腫瘤免疫細(xì)胞治療臨床應(yīng)用( 流程)ppt課件.ppt

腫瘤免疫細(xì)胞治療臨床應(yīng)用 為什么要進(jìn)行腫瘤的免疫治療 細(xì)胞的免疫效應(yīng)細(xì)胞毒性T細(xì)胞 CTL 腫瘤免疫的主要途徑 通過釋放毒性物質(zhì)或促發(fā)靶細(xì)胞上的死亡受體而直接溶解靶細(xì)胞 或通過分泌IFN 間接殺傷腫瘤細(xì)胞 在機(jī)體發(fā)揮免疫監(jiān)視作用 自然殺傷細(xì)胞 NK 固有免疫的主要效應(yīng)細(xì)胞之一 機(jī)體一線防御機(jī)制的一部分 非MHC限制性 不需要對宿主或其免疫功能進(jìn)行調(diào)整適應(yīng) 作用類似于CTL 還可以分泌大量的細(xì)胞因子來調(diào)節(jié)機(jī)體免疫反應(yīng) 樹突狀細(xì)胞 DC 一類專職抗原遞呈細(xì)胞 輔佐T B細(xì)胞參與特異性殺傷腫瘤的過程 免疫逃逸機(jī)制 腫瘤發(fā)生時 通過免疫細(xì)胞治療 從根本上提升機(jī)體免疫功能 控制腫瘤進(jìn)展 免疫細(xì)胞治療 通過采集成體免疫細(xì)胞 經(jīng)過體外分離 活化 培養(yǎng)擴(kuò)增或增加靶向性后 再回輸至患者體內(nèi) 以達(dá)到殺滅機(jī)體內(nèi)腫瘤細(xì)胞 打破免疫耐受 激活和增強(qiáng)機(jī)體免疫能力的療法 我們提供的免疫細(xì)胞 靜脈 灌注 為0 9 氯化鈉注射液稀釋后的100ml細(xì)胞制劑局部注射 為未稀釋的1ml細(xì)胞制劑 細(xì)胞來源的選擇原則 MHC的遺傳限制性70年代R M 津克納澤爾等在小鼠實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn) 殺傷T細(xì)胞與靶細(xì)胞的MHC必需一致才有殺傷作用 因此又稱此現(xiàn)象為MHC限制性 MHC 主要組織相容性復(fù)合體 又稱為HLA基因復(fù)合體 定位于動物或人某對染色體的特定區(qū)域 呈高度多態(tài)性 除非同卵雙生 否則很難有MHC完全一致的個體 表達(dá)于不同細(xì)胞表面 參與抗原遞呈 制約細(xì)胞間相互識別及誘導(dǎo)免疫應(yīng)答 所有的有核細(xì)胞表面都表達(dá)MHC 類分子 MHC 類分子主要表達(dá)在APC表面 DC CTL細(xì)胞首選自體外周血來源的免疫細(xì)胞 NK的KIR 配體錯配患者自體的NK因功能失調(diào) 不能識別 殺傷腫瘤細(xì)胞 而影響臨床療效 KIR 配體錯配 致使異體NK細(xì)胞被激活 擴(kuò)增 非腫瘤組織缺乏激活NK細(xì)胞必須的配體或者這些活化性的配體在腫瘤與非腫瘤組織的表達(dá)有差異 所以異基因反應(yīng)性NK細(xì)胞可以有效殺傷腫瘤而不會傷及正常組織 臍帶血來源的優(yōu)勢低免疫原性 與患者自體來源細(xì)胞相比 不因患者自身免疫功能而影響體外分離和 或 擴(kuò)增效應(yīng)細(xì)胞的數(shù)量 DC無法體外擴(kuò)增 CIK的主要效應(yīng)細(xì)胞為CD3 CD56 具有NK非MHC限制性特點(diǎn) DC CIK細(xì)胞可根據(jù)患者情況 選擇臍帶血來源的免疫細(xì)胞 NK細(xì)胞首選異體外周血來源的免疫細(xì)胞 免疫細(xì)胞治療原則 免疫細(xì)胞治療 篩選標(biāo)準(zhǔn) 適應(yīng)癥 經(jīng)常規(guī)治療僅部分緩解的患者 經(jīng)治療后腫瘤完全消退 但存在復(fù)發(fā) 轉(zhuǎn)移風(fēng)險 應(yīng)用傳統(tǒng)治療無效的患者 生物治療的療效與殘存病灶的大小成反比 殘存病灶越小 效果越好 禁忌癥 T淋巴細(xì)胞病變所致的腫瘤 NK細(xì)胞除外 晚期 腫瘤負(fù)荷大的患者 惡病質(zhì) 因嚴(yán)重的免疫抑制 疫苗無法誘導(dǎo)有效的抗腫瘤免疫者 靶向性CTL適應(yīng)癥經(jīng)免疫組化等方法檢測活檢或手術(shù)獲得的腫瘤組織 MHC 類分子為陽性的患者 若患者無法獲得腫瘤組織 患者未至終末期或惡病質(zhì) 可考慮給予治療 但仍建議對其進(jìn)行MHC 類分子檢測 停止化療或放療后 外周血白細(xì)胞恢復(fù)至正常值或接近正常值 使用升白細(xì)胞藥物達(dá)到的正常值除外 靶向性CTL治療腫瘤抗原的篩查CEA CK19 PSA AFP PAP SCC的血清檢測值異常 患者可無需相應(yīng)的腫瘤抗原免疫組化檢測結(jié)果 直接選為目標(biāo)抗原接受靶向性CTL細(xì)胞治療 如果上述腫瘤標(biāo)志物血清檢測值正常 患者必須提供腫瘤組織的免疫組化檢測結(jié)果以提供目標(biāo)抗原靶點(diǎn) 免疫細(xì)胞臨床應(yīng)用 預(yù)處理 腫瘤患者的免疫耐受狀態(tài)會嚴(yán)重影響腫瘤特異性和非特異性細(xì)胞治療的臨床效果 通過對宿主進(jìn)行預(yù)處理 可以達(dá)到糾正免疫抑制微環(huán)境 提高細(xì)胞的免疫活性 延長細(xì)胞體內(nèi)存活時間 最終達(dá)到最佳臨床療效的目的 淋巴細(xì)胞的減少可以誘導(dǎo)機(jī)體發(fā)生自穩(wěn)增殖 誘導(dǎo) 激活新生的初始T細(xì)胞快速分泌IFN并具有殺傷活性 介導(dǎo)腫瘤排斥 自穩(wěn)增殖還可恢復(fù)無能CD8 T細(xì)胞的應(yīng)答能力 預(yù)處理后 可清除機(jī)體抑制性細(xì)胞 減少內(nèi)源性淋巴細(xì)胞對各種調(diào)節(jié)性細(xì)胞因子 如IL 2 IL 7 IL 15 IL 21等的競爭性消耗 同時降低回輸?shù)拿庖咝?yīng)細(xì)胞增殖活化的閾值 提高殺傷活性 目前備受關(guān)注的抑制性細(xì)胞亞群CD4 CD25 調(diào)節(jié)性T細(xì)胞 Tregs 髓系來源的異質(zhì)細(xì)胞 MDSCs 預(yù)處理方案非清髓性的放療 化療研究發(fā)現(xiàn) Treg細(xì)胞較為敏感的化療藥物 環(huán)磷酰胺 吉西他濱 氟達(dá)拉濱 多西紫杉醇等據(jù)相關(guān)報道顯示 MDSCs在鱗狀細(xì)胞癌 非小細(xì)胞肺癌 胸腺癌和頭頸部腫瘤患者的外周血中大量存在 吉西他濱可以下調(diào)MDSCs舒尼替尼 索坦 可以有效降低轉(zhuǎn)移性腎癌患者體內(nèi)的MDSCs數(shù)量 免疫細(xì)胞臨床應(yīng)用方案 單細(xì)胞治療方案CIK細(xì)胞治療療程 1 10 10 療程 即 10份細(xì)胞治療途徑 靜脈輸注治療方案 2份 4份 4份 1 隔日可在短時間內(nèi)迅速提升機(jī)體免疫功能 因此可作為免疫細(xì)胞治療的基礎(chǔ)治療選擇 NK細(xì)胞治療療程 5 10 9 療程 即 10份細(xì)胞治療途徑 靜脈輸注治療方案 2份 4份 4份 1 隔日作為機(jī)體天然免疫的主要效應(yīng)細(xì)胞 在此主要對MHC 類分子表達(dá)陰性的腫瘤細(xì)胞進(jìn)行識別和殺傷 亦以用于控制感染 靶向性CTL細(xì)胞 不推薦單獨(dú)應(yīng)用 治療療程 2 10 8 療程 即 5份細(xì)胞治療途徑 靜脈輸注治療方案 可選擇一次性回輸或分兩次回輸主要對MHC 類分子表達(dá)陽性的腫瘤細(xì)胞進(jìn)行殺傷 識別 靶向性細(xì)胞治療由于療程內(nèi)細(xì)胞數(shù)量相對較少 故必須在患者進(jìn)行常規(guī)治療 廣譜性治療后 機(jī)體免疫功能相對穩(wěn)定的前提下開展 最大限度的發(fā)揮治療療效 DC細(xì)胞 不推薦單獨(dú)應(yīng)用 治療療程 4 8 10 6 療程 即 4 8份細(xì)胞治療途徑 瘤體內(nèi)注射治療方案 1 2 10 6 次 1 周 4周針對有體表轉(zhuǎn)移性包塊的患者 激活自體 供體T淋巴細(xì)胞發(fā)揮抗腫瘤效應(yīng) 聯(lián)合治療方案 推薦 DC CIKCIK的效應(yīng)細(xì)胞主要是CD3 CD8 和CD3 CD56 兩種 而發(fā)揮主要功能的是CD3 CD56 可此類細(xì)胞僅占20 30 為了提高CIK的功能 激活需要抗原呈遞的CD3 CD8 細(xì)胞 可選擇DC聯(lián)合應(yīng)用 DC的應(yīng)用需放在CIK之前 NK 靶向性CTL應(yīng)用靶向性CTL對MHC 類分子陽性的靶細(xì)胞進(jìn)行識別 殺傷 應(yīng)用NK的非MHC限制性特點(diǎn) 對機(jī)體MHC 類分子陰性的細(xì)胞進(jìn)行識別 殺傷 局部 全身的治療途徑有體表轉(zhuǎn)移包塊的患者建議進(jìn)行DC局部注射 其它細(xì)胞的靜脈回輸應(yīng)用 有胸 腹腔惡性積液的患者DC局部灌注 其它細(xì)胞的靜脈回輸應(yīng)用 CIK NK CTL可進(jìn)行 療程劑量的局部腔內(nèi)灌注 靜脈回輸 IL 2的聯(lián)合應(yīng)用細(xì)胞治療的同時 推薦同時給予IL 2的治療 以調(diào)整患者的免疫功能 延長細(xì)胞在體內(nèi)的活性 提高殺傷腫瘤細(xì)胞效率 可選擇靜脈輸注的途徑 或?qū)L 2直接注入細(xì)胞懸液內(nèi) 與細(xì)胞同時回輸應(yīng)用 首次應(yīng)用時 推薦劑量為50萬單位 以觀察患者對IL 2的耐受性 若患者無明顯不良反應(yīng)或過敏反應(yīng) 第二次細(xì)胞治療起 每次回輸細(xì)胞的同時 可給予100 200萬單位IL 2 療程間隔建議至少進(jìn)行4個療程以上的細(xì)胞治療 期 期的患者 建議6個月為一周期進(jìn)行治療 期以后的患者 建議3個月為一周期進(jìn)行治療 處于病情進(jìn)展期的患者 建議2 4周即可進(jìn)行下個周期的治療 臨床治療時機(jī)的選擇 手術(shù)患者術(shù)后 切口愈合后術(shù)后患者腫瘤負(fù)荷明顯下降 有利于免疫治療療效的發(fā)揮 清除體內(nèi)殘留微小殘留病灶 預(yù)防復(fù)發(fā) 轉(zhuǎn)移 迅速提升機(jī)體免疫功能 為患者爭取下一步進(jìn)行放 化療治療的最佳時機(jī) 建議先給CIK細(xì)胞進(jìn)行廣譜性的治療 之后根據(jù)患者情況 選則搭配其它細(xì)胞治療 放療患者放療結(jié)束后或放療期間放療后可破壞腫瘤基質(zhì) 有利于免疫細(xì)胞到達(dá)腫瘤部位 放療可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞表達(dá)MHC 類分子 有利于DC細(xì)胞對抗原的識別 加工和呈遞 清除循環(huán)腫瘤細(xì)胞及放療過程中逃逸的腫瘤細(xì)胞 預(yù)防復(fù)發(fā) 轉(zhuǎn)移 化療患者可選擇在化療間歇期進(jìn)行細(xì)胞治療 如化療后5 7天的骨髓抑制期 細(xì)胞治療后約5 7天即可進(jìn)行下個周期的化療 化療后打破機(jī)體免疫耐受 下調(diào)Tregs等負(fù)調(diào)控因子 有利于免疫治療療效的發(fā)揮 可清除殘留微小病灶 預(yù)防復(fù)發(fā) 轉(zhuǎn)移 可減輕化療毒副作用 無法耐受或懼怕放化療治療的患者可選擇單獨(dú)進(jìn)行細(xì)胞治療 清除腫瘤細(xì)胞 控制病情進(jìn)展 改善機(jī)體免疫功能后 根據(jù)患者情況 可嘗試進(jìn)行放化療治療 失去手術(shù) 放療 化療治療機(jī)會的晚期患者可選擇單獨(dú)進(jìn)行細(xì)胞治療 提升機(jī)體免疫功能 提高患者生活質(zhì)量 清除腫瘤細(xì)胞 控制病情進(jìn)展 療效評估 主要評價指標(biāo) 完全緩解 CR 部分緩解 PR 穩(wěn)定 SD 進(jìn)展 PD 總生存期 OS 無進(jìn)展生存期 PFS 治療失敗時間 TTF 次要評價指標(biāo) KPS QOL腫瘤相關(guān)抗原檢測 CEA AFP PSA CK19等細(xì)胞免疫功能檢測 T細(xì)胞亞群 CD3 CD4 CD8 Treg CD4 CD25 high CD4 CD25high FOXP3 CIK CD3 CD56 NK CD3 CD56 細(xì)胞因子檢測 如 TNF IFN 細(xì)胞治療注意事項(xiàng) 細(xì)胞為冷鏈運(yùn)輸 應(yīng)用前需先復(fù)溫至37 治療前將細(xì)胞制劑輕微搖勻 避免劇烈震蕩 細(xì)胞有抱團(tuán)的特性 故可能出現(xiàn)微小絮狀物 成團(tuán)細(xì)胞 可通過微彈 等方式使其散開 靜脈治療需應(yīng)用輸血器 治療前后需要0 9 氯化鈉注射液沖管 輸注時 先以20 30滴 分的滴速緩慢靜滴10 15分鐘 觀察患者無不適后 可以80 90滴 分的滴速進(jìn)行治療 建議每份細(xì)胞在30分鐘內(nèi)輸注完 細(xì)胞袋在治療后需低溫保存24h 一旦出現(xiàn)不良反應(yīng) 應(yīng)及時將留存的細(xì)胞袋送至實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行相關(guān)檢測 外周血采集注意事項(xiàng) 通知實(shí)驗(yàn)室人員準(zhǔn)備采血袋 肝素鈉抗凝管 采血前4h內(nèi)不宜吃富含高蛋白質(zhì)和脂肪的食物 可飲糖水或僅用少量清淡飲食 以免血中含有致敏物質(zhì) 采集時不輸液 患者外周血白細(xì)胞數(shù)量 4 10 9 L 采集的外周血標(biāo)本需放置在2 8 下進(jìn)行保存 避免震蕩 12小內(nèi)由實(shí)驗(yàn)室專人進(jìn)行運(yùn)送 采集量 CIK DC 80 100mlNK 50ml靶向性CTL 80 150ml 臨床典型病例 右肺門占位伴腰椎轉(zhuǎn)移 右上肺肺不張 胸悶 心悸 伴咳嗽 咳痰 痰中帶血 腰痛 無法長時間坐立 未行放療 化療治療 病情進(jìn)行性加重 CIK細(xì)胞治療后 胸悶 腰痛較前逐步減輕 坐位時間較前延長 治療后25天復(fù)查CT如左圖示 肺癌晚期 靜脈輸注 肺癌骨轉(zhuǎn)移 靜脈輸注 病情介紹 患者男 77歲 左肺腺癌放化療后 病情較穩(wěn)定 無明顯臨床不適癥狀 查CEA11 8ng ml 略高 后給予 伊利替康 奧沙利鉑 方案化療2個周期 復(fù)查CEA較前無變化 治療 給予臍帶血CIK細(xì)胞治療3個療程 治療后 復(fù)查CEA5 9ng ml 較前明顯下降 臨近正常范圍 左肺鱗癌 靜脈輸注 病情介紹 因 咳嗽 咳痰4月余 入院 胸部CT提示 左肺門占位 病例學(xué)診斷 腺癌 先后給予全身化療3個療程 治療前患者一般情況可 無明顯不適 但影像學(xué)檢查未見明顯變化 治療 給予臍帶血CIK細(xì)胞治療1個療程 治療后 治療后2周復(fù)查胸部CT提示病情較前好轉(zhuǎn) 結(jié)合主管醫(yī)生意見考慮與CIK細(xì)胞治療相關(guān) 治療前 治療后 原發(fā)性肝癌 靜脈輸注 病情介紹 患者男 61歲 慢性乙肝20余年 因 納差 乏力 入院 入院時腹部CT及MRT均顯示 肝內(nèi)多發(fā)結(jié)節(jié)影 呈彌散分布于全肝 AFP持續(xù)升高 肝功能顯示A G一直保持在0 5 給予阿德福韋酯及保肝治療 AFP無明顯下降 A G無改善 治療 給予臍血CIK細(xì)胞治療2療程 治療后 各項(xiàng)指標(biāo)明顯好轉(zhuǎn) 3月后恢復(fù)正常至今 MRT復(fù)查顯示 肝內(nèi)占位較前明顯縮小 AFP恢復(fù)正常 治療前后對比 卵巢癌肝轉(zhuǎn)移 靜脈輸注 病情介紹 患者女 48歲 診斷 右側(cè) 卵巢癌并肝內(nèi)多發(fā)轉(zhuǎn)移 CA1251132U 給予 紫杉醇 卡鉑 化療5個周期 化療后復(fù)查CT提示肝內(nèi)病灶較前縮小 余較前無明顯變化 CA1252223 7U ml 較前明顯升高 臨床癥狀反復(fù) 后患者拒絕繼續(xù)化療 治療 給予臍帶血CIK細(xì)胞治療1個療程 治療后 患者腹痛 乏力較前明顯減輕 進(jìn)食量均較前增加 復(fù)查CA12523 4U ml 降至正常 轉(zhuǎn)移性惡性黑色素瘤 靜脈 局部 病情介紹 患者女 84歲 因 食管癌胃造瘺術(shù)后7月余 入院 曾先后給予3個療程單藥化療 效果欠佳 病情進(jìn)行性加重 先后出現(xiàn)進(jìn)食困難 多發(fā)轉(zhuǎn)移及食管氣管瘺 為解決進(jìn)食問題 給予胃造瘺術(shù) 后因患者體質(zhì)差 無法耐受化療 故給予 替吉奧 口服化療 并配合臍帶血來源CIK細(xì)胞治療控制病情 入院時患者病情穩(wěn)定 一般情況尚可 KPS評分70分 查體 左頸部4 2x2 5cm淋巴結(jié) 質(zhì)硬 無壓痛 活動差 入院后針對針對左頸部包塊行射頻消融術(shù) 效果差 且包塊較前增大 食管癌多發(fā)轉(zhuǎn)移 靜脈 局部 治療 給予CIK細(xì)胞治療1療程 DC細(xì)胞靜脈輸注1次 DC細(xì)胞頸部包塊內(nèi)注射3次 治療后 患者左頸部包塊較前縮小約1cm左右 該患者先后共給予CIK細(xì)胞治療9個療程 訴每次治療后均明顯感覺生活質(zhì)量較前提升 精神狀態(tài)較前明顯好轉(zhuǎn) 肺癌伴胸腔積液 靜脈 灌注 治療前 患者女 75歲 2014 2 12確診 胸腺鱗癌并右側(cè)胸腔積液 右肺轉(zhuǎn)移 給予CIK細(xì)胞靜脈輸注 胸腔內(nèi)灌注3療程 3 1010 治療后胸水明顯減少 胸痛較前減輕 卵巢癌晚期 靜脈 灌注 病情介紹 因 腹痛 腹脹 納差1個月 入院 完善檢