生物制藥3.doc

生物制藥學(xué)試題3一、名詞解釋（每題2分，共20分）1、 生物制藥2、 tPA3、 McAb4、 IFN5、 rHu CSF6、 細胞因子7、 IL8、 脫分化9、 佐劑10、CDR二、填空題（每題2分，共20分）1、 生物藥物包括 、 和 。2、 按學(xué)科領(lǐng)域的不同，生物制藥可分為 、 、 和 。3、 植物培養(yǎng)基中含有 、 、 、 、 、 等成分。4、 植物激素包括 、 、 、 、 等五類。5、 農(nóng)桿菌包括 和 兩類。6、 體外培養(yǎng)的動物細胞根據(jù)其生長方式可分為 、 和 三類。7、根據(jù)復(fù)制的方式（拷貝數(shù)）的不同，質(zhì)?？煞譃閮纱箢愋?和 ，其中 是基因工程中常用的類型。8、原核表達載體可分為 、 和 三種類型。9、篩選單克隆抗體陽性克隆的方法有 、 和 。10、抗體的恒定區(qū)與 有關(guān)，而抗體的可變區(qū)與 有關(guān)。三、單項選擇題（每題1分，共10分）1、 基因工程制藥中常用的限制性內(nèi)切酶是（）。A、I型 B、II型C、III型 D、IV型2、 Klenow酶與DNA聚合酶I相比不具有()的活性。A、53核酸內(nèi)切酶活性B、35核酸內(nèi)切酶活性C、53核酸外切酶活性D、35核酸外切酶活性3、 下列何種激素不屬于生長素？A、2,4DB、IBAC、NAAD、6BA4、 植物激素（ ）是從經(jīng)過高壓滅菌處理的鯡魚精細胞DNA中發(fā)現(xiàn)的。A、腺嘌呤 B、玉米素C、6芐基腺嘌呤D、激動素5、下列何種DNA聚合酶是不依賴模板的DNA聚合酶？（）A、DNA聚合酶IB、DNA聚合酶I大片段C、逆轉(zhuǎn)錄酶D、末端轉(zhuǎn)移酶6、在下列酵母克隆載體中（）不能在染色體外自主復(fù)制。A、YIp質(zhì)粒 B、YRp質(zhì)粒C、YEp質(zhì)粒D、YCp質(zhì)粒7、（）在動物免疫時需要添加佐劑。A、顆粒性抗原 B、細胞性抗原C、可溶性抗原D、半抗原8、人鼠嵌合抗體是由（）組成的？A、人源抗體的V區(qū)+鼠源抗體的C區(qū) B、人源抗體的Fab區(qū)+鼠源抗體的Fc區(qū)C、人源抗體的C區(qū)+鼠源抗體的V區(qū) D、人源抗體的Fv區(qū)+鼠源抗體的Fc區(qū)9、下列何種藥物不屬于人工牛黃的成分？（ ）A、膽酸 B、膽紅素C、膽堿D、膽固醇10、能使肝素失去活性的藥物是（ ）。A、魚精蛋白 B、硫酸軟骨素C、透明質(zhì)酸D、彈性蛋白酶四、簡答題（每題5分，共20分）1 用于工業(yè)生產(chǎn)的動物細胞有哪幾類？各有何特點？2 與克隆載體相比表達載體應(yīng)具備哪些條件？3 試述溶血和凝血的過程，并請說明抗凝血藥物是如何發(fā)揮作用的？4請列舉第二代抗體藥物單克隆抗體藥物的優(yōu)缺點。五、論述題（每題10分，共30分）1、 試列舉蛋白質(zhì)類藥物分離純化的方法。2、 試述研制單克隆抗體的工藝流程。3、 請說明HAT選擇培養(yǎng)基篩選脾瘤雜交瘤細胞的機理。答案3一、名詞解釋1、 生物制藥是指利用生物體、生物組織及其代謝產(chǎn)物或生物過程生產(chǎn)藥物的技術(shù)。2、 組織型纖溶酶原激活劑，抗凝血藥，抑制纖溶酶的產(chǎn)生。3、 單克隆抗體，針對一個抗原決定簇產(chǎn)生的抗體，由一個B淋巴細胞產(chǎn)生。4、 干擾素(Interferon)是人體細胞分泌的一類活性蛋白質(zhì)，可以抗病毒、抗腫瘤、提高人體的免疫功能。5、 重組人集落刺激因子，是一組控制粒細胞、單核巨噬細胞及造血細胞增殖和分化的糖蛋白。6、 細胞因子是由免疫細胞或相關(guān)細胞分泌的高活性的多肽或蛋白質(zhì)，能調(diào)節(jié)機體的生理功能，參與各種細胞的生長、增殖、分化、凋亡。包括細胞生長因子和細胞生長抑制因子。7、 白細胞介素，由白細胞或其它體細胞產(chǎn)生又在白細胞和其它細胞間起調(diào)節(jié)和介導(dǎo)作用，是一類重要的免疫調(diào)節(jié)劑，能刺激淋巴細胞的增殖，抗腫瘤。8、 在離體條件下，外植體分化的細胞轉(zhuǎn)變成分生狀態(tài)，形成胚性細胞團（胚性愈傷組織）的現(xiàn)象。9、 佐劑定義：又稱免疫增強劑，伴隨抗原物質(zhì)注射機體，可增強抗原的免疫原性，佐劑可使弱抗原物質(zhì)成為有效的抗原。10、 互補決定區(qū)，在抗原V區(qū)上有三個，決定了抗體和抗原的特異結(jié)合。二、填空題11、 天然生化藥物、生物制品和生物技術(shù)藥物。12、 發(fā)酵工程制藥、基因工程制藥、細胞工程制藥和酶工程制藥13、 大量元素、微量元素、鐵鹽、碳源、維生素、氨基酸14、 生長素、細胞分裂素、赤霉素、脫落酸和乙烯。15、 根癌農(nóng)桿菌、發(fā)根農(nóng)桿菌16、 貼壁依賴型、非貼壁依賴型和兼性貼壁細胞17、 嚴(yán)謹(jǐn)型質(zhì)粒和松弛型質(zhì)粒，松弛型質(zhì)粒18、 融合型表達載體、非融合型表達載體和分泌型表達載體19、 放射免疫、酶聯(lián)免疫、免疫熒光技術(shù)10、異種抗原性、與抗原的特異結(jié)合三、選擇題1、B； 2、C； 3、D； 4、C； 5、D； 6、A； 7、C； 8、C； 9、C ； 10、A 四、簡答題1、原代細胞：組織、器官粉碎消化獲得，很難保證細胞一致性，含多種細胞，費時費力，獲得數(shù)目有限二倍體細胞：原代細胞經(jīng)傳代、篩選、克隆化后得到了純化的單形細胞?？蓚鞔鷶U增，但壽命有限轉(zhuǎn)化細胞：染色體異倍化，細胞具有無限增殖的能力，更適于工業(yè)化生產(chǎn)，但有致癌的危險。2、1. 具有強啟動子，能為RNA聚合酶所識別 2具有強終止子，使RNA聚合酶只轉(zhuǎn)錄目的基因而不轉(zhuǎn)錄其它無關(guān)基因。3所產(chǎn)生的mRNA 必須具有翻譯起始信號（原核細胞須有起始密碼AUG和SD序列），以便轉(zhuǎn)錄后能順利翻譯。4具有阻遏子，使啟動子受到控制，只有當(dāng)誘導(dǎo)時才能進行轉(zhuǎn)錄，以獲得外源蛋白質(zhì)表達合成的最佳時機。3、抗血栓藥包括凝血因子抑制劑（肝素抑制凝血酶原激活劑的產(chǎn)生）和纖溶酶原激活劑 (尿激酶、tPA)4、具有良好的均一性和高度的特異性，單克隆抗體在疾病的診斷中得到廣泛應(yīng)用。但用于治療時有缺陷：（1） 是鼠源性的，在人體內(nèi)反復(fù)應(yīng)用會引起人抗鼠抗體（HAMA）反應(yīng)，發(fā)生排斥，從而降低療效，甚至可引起過敏反應(yīng)。（2） 分子量大，難以進入相關(guān)組織發(fā)揮藥效。五、論述題1、（1）按溶解度不同進行分離的方法 蛋白質(zhì)、酶的初步純化往往用沉淀法。蛋白質(zhì)形成膠體的穩(wěn)定因素：水化層和同種電荷，打破即沉淀。常用的有鹽析法、有機溶劑沉淀法、等電點沉淀法、與靶物質(zhì)結(jié)合沉淀法（如抗體抗原）等。（2）按分子大小分離的方法 這類方法有超濾法和透析法、分子篩層析法、密度梯度離心法等。其中透析法可用于生物大分子物質(zhì)的濃縮、分級和脫鹽。（3）按所帶電荷不同進行分離的方法 氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)、酶均為兩性電解質(zhì)，它們具有等電點，在離開等電點的pH時不同蛋白便會帶不同的電荷。利用帶電性質(zhì)進行分離。利用電學(xué)性質(zhì)進行分離的方法有離子交換柱層析法、電泳法（醋酸纖維薄膜電泳、PAGE、等電聚焦）等。（4）親和層析法 大部分生物活性物質(zhì)都有其作用的靶物質(zhì)（配基 ），如酶與底物（或抑制劑）、抗原與抗體、激素與受體等，利用化合物的之間的特異的親合作用設(shè)計的層析分離技術(shù)稱為親和層析。蛋白質(zhì)能與配基特異結(jié)合，親和層析分離專一性強，操作簡便。2、以研究的Ag對鼠進行免疫，取脾細胞培養(yǎng)骨髓瘤細胞細胞融合（PEG 融合）選擇培養(yǎng)基篩選融合細胞針對融合細胞產(chǎn)生的抗體進行篩選克隆培養(yǎng)，分離，再克隆培養(yǎng)對單克隆抗體進一步鑒定，大量制備3、細胞融合后可以產(chǎn)生脾脾、脾瘤、瘤瘤雜交細胞以及未融合的細胞，故需采用HAT選擇培養(yǎng)基篩選出脾瘤雜交細胞。HAT選擇培養(yǎng)基的成份H：次黃嘌