溶出度測定法-上崗證培訓(xùn).doc

第十二章 溶出度測定法第一節(jié) 溶出和溶出度研究發(fā)展概況藥物溶出度是指藥物從片劑或膠囊劑等固體制劑在規(guī)定介質(zhì)中溶出的速度和程度。由于藥物的溶出直接影響藥物在體內(nèi)的吸收和利用，溶出度試驗已成為評價制劑質(zhì)量及生產(chǎn)工藝的指標(biāo)之一。而且，溶出度試驗是在體外對體內(nèi)藥物生物利用度進(jìn)行研究和評價的有效的替代方法, 也是保證和衡量固體口服制劑生產(chǎn)工藝及質(zhì)量是否合理和穩(wěn)定的一項重要手段，它以科學(xué)先進(jìn)的測定手段替代了過去的崩解時限檢查, 從而提高了藥品質(zhì)量控制方法的科學(xué)性, 保證了藥品的臨床療效。1溶出度與崩解時限的關(guān)系 藥物要發(fā)揮作用必須到達(dá)作用部位, 藥物能否到達(dá)作用部位以及到達(dá)的速度和程度, 又受到許多因素的影響。以片劑為例, 服藥后, 藥物首先必須經(jīng)過崩解、分散, 然后才能溶解而被吸收產(chǎn)生療效。所以, 各國藥典對一些片劑均進(jìn)行崩解時限檢查, 它對藥物療效起到了一定的保證作用。但是另有許多實驗又提出了新的問題, 例如Glevy和Hayes在做阿司匹林實驗時, 發(fā)現(xiàn)體外崩解時間不能說明體內(nèi)的有效性。僅依靠崩解時限檢查作為所有片劑、膠囊在體內(nèi)吸收的評定標(biāo)準(zhǔn)顯然是不夠完善的，因為藥物溶解后通過崩解儀篩網(wǎng)粒徑常在1.6-2.0mm之間，而藥物需呈溶液狀態(tài)才能被機(jī)體吸收，其粒子大小以單位A來計算，所以崩解僅僅是藥物溶出的最初階段，而后面的繼續(xù)分散和溶解過程，崩解時限檢查是無法控制的，且固體制劑的崩解還要受到處方設(shè)計，制劑制備，貯存過程及體內(nèi)許多復(fù)雜因素的影響，所以崩解時限檢查不能客觀反映藥物與賦形劑之間的關(guān)系和影響，而溶出度檢查卻包括了崩解及溶解過程，因此研究溶出度就有更重要的意義，提出藥物的溶出速度和程度與體內(nèi)吸收情況的關(guān)系才更加密切。2溶出度與生物利用度的關(guān)系 生物利用度是人和動物服藥后通過血或尿中藥物濃度的測定來反映藥物制劑在體內(nèi)可能被吸收利用的程度進(jìn)而推斷療效。從理論上講，藥物的體內(nèi)實驗和臨床研究才是評價制劑的最根本和最可靠的依據(jù)。但生物利用度試驗工作量極大，費用高，對每個樣品進(jìn)行篩選評定, 檢驗和控制產(chǎn)品質(zhì)量只能借助于體外實驗方法來完成。溶出度雖非必然與體內(nèi)生物利用度相關(guān), 但多數(shù)情況下是相關(guān)的，它是以體外實驗法代替動物實驗的一種方法。3 溶出度試驗方法發(fā)展歷程 Noyes 和Whitney 于1897 年最早研究了溶出,提出了溶出速率方程。Nernst 和Brnner 于1904年將Fick 擴(kuò)散定律應(yīng)用于Noyes-Whitney 方程,Hixson 和Crowell 于1931 年導(dǎo)出了立方根定律。到本世紀(jì)中葉,研究重心轉(zhuǎn)移到考察藥物溶出行為對藥物劑型生物活性的影響。1948年，Sperabdio在研究片劑崩解對藥效的關(guān)系時，提出用溶出度試驗代替崩解度，對評價藥物制劑內(nèi)在質(zhì)量更具說服力。美國FDA最早測試溶出度的品種是地高辛和洋地黃毒甙，溶出度測試結(jié)果揭示了兩種藥物在不同劑型、規(guī)格及批號之間存在的療效和毒性的顯著差異來源于產(chǎn)品的溶出度。Edwards 于1951 年對阿斯匹林片劑的研究,指出其鎮(zhèn)痛作用取決于藥物在胃腸道內(nèi)的溶出速率，而與崩解速率無明顯關(guān)系。其后Shenoy 等研究了苯丙胺緩釋片的生物利用度與體外溶出速率的關(guān)系，Smolen 等介紹了溶出與生物利用度曲線近似一致的概念。近年來,不少文獻(xiàn)側(cè)重于研究不同配方、工藝對藥物溶出的影響,及其與生物利用度相關(guān)性,并用來篩選處方和工藝,指導(dǎo)新藥包括緩、控釋制劑的研究。過去認(rèn)為只有難溶性藥物才有溶出度的問題，但近年來研究證明，易溶性藥物也會因制劑的配方和工藝不同而致藥物溶出度有很大差異，從而影響藥物生物利用度和療效，在USP中規(guī)定測定溶出度的制劑有相當(dāng)數(shù)量是易溶性藥物。4 各國藥典收載情況 1967 年美國處方集(NF) 12 版第二補(bǔ)充版首先介紹了緩釋片與膠丸的溶出度試驗,其后,1970 年USP/ NFX 、1975 年的BP73 補(bǔ)充版、1981年第十改正日本藥局方都收載了溶出度檢測項目。其中USP 收載了潑尼松片等6 個品種,BP73補(bǔ)充版收載了地高辛片1個品種,第十改正日本藥局方收載了4 個品種，隨后檢測品種不斷擴(kuò)大。自USP() 開始傾向于所有的片、膠囊都要做溶出試驗。USP 收載了56 個品種,USP 收載了372 個,其補(bǔ)充本、又增加了約20 個,USP(1990) 468 個,USP (1995) 為532個品種；BP1980 年版18個; 第十一改正日本藥局方(1986)為7個。中國藥典1977 年開始收載溶出試驗，1985 年版收載了7 個品種，1990 年版43 個，1995 年版擴(kuò)大為134 個品種，在2010年版中溶出度已成為很普及的檢驗項目。第二節(jié)溶出度測定基本原理藥物釋放所遵循的基本定率是Noyes-Whitney方程，其表述如下：dw/dt=KS(Csat-Csol)其中dw/dt為溶出速率；K為溶出速率常數(shù)；S是固體藥物表面積；Csat為該藥物飽和溶液濃度；Csol為任一時間溶液中藥物濃度。而藥物釋放所取決的基本點就是Csat的值大于Csol，即形成我們常說的漏槽條件（概念）。第三節(jié)溶出度測定的方法和儀器溶出度測定方法根據(jù)藥物與介質(zhì)混合的類型主要分為兩類。一類是由于攪拌或旋轉(zhuǎn)而在介質(zhì)中產(chǎn)生的強(qiáng)制對流導(dǎo)致混合,如轉(zhuǎn)籃法、槳法等；另一類是由于介質(zhì)的自然對流導(dǎo)致混合,使樣品一直暴露于均勻的無渦流新鮮介質(zhì)中,以保持漏槽條件,如循環(huán)法、流通池法。在中國藥典2010年版溶出度檢查法中收載了籃法、槳法和小杯法，另外，在釋放度檢查項下收載了用于緩釋貼劑釋放的碟上槳法。轉(zhuǎn)籃法的主要缺點是籃網(wǎng)或過濾裝置或兩者可能被堵塞,槳法的明顯缺點是樣品可能上浮,而且采用轉(zhuǎn)籃法或槳法對于溶解度低而劑量大的藥物或在溶出液中迅速達(dá)到飽和的藥物,難以保持溶出介質(zhì)的漏槽條件。流通池法適合于小劑量、難溶性藥物的緩、控釋制劑,尤其是腸溶制劑,它比轉(zhuǎn)籃法和槳法更能模擬藥物在體內(nèi)的轉(zhuǎn)運過程,更接近體內(nèi)層流流動的情況,可以測定峰時濃度,便于進(jìn)行釋放介質(zhì)的交換。被USP/NF 第5 補(bǔ)充版收入作為法定方法。BP(1980)版采用轉(zhuǎn)籃法,1993 年版增加為轉(zhuǎn)籃法、槳法、流通池法；日本藥局方第十、十一、十二改正版都收載了轉(zhuǎn)籃法和槳法；USP (1995) 收載了轉(zhuǎn)籃法和槳法,對延時釋放制劑還收載了往復(fù)圓筒法( reciprocating cylinder ) 和流通池法( flow-through cell method) 。中國藥典1985 年版收載了轉(zhuǎn)籃法、槳法和循環(huán)法,1990 年版收載了轉(zhuǎn)籃法、槳法，1995年版為轉(zhuǎn)籃法、槳法、小杯法,2000 年版(草案) 收載轉(zhuǎn)籃法、槳法、小杯法和流通池法，正式版將流通池法取消。樊德厚等人對國內(nèi)1990 - 1996年的有關(guān)溶出度試驗的文獻(xiàn)進(jìn)行統(tǒng)計,其中采用轉(zhuǎn)籃法的為163 篇,用槳法的為66篇,循環(huán)法1 篇,小杯法6 篇。目前常用的智能溶出度試驗儀系列,能進(jìn)行準(zhǔn)確的溫度控制,可以在30 39（有的可達(dá)到50） 范圍內(nèi)每隔 0.1任意調(diào)節(jié),轉(zhuǎn)籃或槳板的轉(zhuǎn)速可以任意調(diào)速,并采用微型計算機(jī)單片技術(shù)測量實際轉(zhuǎn)速,轉(zhuǎn)速準(zhǔn)確,時間可以自動預(yù)置，到時峰鳴報警。自動溶出儀的應(yīng)用越來越廣泛。近來，還有用反射光譜定量的自動溶出儀和帶半透膜的溶出儀，而光纖溶出度測定儀作為目前的一個研究熱點正在被大家所注意。第四節(jié)固體制劑溶出度試驗評價方法對于藥物固體制劑，國產(chǎn)藥與進(jìn)口藥有什么區(qū)別；為什么同樣劑型、同樣劑量的某些藥物，患者服用后會有不同的療效；用什么試驗方法、什么檢測指標(biāo)才能夠科學(xué)、有效地評價出不同質(zhì)量制劑的差別呢。顯而易見，溶出度是一項非常重要的指標(biāo)，但我國現(xiàn)行的溶出度方法能否做到這一點，顯然還要有很多工作去做。人體對藥物的吸收部位主要是消化道。體內(nèi)環(huán)境正常者，胃腸道內(nèi)存在有正常量和正常pH的胃酸和腸液；體內(nèi)環(huán)境非正常或體質(zhì)虛弱者，胃酸和腸液的量及pH會有差異。據(jù)報道，人體消化器官內(nèi)的液體pH范圍為：胃1.27.6，十二指腸3.1 6.7，小腸5.26.0。50歲以上的人群，胃酸和腸液的pH均有變化,隨著年齡的增長,胃酸缺乏的狀況日漸嚴(yán)重,而藥品療效優(yōu)良的評價標(biāo)準(zhǔn)為：患有該疾病的任何(無論性別、年齡、體質(zhì)、體內(nèi)環(huán)境)患者服藥后均有一定的療效和作用，即治療有效性好和適用范圍廣。否則就會導(dǎo)致： 由不同廠家生產(chǎn)的相同劑型的同一藥品，對不同患者有不同的療效；同一廠家的同一藥品對不同患者療效不同，即治療有效性低、范圍窄。療效的優(yōu)劣與生物利用度緊密相關(guān)。生物利用度低的藥品可能只在某一體內(nèi)環(huán)境(如胃酸正常者)才有一定的崩解、溶出和吸收，而對其它患者療效不顯著。這正是藥品內(nèi)在質(zhì)量差異的核心所在。目前日本采用以下4種溶出介質(zhì)來模擬：(1)pH 1.2的溶液(氯化鈉2.0g，加水適量溶解，加鹽酸7ml，再加水稀釋至1000ml，即得)。國外目前傾向于此配制方法，不同于我國目前通常采用的0.1molL-1鹽酸液(鹽酸9ml一1000m1)。(2)pH4.0乙酸鹽緩沖液0.05molL-1乙酸:0.05molL-1乙酸鈉(16.4：3.6)。其中的離子濃度較我國藥典附錄中記載的低。目前我國有關(guān)該介質(zhì)條件下的溶出試驗研究進(jìn)行得較少。(3)pH 6.8磷酸鹽緩沖液(磷酸二氫鉀3.4g和無水磷酸氫二鈉3.55g，加水適量溶解并定容至1000ml，再稀釋一倍，即得)。其中的離子濃度也較我國藥典附錄中記載的低。(4)水。一個優(yōu)質(zhì)藥品，在采用一定的溶出裝置和轉(zhuǎn)速時(這些條件也需進(jìn)行詳盡的研究和論證)，在以上4種溶出介質(zhì)中均應(yīng)有一定的溶出曲線，這樣就能保證該藥品用于人體時，可在各種體內(nèi)環(huán)境中均有一定的溶出或釋放，即對于任何體質(zhì)的患者均有一定的療效。如將4條(或多條)曲線結(jié)合起來，還可用時間、溶出量和溶出介質(zhì)三維圖來表示，應(yīng)當(dāng)是平滑、有一定坡度的山坡型。而如果該制劑僅在pH1.2條件下溶出較好，就只能保證胃酸正常的患者吸收良好，而胃酸缺乏的患者可能就較差。人體胃腸道的蠕動程度，個體差異較大。藥物溶出度試驗中，如果該制劑僅能在槳法、100 rpmmin-1條件下溶出，那么它也許只在身體機(jī)能強(qiáng)壯者的體內(nèi)釋放和被吸收，而在虛弱者體內(nèi)，便不能釋放和被吸收；而如果在槳法、50rpmmin-1條件下，在上述4種溶出介質(zhì)中均有“較高的、一定的”溶出曲線，那么無論患者體內(nèi)情況如何，均會具有較高的、一定的生物利用度，即具有廣泛的療效性。第五節(jié)藥品溶出度測定中的影響因素分析在多年的工作實踐中，絕大多數(shù)藥品均能達(dá)到溶出度的要求，也有部分藥品溶出度測定不符合規(guī)定，這其中多為藥品本身的質(zhì)量問題，但也有測定方法存在的問題，致使測定結(jié)果偏離。分析溶出度測定偏離的原因，有針對性地予以糾正，對實際工作具有十分重要的指導(dǎo)意義。為保證溶出度測定數(shù)據(jù)的客觀性、準(zhǔn)確性和科學(xué)性，本文綜述了溶出度測定過程中的常見問題和解決辦法。 1儀器因素1.1 溶出儀的調(diào)試 在溶出度測定前，必須檢查溶出儀的穩(wěn)定性、轉(zhuǎn)速、溫度等是否符合要求。儀器運轉(zhuǎn)時，整套裝置應(yīng)保持平穩(wěn)，均不能產(chǎn)生明顯的晃動或振動（包括儀器裝置所處的環(huán)境）。轉(zhuǎn)軸應(yīng)在中心孔并垂直，旋轉(zhuǎn)應(yīng)平穩(wěn)無顫動，儀器應(yīng)處于良好的穩(wěn)定轉(zhuǎn)動狀態(tài)。檢查儀器的實際轉(zhuǎn)速與其儀器的電子顯示數(shù)據(jù)是否一致，分別設(shè)置轉(zhuǎn)速50，100，150rpm進(jìn)行測定，用經(jīng)校驗的秒表計時，記下2min轉(zhuǎn)動的次數(shù)，每分鐘轉(zhuǎn)動次數(shù)誤差均不得超過4。調(diào)試槳或藍(lán)的高度，在溶出杯未放入溶出介質(zhì)時，按藥典各法的要求，調(diào)節(jié)槳或藍(lán)的底部距溶出杯內(nèi)底部的距離，應(yīng)符合規(guī)定。從流體力學(xué)的角度來看，槳板的厚度決定所產(chǎn)生漩渦力的大小，即樣品所受物理力的大小。在轉(zhuǎn)速一定的情況下，槳板越厚，所產(chǎn)生的物理機(jī)械理越大。設(shè)置好溫度，用經(jīng)校驗的溫度計測定溶出杯內(nèi)溶出介質(zhì)的溫度，應(yīng)能恒定在 37.00.5，6個溶出杯內(nèi)的溫度差異應(yīng)在0.5。轉(zhuǎn)籃的處理，應(yīng)用轉(zhuǎn)籃法試驗時，應(yīng)注意轉(zhuǎn)籃的潔凈程度，一般在陽光下觀察轉(zhuǎn)籃的空隙是否有堵塞。如有堵塞，可采用超聲或在稀硝酸中煮沸、再在水中煮沸的辦法進(jìn)行清理，否則將影響溶出度數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。尤其是在低轉(zhuǎn)速時，影響更為明顯。同時，還應(yīng)注意試驗時應(yīng)取用干燥的轉(zhuǎn)籃。水浴高度， 溶出儀外圍水浴高度應(yīng)超過溶出杯里溶出介質(zhì)液面高度，否則將影響溶出杯中溶出液的溫度，導(dǎo)致結(jié)果偏低；尤其是進(jìn)行緩、控釋制劑試驗時，由于試驗時間較長，更需注意。1.2溶出儀的校正 溶出儀不僅各項機(jī)械性能指標(biāo)(轉(zhuǎn)速、軸距、 高度等)應(yīng)符合溶出度檢測的規(guī)定，同時，還應(yīng)定期使用校正片對其性能進(jìn)行校正。特別是當(dāng)試驗中出現(xiàn)異常情況或檢驗結(jié)果有爭議時，為保證實驗結(jié)果的可靠性，必須用溶出度校正片對儀器進(jìn)行校正。溶出度校正片是由美國藥典委員會在20世紀(jì)70年代提出的。因為溶出儀僅機(jī)械指標(biāo)符合要求還不夠，應(yīng)采用一定的標(biāo)準(zhǔn)制劑進(jìn)行校正，對數(shù)據(jù)進(jìn)行數(shù)理統(tǒng)計后必須符合一定的要求。如不符合，則應(yīng)適當(dāng)調(diào)整儀器的機(jī)械部件，直至校正片的測定符合規(guī)定。我國目前使用的是非崩解型溶出度校正片水楊酸片。使用溶出度校正片不僅能確定溶出儀的性能狀態(tài)，還能考查實驗操作是否規(guī)范，因此校正片對溶出實驗具有非常實用的價值，對尋找溶出度結(jié)果偏差的來源有很好的幫助。溶出儀在校正后，溶出杯需編號配對，溶出杯不配套對實驗有一定的影響。 2 溶出介質(zhì)的配制與脫氣2.1溶出介質(zhì)的脫氣 溶出度試驗規(guī)定，溶出介質(zhì)在試驗前應(yīng)進(jìn)行脫氣處理，因為介質(zhì)中的氣泡在實驗過程中會影響樣品的崩解、擴(kuò)散和溶出。溶出介質(zhì)脫氣與否對轉(zhuǎn)籃法的影響較明顯，因為溶液中的氣泡會堵塞轉(zhuǎn)籃空隙，影響樣品溶出。而對槳法影響不大。脫氣方法一般采用煮沸法、抽濾法或超聲法等，煮沸法需煮沸并保持15min再放冷，剛沸騰即放冷除氣效果不夠好。較好的脫氣方法是緩慢攪拌下加熱至約41，并在真空條件下不斷攪拌5 min，或減壓抽濾，現(xiàn)在已有加熱，抽真空，水循環(huán)攪拌一體化的儀器，脫氣效果較好。 2.2配制溶出介質(zhì)的試劑和試液 若溶出介質(zhì)為鹽酸溶液等，需在水脫氣后冷至約37時配制，先配好再加熱脫氣會影響酸度。含有有機(jī)溶劑的溶出介質(zhì)更應(yīng)在脫氣后配制。若溶出介質(zhì)為緩沖液，應(yīng)調(diào)節(jié)pH值至規(guī)定值0.05之內(nèi)。溶出介質(zhì)中所用到的無機(jī)鹽或有機(jī)溶劑(乙醇或異丙醇等)，不同廠商的差異不顯著；而水則由于來源各異、pH值不同，對某些品種可能會導(dǎo)致測定結(jié)果的差異。表面活性劑，如十二烷基硫酸鈉(SDS)、聚山梨酯80、溴化十六烷基三甲基銨、三羥甲基氨基甲烷等，因品牌的不同可能導(dǎo)致測定結(jié)果的差異較大。在部分品種(如非諾貝特緩釋片、非洛地平緩釋片) 的溶出度測定中曾有此類情況，有時甚至?xí)绊懡Y(jié)果的判定。 2.3溶出介質(zhì)的揮發(fā) 當(dāng)溶出介質(zhì)中有機(jī)相比例較大時，應(yīng)注意減少預(yù)熱和試驗過程中介質(zhì)的揮發(fā)，盡量使用密封性良好的溶出儀。 3取樣時間和取樣量 按規(guī)定的取樣時間取樣，從6個杯中完成取樣的時間應(yīng)在1min內(nèi)，自取樣至濾過應(yīng)在30秒鐘內(nèi)完成。若手工取樣，1min內(nèi)取6份溶出液有一定困難，可采用在開始時每隔1min放下一根轉(zhuǎn)桿，將供試品逐一放入溶出介質(zhì)中，取樣時即可按時從容取樣。對于緩釋控釋制劑，需多次取樣，多次取樣所量取溶出介質(zhì)的體積之和應(yīng)在其總體積的1之內(nèi)，如超過總體積的1時，應(yīng)及時補(bǔ)充溶出介質(zhì)或在計算時加以校正。4溶出液的過濾與濾膜的吸附取樣過濾時，應(yīng)注意可能存在的損失。因濾膜與藥物間有一個吸附飽和過程，即濾膜只有吸附到一定量之后，方能達(dá)到飽和、不再吸附。比如，使用同一個濾膜進(jìn)行6份樣品過濾時，往往第一個數(shù)據(jù)偏低，這就是吸附飽和過程所致。該過程與濾膜的品牌和性質(zhì)，藥物的理化性質(zhì)、是否經(jīng)微粉化處理等因素有關(guān)。對用濾膜過濾時有吸附作用的藥品，要用其他無吸附的濾材濾過，或用適當(dāng)?shù)姆椒ㄏ降挠绊懀缈蓪V膜在沸水中煮沸1小時，或加大初濾液體積等，也可采用樣品直接高速離心的方法。 判定濾膜吸附與否的方法可采用：取對照品溶液，經(jīng)濾膜過濾后，與原溶液進(jìn)行比較，觀察測定前后響應(yīng)值（吸光度或峰面積）的變化。取溶出液過濾，舍去不同體積的初濾液后測定，觀察響應(yīng)值（吸光度或峰面積）的變化，了解被測藥物與濾膜的吸附情況。 取樣后，一部分不過濾，直接采用高速離心，取上清液測定。另一部分采用過濾法，取續(xù)濾液測定，考察兩者間測定數(shù)據(jù)的差異。 一些小規(guī)格制劑如格列美脲片(1mg、2mg、3mg)、硝酸異山梨酯片(5mg、10mg)等品種，由于此類藥品的主藥均難溶于水，制成制劑時一般均需進(jìn)行微粉化處理使原料藥粒徑變小，比表面能變大，靜電吸附能力增強(qiáng)，故與濾膜的吸附作用明顯，達(dá)到飽和所需的初濾液體積大大增加。同時，又由于規(guī)格小，溶出液濃度低，需消耗更多初濾液方能達(dá)到飽和。所以，遇到此類情況時，一定要仔細(xì)考察濾膜的吸附情況，從而確保實驗數(shù)據(jù)的可靠性。 5 膠囊殼對測定的影響 膠囊殼質(zhì)量的不同，紫外吸光強(qiáng)度也各不相同，故在紫外法測定時常常有干擾，筆者在工作中曾多次遇到溶出度均值大于含量10%20% (均采用紫外法測定)的情況，所以在測定膠囊劑的溶出度時，應(yīng)注意膠囊殼對實驗結(jié)果的影響。校正試驗一般采用取6粒空白膠囊殼，置于同一溶出杯內(nèi)，用該品種項下規(guī)定體積的溶出介質(zhì)溶解空膠囊殼，并按該品種項下的分析方法測定，測得每個空膠囊的空白校正值，如校正值大于標(biāo)示量的25，實驗無效，如校正值2，則可忽略不計。 6沉降藍(lán)的使用溶出試驗中加沉降藍(lán)的目的是為了防止被測樣品上浮或貼壁，致使溶出液的濃度不均勻，或因貼壁致使部分樣品的活性成分難以溶出。因沉降籃加入后會造成溶出杯內(nèi)流體力學(xué)的改變，因此在建立溶出度方法是應(yīng)進(jìn)行詳細(xì)的驗證。但在日常檢驗中，如果該品種項下溶出度測定法沒有規(guī)定要求使用沉降藍(lán)，那么不可隨意使用，否則會造成溶出度試驗結(jié)果的偏差。 7溶出液的穩(wěn)定性主成分在溶出介質(zhì)中的穩(wěn)定性也是一個不容忽視的問題。如溶液穩(wěn)定性不佳，如一些光穩(wěn)定性、熱穩(wěn)定性較差的藥品（尼莫地平制劑、硝苯地平制劑或硝酸甘油制劑等），應(yīng)在取樣后立即測定。總之，在溶出度試驗中，一方面要嚴(yán)格控制各項實驗條件，另一方面也要考慮具體品種的個性。比如我們在關(guān)注濾膜吸附的同時，還應(yīng)注意濾膜與溶出介質(zhì)的相容性問題，如濾膜被溶出介質(zhì)溶解，便會在溶液中產(chǎn)生濁度，使紫外吸光度偏大，從而造成結(jié)果偏差。溶出度測定的影響因素很多，有儀器和操作的誤差，更需要注意的是特殊品種的特殊情況。只有在實驗中善于分析問題，總結(jié)經(jīng)驗，不斷提高分析問題解決問題的能力，才能及時有效地校正偶然出現(xiàn)的結(jié)果偏離現(xiàn)象，確保溶出度測定數(shù)據(jù)的客觀性和準(zhǔn)確性。第六節(jié) 溶出結(jié)果的處理及比較方法用于比較藥劑溶出曲線的方法很多，最簡單、直觀的方法是將溶出數(shù)據(jù)以曲線圖或列表的形式來描述每種制劑的平均溶出度，該法可直觀了解制劑配方改變和溶出度變化的關(guān)系，但是不能提供一個綜合指標(biāo)，很難進(jìn)行相應(yīng)的數(shù)據(jù)分析。當(dāng)對多種制劑進(jìn)行比較時，這種方法的曲線圖或數(shù)據(jù)列表顯得凌亂和復(fù)雜。為此，很多藥學(xué)工作者對溶出度比較的方法進(jìn)行了深入研究，建立了一些可行的方法,主要分為非模型依賴法和模型依賴法。（一）非模型依賴法1、相似因子法 擬合因子包括相似因子f2和差異因子f1。由Moore和Flanner首先提出。f1和f2方程提供了簡單的計算方法，并對單一的溶出曲線間的相似性進(jìn)行了量化比較，均符合美國食品藥物管理局(FDA)和藥品配方制程改變管理規(guī)范(SUPAC)指導(dǎo)原則中有關(guān)藥劑相似性的定量分析。其中相似因子f2被FDA推薦為比較兩條溶出曲線相似性的首選方法。可作為評價工藝或處方中輔料改變時制劑溶出曲線間的差異性評價參數(shù)，以及研制制劑與市售制劑間溶出曲線的差異性評價參數(shù)。相似因子f2的數(shù)學(xué)表達(dá)式如下f2=50log1+(1/n) (Rt 一Tt )2 -0.5100式中：Rt為t時間參比制劑累積釋藥百分率；Tt為t時間受試制劑累積釋藥百分率；n為取點數(shù)目。目前此公式已被引用于FDA許多指導(dǎo)性文件。當(dāng)f2在50100之間時，表明兩種制劑的溶出度相似或等同。參比制劑和受試制劑在任何時間點溶出度的平均誤差不能超過15% 。這種方法對于有3個或3個以上時間點構(gòu)成的溶出曲線間的比較更為有效，但是如果f2值大于100，實驗數(shù)據(jù)就應(yīng)該先進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。相似因子f2的主要優(yōu)點是：（1）便于計算，通過一個簡單的數(shù)字就可以對溶出度進(jìn)行描述和比較，可用于正交設(shè)計或均勻設(shè)計的數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析；(2)可直接對釋藥數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，無需擬合各種釋藥速率。但同時具有以下缺點或局限性 ：(1)沒有考慮到數(shù)據(jù)的變異性或相關(guān)性；(2) f2和f1容易受溶出度時間點數(shù)目的影響；(3)溶出度測定的最后一點的設(shè)計對f2值至關(guān)重要；(4)對于單組的溶出數(shù)據(jù)不適用，不能提供單組溶出數(shù)據(jù)的信息。2、 此外非模型依賴法還包括釋放區(qū)間法、偏離度法以及溶出速率法等等。（二）模型依賴法模型依賴法能較好地擬合和提供溶出度數(shù)據(jù)。藥物釋放研究中所用的數(shù)學(xué)模型已達(dá)十余種。這些數(shù)學(xué)模型被用于實際觀測的數(shù)據(jù)分析中有兩個目的：一是通過數(shù)據(jù)分析而確立具有較好的擬合效果的模型，用其預(yù)報累積釋放率的某個時間的取值；二是通過觀測數(shù)據(jù)的分析，闡明釋放過程所遵循的基本規(guī)律，或者說判斷釋放與藥量及制劑釋放特性的結(jié)構(gòu)關(guān)系。選擇較好模型的三點建議：(1)所選模型的時間過程特征應(yīng)與釋放過程的時間特征一致；(2)擬合效果好且模型參數(shù)少；(3)模型參數(shù)應(yīng)有較為明確的物理意義。例如Weibull模型、Logistic模型和Gompertz模型。Weibull模型有3個參數(shù)；Logistic和Gompertz模型有4個未知參數(shù)；一般需要5個以上時間點的絕對最小值來擬合這些模型。用最小平方法的非線性回歸值可獲得最好的擬合度并計算指定時間點的積分值。這種計算方法可針對于每個容器。因此可計算得到溶出效率的均值(6個容器)及其標(biāo)準(zhǔn)差。通過計算溶出效率均值及其標(biāo)準(zhǔn)差或批次間的置信區(qū)間，比較參考制劑的溶出效率和受試制劑間的溶出效率的差異。如果差異和差異的95%的置信區(qū)間在合理的范圍內(nèi)(例如1O )即能得出參考制劑和測試制劑溶出度是等效的結(jié)論。1、威布爾分布(Weibull分布函數(shù))是一種概率分布：F(t)=1-exp-(t-)m/；可以轉(zhuǎn)化成另一種公式表達(dá)：lnln1/(1-F(t)=mln(t-)-ln其中F(t)：累積溶出百分率。：位置參數(shù)。該參數(shù)物理意義最為明確，=0時，說明藥物制劑溶出無時間延滯，0時，