNA和呈20面體對稱排列的蛋白衣殼；核衣殼外有雙層脂類糖蛋白包膜，包膜上有小刺突。,皰疹病毒的共同特點：,2. 除EBV，HHV6外,均能在人二倍體細胞核內復制，通過核膜出芽，由胞吐或細胞溶解方式釋放病毒。核內有嗜酸性包涵體。病毒可通過細胞間橋直接擴散。感染細胞與鄰近未感染的細胞融合，形成多核巨細胞。,3. 感染特點 病毒感染宿主細胞，主要表現為： 顯性感染：病毒增殖，細胞破壞，出現臨床癥狀。 潛伏感染 ：病毒不增殖，也不破壞細胞，病毒與 宿主細胞處于暫時平衡狀態(tài)。 整合感染：病毒基因組的一部分可整合于宿主細胞的DNA中，導致細胞轉化。 先天性感染：病毒經胎盤感染胎兒，造成胎兒畸形。,皰疹病毒的潛伏感染部位： HSV1 三叉神經節(jié)，頸上和迷走神經節(jié) HSV2 骶神經節(jié) VZV 脊髓后跟神經節(jié)或顱神經的感覺神經節(jié) CMV 唾液腺、乳腺、腎臟等 EBV B淋巴細胞 HHV6 B和T淋巴細胞,HSV1 HSV2 VZV EBV CMV,Herpes simplex virus, HSV HHV-1,第一節(jié) 單純皰疹病毒,一、生物學性狀,單純皰疹病毒，由于在感染急性期發(fā)生水皰性皮疹即所謂單純皰疹而得名 有兩種血清型： HSV-1和HSV-2，兩型病毒DNA有50同源性，兩型感染部位不同。 HSV-1： 引起腰以上皮膚、粘膜、器官感染 HSV-2：主要引起生殖器及腰以下的皮膚皰疹,一、生物學性狀,HSV具有典型皰疹科病毒的形態(tài)。,基因組：150 kb, 編碼70多種蛋白 與病毒復制有關：核糖核苷酸還原酶、胸苷激酶等 與細胞相互作用有關： 糖蛋白：位于病毒體表面，是誘導機體產生免疫反應的主要抗原。目前已發(fā)現并正式命名的有11種，分別是gB、gC、 gD、 gE、gG、 gH、 gI、 gJ、 gK 、gL 、gM 。,HSV主要包膜糖蛋白的功能,生物學性狀,HSV培養(yǎng)特性 HSV可在多種細胞中增殖，常用原代新生兔腎、人胚肺、人胚腎、人羊膜等細胞培養(yǎng)。病毒感染細胞后，CPE發(fā)展迅速，表現為細胞腫脹、變圓和產生嗜酸性核內包涵體。 HSV對動物的感染范圍較廣。常用的實驗動物有家兔、豚鼠、小鼠等。由于接種途徑不同，感染類型也不一樣。如腦內接種引起皰疹性腦炎；角膜接種引起皰疹性角膜炎。,CPE,二、致病性與免疫性,人群感染率高，廣泛存在潛伏感染 傳染源 病人和健康帶毒者 傳播途徑 密切接觸、性接觸、飛沫 HSV-1一般通過口腔或污染的手及飛沫感染 HSV-2一般通過性接觸傳播,HSV感染較普遍 密切接觸和性接觸 經粘膜和破損皮膚 上皮細胞內復制，水皰漿液 充滿病毒顆粒，細胞碎片， 基底部多核巨細胞；神經細 胞則為潛伏感染。,皮膚損傷性水皰,原發(fā)感染 潛伏感染和復發(fā) HSV-1：三叉神經節(jié)和頸上神經節(jié) HSV-2：骶神經節(jié) 先天性感染,感染類型,HSV-1,直接密 切接觸,嬰幼兒 等易感人群,齦口炎、皰疹性角 膜結膜炎、皮膚皰疹性 濕疹、皰疹性甲溝炎 或皰疹性腦炎等,HSV-2,性接觸,原發(fā)性生殖器皰疹,感染類型： 1、原發(fā)感染：,初次顯性感染很少見，約90%為隱性感染， 少數出現臨床癥狀,原發(fā)感染,唇皰疹,齒齦炎,膿性指頭炎,生殖器皰疹,HSV原發(fā)感染后，大部分病毒被消除，少數病毒潛伏在神經節(jié)中而不引起癥狀，與機體處于相對平衡狀態(tài)。當機體受到一定的刺激時，潛伏的病毒被激活重新增殖，沿神經軸突下行到神經末梢支配的粘膜上皮細胞內增殖，引起復發(fā)性局部皰疹。復發(fā)出現在同一部位。 HSV-1 潛伏于三叉神經節(jié)、頸上神經節(jié) HSV-2 潛伏于骶神經節(jié),感染類型： 2、潛伏感染與復發(fā) ：,潛伏感染 原發(fā)感染后, HSV由感覺神經 HSV-1: 三叉神經節(jié)和頸上神經節(jié) HSV-2: 骶神經節(jié) 潛伏的HSV不復制，對抗病毒藥物不敏感,復發(fā)性感染 非特異性刺激：發(fā)熱、月經、感染等 激活潛伏病毒 沿感覺神經纖維 下行到末梢（原發(fā)部位） 感染粘膜或皮膚上皮細胞 免疫記憶反應 病程短, 組織損傷輕, 感染更局限,流 產 早 產 死 胎 先天性畸形,新生兒皰疹,胎盤,產道,母體,感染類型： 3、先天性及初生兒感染：,先天性感染及新生兒感染,因原發(fā)感染或潛伏感染的HSV-1被激活，HSV通過胎盤，引起先天畸形、智力低下、流產等。 生殖器皰疹：新生兒經產道感染，發(fā)生新生兒皰疹。,經產道感染的新生兒皰疹,患生殖器皰疹，宮頸癌高發(fā) 宮頸癌患者抗HSV-2（+） 脫落細胞涂片HSV-2抗原（+） 兩種病好發(fā)部位相同 癌細胞中有HSV-2基因片段 動物試驗可誘發(fā)腫瘤,HSV-2與宮頸癌（相關）,免疫性 IFN和NK細胞：限制原發(fā)感染發(fā)展 中和抗體：阻斷病毒擴散，但不能有效組織病毒向神經組織的移行 細胞免疫：起更重要作用，控制和消除HSV感染 對潛伏在神經節(jié)細胞內的病毒均無作用,三、微生物學檢查法,檢測抗原 刮取皰疹基底部組織 熒光素或酶標記抗體染色 檢查皰疹病毒抗原，亦可尋找核內包涵體和多核巨細胞 檢測核酸 PCR或原位雜交檢測HSV的DNA 分離病毒 標本：水皰液、唾液或CSF 細胞：BHK-21，Vero CPE：細胞腫脹；融合細胞；包涵體,四、防治原則,防治原則,預防 避免同患者接觸 防止醫(yī)院內感染 剖腹產預防新生兒感染 HSV有致癌可能性，減毒活疫苗和死疫苗不宜用于人體 包膜蛋白（提純的gG、gD）亞單位疫苗,治療 ACV（無環(huán)鳥苷）用于治療口唇皰疹，皰疹性腦炎、生殖器皰疹、新生兒皰疹等，能緩解癥狀、縮短病程，但不能防止?jié)摲腥驹侔l(fā)。,Varicella zoster virus （VZV）,第二節(jié) 水痘-帶狀皰疹病毒,水痘-帶狀皰疹病毒（VZV）,人是VZV的唯一自然宿主 皮膚是病毒的主要靶細胞 可由同一種病毒引起兩種不同的病癥 兒童初次感染引起水痘 潛伏體內的病毒受到某些刺激后復發(fā)引起帶狀皰疹，多見于成年人和老年人,與HSV相似： 潛伏神經細胞，引起復發(fā)感染 細胞免疫限制和防止重癥水痘 皮膚損傷以水皰為特征 編碼TK等, 對抗病毒藥物敏感 與HSV不同： 呼吸道感染 通過病毒血癥播散至皮膚,一、生物學性狀,VZV的基本性狀,基本性狀與HSV相似 只有一個血清型 對一般實驗動物不敏 感，在人胚成纖維細 胞中增殖，并緩慢產 生細胞病變,水痘和帶狀皰疹,二、致病性與免疫性,致病性,傳染源主要是患者， 病毒借飛沫經呼吸道或接觸傳播 感染類型 原發(fā)感染和潛伏感染,1、原發(fā)感染（多見兒童）,兒童：好發(fā)年齡為39歲，多在冬春季流行。皮疹分布呈向心性，軀干比面部和四肢多。病情較輕。但在細胞免疫缺陷、白血病或長期使用免疫抑制劑的兒童可表現為重癥，甚至危及生命。 成人：20%30%并發(fā)肺炎。一般病情重，病死率亦高。 孕婦：表現亦較嚴重，并可引起胎兒畸形、流產或死產。,病毒,經呼吸道、結膜、皮膚等處侵入人體,先在局部淋巴結增殖,進入血液散布到各個內臟繼續(xù)大量增殖,23周潛伏期,皮膚廣泛發(fā)生丘疹，水皰疹和膿皰疹,VZV的致病過程,原發(fā)感染和潛伏感染,水痘,水痘(Chicken Pox),2、潛伏與再發(fā)感染（多見于成年人和老年人）,帶狀皰疹,潛伏于脊髓后根神經節(jié)或顱神經的感覺神經節(jié)中的少量病毒，在機體免疫力下降時，在冷、熱、藥物等因素刺激下，潛伏的病毒被激活，病毒沿神經軸突到達所支配的皮膚細胞內增殖，發(fā)生皰疹，排列呈帶狀，故稱帶狀皰疹。,2、潛伏與再發(fā)感染（多見于成年人和老年人）,（1）潛伏場所 脊髓后根神經節(jié)或顱神經的感覺神經節(jié),（2）再發(fā)感染 形成沿感覺神經支配的皮膚分布，串聯成帶狀的帶狀皰疹,復發(fā)性感染,形形色色的帶狀皰疹,免疫性,兒童患水痘后，機體產生持久的特異性細胞免疫和體液免疫，極少再患水痘。 病毒中和抗體和細胞免疫不能有效地清除潛伏于神經節(jié)中的病毒，故不能阻止病毒被激活而發(fā)生帶狀皰疹。,臨床表現都較典型，無需做微生物學診斷 脫落細胞檢查嗜酸性核內包涵體和多核巨細胞，或IFA查病毒抗原,三、微生物學檢查法,四、 防治原則,可預防接種VZV減毒活疫苗。 帶狀皰疹免疫球蛋白（VZVIg）被動免疫。 正常兒童患水痘不需治療，抗病毒藥物用于治療免疫低下患兒的水痘、成人水痘及帶狀皰疹。 治療：無環(huán)鳥苷 IFN：限制疾病、緩解局部癥狀,第三節(jié) EB病毒,Epstein-Barr virus，EBV,EB病毒（Epstein-Barr virus，EBV）,Epstein和Barr于1964年首次成功地將Burkitt非洲兒童淋巴瘤細胞時發(fā)現，故名 主要侵犯B細胞,形態(tài)結構類似HSV,一、生物學性狀,一、生物學性狀,在病毒不同存在狀態(tài)，表達不同抗原 增殖性感染EBV早期抗原（EA） EBV衣殼抗原 （VCA） EBV膜抗原（membrane antigen，MA） 潛伏感染 EBV核抗原（EBNA） 潛伏感染膜蛋白（LMP）,抗原性,潛伏感染 EBV感染B細胞或上皮細胞 潛伏感染 細胞含EBV基因組 (游離或整合) 選擇性表達潛伏期抗原，刺激B細胞增生或永生化,致病性,EB病毒在人群中廣泛感染 我國35歲兒童感染率達90%以上 主要通過唾液傳播，也可經輸血傳染 傳染源：EBV抗體陽性而仍排毒的健康人、隱性感染者和病人。 傳播途徑：主要通過唾液感染。輸血也偶可傳播，但未發(fā)現有垂直感染。 宿主：在體內感染主要感染人和其他靈長類動物的B淋巴細胞和口咽上皮細胞。EBV受體為CD21（CR2）。,二、致病性與免疫性,EBV感染,咽喉部上皮細胞,B淋巴細胞,血液中EBV感染的B細胞,多克隆激活B細胞,特異性免疫球蛋白 異嗜性抗體,刺激T細胞增殖,非典型淋巴細胞,咽喉部上皮細胞,EBV復制,唾液傳播,gp350/gp220,gp85,所致疾病,傳染性單核細胞增多癥 非洲兒童淋巴瘤（即Burkitt淋巴瘤） 鼻咽癌 淋巴組織增生性疾病,傳染性單核細胞增多癥,一種急性淋巴組織增生性疾病，多見于青春期初次感染EBV后發(fā)病 三個典型癥狀為發(fā)熱、咽炎和頸淋巴結腫大 隨病情發(fā)展可出現肝脾腫大、肝功能異常，外周血單核細胞增多，并出現異型淋巴細胞（可殺傷表面有EBV抗原表達的B細胞）,肝脾臟大、肝功能異常，外周血單核細胞增多，并出現異型淋巴細胞。,異形單核細胞,非洲兒童淋巴瘤（即Burkitt淋巴瘤）,于中非、新幾內亞和美洲溫熱帶地區(qū)呈地方性流行 多見于512歲兒童 好發(fā)部位為顏面、腭部 所有BL病人血清均含EBV抗體，其中80%以上滴度高于正常人 在腫瘤組織中發(fā)現EBV基因組,鼻咽癌,我國南方（廣東、廣西）及東南亞是鼻咽癌高發(fā)區(qū) 多發(fā)生于40歲以上中老年人 EBV與鼻咽癌 在所有病例的癌組織中有EBV基因組存在和表達 病人血清中有高效價EBV抗原（主要VCA和EA）的lgG和 lgA 抗體病情好轉后，這些抗體的滴度也隨之下降,EBV與鼻咽癌,(1)鼻咽癌活檢組織均可檢出EBV的DNA和EBNA (2)病人血清中有高效價EBV特異的VCA -IgA或EA-IgA 抗體 (3)鼻咽癌細胞在裸鼠傳代中有完整的EBV形式 (4)鼻咽粘膜尚未發(fā)生惡變前已經查出這些抗體，治療后好轉者，抗體效價下降,免疫性,EBV在人群中廣泛存在，成人抗體的陽性率達90%以上 出現中和抗體，能阻止外源性病毒再感染 細胞和體液免疫不能清除體內已經潛伏的EBV,異嗜性抗體的檢測 輔助診斷：傳染性單核細胞增多癥 交叉抗體：IgM型抗體，非特異凝集牛、綿 羊RBC；出現早，發(fā)病3-4周內 達高峰；消失快，恢復期逐漸下 降至消失，有診斷價值（早期診 斷、近期感染）；效價1:224 缺點：假陽性 正常人, 血清病等,三、微生物學檢查法,EBV特異性抗體檢測 EBV感染： 檢測病毒VCAIgA或EAIgA抗體， 滴度1：51：10有診斷意義。,我國用基因工程方法構建的同時表達EBV gp320和HBsAg的疫苗，重點使用在鼻咽癌高發(fā)區(qū)。 gp320膜蛋白疫苗，正在英國大學生患者中作小規(guī)模接種，以期觀察該疫苗是否能降低傳染性單核細胞增多癥的發(fā)病率。,四、防治原則,Human cytomegalovirus （HCMV）,第四節(jié) 人巨細胞病毒,是巨細胞包涵體病的病原體 1956年Smith等首先用組織培養(yǎng)方法從患者腺體組織培養(yǎng)中分離出病毒 由于感染的細胞腫大，并具有巨大的核內包涵體，故名 CMV多為潛伏感染，?？捎蓱言械纫蛩乇患せ?CMV,HCMV只能感染人 復制周期為3648h 其特點是細胞變圓、膨脹、核變大 形成巨大細胞，核內出現鷹眼狀（Owls eye inclusion body） 大型嗜酸性包涵體,一、生物學性狀,owls eye inclusion body,一、生物學性狀,培養(yǎng)特性,感染宿主范圍狹窄，即不能感染其他動物；人體內感染多種細胞，但體外僅在人成纖維細胞中增殖。 在培養(yǎng)細胞中復制慢，經712d才能出現典型的CPE。,細胞變圓、膨脹、核變大，形成巨大細胞；核內出現周圍有一輪“暈”的大型嗜酸性包涵體，稱“鷹眼”細胞。,CMV在人群中的感染極為普遍，初次感染大多在2歲以下，通常呈隱性感染，少數人有臨床癥狀 。60%90%成人有CMV抗體，多數都可長期帶病毒。,二、致病性與免疫性,患者和無癥狀的隱性感染者,病毒,潛伏感染,唾液腺,乳腺,腎臟,白細胞,其他腺體,經常/間歇性排出病毒,唾液、乳汁、尿、血液、精液、宮頸及陰道分泌物,存在病毒,傳染源,1、母嬰傳播： 2、接觸傳播：口口，手口 3、性傳播： 4、醫(yī)源性傳播：輸血及器官移植,傳播途徑,感染類型,先天性感染： 圍生期感染： 兒童和成人原發(fā)感染： 免疫功能低下者感染感染： 細胞轉化與致癌潛能：癌組織中檢出病毒核酸,先天性感染（宮內感染）,通過胎盤感染胎兒。發(fā)生率為0.5%2.5%，CMV是能引起先天性感染的主要病毒之一 只有少部分（10%）感染者表現癥狀，主要臨床表現是巨細胞包涵體?。S疸、肝脾腫大、溶血性貧血、紫癜等）， 極少數患兒表現為先天性畸形（小頭智力低下、神經肌肉運動障礙、耳聾、脈絡膜視網膜炎等）,先天性疾?。?經產道感染，或出生后數周由母體的病毒（尿或乳汁中的病毒），或護理人員排出的病毒所引起的感染 多數無癥狀或癥狀輕微，表現為輕聲度或明顯呼吸障礙、肝功損害 通常不表現神經損傷，預后良好,圍生期感染,兒童和成人原發(fā)感染,通常呈隱性感染，感染后多數可長期帶毒，表現為潛伏感染。 少數感染者出現臨床癥狀，表現為巨細胞病毒單核細胞增多癥。 單核細胞增多 異嗜性抗體陰性,免疫功能低下者感染,發(fā)生于長期免疫抑制劑治療、器官移植、AIDS、白血病、淋巴瘤等患者 除原發(fā)感染外，體內原有的潛伏HCMV可被激活 癥狀主要是肺炎、視網膜炎、腦炎、腦膜炎等，預后不好,與腫瘤關系（宮頸癌、前列腺癌、結腸癌、Kaposi肉瘤） 癌組織中檢出病毒核酸,免疫性,病毒,機體,特異Ab,可維持終生，保護作用不強,病毒血癥與中和抗體可同時存在,母體Ab不能降低宮內/圍生期 病毒感染，但減輕感染程度,細胞免疫,限制HCMV播散和潛伏病毒的激活,細胞學檢查：取組織或尿液標本，離心后涂片染色鏡檢，觀察巨大細胞及包涵體。 病毒分離培養(yǎng)：臨床一般不用。 血清學檢查：特異性IgM與IgA可幫助診斷活動性HCMV感染。新生兒血清有IgM說明有宮內感染。,三、微生物學檢查法,嬰兒室發(fā)現HCMV感染應隔離以防交叉感染。感染產婦避免母乳喂養(yǎng)。 無有效疫苗。 可用丙氧鳥苷（更昔洛韋）治療。,四、防治原則,TORCH,TORCH是在1971年由美國學者Nahmias首次提出，他將能引起胎兒先天性感染導致胚胎發(fā)育異?；蚧蔚闹饕≡w的英文名稱的第一個字母組成TORCH一詞。 T：Toxoplasma, TOX（弓形蟲） O：Others（梅毒螺旋體、B19細小病毒等） R： Rubella virus, RV（風疹病毒） C：Cytomegalovirus, CMV（巨細胞病毒） H：Herpes simplex virus ,HS