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摘要 納米晶制備、表征、熒光和共振瑞利散射光譜特性研究 分析化學(xué)專業(yè)博士研究生李太山 指導(dǎo)教師劉紹璞教授 摘要 納米材料具有體積效應(yīng)、表面效應(yīng)、量子尺寸效應(yīng)和宏觀量子隧道效應(yīng),使 它們表現(xiàn)出獨(dú)特的物理化學(xué)性質(zhì),因此在許多領(lǐng)域有著廣闊的應(yīng)用前景,成為當(dāng) 前一個(gè)熱門的、前沿性的研究領(lǐng)域。近年來納米材料在分析化學(xué)中的應(yīng)用日益增 多,其中利用它們的光譜特性而發(fā)展出的納米探針和納米光學(xué)傳感器受到人們的 關(guān)注,除了在紫外可見吸光光譜,熒光光譜分析的應(yīng)用外,在其他光譜分析中的 應(yīng)用也受到人們的重視。 共振瑞利散射( r r s ) 光譜分析是二十世紀(jì)九十年代發(fā)展起來的一種分子光 譜分析新技術(shù),它既與分子中電子在入射光電磁場(chǎng)作用下發(fā)生受迫振動(dòng)有關(guān),又 受電子能級(jí)躍遷的影響,因而它能夠?qū)ρ芯糠肿咏Y(jié)構(gòu)和形態(tài)、電荷分布、鍵合性 質(zhì)以及反應(yīng)特征等提供更豐富的信息。由于p - , r s 分析法高靈敏度和簡(jiǎn)便快速而受 到人們的關(guān)注,在納米微粒的表征和分析應(yīng)用方面也得到越來越多的研究。 本文研究了硒化鎘、硒化鎘硫化鎘、碲化鎘、碲化鎘硫化鎘、硒化亞銅納 米晶及e u 2 0 3 納米棒的合成技術(shù),優(yōu)選了合成方法,制備了一系列具有優(yōu)良光譜 性能和反應(yīng)能力的納米晶。并以多種方法( 透射電鏡、高分辨透射電鏡、x 射線 衍射、紅外光譜、吸收光譜、熒光光譜等) 對(duì)制備的納米晶的粒徑尺度、形貌和 結(jié)構(gòu)進(jìn)行了表征。研究了它們的紫外可見吸收、熒光和共振瑞利光譜特性,并研 究了這些納米材料與某些金屬離子、藥物和生物大分子的相互作用及其對(duì)熒光和 i m s 光譜的影響,探索利用納米晶做探針建立以熒光和r r s 法測(cè)定某些金屬離 二f 、藥物和生物大分子的可能性,從而為進(jìn)一步拓展納米晶做探針在分析化學(xué)中 的應(yīng)用創(chuàng)造了條件。 一、硒化鎘納米晶的制備、表征及其與某些金屬離子和藥物相互作用的熒光和r r s 兩南大學(xué)博十學(xué)位論文 暑量蔓皇皇i = , i i i ii l ll i, i i ii 皇曼皇曼寡舞苧囂 光譜研究 以檸檬酸鈉、巰基乙酸鈉、巰基琥珀酸等為包裹劑,硒粉為硒源,氯化鎘為 鎘源,水或氨水為介質(zhì),k b h 4 作為還原劑,水相合成了c d s e 納米晶。通過透射 電鏡( t e m ) 、高分辨透射電鏡( h r t e m ) 、x 射線衍射( x r d ) 等對(duì)其結(jié)構(gòu)、形貌進(jìn)行 了分析,通過熒光光譜、紫外可見光譜和r r s 光譜對(duì)其光譜性質(zhì)等進(jìn)行了研究。 并研究某些金屬離子及抗癌藥物多柔比星對(duì)c d s e 納米晶熒光和r r s 的影響。 結(jié)果表明,以巰基乙酸包裹效果最好。其中p hi i 2 及c d :s e :k b i - 1 4 :巰基乙酸 = 1 0 :0 5 :2 0 :2 5 的條件下,制備的納米晶粒徑在2 - 4n m ,納米晶顆粒清晰并具有 較強(qiáng)熒光,其最大激發(fā)和最大發(fā)射波長(zhǎng)分別為與2 7 7n m 和5 5 6n m 處,與此同時(shí) c d s e 納米晶在3 2 0n m 和5 5 9r l l n 處有兩個(gè)散射峰。 研究了c d s e 納米晶與n a ( i ) 、k ( o 、m n ( i i ) 、c u ( i i ) 、c d ( i i ) 、m g ( i i ) 、n i ( i i ) 、 z n ( i i ) 、c o ( i f ) 和c r ( i i i ) 離子在水溶液中的相互作用及其對(duì)熒光和r r s 光譜的影 響,結(jié)果表明:在水溶液中納米晶與c r ( i i i ) 的反應(yīng)產(chǎn)物可使其熒光顯著增強(qiáng),c u ( i i ) 與納米晶結(jié)合使其熒光猝滅,其余金屬離子對(duì)納米晶的熒光影響甚微,這為在水 溶液中以c d s e 納米晶做探針熒光增強(qiáng)和熒光猝滅法測(cè)定c r ( i i i ) 和c u ( i i ) 創(chuàng)造了條 件。此時(shí)對(duì)c r ( 1 1 1 ) 的檢出限為1 7n g m l ,但對(duì)測(cè)定c u ( i i ) 靈敏度不高。 c d s e 納米晶在乙醇溶液中,熒光光譜發(fā)生變化,最大發(fā)射波長(zhǎng)從5 5 6h i l l 移 動(dòng)至4 7 0r i m 。當(dāng)c d s e 納米晶與z n ( i d 、n i ( i i ) 、c r ( i i o 、c u ( i i ) 反應(yīng)時(shí),在4 0 7n i i l 附近出現(xiàn)一個(gè)新的熒光峰,該熒光峰增強(qiáng)的順序是z n ( i o 、n i ( i i ) 、c r ( i i i ) 、c u ( i i ) , 對(duì)z n ( i i ) 的檢出限是2 6 # g m l ,顯然,對(duì)于金屬離子的選擇性不如水相反應(yīng)。研 究還表明,上述離子與8 羥基喹啉形成螯合物,導(dǎo)致4 0 7n m 附近熒光猝滅。 但是,不論在水相或乙醇溶液中,c d s e 納米晶與上述金屬離子的反應(yīng),對(duì) r r s 的影響不顯著,缺乏分析應(yīng)用價(jià)值。 還研究了c d s e 納米晶與抗癌藥物多柔比星相互作用對(duì)熒光和r r s 的影響, 結(jié)果表明,納米晶與多柔比星反應(yīng)時(shí)將導(dǎo)致熒光顯著猝滅,但對(duì)r r s 的影響不大。 熒光猝滅法對(duì)于多柔比星有較高靈敏度,其檢出限為3 4n g m l 。這為以c d s e 納米 晶做探針熒光猝滅法測(cè)定多柔比星創(chuàng)造了條件。 二、硒化鎘,硫化鎘納米晶的制備、表征及其與某些金屬離子和藥物相互作用的熒 光和r r s 光譜研究 i l 捅要 | 鼉量量皇_ , , i l i l l l i a a 量皇皇曼童詈| 量曼_ 采用檸檬酸為包裹劑,硒粉為硒源,硫代乙酰胺為硫源,氯化鎘為鎘源,硼 氫化鉀為還原劑水相制各c d s e c d s 納米晶,通過t e m 、h r t e m 、x r d 等對(duì)其 結(jié)構(gòu)、形貌進(jìn)行了表征,通過熒光光譜、紫外可見光譜和r r s 光譜對(duì)其光譜性質(zhì) 進(jìn)行了研究。并研究某些金屬離子及氨基糖苷類藥物對(duì)c d s e c d s 納米晶熒光和 r r s 的影響。 結(jié)果表明,c d :s e :s :k b h 4 :檸檬酸鈉3 0 :1 0 :1 0 :2 0 :4 0 條件下,合成的 c d s e c d s 納米晶粒徑在4 1 6 5n i n ,它具有較強(qiáng)的熒光,其最大激發(fā)和最大發(fā)射 波長(zhǎng)分別位于2 3 2n n l 和6 2 0n l r l ,熒光峰的半峰寬3 9n m 。 研究了日光照射對(duì)c d s e c d s 納米晶熒光性質(zhì)的影響,結(jié)果表明隨著日光照 射時(shí)間的增加,熒光強(qiáng)度有所增強(qiáng)。納米晶溶液暴露的氣氛對(duì)熒光也有較大的影 響,發(fā)現(xiàn)有氧存在下,熒光增強(qiáng)的速度將會(huì)加快,文中還考察了溶液p h 值對(duì)熒 光的影響,發(fā)現(xiàn)p h 值對(duì)于熒光光譜特征和相對(duì)熒光強(qiáng)度均有較大的影響,其p h 值的最佳區(qū)間是8 9 5 1 1 2 之間。 研究了c d s e c d s 納米晶與c u ( i i ) 、m n ( i i ) 、h g ( i i ) 、c o ( i i ) 、c r ( i i i ) 、f c ( i i i ) 的相互作用及其對(duì)熒光的影響。結(jié)果表明,納米晶與這些金屬離子反應(yīng)時(shí),能引 起納米晶的熒光猝滅。文中考察了上述6 種離子適宜的反應(yīng)條件和影響因素,確 定了線性范圍和相關(guān)系數(shù),反應(yīng)有較高的靈敏度,對(duì)于上述離子的檢出限分別是: 0 5 3n g m l ( c u ( i i ) ) 、11 0n g m l ( m n ( i i ) ) 、3 9n g m l ( h g ( i i ) ) 、2 0n g m l ( c o ( i i ) ) 、 2 9n g m lc r ( 1 1 1 ) 、i i 6n g m l ( f e ( i i i ) ) ,因此,為以c d s e c d s 作探針測(cè)定上述離 子創(chuàng)造了條件。 與此同時(shí),還研究了c d s e c d s 納米晶與硫酸小諾霉素( m s ) 和硫酸阿米卡星 ( a s ) 等氨基糖苷類抗生素的結(jié)合作用對(duì)熒光的影響。結(jié)果表明,當(dāng)納米晶與上述 藥物結(jié)合時(shí)能促使熒光產(chǎn)生不同程度的增強(qiáng),并且在一定范圍內(nèi)使熒光增強(qiáng)與藥 物的濃度成正比,對(duì)于上述藥物的檢出限分別為1 8 7n g m l ( m s ) 、2 5 8n g m l ( a s ) , 這就使得用c d s e c d s 做探針熒光的熒光法測(cè)定上述藥物成為可能。 文中還研究了c d s e c d s 納米晶的共振瑞利散射光譜特性,散射峰位于5 5 5 n m 和2 9 8n m 處,當(dāng)它與上述金屬離子反應(yīng)時(shí),m n ( i i ) 、h 甙i i ) 、c o ( i i ) 使r r s 增強(qiáng),而c u ( i i ) 使r r s 下降,并且r r s 強(qiáng)度的變化與相應(yīng)離子的濃度在一定范 圍內(nèi)呈線性關(guān)系,只是離子的檢出限比熒光猝滅法低。但是c d s e c d s 納米晶與 i i i 兩南大學(xué)博士學(xué)位論文 m s 和a s 作用時(shí),不能引起r r s 的明顯變化,故c d s e c d s 納米晶不能用于上 述藥物的r r s 法測(cè)定。 三、碲化鎘納米晶的制備、表征及其與藥物相互作用的熒光和r r s 光譜研究 以氯化鎘、碲氫化鉀為原料,巰基乙酸鈉為包裹劑水相合成了碲化鎘納米晶, 通過透射電鏡、高分辨透射電鏡、能量色散譜、熒光光譜、紫外可見光譜、x 射 線衍射對(duì)碲化鎘納米晶進(jìn)行了表征,所合成的納米晶直徑為5 啪左右,屬立方 結(jié)構(gòu)。碲化鎘納米晶溶液在制備后放置1 9d 其熒光量子產(chǎn)率從初始的3 7 達(dá)到 9 7 ,而最大熒光發(fā)射波長(zhǎng)( 九e m ) 從5 4 3n m 移至5 1 0n n l ,藍(lán)移3 3n i n ,而且在 冰箱4 c 可穩(wěn)定至少1 0 個(gè)月。同時(shí)碲化鎘納米晶溶液也具有一定的共振瑞利散射 ( r r s ) ,其最大散射峰位于5 5 4n m 附近。研究了碲化鎘納米晶與硫酸阿米卡星和硫 酸小諾霉素的相互作用對(duì)熒光和r r s 的影響。結(jié)果表明:當(dāng)兩者反應(yīng)形成結(jié)合產(chǎn) 物時(shí),將使納米晶溶液熒光顯著猝滅并使r r s 明顯增強(qiáng),并且熒光猝滅作用和 r r s 增強(qiáng)在一定的范圍內(nèi)與藥物的濃度成正比,對(duì)于硫酸阿米卡星和硫酸小諾霉 素的檢出限分別為3 4n g m l 和2 6n g m l ( 熒光猝滅法) 及1 5 2n g m l 和1 4 0 n g m l ( r r s 法) ,方法具有高靈敏度。因此為用碲化鎘納米晶作熒光探針熒光猝滅 法和r r s 法測(cè)定氨基糖苷類藥物創(chuàng)造了條件。 四、碲化鎘硫化鎘納米晶的制備、表征與金屬離子作用及用于生物分子標(biāo)記的研 究 以氯化鎘、碲粉、硼氫化鉀為原料,巰基乙酸為包裹劑,水相合成碲化鎘 硫化鎘納米晶。通過t e m 、h r t e m 、x r d 等對(duì)其結(jié)構(gòu)、形貌進(jìn)行了表征,通過 熒光光譜、紫外可見光譜和r r s 光譜對(duì)其光譜性質(zhì)進(jìn)行了研究。研究某些金屬離 子對(duì)c d t e c d s 納米晶熒光和r r s 的影響,并將c d l e c d s 納米晶用于生物材料 的特異性標(biāo)記。 研究結(jié)果表明,在c d :t e :巰基乙酸鈉= 2 :1 :4 8 條件下,合成的c d t e c d s 納米 晶粒徑約6n m ,它具有強(qiáng)的熒光,熒光量子產(chǎn)率可達(dá)到9 8 。其最大激發(fā)和最大 發(fā)射波長(zhǎng)分別位于2 5 3n l t l 和5 1 1n m 。p h 對(duì)納米晶熒光影響較大,酸性介質(zhì)中熒 光猝滅,在p h7 0 1 1 2 之間熒光強(qiáng)而穩(wěn)定。 研究了此種納米晶與金屬離子反應(yīng)時(shí)對(duì)于熒光和r r s 的影響,結(jié)果表明 c u ( i i ) 、c o ( i i ) 、n i ( i i ) 和c r ( i i i ) 均可使熒光發(fā)生不同程度的猝滅作用,其中以 i v 捅螢 薯量量舅量i i ; _ i i ! c u ( i i ) 的猝滅作用最強(qiáng),其次是c o ( i i ) 、n i ( i i ) 和c r ( 1 1 1 ) ,在一定范圍內(nèi)熒光猝滅 值與金屬離子的濃度成正比,對(duì)于上述金屬的檢出限分別是1 0n g m l ( c u ( i i ) ) 、 1 8n g m l ( c o ( i i ) ) 、3 5n g m l ( n i ( i i ) ) 、3 4n g m l ( c r ( i i i ) ) 。并以c u ( i i ) 為例,研究 了適宜的反應(yīng)條件和共存物質(zhì)的影響,表明方法有一定的選擇性,從而為用 c d t e c d s 納米晶做探針熒光猝滅法測(cè)定上述離子,特別是c u ( i i ) 離子奠定了基 礎(chǔ)。 納米晶與c u ( ) 、c o ( i i ) 和n i ( i i ) 反應(yīng)時(shí),導(dǎo)致納米晶溶液r r s 降低,在一 定范圍內(nèi)r r s 降低值與金屬離子的濃度成正比,但是與熒光法相比。r r s 法靈敏 度較低,線性關(guān)系稍差。 將c d t e c d s 納米晶用于生物分子標(biāo)記,結(jié)果發(fā)現(xiàn),牛血清白蛋白( b s a ) 、兔 抗羊i g g 抗體和羊抗鼠i g g 三種蛋白質(zhì)均能與納米晶結(jié)合,使蛋白質(zhì)帶有綠色熒 光。c d t e c d s 納米晶和羊抗鼠i g g 結(jié)合之后,保持了二抗的活性,能與鼠抗人 i g g 抗原作用實(shí)現(xiàn)特異性識(shí)別。與羊抗鼠i g g 結(jié)合的c d t e c d s 納米晶,再用b s a 封閉納米晶表面剩余位點(diǎn),c d t e c d s 羊抗鼠i g g 能與已結(jié)合于細(xì)胞表面c k l 9 鼠抗人i g g 結(jié)合,使細(xì)胞被熒光標(biāo)記。 五、硒化亞銅和氧化銪納米材料的制備、表征及其熒光光譜研究 建立了一種室溫水相合成c u 2 s e 納米晶的新方法,以硝酸銅、硒粉和巰基乙 酸鈉為原料在氨水介質(zhì)中室溫合成了c u 2 s e 納米晶。通過透射電鏡、高分辨透射 電鏡、x 射線衍射、熒光光譜和紫外可見光譜等手段分析、表征了合成的納米晶。 c u 2 s e 呈硒銅礦結(jié)構(gòu),尺寸為長(zhǎng)2 0 4 0 n m ,寬1 0 2 0 n m 。c u 2 s e 納米晶具有較強(qiáng)的 熒光其最大激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)分別位于2 5 3n n l 和5 8 5n n l 。 建立了合成一維e u 2 0 3 納米材料的簡(jiǎn)易方法,在表面活性劑( s d s ) 作用下, 以丁醇水溶液作溶劑,六次甲基四胺做堿源合成了e u 2 0 ( c 0 3 ) 2 h 2 0 和e u 2 0 3 納 米棒。通過透射電鏡、高分辨透射電鏡、掃描電鏡、x 射線衍射等手段分析、表 征了合成的一維產(chǎn)品。e u 2 0 3 納米棒直徑為8 0 3 0 0 納米,長(zhǎng)為1 5 微米。同時(shí)討 論了納米棒的形成機(jī)理。e u 2 0 3 納米棒最大吸收波長(zhǎng)位于31 7 r i m ,發(fā)生藍(lán)移4 7 r i m , 呈現(xiàn)出明顯的量子限域效應(yīng)。e u 2 0 3 納米棒在3 2 9 n m 和6 1 7 n m 呈現(xiàn)出熒光峰。 上述兩種納米材料均有較好的熒光特性。但是因其水溶性較差而影響了它們 與金屬離子、藥物和生物大分子的反應(yīng)能力。今后將從合成方法及表面改性等方 v 西南大學(xué)博+ 學(xué)位論文 i | i i i i i i i i , ,i i i 鼉冒曼曼葛篁皇舅量量量曼邑曼曼曼曼曼量皇皇毫量鼉量量量皇罾置量置皇量皇置| 罾一 面改善其水溶性,使之能在分析化學(xué)中得到更好的應(yīng)用。 關(guān)鍵詞:納米晶,熒光特性,共振瑞利散射,金屬離子,藥物,生物標(biāo)記 a b s t r a c t s t u d yo nt h es y n t h e s e s ,c h a r a c t e r i z a t i o n s , f l u o r e s c e n c ea n dr e s o n a n c e r a y l e i g hs c a t t e r i n g s p e c t r ao ft h en a n o c r y s t a l s a n a l y t i c a lc h e m i s t r yd o c t o rp o s t g r a d u a t e :t a i s h a nl i s u p e r v i s o r :p r o f e s s o rs h a o p ul i u a b s t r a c t d u et ov o l u m ee f f e c t ,s u r f a c ee f f e c t ,q u a n t u ms i z ee f f e c ta n dm a c r o s c o p i c q u a n t u mt u n n e l i n ge f f e c t ,n a n o m a t e r i a l se x h i b i tu n i q u ep h y s i c a la n dc h e m i c a l p r o p e r t i e s t h e r e f o r e ,w i t hb r o a dp r o s p e c t sf o ra p p l i c a t i o ni nm a n yf i e l d s ,t h e yh a v e b e c o m eah o ta n da d v a n c e dr e s e a r c hr e a l m r e c e n t l y , m o r en a n o m a t e r i a l sh a v eb e e n a p p l i e d t o a n a l y t i c a lc h e m i s t r y ,i nw h i c hn a n o p r o b e sa n dn a n oo p t i c a ls e n s o r s d e v e l o p e db yu s i n gt h e i rs p e c t r a lc h a r a c t e r i s t i c sh a v ea t t r a c t e dm u c ha t t e n t i o n b e s i d e s t h ea p p l i c a t i o ni nu l t r a v i o l e t v i s i b l ea b s o r p t i o ns p e c t r aa n df l u o r e s c e n c e s p e c t r a a n a l y s i s ,o t h e rs p e c t r o s c o p i ca p p l i c a t i o n sh a v ea l s od r a w nc o n s i d e r a b l en o t i c e r e s o n a n c er a y l e i g hs c a t t e r i n g ( r r s ) i san e wa n a l y t i c a lt e c h n i q u ed e v e l o p e di n 19 9 0 s r r si sr e l a t e dt ob o t ht h ec o m p e l l e dv i b r a t i o no ft h ee l e c t r o n si nm o l e c u l ea n d t h ee l e c t r o n i c e n e r g y l e v e lt r a n s i t i o n su n d e rt h ee f f e c to ft h ei n c i d e n t l i g h t e l e c t r o m a g n e t i cf i e l d t h e r e f o r ei tc a no f f e rm o r ei n f o r m a t i o na b o u tm o l e c u l a rs t r u c t u r e a n dc o n f o r m a t i o n , c h a r g ed i s t r i b u t i o n , l i n k a g en a t u r e3 8w e l la st h er e a c t i o n c h a r a c t e r i s t i c sa n ds oo n m o r ea t t e n t i o nh a sb e e np a i dt or r sm e t h o d ,s i n c ei ti sv e r y s e n s i t i v ea n ds i m p l ei nm o n i t o r i n gs o m ei o n s ,s o m ed r u g sa n db i o m o l e c u l e s i th a sb e e n a l s oa p p l i e di nt h ec h a r a c t e r i z a t i o na n da n a l y s i so fn a n o p a r t i c l e s i nt h i st h e s i s ,t h es y n t h e t i cm e t h o d so fc a d m i u ms e l e n i d e ,c a d m i u ms e l e n i d e c a d m i u ms u l f i d e ,c a d m i u mt e l l u r i d e ,c a d m i u mt e l l u r i d e c a d m i u ms u l f i d e ,c u p r o u s s e l e n i d en a n o c r y s t a l s ( n c s ) a n de u r o p i u mo x i d en a n o r o d sw e r er e s e a r c h e d ,a n ds o m e n a n o c r y s t a l sw i t hf i n eo p t i c a lp r o p e r t i e sa n dr e a c t i v i t i e sw e r eo b t a i n e db yo p t i m i z e d s y n t h e t i cm e t h o d s t h es 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