化妝品微生物指標(biāo)檢驗(yàn).ppt

化妝品微生物檢驗(yàn),化妝品因含有水分，油脂，蛋白質(zhì)，多元醇等，為微生物的生長創(chuàng)造了良好的條件，造成產(chǎn)品變質(zhì)。 為了抑制微生物的繁殖和消費(fèi)者使用過程中的產(chǎn)品污染，往往在化妝品中加入防腐劑，但不能過量。 因此，化妝品一方面為微生物的生長繁殖提供了良好的環(huán)境；另一方面由于防腐劑的應(yīng)用又可抑制微生物的生長。,化妝品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn),微生物檢驗(yàn)方法,gb/t 7918.1-1987 化妝品微生物標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法 總則 菌落總數(shù) （化妝品衛(wèi)生規(guī)范-2007年） gb/t 7918.2-1987 化妝品微生物標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法 細(xì)菌總數(shù)測定 糞大腸菌群：gb/t 7918.3-1987 化妝品微生物標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法 糞大腸菌群 銅綠假單胞菌 （化妝品衛(wèi)生規(guī)范-2007年） gb/t 7918.4-1987 化妝品微生物標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法 綠膿桿菌 金黃色葡萄球菌 gb/t 7918.5-1987 化妝品微生物標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法 金黃色葡萄球菌 霉菌和酵母菌：（化妝品衛(wèi)生規(guī)范-2007年）,總則,微生物檢驗(yàn)的基本要求 微生物檢驗(yàn)樣品的采集、保存及制備,適用范圍,總則,1、具有代表性 隨機(jī)抽取相應(yīng)數(shù)量的包裝單位。 應(yīng)從批的整體中各部位抽取，如從四角+中間；分上、中、下層；或上、中上、中、中下、下層；梅花點(diǎn)式等。 所有接觸樣品的工具、容器都必須保持清潔。,樣品的采集,2、抽/采樣數(shù)量 按照抽樣批及抽樣方案,jjf10702005 定量包裝商品凈含量計(jì)量檢驗(yàn)規(guī)則,3、檢驗(yàn)量 檢驗(yàn)時(shí)，應(yīng)分別從兩個(gè)包裝單位以上的樣品中共取10g 或10ml。包裝量小于20g的樣品，采樣量可適當(dāng)增加樣品包裝數(shù)量。,樣品的制備,液體樣品,膏、霜、乳劑半固體狀樣品,固體樣品,樣品的制備注意事項(xiàng),無菌容器、材料及操作,樣品的均一性,樣品的檢驗(yàn)及保管,及時(shí)檢驗(yàn),樣品應(yīng)放在室溫陰涼干燥處,樣品先進(jìn)行微生物檢驗(yàn)，再做其他指標(biāo),須防止微生物的再污染和擴(kuò)散,如檢出糞大腸菌群或其它致病菌，自報(bào)告發(fā)出之日起該菌種及被檢樣品應(yīng)保存一個(gè)月,菌落總數(shù)檢驗(yàn),菌落總數(shù)（aerobic bacterial count）是指化妝品檢樣經(jīng)過處理，在一定條件下培養(yǎng)后（如培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時(shí)間、ph 值、需氧性質(zhì)等），1g（1ml）檢樣中所含菌落的總數(shù)。所得結(jié)果只包括一群本方法規(guī)定的條件下生長的嗜中溫的需氧性菌落總數(shù)。,測定菌落總數(shù)便于判明樣品被細(xì)菌污染的程度，是對樣品進(jìn)行衛(wèi)生學(xué)總評價(jià)的綜合依據(jù)。,化妝品中防腐劑抑制細(xì)菌的生長. 含卵磷脂、吐溫80 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行中和。對尼泊金類、苯甲酸類、六氯酚類等有效，但對卡松類的防腐劑的中和效果有限。,卡松的中和劑半胱氨酸,可較好的中和卡松的抑菌效果。因此,檢測時(shí)不同的防腐劑加入不同的中和劑,為便于區(qū)別化妝品中的顆粒與菌落，可在每 100ml 卵磷脂吐溫 80 營養(yǎng)瓊脂中加入 1ml 0.5的 ttc 溶液，如有細(xì)菌存在，培養(yǎng)后菌落呈紅色，而化妝品的顆粒顏色無變化。,在膏霜類化妝品中,微生物都是吸附或附著于顆粒狀的原料中,檢測時(shí)不易洗脫下來,因此,需要驗(yàn)證檢測方法的有效性。,糞大腸菌群,糞大腸菌群（fecal coliforms）系一群需氧及兼性厭氧革蘭氏陰性無芽胞桿菌，在 44.50.5培養(yǎng) 24h48h 能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸并產(chǎn)氣。,該菌直接來自糞便，是重要的衛(wèi)生指示菌。,糞大腸菌群檢查流程圖,銅綠假單胞菌,銅綠假單胞菌（pseudomonas aeruginosa）屬于假單胞菌屬，為革蘭氏陰性桿菌，氧化酶陽性，能產(chǎn)生綠膿菌素。此外還能液化明膠，還原硝酸鹽為亞硝酸鹽，在 421條件下能生長。,該菌對人有致病力，可使傷處化膿，引起敗血癥等。,最終結(jié)果判斷,增菌培養(yǎng),供試液的制備,書寫檢驗(yàn) 記錄單,分離純化,無菌落或無特征菌落,配培養(yǎng)基和稀釋液,銅綠假單胞菌檢查流程圖,361,1824h,361,1824h,十六烷三甲基溴化銨平板,scdlp培養(yǎng)基,黃綠色菌膜,灰白色濕潤,氧化酶試驗(yàn),粉紅/紫紅色,綠膿菌素試驗(yàn),鹽酸層呈粉紫色氯仿層呈藍(lán)綠色,硝酸鹽還原產(chǎn)氣試驗(yàn),n2,明膠液化試驗(yàn),明膠培養(yǎng)基（高層）,明膠液化,金黃色葡萄球菌,金黃色葡萄球菌（staphylococcus aureus）為革蘭氏陽性球菌，呈葡萄狀排列，無芽胞，無莢膜，能分解甘露醇，血漿凝固酶陽性。,該菌是葡萄球菌中對人類致病力最強(qiáng)的一種，能引起人體局部化膿性病灶，嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致敗血癥。,革蘭染色、鏡檢 生化試驗(yàn):血漿凝固酶試驗(yàn) 甘露醇發(fā)酵試驗(yàn),最終結(jié)果判斷,增菌培養(yǎng),供試品的處理,書寫檢驗(yàn) 記錄單,分離純化,無菌落或無特征菌落,配培養(yǎng)基和稀釋液,361,361,242h,2448h,金黃色葡萄球菌檢查流程圖,baird parkers平板,灰/黑色,甘露醇發(fā)酵試驗(yàn),血漿凝固酶試驗(yàn),血漿凝塊,液態(tài)血漿,霉菌和酵母菌,霉菌和酵母菌數(shù)測定（determination of molds and yeast count）是指化妝品檢樣在一定條件下培養(yǎng)后，1g 或 1ml 化妝品中所污染的活的霉菌和酵母菌數(shù)量，藉以判明化妝品被霉菌和酵母菌污染程度及其一般衛(wèi)生狀況。,檢驗(yàn)結(jié)果正確的保證,設(shè)備方面： 恒溫培養(yǎng)設(shè)備 高壓滅菌器 超凈工作臺 均質(zhì)器 天平 顯微鏡,材料要求：