分子細(xì)胞生物學(xué)考試題目及參考答案.docVIP

1 詳細(xì)敘述腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的主要步驟。腫瘤轉(zhuǎn)移是一個(gè)復(fù)雜的多步驟連續(xù)過程，其中至少包含以下步驟： 原發(fā)部位腫瘤脫離原發(fā)瘤，侵襲穿越基底膜并向周圍間質(zhì)浸潤(rùn)性生長(zhǎng)，穿越局部毛細(xì)血管/淋巴管壁進(jìn)入管腔，與血小板聚集或形成小瘤栓，隨血液/淋巴液運(yùn)輸?shù)竭_(dá)靶器官毛細(xì)血管床，與該部位的血管/淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生粘附，穿越管壁和基底膜進(jìn)入周圍間質(zhì)，不斷增值形成轉(zhuǎn)移瘤。2 如何理解和研究腫瘤微環(huán)境。 腫瘤局部浸潤(rùn)的免疫細(xì)胞、間質(zhì)細(xì)胞及所分泌的活性介質(zhì)等與腫瘤細(xì)胞共同構(gòu)成的局部?jī)?nèi)環(huán)境，在腫瘤轉(zhuǎn)移過程中，微環(huán)境對(duì)于轉(zhuǎn)移的腫瘤細(xì)胞的存活與增殖都是必需的。腫瘤微環(huán)境中的基質(zhì)細(xì)胞對(duì)腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移的形成起著重要的促進(jìn)作用：基質(zhì)細(xì)胞可以通過產(chǎn)生趨化因子、生長(zhǎng)因子和基質(zhì)降解酶以促進(jìn)血管生成和基底膜破壞，使腫瘤的侵襲能力增強(qiáng)；在腫瘤的轉(zhuǎn)移過程中伴隨著宿主骨髓來源的相關(guān)細(xì)胞向腫瘤原發(fā)部位和預(yù)轉(zhuǎn)移部位的定向流動(dòng)，這些細(xì)胞要么留存在原發(fā)瘤中，在腫瘤微環(huán)境中發(fā)育為相關(guān)基質(zhì)細(xì)胞，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增值和侵襲。要么在遠(yuǎn)處預(yù)轉(zhuǎn)移部位形成特殊的腫瘤預(yù)轉(zhuǎn)移微環(huán)境，為腫瘤細(xì)胞的定向轉(zhuǎn)移提供適宜的存活和增殖微環(huán)境；腫瘤微環(huán)中存在著大量細(xì)胞因子和趨化因子，它們對(duì)于腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移也起著至關(guān)重要的作用，如低濃度的TNF能夠?qū)δ[瘤細(xì)胞起到直接的作用。3 什么是腫瘤干細(xì)胞？其研究對(duì)臨床應(yīng)用研究有什么指導(dǎo)意義？腫瘤干細(xì)胞（CSCs），也稱腫瘤生成細(xì)胞，是指腫瘤細(xì)胞中一小部分具有類似干細(xì)胞功能的細(xì)胞，能夠自我更新，分化為異質(zhì)癌細(xì)胞，并且在遠(yuǎn)端組織中產(chǎn)生新的腫瘤。腫瘤干細(xì)胞假說提出了只有一小部分腫瘤細(xì)胞可以產(chǎn)生腫瘤并維持腫瘤生長(zhǎng)及異質(zhì)性，與腫瘤的發(fā)生、轉(zhuǎn)移以及復(fù)發(fā)有著直接的聯(lián)系，為癌癥的臨床治療提供了全新的視角。徹底有效地根除癌癥需要消滅腫瘤干細(xì)胞又避免傷害正常的干細(xì)胞，而一些實(shí)體瘤中的研究發(fā)現(xiàn)腫瘤干細(xì)胞對(duì)常規(guī)癌癥治療手段具有耐受性，因此發(fā)展腫瘤干細(xì)胞的篩選鑒定方法，進(jìn)一步開發(fā)只針對(duì)腫瘤干細(xì)胞的藥物以及治療方法對(duì)于癌癥的臨床治療具有重要的意義。現(xiàn)今的治療策略主要針對(duì)非腫瘤干細(xì)胞，低估了CSC-特異性治療方案的重要性。然而，如果非CSC可以產(chǎn)生CSC，這種可塑性可能會(huì)挫敗嘗試通過單單消滅CSC來達(dá)到治療腫瘤的嘗試，因?yàn)橥ㄟ^治療手段消滅CSC后很可能會(huì)緊接著發(fā)生非CSC再生為CSC，使得腫瘤再生長(zhǎng)。因此，最好的治療方案應(yīng)該是合作使用靶向CSC與靶向非CSC藥物。4 TGF-信號(hào)通路在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用。在正常的生理?xiàng)l件下，TGF-通過調(diào)控細(xì)胞周期，抑制細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡抑制腫瘤的發(fā)生；但在特定的情況下，如TR基因突變或Smad 蛋白功能的喪失，細(xì)胞丟失對(duì)TG F-誘導(dǎo)的生長(zhǎng)抑制和凋亡信號(hào)的敏感性，細(xì)胞的生長(zhǎng)失去調(diào)控，誘發(fā)細(xì)胞突變，導(dǎo)致癌變的發(fā)生。腫瘤細(xì)胞和瘤內(nèi)基質(zhì)細(xì)胞常常產(chǎn)生大量的TGF-，通過自分泌和旁分泌促進(jìn)腫瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移，TGF-可誘導(dǎo)癌細(xì)胞侵襲所必需的MET；腫瘤源性TGF-作用于間質(zhì)細(xì)胞瘤基質(zhì)，誘導(dǎo)趨向腫瘤細(xì)胞的增殖分化；TGF-與血管形成有關(guān)；TGF-能夠抑制包括細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞，自然殺傷細(xì)胞和巨噬細(xì)胞在內(nèi)的淋巴細(xì)胞的增殖和分化，從而使腫瘤逃離免疫監(jiān)視。5 簡(jiǎn)述泛素化修飾過程和類型。泛素化修飾即蛋白質(zhì)被泛素共價(jià)修飾的過程，泛素-蛋白酶體通路是真核細(xì)胞最主要的蛋白降解途徑。泛素化修飾涉及泛素激活酶E1、泛素結(jié)合酶E2和泛素連接酶E3的一系列反應(yīng):首先在ATP供能的情況下酶E1粘附在泛素分子尾部的Cys殘基上激活泛素,接著,E1將激活的泛素分子轉(zhuǎn)移到E2酶上,隨后,E2酶和一些種類不同的E3酶共同識(shí)別靶蛋白,對(duì)其進(jìn)行泛素化修飾。E3決定了蛋白質(zhì)降解的特異性,E3分為兩個(gè)家族：RING/U-Box家族和HECT家族。前者可以將泛素直接從E2復(fù)合物上轉(zhuǎn)移到底物蛋白質(zhì)上。后者必須先將泛素轉(zhuǎn)移到自身活性部位的Cys殘基上后，再轉(zhuǎn)移到底物蛋白質(zhì)上。6 什么是細(xì)胞極性？舉例說明其表現(xiàn)形式。單個(gè)細(xì)胞內(nèi)含物的不對(duì)稱分布所產(chǎn)生的細(xì)胞功能不對(duì)稱性，即為細(xì)胞極性。前-后極性：受精卵，卵母細(xì)胞頂尖-基地極性：胚胎外胚層，哺乳動(dòng)物上皮細(xì)胞其他類型極性：星形細(xì)胞，神經(jīng)元7 什么是EMT？分為哪幾類？敘述EMT在正常發(fā)育和病理中的功能。上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)型，指具有極性的上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)換成為具有活動(dòng)能力的間質(zhì)細(xì)胞并獲得侵襲和遷移能力的過程。一型EMT：移植、胚胎形成和組織發(fā)育中的EMT。二型EMT：與組織再生和器官纖維化有關(guān)。三型EMT：與癌發(fā)生和轉(zhuǎn)移有關(guān)。正常發(fā)育：原腸胚形成中，通過EMT構(gòu)成的中胚層產(chǎn)生胚胎第三層細(xì)胞；神經(jīng)脊分層，神經(jīng)上皮細(xì)胞EMT是誘發(fā)神經(jīng)脊的重要步驟。病理：由上皮細(xì)胞產(chǎn)生的腫瘤可以通過獲得間質(zhì)細(xì)胞特性（EMT）變得更加運(yùn)動(dòng)與侵襲；EMT有利于腫瘤細(xì)胞滲入血液或淋巴管并且在遠(yuǎn)端產(chǎn)生腫瘤。8 考慮分泌酶作為治療靶點(diǎn)時(shí)最應(yīng)該注意的事項(xiàng)是什么？為什么？ 由于和分泌酶是A產(chǎn)生的關(guān)鍵酶 ,部分的抑制是治療AD的有效方法。阻斷A的來路打斷了 A沉積惡性循環(huán) ,從而啟動(dòng)自身的清除機(jī)制去清除已存在的淀粉斑 ,達(dá)到提高療效的目的。但和分泌酶存在于身體許多不同的細(xì)胞中 ,它們除了以APP 為底物外可能還有其他底物參與其他物質(zhì)的代謝。因此 ,需要長(zhǎng)期治療的 AD 病人 ,完全的抑制可能會(huì)導(dǎo)致毒性反應(yīng)。且 分泌酶抑制劑本身存在特異性，特異性較差的 分泌酶抑制劑在抑制A 生成的同時(shí)，也抑制了Notch 等的切割，從而導(dǎo)致了嚴(yán)重的毒副作用。還一個(gè)問題是大腦結(jié)構(gòu)的特殊性 ,和分泌酶抑制劑必須通過血腦屏障 ,進(jìn)入腦內(nèi)才能發(fā)揮作用。9 簡(jiǎn)述TLR4信號(hào)通路在炎癥中的功能。TLR4的結(jié)構(gòu)分為3個(gè)區(qū)域: 胞外域、跨膜域、胞內(nèi)域。胞外域LRR可與CD14結(jié)合, 介導(dǎo)病原相關(guān)分子模式的識(shí)別。當(dāng)TLR4與相應(yīng)配體結(jié)合后, 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)到胞內(nèi)域TIR, 然后激活核因子JB( nuclear factor-JB, NF-JB)和絲裂原活化蛋白激酶信號(hào)通路, 從而促進(jìn)各種炎性細(xì)胞因子基因表達(dá)的激活。LPS激活TLR4/NF-JB信號(hào)通路主要有兩條途徑: 一條是髓樣分化因子88(MyD88)依賴信號(hào)通路; 另一條MyD88非依賴的信號(hào)通路。細(xì)胞外LPS與TLR4結(jié)合，TLR4的胞內(nèi)TIR區(qū)域與MyD88的羧基端結(jié)合, MyD88的氨基端與IL-1受體相關(guān)激酶(IRAK)氨基端結(jié)合, 激活I(lǐng)RAK。激活的IRAK激活腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6(TRAF-6), TRAF-6激活NF-JB抑制物的激酶(IKKs) 復(fù)合物。NF-JB抑制物在IKKs復(fù)合物的作用下磷酸化并降解, NF-JB激活后轉(zhuǎn)入細(xì)胞核中誘導(dǎo)特定基因的表達(dá), 激活細(xì)胞因子IL-1、IL-6、IL-8、IL-12等。另外, 存在MyD88非依賴信號(hào)通路, LPS可以刺激MyD88缺陷的巨噬細(xì)胞表達(dá)干擾素誘導(dǎo)蛋白10, 表達(dá)干擾素誘導(dǎo)基因需要依賴TLR4, 但不依賴MyD88, 是通過干擾素調(diào)節(jié)因子3和NF-JB發(fā)生的。 10 為什么腸上皮細(xì)胞特異性敲除IKK會(huì)減少腸癌？而腸實(shí)質(zhì)細(xì)胞特異性敲除IKK會(huì)促進(jìn)腸癌？ IKK/NF-kB途徑是炎癥反應(yīng)關(guān)鍵通路，被炎癥因子激活后，轉(zhuǎn)錄水平促進(jìn)炎癥因子表達(dá)。 小鼠CAC模型中，腸上皮細(xì)胞敲除IKK減少腸癌，是因?yàn)榈蛲鲈鰪?qiáng)。IKK/NF-kB通過激活轉(zhuǎn)錄下游抗凋亡基因?qū)崿F(xiàn)抑制凋亡作用。 而腸實(shí)質(zhì)細(xì)胞敲除IKK，11什么是Warburg效應(yīng)？為何缺氧可誘導(dǎo)糖酵解？即使在有氧條件下腫瘤組織也會(huì)以糖酵解作為主要產(chǎn)能方式, 這種現(xiàn)象稱為“Warburg effect ”。葡萄糖在體內(nèi)氧化分解的途徑包括糖酵解和氧化磷酸化糖酵解依賴分布于細(xì)胞膜上的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體將胞外毛細(xì)血管內(nèi)的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)入胞內(nèi)，通過一系列糖酵解酶分解代謝，生成終產(chǎn)物丙酮酸在有氧條件下，丙酮酸通過轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白進(jìn)入線粒體氧化脫羧生成乙酰輔酶A，進(jìn)入三羧酸循環(huán)(TCA)徹底氧化成H2O和CO2，該途徑需要氧的參與在缺氧條件下，丙酮酸因缺氧不能進(jìn)行氧化磷酸化，只能轉(zhuǎn)化成乳酸，通過細(xì)胞膜的單羧基轉(zhuǎn)運(yùn)體分泌至胞外，進(jìn)入血液循環(huán)，到達(dá)肝臟后通過糖異生作用，轉(zhuǎn)變成肝糖原或血糖，再進(jìn)行糖酵解形成丙酮酸并進(jìn)一步形成乳酸，形成乳酸循環(huán)因此缺氧可誘導(dǎo)糖酵解。12 腫瘤細(xì)胞與正常細(xì)胞相比在細(xì)胞代謝方面有哪些不同？能量代謝：腫瘤細(xì)胞以糖酵解為主，即使是有氧情況下，且惡性腫瘤較良性腫瘤顯著，糖酵解許多中間產(chǎn)物被腫瘤用來合成蛋白質(zhì)、核酸、類脂以供腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖。有氧條件下，正常細(xì)胞先通過糖酵解形成丙酮酸，隨后氧化磷酸化形成CO2與H2O并且釋放大量能量；蛋白質(zhì)代謝：腫瘤細(xì)胞較正常細(xì)胞蛋白子合成與分解代謝均增強(qiáng)，合成代謝超過分解代謝，甚至可能奪取正常蛋白分解產(chǎn)物，以合成腫瘤本身蛋白；核酸代謝：腫瘤細(xì)胞較正常細(xì)胞合