輸血前傳染性疾病指標的臨床運用 ppt課件.pptx

術(shù)前 輸血前傳染性疾病指標的臨床運用 按照衛(wèi)生部 臨床輸血技術(shù)規(guī)范 相關(guān)規(guī)定 要求對輸血前和手術(shù)前 包括產(chǎn)前 患者進行血液傳播性疾病的血清指標檢測 即乙型肝炎病毒 丙型肝炎病毒抗體 抗HCV 人類免疫缺陷病毒 型 型 抗體 抗HIVl 2 梅毒抗體 TP 四項傳染性指標 我國2012年發(fā)布的 中國丙型病毒性肝炎醫(yī)院感染防控指南 中要求 進行外科手術(shù)及侵入性診療操作 所有涉及外科操作的內(nèi)科 內(nèi)鏡以及婦科 產(chǎn)科 牙科等的常規(guī)醫(yī)療操作 患者在進行操作前篩查丙肝病毒抗體 血液透析患者首次血液透析前應(yīng)進行丙肝病毒抗體檢測 丙肝病毒抗體陰性者在血透中建議定期 半年 進行丙型病毒性肝炎的篩查這對于避免醫(yī)源性感染 預(yù)防醫(yī)務(wù)人員的職業(yè)感染 防止出現(xiàn)醫(yī)療糾紛有積極意義 為保障廣大人民群眾的身體健康 提高人口素質(zhì) 有效控制病毒性肝炎 HBV HCV 艾滋病和梅毒等傳染性疾病的傳播 加強肝炎 艾滋和梅毒等傳染病的預(yù)防與控制工作 國家制定了 中華人民共和國傳染病防治法 艾滋病防治條例 及最新的 中國預(yù)防與控制梅毒規(guī)劃 2010 2020年 主要內(nèi)容 HBV感染與檢測HCV感染與檢測HIV感染與檢測TP感染與檢測 HBV是全球衛(wèi)生問題 約有20億人曾感染過乙肝慢性HBV感染者約有3 5億 感染率最高的區(qū)域在亞洲 非洲 乙肝全球流行分布圖 HBV感染的轉(zhuǎn)歸 慢性HBV感染 成年期感染5 10 肝硬化 肝功能衰竭 肝細胞癌 慢性乙型肝炎 5年發(fā)生率12 25 5年發(fā)生率5 15 5年發(fā)生率20 23 肝移植 嬰兒期感染85 95 急性HBV 三部曲 慢性乙型肝炎防治指南 2015年版 血清學(xué)檢測HBsAg HBsAbHBeAg HBeAbHBcAb HBcAb IgM病原學(xué)檢測HBV DNAHBV基因型和變異 指南推薦HBsAg作為HBV感染的標志物 陽性表示HBV感染 同時明確指出 血清HBsAg定量檢測可用于預(yù)測疾病進展 抗病毒療效和預(yù)后 慢性乙型肝炎治療終點 慢性乙型肝炎防治指南 2015年版 ELISA檢測HBsAg的問題 定量及溯源性 國產(chǎn)ELISA試劑為定性檢測 無法溯源到WHO國際標準 不能對病人進行動態(tài)定量監(jiān)測精密度 ELISA試劑通過批批檢的精密度要求為CV 15 實驗室實際HBsAg測定結(jié)果的批間CV一般為25 左右敏感性 目前發(fā)現(xiàn)獻血員中所發(fā)現(xiàn)的HBsAg攜帶者最低含量為0 2ng ml 國產(chǎn)ELISA試劑的敏感性水平多為0 5ng ml左右 對極低含量的HBsAg攜帶者可能出現(xiàn)漏檢 ELISA檢測HBsAg的問題 突變株 S基因發(fā)生突變可導(dǎo)致HBsAg的抗原決定簇發(fā)生改變 可影響與相應(yīng)抗體的結(jié)合 從而出現(xiàn)HBsAg假陰性結(jié)果特異性 ELISA影響因素多 采用400nm波長比色 出現(xiàn)假陽性結(jié)果的可能性較大 在弱反應(yīng)性的標本中更為常見 HBsAg化學(xué)發(fā)光定量檢測 優(yōu)秀的突變檢測能力 混合單克隆抗體 小分子標記物 儀器自動化檢測 發(fā)光物質(zhì)穩(wěn)定 精密度高 10 敏感性高 0 03 0 05IU ml 表面抗原的定量檢測是評定乙肝治療效果的顯著預(yù)測因素血清HBsAg定量與cccDNA水平有較好的相關(guān)性 判斷理想的治療終點 HBVcccDNA與HBsAg相關(guān)性 cccDNA是乙肝病毒前基因組RNA復(fù)制的原始模板 只有清除了細胞核內(nèi)的cccDNA 才能徹底消除乙肝患者病毒攜帶狀態(tài) 是抗病毒治療的目標慢乙肝患者外周血中幾乎檢測不到cccDNA血清HBsAg濃度與cccDNA相關(guān) NewinsightonhepatitisBviruspersistencefromthestudyofintrahepaticviralcccDNA JournalofHepatology Volume42 Issue3 March2005 Pages302 308 最常見的HBsAg突變位點 評估13種常見變異株 ELISA只能檢測其中的3種 高敏發(fā)光 常見突變位點全部檢出 HBsAg定量檢測 優(yōu)勢和價值 抗 HBs定性檢測 有無應(yīng)答標志 機體對乙肝病毒產(chǎn)生抵抗力的標志疫苗注射后免疫成功的標志 抗 HBs定量檢測 疫苗接種完成后1個月抗體濃度達到高峰 無應(yīng)答者 無抗體產(chǎn)生 5 加強劑量復(fù)種低應(yīng)答者 100IU L 20 無須復(fù)種 乙肝疫苗注射效果評價 定量是應(yīng)答水平評價標準 血清HBsAb定量可用于評價乙肝疫苗接種的效果 主要內(nèi)容 HBV感染與檢測HCV感染與檢測HIV感染與檢測TP感染與檢測 HCV 沉默的殺手 全球感染率2 8 中國感染率0 43 慢性化比例高達70 2004HCVaudiowebconference Dr ERSchiff MiamiUniversity Florida PersistentCase 70 CuredCase 30 HCV感染的典型血清學(xué)模式 急性HCV感染被完全治愈 急性HCV感染轉(zhuǎn)為慢性感染 急性HCV感染的兩種臨床結(jié)果 血清學(xué)模式 2015年版中國丙型肝炎防治指南推薦以抗 HCV作為HCV感染者的篩查 抗 HCV檢測的窗口期3rdgenerationHCVantibodytests 二代試劑82天 一代試劑140 150天 3代試劑70天 強生第三代 Roche Sysmex Abbott Siemens等均為第二代 化學(xué)發(fā)光與ELISA檢測敏感度比較 幾種丙肝抗體檢測的臨床應(yīng)用評價 現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)雜志 2012 本試驗中所有初篩陽性及三種方法檢測不一致標本均以HCV RNA進行確認 結(jié)果僅有1例HCV RNA為陰性 其余均為陽性 可能是由于窗口期導(dǎo)致發(fā)光法漏檢 無誤診 而兩種ELISA方法漏檢隸屬分別為14例和12例 兩例誤診 RF強陽性 較嚴重溶血 高危人群篩查 血透患者 血透患者感染丙肝屢見報道 為什么血透患者為丙肝高危人群 長期血液透析病人多為慢性腎功能衰竭病人 機體免疫力低下 免疫系統(tǒng)較難發(fā)生免疫應(yīng)答產(chǎn)生抗體 導(dǎo)致HCV抗體檢測的窗口期延長 對于血透人群只用HCV抗體篩查 會導(dǎo)致大量漏檢 增加血透病人感染風(fēng)險 丙肝血清學(xué)圖譜 核心抗原檢測 12 15天抗體檢測 70天明顯縮短窗口期 有條件建議對高風(fēng)險人群開展HCV核心抗原檢測 主要內(nèi)容 HBV感染與檢測HCV感染與檢測HIV感染與檢測TP感染與檢測 中國HIV的流行分布 截至2013年9月 聯(lián)合國艾滋病規(guī)劃署 UNAIDS 公布中國HIV感染人數(shù)850 000中國艾滋病每天死8000人 每天新患1 5萬 0 20 30 40 50 60 70 80 90 100 IgGHIV1病毒裂解產(chǎn)物敏感性特異性無IgM無HIV2 1983 85 Sensitivity 第3代 第2代 第1代 敏感性特異性 HIV 1O組 血清學(xué)檢測HIV技術(shù)的進展 HIVAg Ab聯(lián)合檢測縮短窗口期 Adaptedfrom FiebigetalAIDS 17 1871 1879 2003 感染早期 在HIV抗體產(chǎn)生之前就可以檢出HIVp24抗原 HIV抗原抗體 Ag Ab 聯(lián)檢檢出HIV感染的時間比HIV抗體檢測早3 5天 化學(xué)發(fā)光與ELISA檢測敏感度比較 CLIA ECLIA ELISA 三種不同技術(shù)原理的第4代HIV診斷試劑的臨床檢測性能比較研究中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志2013年 雅培羅氏佰樂 注 血清轉(zhuǎn)換盤來源于已經(jīng)確診HIV感染 且已知感染HIV的時間 血清轉(zhuǎn)換盤檢測結(jié)果 主要內(nèi)容 HBV感染與檢測HCV感染與檢測HIV感染與檢測TP感染與檢測 診察臨床癥狀初期硬結(jié) 硬性下疳 扁平濕疣等病原學(xué)檢查原理 一期 二期梅毒時 取硬下疳 扁平濕疣 黏膜斑等皮損部位組織液或淋巴結(jié)穿刺術(shù)得到的組織液 在暗視野顯微鏡下 光線從聚光器的邊緣斜射到涂片上的梅毒螺旋體而發(fā)出亮光 從而根據(jù)其特殊形態(tài)和運動方式進行檢測 方法 1 暗視顯微鏡檢查 2 鍍銀染色法 3 核酸檢測血清學(xué)檢查梅毒螺旋體抗體 TP 檢測法脂質(zhì)抗體檢測法 梅毒診斷方法 感染梅毒4周左右產(chǎn)生IgG型抗梅毒螺旋體抗體 即使經(jīng)足量抗梅治療 梅毒螺旋體抗原消失后很長時間 IgG抗體仍可通過記憶細胞的作用繼續(xù)產(chǎn)生 甚至終生在血清中可測出另一種具有抗體性質(zhì)的物質(zhì)叫反應(yīng)素 reagin 是梅毒螺旋體破壞人體組織過程中釋放出的一種抗原性心磷脂刺激機體所產(chǎn)生的抗體 反應(yīng)素一般在感染后5 7周 或下疳出現(xiàn)后2 3周 產(chǎn)生 經(jīng)正規(guī)治療后可逐漸消失 感染梅毒后 首先產(chǎn)生IgM型抗梅毒螺旋體抗體 感染2周后即可測出 早期梅毒抗梅治療3 9個月后或晚期梅毒治療2年后 大部分病人IgM可轉(zhuǎn)陰性 再感染時又出現(xiàn)陽性 故IgM型抗體的存在是活動性梅毒的表現(xiàn) 梅毒血清學(xué)標記物 梅毒血清學(xué)診斷流程 特異性梅毒血清學(xué)試驗 CLIA ELISA TPPA等 先進行梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗 陽性時再進行非螺旋體抗原血清學(xué)試驗 該結(jié)果解釋不適用于胎傳梅毒 神經(jīng)梅毒檢測結(jié)果陽性 臨床無癥狀和體征 否認感染史的人群 可能存在隱性感染和既往感染 少數(shù)存在非特異性抗體干擾 如老年人群 對于檢測結(jié)果陰性 承認有高危性行為的人群 建議隨訪復(fù)查 梅毒血清學(xué)檢測結(jié)果解釋 幾種梅毒螺旋體抗體檢測方法的應(yīng)用評價 檢