衛(wèi)生化學(xué)試題及總結(jié).doc

1. 吸光度：吸光物質(zhì)對(duì)光的吸收程度的度量2. 朗伯比爾定律：在一定條件下，物質(zhì)的吸光度與溶液的濃度和液層厚度的乘積成正比。A=abc，3. 熒光光譜：固定激發(fā)4. 共振線：包括共振吸收線和共振發(fā)射線，指原子外層電子從基態(tài)躍遷至第一激發(fā)態(tài)所吸收的譜線或是從第一激發(fā)態(tài)直接躍遷至基態(tài)所輻射的譜線5. 原子吸收光譜： 處于基態(tài)的氣態(tài)原子吸收一定的電磁輻射從基態(tài)躍遷至激發(fā)態(tài)產(chǎn)生的光譜6. 指示電極：電極電位隨待測(cè)離子活度（濃度）變化而變化，并且二者之間關(guān)系符合能斯特方程。7. 保留時(shí)間：從進(jìn)樣開(kāi)始組分濃度出現(xiàn)最大值（色譜峰最高點(diǎn)）所需要的時(shí)間8. 分離度：又稱分辨率，以相鄰兩組分色譜峰保留值之差與其平均峰寬值之比表示填空題1. 隨機(jī)誤差服從(正態(tài)分布)規(guī)律2. 樣品采集的原則可以概括為（典型性，適時(shí)性，代表性）3. 溶解法是將待測(cè)組分溶解于溶劑中，適用于被測(cè)組分為（分離）狀態(tài)、（易溶于）適當(dāng)溶劑的樣品4. 原子吸收光譜法中原子化法可分（火焰法）和（石墨爐法）兩大類5. 在原子吸收分光光度法中，最常用的光源是（空心陰極燈）和（無(wú)極放電燈）6. 電解池是將（電能）轉(zhuǎn)變?yōu)椋ɑ瘜W(xué)能）裝置7. 以測(cè)量電解質(zhì)溶液電導(dǎo)為基礎(chǔ)的分析方法稱為-（電導(dǎo)分析法）8. 依據(jù)所用固定相的狀態(tài)，氣相色譜分為（氣-固）色譜和（氣-液）色譜9. 不被固相吸附或溶解的氣體（如空氣，甲烷），從進(jìn)樣開(kāi)始到柱后出現(xiàn)濃度最大值所需的時(shí)間稱為（保留時(shí)間）10. 在定量工作曲線范圍內(nèi)，進(jìn)樣量越大，則峰面積（越大）11. 液相色譜分析系統(tǒng)包括-（高壓輸液）系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、（分離）系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)和記錄系統(tǒng)五部分。12. 在一定溫度和壓力下，組分在固定相（s）和流動(dòng)相（m）間達(dá)到平衡時(shí)的濃度之比稱為（分配系數(shù)k）第一章 緒論一、分析方法的分類1. 按分析任務(wù)分類定性分析（qualitative analysis）：含何種元素、何種官能團(tuán)定量分析（quantitative analysis） ：測(cè)定組分的相對(duì)含量結(jié)構(gòu)分析（structure analysis） ： 形態(tài)分析、立體結(jié)構(gòu)、結(jié)構(gòu)與活性2. 按分析對(duì)象分類：無(wú)機(jī)分析和有機(jī)分析 3. 按待測(cè)組分含量分：常量、微量、痕量、超痕量4. 按分析手段分類化學(xué)分析：以物質(zhì)的化學(xué)反應(yīng)及其計(jì)量關(guān)系為基礎(chǔ)的分析方法，包括：重量分析和容量分析 儀器分析：以物質(zhì)的物理性質(zhì)和物理化學(xué)性質(zhì)為基礎(chǔ)的分析方法，需要較特殊的儀器，通常稱為儀器分析，包括電化學(xué)分析、光化學(xué)分析、色譜分析、其它儀器分析方法5. 按分析目的分類常規(guī)分析：例行分析，日常分析仲裁分析：權(quán)威機(jī)構(gòu)、法定分析，具法律效力：司法鑒定等1、衛(wèi)生化學(xué)：是以分析化學(xué)為基礎(chǔ)，研究預(yù)防醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中與健康有關(guān)的物質(zhì)的質(zhì)、量及其變化規(guī)律的一門學(xué)科2、衛(wèi)生化學(xué)應(yīng)用領(lǐng)域：食品衛(wèi)生，營(yíng)養(yǎng)衛(wèi)生，環(huán)境衛(wèi)生，勞動(dòng)衛(wèi)生3、衛(wèi)生化學(xué)所包括的主要內(nèi)容：1) 樣品采集、保存與處理2) 誤差分析、數(shù)據(jù)處理和質(zhì)量保證3) 常用儀器分析方法的基本原理和基本操作(一)一、 準(zhǔn)確度和精確度分析結(jié)果準(zhǔn)確可靠的衡量指標(biāo)(一) 準(zhǔn)確度結(jié)果與真實(shí)值的接近程度（絕對(duì)誤差E和相對(duì)誤差RE）(二) 精密度幾次測(cè)定結(jié)果相互接近程度用偏差來(lái)衡量絕對(duì)偏差，平均偏差，相對(duì)平均偏差，標(biāo)準(zhǔn)偏差，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD是表示和評(píng)價(jià)精密度最靈敏、最常用的指標(biāo)衛(wèi)生分析要求RSD10%二、 分析數(shù)據(jù)處理1、 有效數(shù)字“四舍六入五留雙”2、 可疑數(shù)據(jù)（即離群值）的取舍，常用：Q檢驗(yàn)法（3-10次測(cè)定）和G檢驗(yàn)法（多次）3、 平均值的置信區(qū)間：置信區(qū)間：分析結(jié)果真實(shí)值所在的范圍 置信度（P）：真實(shí)值在置信區(qū)間中出現(xiàn)的幾率4、 分析數(shù)據(jù)的顯著性檢驗(yàn)：檢驗(yàn)是否存在統(tǒng)計(jì)上的顯著性差異，即有誤系統(tǒng)誤差存在方法：t檢驗(yàn)法和F檢驗(yàn)法t檢驗(yàn)法分：平均值與標(biāo)準(zhǔn)值（）的比較和兩組數(shù)據(jù)的平均值比較（同一試樣）F檢驗(yàn)法：檢驗(yàn)兩組測(cè)定數(shù)據(jù)的精密度三、 分析工作的質(zhì)量保證分為質(zhì)量控制和質(zhì)量分析 2種1、 質(zhì)量控制：指使測(cè)量質(zhì)量達(dá)到預(yù)期要求需采取的措施，包括人員素質(zhì)、實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備條件、環(huán)境條件和實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)管理制度等。評(píng)價(jià)主要指標(biāo)：準(zhǔn)確度；精密度；靈敏度；工作曲線的線性范圍；穩(wěn)定性 5種1）準(zhǔn)確度：a）用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)評(píng)價(jià)：相同條件，檢驗(yàn)一致性 95%，n=46 b）加標(biāo)回收率評(píng)價(jià)：越接近100%越好 衛(wèi)生分析要求：回收率85%105% c）與標(biāo)準(zhǔn)方法對(duì)照評(píng)價(jià)：檢驗(yàn)其顯著性（t檢驗(yàn)） 2）精密度：驗(yàn)檢隨機(jī)誤差的大小衛(wèi)生分析要求RSD0.999，否則準(zhǔn)確度受影響c）分析工作的精密度和準(zhǔn)確度；（加標(biāo)回收率；RSD） d）儀器誤差和操作誤差的檢驗(yàn)不同儀器比較和不同人員比較結(jié)果 2）實(shí)驗(yàn)室間：a）分析方法檢出限、精密度、準(zhǔn)確度 b）制定允許誤差標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) c）實(shí)驗(yàn)室誤差測(cè)定RE 3）其他方法：a）雙樣品法：隨機(jī)標(biāo)準(zhǔn)偏差振動(dòng)能級(jí)轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)2）能級(jí)躍遷：紫外-可見(jiàn)光譜屬于電子躍遷光譜。三個(gè)能級(jí)之間均有躍遷寬譜帶3）吸收曲線規(guī)律：a、同一種物質(zhì)不同波長(zhǎng)光的吸光度不同。吸光度最大波長(zhǎng)為最大吸收波長(zhǎng)maxb、不同濃度同一物質(zhì)，吸收曲線形狀相似max不變c、吸收光譜（吸收曲線）可以提供物質(zhì)的結(jié)構(gòu)信息，作為物質(zhì)定性分析的依據(jù)之一d、不同濃度同一物質(zhì)，某一波長(zhǎng)下吸光度A 有差異，max處吸光度A 的差異最大物質(zhì)定量分析的依據(jù)e在max處吸光度隨濃度變化幅度最大，所以測(cè)定最靈敏。吸收曲線是定量分析中選擇入射光波長(zhǎng)的重要依據(jù) 4）電子能級(jí)和躍遷： 5）生色團(tuán)（和助色團(tuán)）是分子產(chǎn)生紫外-可見(jiàn)吸收的條件及其應(yīng)用： a、紅移：吸收峰位置向長(zhǎng)波方向的移動(dòng) b、藍(lán)移：吸收峰位置向短波方向移 c、增色效應(yīng)：吸收強(qiáng)度增強(qiáng)的效應(yīng) d、減色效應(yīng)：吸收強(qiáng)度減小的效應(yīng)3、影響紫外-可見(jiàn)吸收光譜的因素 1）共軛效應(yīng)：p電子共軛體系增大，lmax紅移，e max增大；空間阻礙破壞共軛體系，lmax藍(lán)移，e max減小2）取代基：給電子基未共用電子對(duì)流動(dòng)性大，形成p-p 共軛，降低能量，lmax紅移 吸電子基的存在產(chǎn)生p電子的永久性轉(zhuǎn)移，lmax紅移。 給電子基與吸電子基同時(shí)存在，產(chǎn)生分子內(nèi)電荷轉(zhuǎn)移吸收，lmax紅移，e max增加。 3)溶劑影響：溶劑極性增大pp*躍遷波長(zhǎng)紅移；np*躍遷波長(zhǎng)藍(lán)移吸收光譜的產(chǎn)生 1、分子含有生色團(tuán)和助色團(tuán)2、吸收紫外可見(jiàn)光并伴隨電子能級(jí)躍遷 3、不同官能團(tuán)吸收不同波長(zhǎng)的光 4、作波長(zhǎng)掃描，記錄吸光度對(duì)波長(zhǎng)的變化曲線，得到該物質(zhì)的紫外-可見(jiàn)吸收光譜二、紫外-可見(jiàn)分光光度法的定量基礎(chǔ)吸收定律1、朗伯-比爾定律：在一定條件下，物質(zhì)的吸光度與溶液的濃度和液層厚度的乘積成正比。A=abc，有關(guān)理解如下： 是吸光光度法的理論基礎(chǔ)和定量測(cè)定的依據(jù)。應(yīng)用于各種光度法的吸收測(cè)量； 吸光系數(shù)a(Lg-1cm-1）相當(dāng)于濃度為1 gL-1、液層厚度為1cm時(shí)該溶液在某一波長(zhǎng)下的吸光度； 吸光系數(shù)a是吸收物質(zhì)在一定波長(zhǎng)和溶劑條件下的特征常數(shù)； 吸光系數(shù)a不隨濃度c和光程長(zhǎng)度b的改變而改變。在溫度和波長(zhǎng)等條件一定時(shí)，僅與吸收物質(zhì)本身的性質(zhì)有關(guān)，與待測(cè)物濃度無(wú)關(guān)； 吸光系數(shù)可作為定性鑒定的參數(shù) max表明了該物質(zhì)最大限度的吸光能力，也反映了光度法測(cè)定該物質(zhì)可能達(dá)到的最大靈敏度。越大吸光能力越強(qiáng)，方法的靈敏度越高 105：超高靈敏；=(610）104 ：高靈敏；2104 ：低靈敏偏離定律的原因與改進(jìn)1、物理因素:難以獲得真正的純單色光，非單色光影響選擇合適的單色器，并將入射波長(zhǎng)選定在待測(cè)物質(zhì)的最大吸收波長(zhǎng)且吸收曲線較平坦處。 雜散光影響造成負(fù)偏離2、化學(xué)因素：溶液濃度過(guò)高；溶液均勻性差（如膠體溶液，乳濁溶液或懸溶液）；質(zhì)點(diǎn)間存在相互作用（如發(fā)生離解，締合，配位或配合物組成變化等）只適用于稀溶液（c富燃貧燃2) 石墨爐（無(wú)焰）原子化器：分為四步a) 干燥：蒸發(fā)出去溶劑，用稍高于溶劑的沸點(diǎn)b) 灰化：除去易揮發(fā)的基體和有機(jī)物，減少分子吸收，盡量選較高的灰化溫度，以減少灰化時(shí)間c) 原子化：使待測(cè)元素成為基態(tài)原子，溫度1800-3000k，停掉載氣，延長(zhǎng)基態(tài)原子的石墨管中提留時(shí)間，提高分析靈敏度d) 凈化：高溫除去管內(nèi)殘?jiān)?、分光系統(tǒng)：由色散原件，反射鏡，狹縫等組成，作用：分出被測(cè)元素共振線4、檢測(cè)系統(tǒng)：5、顯示系統(tǒng)四、定量分析方法：標(biāo)準(zhǔn)曲線法，標(biāo)準(zhǔn)加入法，內(nèi)標(biāo)法五、定量分析方法評(píng)價(jià)：靈敏度和檢出限六、干擾及其抑制方法：干擾類型有：光譜，電離，化學(xué)，物理，背景干擾電位分析法一、 概念與原理：(一) 電化學(xué)分析法：是將兩支電極插入被測(cè)溶液中，組成一個(gè)化學(xué)電池，通過(guò)測(cè)量該電池的電學(xué)參數(shù)或參數(shù)的變化，確定被測(cè)組分的濃度1. 電位分析法：是通過(guò)測(cè)量被測(cè)溶液組成的化學(xué)電池的電池電動(dòng)勢(shì)來(lái)求得被測(cè)組分的濃度2. 庫(kù)侖分析法：是以測(cè)量通過(guò)電解池的電量球的被測(cè)組分含量的方法(二) 化學(xué)電池：實(shí)現(xiàn)化學(xué)能和電能相互轉(zhuǎn)化的裝置，有兩種：1. 原電池：能自發(fā)地將化學(xué)能轉(zhuǎn)變?yōu)殡娔艿难b置2. 電解池：需要消耗外電源電能，將其轉(zhuǎn)變?yōu)榛瘜W(xué)能的裝置氧化反應(yīng)失去電子還原態(tài)陽(yáng)極還原反應(yīng)得到電子氧化態(tài)陰極負(fù)極電位低正極電位高(三) 電池電動(dòng)勢(shì)與電極電位1. 電池電動(dòng)勢(shì)：電池兩端的電勢(shì)差2. 電極電位測(cè)量：無(wú)法測(cè)定單個(gè)電極的電極電位，只能測(cè)相對(duì)電極電位，利用標(biāo)準(zhǔn)電極電位（在25，參與反應(yīng)的所有物質(zhì)的活度都等于1mol/L時(shí)的電極電位）常用有標(biāo)準(zhǔn)氫電極，并得出參比電極（屬于二次標(biāo)準(zhǔn)電極）二、 能斯特方程：表示電極電位與組成電極的物質(zhì)及其活度、溫度之間的關(guān)系任一電極：氧化態(tài)(Ox)+ne 還原態(tài)（Red）能斯特方程：25時(shí)（T273K25K） 所以：電極電位的大小有電極的本質(zhì)及參與電極反應(yīng)的物質(zhì)的氧化態(tài)和還原態(tài)的活度決定三、 液接電位和鹽橋1. 在兩種不同離子的溶液或兩種不同濃度的溶液接觸界面上，存在著微笑的電位差，此為液接電位，大小一般不超過(guò)0.03v消除方法：使用鹽橋2. 鹽橋：連接和“隔離”不同電解質(zhì)的置，經(jīng)典為u型，充以用瓊脂固定kcl飽和溶液鹽橋的作用：構(gòu)成原電池的通路維持溶液的電中性消除液體接界電位四、 電位分析法：(一) 原理：兩個(gè)電極組成一個(gè)原電池測(cè)定該電池電動(dòng)勢(shì)利用指示電極和參比電極1. 參比電極：在溫度、壓力一定條件下，其電極電位準(zhǔn)確已知，且不隨待測(cè)溶液中離子濃度的變化而改變的電極常用甘汞電極和銀/氯化銀電極2. 指示電極：電極電位隨待測(cè)離子活度或濃度的變化而變化，并且二者之間的關(guān)系符合能斯特方程常有：基于電子轉(zhuǎn)移的氧化還原電極（如銅電極，鋅電極等）和基于離子交換的離子選擇性電極，即膜電極（普遍應(yīng)用，）(二) 離子選擇性電極：主要有：ph玻璃電極，氟離子選擇性電極，流動(dòng)載體膜電極，氣敏電極四種1、 離子選擇性電極的性能評(píng)價(jià)：線性范圍、檢測(cè)下限、電極斜率、選擇性、響應(yīng)時(shí)間和電極壽命等。2、 檢測(cè)下限：電極能夠定性檢測(cè)出的最小濃度3、 電極斜率：指在響應(yīng)曲線的線性范圍內(nèi)，待測(cè)離子濃度每變化10倍，所引起的電極電位的變化值電位法多用于低價(jià)離子測(cè)定：因?yàn)槔碚撋想姌O斜率S=2.303 RT/nF，當(dāng)離子電荷數(shù)越大，級(jí)差越小，測(cè)定靈敏度也越低，所以一般用于測(cè)定低價(jià)離子 4、 選擇性系數(shù)Ki，j 能產(chǎn)生相同電位時(shí)待測(cè)離子i與干擾離子j 的活度比:表示其他共存離子j對(duì)響應(yīng)離子i的干擾程度，K越小，表示干擾越小，選擇性越高選擇性系數(shù)K的意義：a) 可以判斷電極對(duì)測(cè)量體系的適應(yīng)性，粗略地估計(jì)干擾離子帶來(lái)的誤差b) 作為選擇適當(dāng)?shù)碾x子強(qiáng)度調(diào)節(jié)劑的參考c) 作為試樣預(yù)處理是選用試劑的參考5、 響應(yīng)時(shí)間：指參比電極與離子選擇電極一起接觸到試液起直到電極電位值達(dá)到穩(wěn)定值的95%所需的時(shí)間影響因素：a) 膜的性質(zhì)b) 離子濃度及濃度改變方向：濃度越高，越短，稀溶液向濃溶液進(jìn)行，短c) 離子到達(dá)電極的表面速度：攪拌可縮短時(shí)間d) 試液中離子強(qiáng)度：存在大量不干擾離子時(shí)，能縮短e) 試液中共存的干擾離子：干擾越多，時(shí)間延長(zhǎng)f) 試液溫度：溫度升高，時(shí)間縮短五、 電位分析方法：直接電位分析法；電位滴定法(一) 直接電位分析法：標(biāo)準(zhǔn)曲線法；比較法，溶液的ph測(cè)定；校準(zhǔn)加入法（內(nèi)標(biāo)法）1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線法：用一系列已知濃度測(cè)定電動(dòng)勢(shì)，繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，再用測(cè)得電動(dòng)勢(shì)在曲線中得出待測(cè)濃度大批量測(cè)定2. 比較法：已知濃度測(cè)電動(dòng)勢(shì)，再測(cè)待測(cè)濃度電動(dòng)勢(shì)，兩式相減3. 溶液ph測(cè)定：ph=-lgH+，兩式相減，同比較法4. 標(biāo)準(zhǔn)加入法：先測(cè)體積Vx，濃度Cx待測(cè)溶液電位值Ex，再測(cè)在待測(cè)溶液中加入體積Vs，濃度Cs標(biāo)準(zhǔn)溶液的電位值Es，兩式相減，簡(jiǎn)化得： 濃度增量為：c = cs Vs / V0(二) 電位滴定法：在試液滴加滴定劑，發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，檢測(cè)電動(dòng)勢(shì)變化，滴定突躍式滴定劑體積和濃度，計(jì)算待測(cè)組分含量。色譜分析法概論一、 色譜法：利用混合物各組分在固定相和流動(dòng)相間的相互作用（吸附、分配、離子交換、親和力、分子尺寸）不同，使固定相對(duì)組分的保留作用不同，當(dāng)兩相作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí)，不同組分產(chǎn)生反復(fù)多次的差速遷移而進(jìn)行分離的方法。二、 色譜法分類 (一) 按兩相的聚集狀態(tài)：1. 流動(dòng)相狀態(tài)：分為3類1) 液相色譜法2) 氣相色譜法3) 超臨界流體色譜法2. 固定相狀態(tài)：兩大類1) 液相色譜法：液-固色譜法；液-液色譜法2) 氣相色譜法：氣-固色譜法；氣-液色譜法(二) 按操作形式：兩大類1. 柱色譜法（固定相裝于柱子中）：填充柱色譜法；毛細(xì)柱色譜法2. 平面色譜法（固定相呈平面狀）：薄層色譜法；紙色譜法(三) 按分離原理：1. 吸附色譜法組分與吸附劑吸附能力強(qiáng)弱不同，包括氣固和液固2. 分配色譜法組分在固定液中的溶解度不同，包括氣液和液液3. 離子交換色譜組分與離子交換劑的交換能力大小不同4. 尺寸排阻色譜分子尺寸大小不同在多孔固定相中的選擇滲透5. 親和色譜法組分與固定相的高專屬性親和力，三、 氣相色譜常用術(shù)語(yǔ)：(一) 色譜圖：在氣相色譜分析中，柱后流出物流經(jīng)檢測(cè)器是，載氣中各組分的量所產(chǎn)生的信號(hào)對(duì)時(shí)間的曲線1. 基線：在操作條件下，僅有流動(dòng)相流過(guò)色譜柱時(shí)的流出曲線2. 保留值定性分析的指標(biāo)1) 保留時(shí)間tR：從進(jìn)樣到組分濃度出現(xiàn)最大值（色譜峰最高點(diǎn)）所需時(shí)間2) 死時(shí)間tM(t0 ): 不被固定相滯留組分的保留時(shí)間，即流動(dòng)相流過(guò)色譜柱所需要的時(shí)間3) 調(diào)整保留時(shí)間 ：扣除死時(shí)間的保留時(shí)間，即組分在固定相中滯留的時(shí)間4) 保留體積：組分從進(jìn)樣到出現(xiàn)信號(hào)最大值所需要流過(guò)流動(dòng)相的體積5) 死體積：不被固定相滯留組分的保留體積6) 調(diào)整保留體積：組分保留體積與死體積之比7) 相對(duì)保留值：在相同操作條件下，組分i的調(diào)整保留值與組分s的調(diào)整保留值之比，表示色譜柱（固定相）對(duì)不同組分的選擇性，當(dāng) ri,s1時(shí)，色譜柱對(duì)組分有選擇性3. 峰高和峰面積定量參數(shù)1) 峰面積：峰與峰底之間的面積2) 峰高：色譜峰最高點(diǎn)至峰底之間距離4. 區(qū)域?qū)挾扔糜诤饬可V柱效能1) 峰寬：即基底寬度，色譜峰兩側(cè)拐點(diǎn)出的切線在基線上截取的距離，Wb，2) 半峰寬：峰高一半處的峰寬，W1/2，3) 標(biāo)準(zhǔn)偏差正態(tài)分布色譜峰上兩拐點(diǎn)間距離的一半，或是0.607倍峰高處峰寬的一半，用 表示色譜柱后流出組分的分散程度程度；越小，峰窄，柱效高4) 上三者關(guān)系： 5. 分配系數(shù)：一定溫度、壓力條件下，組分在兩相中達(dá)到分配平衡是，固定相中組分濃度與流動(dòng)相中組分濃度之比6. 分配比：又稱容量因子：表示一定溫度、壓力下，兩相平衡是，固相中組分質(zhì)量與流動(dòng)相中組分質(zhì)量之比，質(zhì)量之比，實(shí)際等于滯留在兩相中時(shí)間之比或相應(yīng)體積之比，值越大，固定相對(duì)組分滯留作用越大，色譜柱容量越大四、 基本理論：塔板理論與速率理論(一) 塔板理論：四個(gè)基本假設(shè)：1. 色譜柱由若干個(gè)小段組成，每一段稱為一個(gè)理論塔板，塔板的段長(zhǎng)稱為理論塔板的高度H2. 塔板中，下層是固定相，上層充滿流動(dòng)相，該空間稱為板體積（V），載氣脈沖式進(jìn)入色譜柱，每次進(jìn)氣一個(gè)V，3. 組分在各塔板內(nèi)的兩相之間迅速達(dá)到分配平衡，分配系數(shù)恒定不變，與組分濃度無(wú)關(guān)，4. 開(kāi)始時(shí)，試樣組分全部加在第1塊塔板上，試樣沿色譜柱方向的縱向擴(kuò)散忽略不計(jì)(二) 柱效能指標(biāo)：理論塔板數(shù)n，理論塔板高度H，有效塔板數(shù)neff三個(gè)指標(biāo)來(lái)反映色譜柱對(duì)組分的分離效能(三) 塔板理論的貢獻(xiàn)：1. 較好地解釋了色譜峰形的正態(tài)分布規(guī)律2. 提出了評(píng)價(jià)柱效能指標(biāo)：n和H(四) 塔板理論的不足1. 沒(méi)有考慮動(dòng)力學(xué)因素對(duì)色譜過(guò)程的影響，不能解釋載氣流速u對(duì)理論塔板數(shù)n的影響2. 不能回答色譜峰為什么發(fā)生變形3. 不能說(shuō)明塔板高度受什么因素影響(五) 速率理論：Van Deemter 方程H=A+B/u+Cu A，B，C為常數(shù)，u為載氣的平均線速度1. 渦流擴(kuò)散項(xiàng)A：產(chǎn)生原因：隨載氣一起流動(dòng)的組分由于固定相的阻礙而改變運(yùn)動(dòng)方向，形成“渦流”，導(dǎo)致不同的組分分子在柱中走過(guò)的路程長(zhǎng)短不一致，引起峰形的擴(kuò)張與填充物的平均顆粒直徑大小及填充不均勻性有關(guān)，與載氣性質(zhì)，線速度和組分無(wú)關(guān)填充柱填充越均勻規(guī)則，載體平均顆粒直徑越小，渦流擴(kuò)散越小，色譜峰擴(kuò)張變形小2. 分子擴(kuò)散項(xiàng)B/u(縱向擴(kuò)散項(xiàng))：產(chǎn)生原因：組分被載氣帶入色譜柱后，以“塞子”的形式存在于柱內(nèi)很小一段空間中，在“塞子”的前后（縱向）存在著濃度差而形成濃度梯度，使運(yùn)動(dòng)著的分子產(chǎn)生縱向擴(kuò)散與載氣相對(duì)分子質(zhì)量，載氣密度，柱溫，組分的保留時(shí)間有關(guān)越小，越小，升高，縮短3. 傳質(zhì)阻力項(xiàng)Cu：傳質(zhì)過(guò)程：組分在氣液兩相中溶解、擴(kuò)散、平衡和轉(zhuǎn)移的過(guò)程傳質(zhì)阻力：影響傳質(zhì)速度的阻力Cu組分隨載氣流動(dòng)時(shí)，組分在兩相中反復(fù)擴(kuò)散分配運(yùn)動(dòng)所受的傳質(zhì)阻力。包括液相傳質(zhì)阻力和氣相傳質(zhì)阻力1) 氣相傳質(zhì)過(guò)程：組分從氣相移動(dòng)到氣-液界面的過(guò)程，試樣組分在兩相界面上不能瞬間達(dá)到分配平衡，從而引起滯后現(xiàn)象，使得色譜峰變寬2) 液相傳質(zhì)過(guò)程：組分從固定相的氣-液界面進(jìn)入液相內(nèi)部，并發(fā)生質(zhì)量交換，達(dá)到分配平衡，然后再返回氣液界面的過(guò)程4. Van Deemter 方程貢獻(xiàn)1) 影響柱效的因素:柱溫、色譜柱填充的均勻程度、填料顆粒的大小、流動(dòng)相的種類、流動(dòng)相的流速、固定相的液膜厚度2) 為色譜分析工作選擇最佳分離條件提供理論依據(jù)(六) 分離操作條件的選擇：1. 分離效能指標(biāo)：組分分離的前提條件：兩組分的分配系數(shù)或分配比不等，理論塔板數(shù)n只能說(shuō)明色譜柱對(duì)某一組分的柱效能高低，不能判斷兩相鄰色譜峰對(duì)應(yīng)組分在柱中的分離情況；相對(duì)保留值可以說(shuō)明色譜柱對(duì)難分離的兩組分選擇性好壞，卻不能反映柱效能高低（a）色譜峰距離近且峰形寬，兩峰嚴(yán)重相疊選擇性和柱效都很差（b）能分開(kāi)但峰形寬選擇性好，但柱效低（c）分離最理想選擇性好，柱效也高1) 分離度R：又稱分辨率，以相鄰兩組分色譜峰保留值之差與其平均峰寬值之比表示：a) 如果R=1，稱為4分離，峰分離達(dá)98%b) 如果R=1.5 ，稱為6分離，峰分離達(dá)99.7%R=1.5是兩個(gè)相鄰色譜峰完全分離的標(biāo)志 R越大，相鄰組分分離越好相鄰兩組分是否分離的判斷依據(jù)：R=1.5實(shí)際應(yīng)用中，以最難分離物質(zhì)對(duì)的色譜峰作為計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)2) 色譜分離方程分離度與柱效能、柱選擇性及柱容量的關(guān)系a) R與柱效的關(guān)系：柱效n影響色譜峰的寬窄，取決于色譜柱性能及載氣流速；增加柱長(zhǎng)可改進(jìn)分離度，但會(huì)延長(zhǎng)組分的保留時(shí)間，使峰產(chǎn)生擴(kuò)展；設(shè)法降低板高，提高柱效，才是提高分離度的最好方法。b) R與r2,1的關(guān)系：r2,1越大，選擇性好2. 分離操作條件的選擇指導(dǎo)原則：Van Deemter 方程與色譜分離方程分離條件色譜柱操作條件載氣流速、進(jìn)樣條件及檢測(cè)器1) 色譜柱的選擇a) 固定相（固定液）按“相似相溶”原則；柱溫 u最佳）時(shí)，u越大，Cu項(xiàng)越小，B/u項(xiàng)越小，Cu項(xiàng)起主導(dǎo)作用，選用分子量較小的載氣（H2，He），減小氣相傳質(zhì)阻力，提高柱效(七) 氣相色譜檢測(cè)器1. 常用檢測(cè)器分類：濃度敏感型檢測(cè)器，如熱導(dǎo)檢測(cè)器，電子捕獲檢測(cè)器 質(zhì)量敏感型檢測(cè)器，如氫火焰離子化檢測(cè)器，火焰光度檢測(cè)器2. 檢測(cè)器性能指標(biāo)：1) 靈敏度S：?jiǎn)挝涣康奈镔|(zhì)通過(guò)檢測(cè)器時(shí)所產(chǎn)生的信號(hào)大小S=R/ Q2) 檢測(cè)限（敏感度）：某組分的峰高恰為噪音的兩倍（2N）時(shí)，單位時(shí)間內(nèi)引入檢測(cè)器中該組分的質(zhì)量（g/s），或單位體積載氣中所含該組分的量（mg/ml）。檢測(cè)限越小，性能越好3) 線性范圍：可測(cè)定的濃度或質(zhì)量范圍：越寬越好4) 基線漂移和響應(yīng)時(shí)間；前者表示基線在單位時(shí)間內(nèi)單方向緩慢變化的幅值3. 常用：火焰離子化檢測(cè)器靈敏度高，噪音小，死體積小等；破壞樣品，一般只能測(cè)定含碳化合物4. 電子捕獲檢測(cè)器：對(duì)電負(fù)性物質(zhì)具有極高的靈敏度和選擇性，適用于痕量藥物、農(nóng)藥及含電負(fù)性基團(tuán)環(huán)境污染物的分析如敵敵畏 (八) 定性定量分析1. 定性分析：a) 利用保留值定性：已知物對(duì)照法；色譜峰增高法；相對(duì)保留值法；文獻(xiàn)保留值對(duì)照法b) 聯(lián)用技術(shù)定性：氣質(zhì)聯(lián)用；與紅外吸收光譜聯(lián)用；與磁共振波譜聯(lián)用2. 定量分析a) 定量分析依據(jù)：檢測(cè)器的響應(yīng)信號(hào)（峰面積或峰高）與組分量成正比b) 校正因