行為試驗室管理制度.doc

中 科 院 神 經(jīng) 所 編號：AF-SOP-2-1行為實驗室管理制度一、 目的：嚴(yán)格控制動物實驗環(huán)境不受病源微生物的危害；保護(hù)動物的福利；維持環(huán)境的生物潔凈度；確保動物實驗環(huán)境的一致性。規(guī)范使用操作，更好發(fā)揮公共平臺功能。二 、參考文件：實驗動物管理條例（中華人民共和國國家科學(xué)技術(shù)委員會令第588號，2011），實驗動物 環(huán)境及設(shè)施（中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)，GB 14925-2010/XG1-2011）。三、規(guī)章制度1.人員管理1.1門禁系統(tǒng)只對登記過的合格人員開放，動物實驗人員須經(jīng)培訓(xùn)后方可進(jìn)入屏障系統(tǒng)工作。1.2與動物實驗無關(guān)人員以及外來人員，如需進(jìn)入，須由該設(shè)施管理人員陪同進(jìn)入。1.3人員進(jìn)出屏障系統(tǒng)請嚴(yán)格遵守行為鼠房人員進(jìn)出流程。1.4在屏障系統(tǒng)內(nèi)，人員應(yīng)注意保持安靜。人員從一開始進(jìn)入行為實驗室的更衣室到離開行為實驗室，均禁止高聲交談。1.5 禁止在屏障系統(tǒng)內(nèi)使用手機。1.6在屏障系統(tǒng)內(nèi)，人員進(jìn)出時不能同時開啟兩扇門，并做到隨手關(guān)門。1.7 人員進(jìn)行實驗請嚴(yán)格遵守行為實驗規(guī)程。1.8實驗人員禁止更改行為實驗室內(nèi)空調(diào)設(shè)置、小鼠飼養(yǎng)間照明開關(guān)和各種時控開關(guān)等。1.9 實驗人員不得拆卸或移動儀器設(shè)備的硬件設(shè)施，不得更改儀器設(shè)備的固定參數(shù)設(shè)置。禁止移動房間內(nèi)的儀器設(shè)備，未經(jīng)允許不得將外面的儀器設(shè)備帶入實驗室內(nèi)，個人的儀器設(shè)備不得占用公用儀器設(shè)備空間。1.10 實驗人員應(yīng)愛護(hù)動物實驗室的儀器設(shè)備，實驗時如發(fā)生儀器設(shè)備故障或損壞等意外情況，請在實驗登記本上填寫，并及時通知管理人員。1.11 在屏障系統(tǒng)內(nèi)進(jìn)行實驗操作，應(yīng)注意無菌操作，謹(jǐn)防病原傳播。2、物品管理：2.1與實驗無關(guān)的物品(如手機、U盤等)，不準(zhǔn)帶入屏障系統(tǒng)。2.2動物房負(fù)責(zé)統(tǒng)一提供筆、紙張、脫脂棉等易耗品。除此之外，個人實驗所需的耐高溫高壓滅菌的物品，統(tǒng)一交給動物房，經(jīng)121、30分鐘的高溫高壓滅菌處理，并確認(rèn)滅菌指示紙達(dá)到安全狀態(tài)后，才可進(jìn)入行為室內(nèi)。2.3不耐高溫高壓滅菌的物品，如果可以浸泡處理的，須將物品交給工作人員，在指定消毒液中浸泡半個小時后，方可進(jìn)入行為室。如不能浸泡處理的，須將物體表面用消毒液擦拭干凈，并用消毒液噴霧消毒，放在傳遞窗中紫外燈照射30分鐘后，從傳遞窗內(nèi)側(cè)帶入屏障系統(tǒng)。2.4更換下來的籠具、飲水瓶等物品放到傳遞窗，關(guān)好傳遞窗的門，人員出去后，從外面打開傳遞窗，取出物品，放到清洗間內(nèi)。2.5使用過的廢棄針頭、刀片等尖銳物體請放到利器盒內(nèi)，針筒請扔到普通垃圾筒中，由動物房工作人員統(tǒng)一處理，嚴(yán)禁隨意丟棄！3、實驗動物管理：3.1進(jìn)行行為實驗的小鼠必須是通過神經(jīng)所動物房定購的，或者來自神經(jīng)所屏障系統(tǒng)動物房，禁止將其他來源的小鼠帶入行為室。3.2未經(jīng)檢疫的小鼠或者清潔級以下的小鼠不得進(jìn)入六樓行為實驗室內(nèi)。3.3不得將大鼠或其他實驗動物帶入六樓行為實驗室內(nèi)。3.4實驗動物傳遞為單向傳遞（如下圖所示）：屏障系統(tǒng)隔離1周動物房購買的小鼠行為實驗室普通級鼠房屏障系統(tǒng)內(nèi)小鼠其他實驗處理或者安樂死3.5禁止將行為實驗室的小鼠再放回屏障系統(tǒng)動物房內(nèi)飼養(yǎng)，已經(jīng)拿出行為室的動物嚴(yán)禁再次返回； 3.6實驗人員應(yīng)經(jīng)常（每周不少于2次）查看自己的實驗小鼠。3.7 每籠動物數(shù)不得超過5只，對于掛紅牌的籠盒必須及時分籠，避免影響動物健康；3.8不準(zhǔn)虐待動物；不準(zhǔn)在行為實驗室內(nèi)處死動物。3.9工作人員或?qū)嶒炄藛T如發(fā)現(xiàn)有動物死亡時，應(yīng)立即取出動物尸體，用塑料袋包裝，在標(biāo)簽牌及動物死亡記錄表中登記動物死亡數(shù)、日期，并及時更換該鼠籠、籠蓋、飼料及飲水瓶，最后離開時將動物尸體一并帶出；3.9逃逸鼠的處理：取放小鼠要小心，用完后一定要將蓋子蓋緊，不要留有縫隙，以免小鼠逃逸。工作人員或?qū)嶒炄藛T一旦發(fā)現(xiàn)逃逸鼠，應(yīng)立即處死。3.10動物尸體用塑料袋包裝后放入指定冰柜，集中焚燒處理。3.11實驗結(jié)束后小鼠的處理：行為實驗結(jié)束后，請及時將小鼠移出行為實驗室，并完成行為實驗使用申請表。如連續(xù)四周沒有進(jìn)行過任何實驗的小鼠，并未作說明的，工作人員有權(quán)對小鼠做出處理。動物行為平臺內(nèi)的小鼠房是專門用來暫時放置即將進(jìn)行行為實驗小鼠的場所，禁止用于長期飼養(yǎng)或繁殖小鼠。每次實驗后，實驗者應(yīng)該盡快對小鼠房進(jìn)行清理（例如：不應(yīng)該將鼠籠放在地上）。對于某些實驗者在動物行為平臺小鼠房內(nèi)繁殖小鼠的現(xiàn)象，一經(jīng)發(fā)現(xiàn)，將進(jìn)行通報批評，并且取消2個月的動物行為平臺使用資格。4、行為實驗預(yù)約管理4.1嚴(yán)格執(zhí)行預(yù)約制度，每次實驗前必須提前登陸中科院預(yù)約系統(tǒng)進(jìn)行預(yù)約。 4.2提前一周預(yù)約。如果將要進(jìn)行對動物年齡有嚴(yán)格要求的實驗，提前兩周預(yù)約。4.3沒有預(yù)約禁止進(jìn)行實驗！如果你沒有提前預(yù)約，但是正好當(dāng)天臨時要做實驗，即使房間是空閑的，在實驗開始前也一定要在網(wǎng)上預(yù)約登記，以免發(fā)生時間沖突。4.4實行優(yōu)先權(quán)制度: 每次所預(yù)約的時間不得超過10天。10天后的時間，如果無人預(yù)約，則可以繼續(xù)預(yù)約。如果10天后有其他人預(yù)約，則其他人有優(yōu)先權(quán)。4.5預(yù)約時間超過10天的需要提前跟工作人員申請，工作人員根據(jù)實驗安排情況安排實驗時間。4.6 如果單個實驗室占用時間很長，其他人員可根據(jù)需求申請更改。4.7實驗計劃有變動時，請及時在網(wǎng)上更改預(yù)約時間。4.8嚴(yán)格按照預(yù)約時間進(jìn)行實驗。4.9對于預(yù)約后不用（網(wǎng)上預(yù)約記錄和實驗登記不符合），或者沒有預(yù)約就進(jìn)行實驗者，一經(jīng)發(fā)現(xiàn)，動物管理委員會將對其進(jìn)行通報批評，并且取消其預(yù)約權(quán)力2個月。 行為實驗室人員進(jìn)出流程1. 人員進(jìn)行為室流程：將外套掛在六樓大廳衣架上簽寫人員進(jìn)入動物設(shè)施通用登記表 / 實驗動物領(lǐng)用登記表 門禁刷卡 將自己的鞋放在門口赤腳進(jìn)入更衣間戴手套戴口罩打開一套無菌服將無菌服袋子放在架子底層的籠子內(nèi)穿戴無菌服上衣將頭發(fā)包裹在無菌服帽子內(nèi)穿戴褲子將上衣收進(jìn)褲腰內(nèi)，并將褲子上的帶子收緊穿鞋套75%乙醇噴霧凈手打開風(fēng)淋室門啟動按鈕關(guān)閉進(jìn)口門全身轉(zhuǎn)動風(fēng)淋30秒打開出口門進(jìn)入工作走廊右轉(zhuǎn)到出口處更換行為室內(nèi)拖鞋開始工作或?qū)嶒灐?. 人員離開行為室流程：實驗/飼養(yǎng)工作完畢后整理工作臺面 打掃實驗室內(nèi)衛(wèi)生，保持清潔關(guān)閉實驗室內(nèi)照明（嚴(yán)禁關(guān)閉小鼠飼養(yǎng)間照明開關(guān)）關(guān)閉房間門將實驗廢棄物放至傳遞窗內(nèi)將傳遞窗關(guān)好將拖鞋放回鞋架上進(jìn)入出口間關(guān)閉內(nèi)走廊門按出口開關(guān)從出口離開將廢棄飼養(yǎng)籠具放至清洗間將更換下的無菌服放在指定收集箱內(nèi)，手套、口罩等物品放入垃圾桶內(nèi) 穿好自己的鞋離開動物房；行為實驗流程1.開始實驗前需填寫行為實驗室使用申請表進(jìn)行登記。2. 網(wǎng)上預(yù)約實驗。3. 提前兩周從公司訂購動物放至六樓屏障系統(tǒng)內(nèi)，一周檢疫合格后將動物轉(zhuǎn)移至行為實驗室內(nèi)；或提前一周將屏障系統(tǒng)內(nèi)動物轉(zhuǎn)移至行為實驗室內(nèi)，轉(zhuǎn)移方法請參照行為室實驗動物轉(zhuǎn)移規(guī)程。4. 將動物在行為室內(nèi)飼養(yǎng)三天以上再開始行為實驗。5. 實驗開始前將實驗動物轉(zhuǎn)移至實驗間適應(yīng)至少半個小時。6. 嚴(yán)格按照預(yù)約時間段開始實驗并填寫實驗記錄。7.實驗開始前在每個房間門口的登記本上登記，并將門上的牌子翻至 實驗中 請勿進(jìn)入， 結(jié)束時間一開始不要填寫，請結(jié)束時再填寫，以便大家了解當(dāng)時實驗室的實時使用狀態(tài)。8. 根據(jù)儀器使用說明進(jìn)行實驗。9. 實驗人員在實驗結(jié)束后應(yīng)立即關(guān)閉儀器電源，隨后再清除儀器內(nèi)外各種實驗污垢，并按照要求對儀器進(jìn)行清洗消毒，謹(jǐn)防病原傳播，并延長儀器使用壽命。 10.清理實驗臺及地面，將垃圾帶出房間。11. 關(guān)閉實驗房間照明，關(guān)閉房門，將牌子翻至 實驗結(jié)束。12. 將實驗小鼠放回飼養(yǎng)間原位。13. 實驗數(shù)據(jù)請放至桌面animal公共使用里面，然后到神經(jīng)樓517自帶U盤將數(shù)據(jù)拷走，禁止將U盤帶入屏障系統(tǒng)內(nèi)。行為實驗人員操作規(guī)程1. 超凈臺使用規(guī)程：打開電源 75%酒精噴霧工作臺面 無菌操作 結(jié)束后消毒液噴霧并擦拭臺面、整理相應(yīng)物品 關(guān)閉電源；2. EVC使用規(guī)程：2.1取下的籠盒必須在超凈臺內(nèi)完成實驗操作，嚴(yán)禁在地面上操2.2結(jié)束后將籠盒放回原位并插緊，檢查籠盒位置防止動物窒息死亡；2.3每籠動物數(shù)不得超過5只，對于掛紅牌的籠盒必須及時分籠，避免影響動物健康；2.4禁止在EVC及普通籠盒上用記號筆書寫信息，這樣在更換籠盒后容易造成信息誤導(dǎo)，而且請統(tǒng)一使用標(biāo)簽卡片；2.5動物標(biāo)簽卡片只能保留一張，嚴(yán)禁多張疊放避免混淆；2.6飼養(yǎng)室超凈臺頂部嚴(yán)禁堆放各種物品。3. 動物標(biāo)簽的使用規(guī)程：3.1標(biāo)簽卡槽內(nèi)只允許擺放最新的標(biāo)簽，保證每盒一張避免混淆；3.2每個實驗籠的卡片上請?zhí)顚憣嶒炐∈蟮拿Q、數(shù)量、日期；使用者姓名的全稱、使用者所在課題組組長姓名的中文全稱； 需要特殊飼養(yǎng)要求的，請將要求寫在另一塊卡片上，掛在籠子上。3.3轉(zhuǎn)基因動物的標(biāo)簽信息按照命名要求規(guī)范書寫；4. 傳遞窗使用規(guī)程：4.1任何物品進(jìn)入傳遞窗前必須用消毒液表面噴霧；4.2嚴(yán)禁傳遞密封的盒子或容器，如一定要使用必須先噴霧消毒再完全打開后放入傳遞窗紫外消毒；4.3由于紫外燈滅菌效果局限，各組將實驗記錄本上的重要信息寫在紙上再通過傳遞窗；4.4動物傳遞紫外照射時間15分鐘，其余物品一律30分鐘；4.5依據(jù)傳遞窗內(nèi)放置的時鐘算好滅菌時間，并嚴(yán)格按物品內(nèi)容填寫傳遞窗使用登記表；5. 動物安樂死流程：將待處理動物放入容器內(nèi)并蓋緊 打開CO2鋼瓶旋鈕約30秒 （小鼠），60秒（大鼠） 觀察并確認(rèn)動物死亡狀態(tài) 關(guān)閉鋼瓶旋鈕打開籠蓋取出動物尸體 專用垃圾袋打包后放入指定冰柜中；注意事項：禁止旋擰壓力表上已經(jīng)設(shè)置好的旋鈕；使用者應(yīng)認(rèn)真遵守以上規(guī)則，如發(fā)現(xiàn)有違規(guī)操作者，第一次給本人及研究組組長發(fā)信警告，并取消預(yù)約權(quán)利一周，第二次交動物管理委員會警告批評，并取消預(yù)約權(quán)利兩周，第三次全所通報批評，并取消預(yù)約權(quán)利兩個月。中科院神經(jīng)科學(xué)研究所 二一二年三月行為鼠房飼養(yǎng)規(guī)程1. 將EVC籠盒在超凈臺內(nèi)打開使用消毒好的鑷子輕輕抓取小鼠將小鼠輕輕放至新的EVC籠盒內(nèi)完成更換。2. 根據(jù)飼養(yǎng)籠位數(shù)量制定換籠、添水、加料、消毒等工作時間，每周更換墊料、水瓶一次。3. 禁止更改每籠小鼠的更換墊料時間。4. 工作時請盡量輕拿輕放，減少噪音產(chǎn)生。5. 每日工作結(jié)束后用消毒液擦拭架子表面、桌面及拖擦飼養(yǎng)室地面、公共走廊及出入口，噴霧消毒并做好工作記錄；6. 每周四上午8：00-10:00對整個屏障系統(tǒng)噴霧消毒，并用消毒液拖擦墻面、門縫、天花板和高效出風(fēng)口，各房間回風(fēng)口過濾網(wǎng)用消毒液清洗干凈；7. 兩周更換食槽、籠蓋一次，兩周清理EVC回風(fēng)口一次。8. 更換的籠蓋、籠盒如有多余必須歸還到飼養(yǎng)室存放架上，禁止隨手丟在超凈臺內(nèi)或飼養(yǎng)室地面上；9. 根據(jù)動物數(shù)適量添加飼料，防止添加過多影響飼料品質(zhì)和籠盒內(nèi)環(huán)境，懷孕母鼠可適量投放葵瓜子、大麥、雞蛋等增加營養(yǎng)；10. 純水若少于飲水瓶容量的1/3時需更換，發(fā)現(xiàn)漏水瓶及時更換；11. 損壞籠具請及時處理。12.籠盒的清洗以四角不留污垢為標(biāo)準(zhǔn)，晾干后裝填墊料待高壓；13.每籠盒添加墊料一碗，結(jié)束后必須將儲存箱蓋好；行為室實驗動物轉(zhuǎn)移規(guī)程屏障系統(tǒng)內(nèi)小鼠轉(zhuǎn)移到行為實驗室方法在屏障系統(tǒng)內(nèi)將小鼠IVC籠盒放入傳遞窗（禁止打開籠蓋），人員出屏障系統(tǒng)取出籠盒再放至行為實驗室傳遞窗內(nèi)，消毒液噴霧籠盒表面，紫外線照射15分鐘后，在實驗室內(nèi)將籠蓋打開，將小鼠放入預(yù)先準(zhǔn)備好的籠盒內(nèi)。注：EVC小鼠飼養(yǎng)間照明程序為： 早上5:00-下午5:00 照明 下午5:00-早上5:00 黑暗飼養(yǎng)一房間（EVC）墊料更換表： 每周一上午8:00-10:00 1號籠架 每周二上午8:00-10:00 2號籠架飼養(yǎng)二房間（平板架）墊料更換表： 每周二上午10:00-11:00 每周四上午8：00-10：00消毒時間，請大家安排實驗時避開此時段。從公司購買的小鼠需要先放到神經(jīng)樓6樓IVC鼠房隔離一周，并抽取2%的小鼠進(jìn)行檢疫，檢疫合格后才能轉(zhuǎn)移至行為實驗室。因此請在實驗開始前兩周訂購SPF級動物，并且訂購時請多訂購2%的動物用于檢疫。Behavior LabRoom 7 Room 1Room 6Animal Room 1 entrance air shower entrance 1mexitdoorTransfer windowRoom 3 Room 2Room 4 Room 5 Surgery Room 221Animal Room 2 Room 1： Social Behavior; Novel Object Recognition; LocomotionRoom 2： Fear Conditioning; Prepulse Inhibition of startle (PPI), Fear-potentiated startle (FPS); Passive and Active AvoidanceRoom 3： Conditioned Place Preference； Tail Flick；Von Frey Hairs； Hargreaves Test； Formalin Test; Footprint Pattern; Hot Cold Plate;Room 4： Water Maze; Rotarod; Von Frey Hairs；Room 5： Open Fiel