活化部分凝血酶時(shí)間(APTT)測(cè)定.doc

操作規(guī)程出凝血3.1活化部分凝血酶時(shí)間（APTT）測(cè)定（第四版）出凝血3.2 原理： 在37條件下用激活劑（糅花酸）激活因子X(jué)II和XI，以腦磷脂替代血小板提供凝血的催化表面，在因子IX的參與下，測(cè)定貧血小板血漿的凝固時(shí)間。部分活化凝血酶時(shí)間測(cè)定（APTT）是內(nèi)源性凝血系統(tǒng)的篩選實(shí)驗(yàn)。標(biāo)本處理：患者處于休息狀態(tài)下，采空腹靜脈血（急診病人除外）。采血者應(yīng)技術(shù)熟練，“一針見(jiàn)血”，以防止組織損傷，使外源性凝血因子進(jìn)入標(biāo)本。最好不與其它實(shí)驗(yàn)一起采集而使血液停留在針管的時(shí)間延長(zhǎng)。采完血后，將血液沿管壁緩緩注入試管，避免產(chǎn)生氣泡；然后迅速將血液和抗凝劑輕輕顛倒混勻，避免用力震蕩。全血要在1小時(shí)內(nèi)分離血漿。分離乏血小板血漿時(shí)，要在室溫下3000rpm離心10分鐘，室溫下可存放4小時(shí)。全部試驗(yàn)不能在4小時(shí)內(nèi)完成，應(yīng)將乏血小板血漿分裝在0.51.0ml的小試管中快速冷凍，儲(chǔ)存于-20冰箱中。冷凍過(guò)的標(biāo)本不能再次冷凍，否則結(jié)果會(huì)不準(zhǔn)確。冷凍血漿融化時(shí)，應(yīng)將盛冷凍血漿的容器置于37水浴中，并輕輕搖動(dòng)，使其迅速融化。出凝血3.4 試劑： APTT試劑：試劑購(gòu)于天津威士達(dá)公司。德靈Actin試劑（試劑盒代號(hào)B4218-1）。每瓶試劑內(nèi)含磷脂（從兔腦中提?。?，1.0104mol/L糅花酸，穩(wěn)定劑共2ml。0.025M氯化鈣：實(shí)驗(yàn)室自制。 試劑從冰箱中取出，室溫平衡15min后上機(jī)分析。出凝血3.5 儀器：使用Sysmex公司的CA-7000型全自動(dòng)血液凝固儀。出凝血3.6 操作：按儀器操作步驟執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)操作。出凝血3.1開(kāi)機(jī)：按下機(jī)器側(cè)面的POWER 按鈕。開(kāi)機(jī)后機(jī)器進(jìn)行自檢，當(dāng)屏幕上邊顯示“Ready:”時(shí)可以進(jìn)行試驗(yàn)。出凝血3.2檢查消耗品：1、準(zhǔn)備反應(yīng)杯：打開(kāi)儀器上蓋裝反應(yīng)杯的蓋子查看反應(yīng)杯是否夠量，不足時(shí)，需及時(shí)添加。（一次性最多可放1000 個(gè)杯子）2、準(zhǔn)備試劑：按照儀器對(duì)試劑的要求，把試劑準(zhǔn)備好，放到儀器內(nèi)相應(yīng)位置，注意查看試劑的量和有效期。如還不熟悉試劑位置時(shí)，可在主屏幕上選Reagent Setting，按屏幕顯示放置試劑。3、查看儀器的洗液瓶和廢液瓶出凝血3.3準(zhǔn)備標(biāo)本：將樣本放入樣本架，再將樣本架放到儀器進(jìn)樣器上。出凝血3.4輸入檢測(cè)項(xiàng)目：主菜單上按下Work List 鍵，進(jìn)入工作菜單，輸入APPT項(xiàng)目。出凝血3.5輸入樣本號(hào)： 按屏幕下菜單的ID No.鍵，按順序輸入樣本的序號(hào)。出凝血3.6開(kāi)始檢測(cè)：錄入完所有測(cè)試信息，按下屏幕右上角START 鍵，開(kāi)始檢測(cè)。出凝血3.7質(zhì)量控制：使用德靈公司的leve11質(zhì)控品做質(zhì)量控制。每批質(zhì)控品的值不超過(guò)2SD。（詳見(jiàn)出凝血1質(zhì)量控制）出凝血3.8 計(jì)算：儀器自動(dòng)計(jì)算出結(jié)果。出凝血3.9 參考值：23s33s,由DADE BEHRING公司推薦。出凝血3.10 臨床意義：APTT是內(nèi)源性凝血系統(tǒng)的篩選實(shí)驗(yàn)。 APTT延長(zhǎng)：見(jiàn)于凝血因子VIII、IX、XI、XII、V、II減低或缺乏，纖維蛋白原缺乏癥，抗凝物質(zhì)存在等。 APTT縮短：見(jiàn)于高凝狀態(tài)、血栓性疾病等。出凝血3.11 參考文獻(xiàn)：1） 主編王鴻利.止血與血栓檢驗(yàn)技術(shù).（第一版1992.6）上海科學(xué)技術(shù)出版社.2） 主編李家增 王鴻利 韓忠朝.血液實(shí)驗(yàn)學(xué).(第一版1997.10)上?？茖W(xué)技術(shù)出版社.3） 主編鄧家棟 楊崇禮 楊天楹.臨床血液學(xué).(第一版1985)上?？茖W(xué)技術(shù)出版社.4） 主編鄧家棟 楊天楹 楊