影響滅活的因素.ppt

影響滅活的因素 主講人 第四組 二 一三年六月九日 滅活的概念 是指破壞病原微生物的生物學(xué)活性 繁殖能力及致病作用 或者破壞外毒素的毒性作用但盡可能不影響其免疫原性 用以只別的滅活疫苗活類毒素 滅活是獸用生物制品制備過程中的一項(xiàng)必不少的環(huán)節(jié) 滅活的方法 滅活方法可分為 1 物理滅活法熱滅活 超聲波滅活法 紫外線滅活法 射線滅活法等 2 化學(xué)滅活法利用化學(xué)藥品或酶使微生物 活性物質(zhì)的一些結(jié)構(gòu)發(fā)生改變而產(chǎn)生的使其喪失生命力 感染性或活性的方法 常用的滅活劑 甲醛甲醛及其37 40 溶液即福爾馬林 是病毒學(xué)中普遍應(yīng)用的一種病毒滅活劑 在動(dòng)物滅活疫苗制作中尤為常用 用甲醛滅活的時(shí)間長 一半需要在37 39oC處理24h以上或者更長的時(shí)間 滅活的濃度為0 1 0 8 結(jié)晶紫它主要是它的陽離子與微生物蛋白質(zhì)的羧基形成帶弱點(diǎn)的化合物 妨礙微生物的正常代謝 擾亂微生物的氧化還原作用 使電勢升高而不適于衛(wèi)生物的生長繁殖 對革蘭氏陽性菌主要是干擾細(xì)胞壁肽聚糖的合成 苯酚為無色結(jié)晶或白色榕塊 有特殊氣味 有毒及腐敗性 易潮解 溶于水及有機(jī)溶劑 苯酚的滅活機(jī)制是使微生物的蛋白質(zhì)發(fā)生變性和抑制特異的酶系統(tǒng) 脫氨酶 氧化酶等 的活性 從而導(dǎo)致微生物死亡 常用濃度為0 3 0 5 常用滅活疫苗及滅活方法 豬丹毒滅活疫苗0 2 0 25 甲醛370C18 24h禽巴氏桿菌蜂膠滅活疫苗0 1 甲醛370C7 12h豬多殺性巴氏桿菌病疫苗0 1 甲醛370C7 12h犬瘟熱肝脾組織滅活苗0 1 甲醛370C24h雞傳染性法氏囊病組織滅活苗0 4 370C20 24h豬瘟結(jié)晶紫疫苗血毒4 甘油結(jié)晶紫1 1000ml甘油 2 5g結(jié)晶紫 370C 380C6 8d狂犬病羊腦組織苗組織苗1 苯酚甘油溶液4 含60 甘油及1 苯酚的蒸餾水 360C7d破傷風(fēng)類毒素0 4 甲醛370C 380C21 31d 影響滅活的因素 所謂的滅活效果 是指滅活的完全性 即被滅活物的活性是否能完全喪失或破壞 并且滅活后是否保留良好的抗原性 滅活效果 常受滅活劑量 溫度 時(shí)間 PH 滅活物種類 濃度等因素的影響 1 滅活的特異性指某些滅活劑只對一部分微生物有明顯的滅活作用 而對另一些微生物則效力很差 酚類能抑制和殺滅大部分細(xì)菌的繁殖體 對真菌和病毒不太敏感 陽離子表面活性劑抗菌譜廣 效力快 對組織無刺激性 能殺死多鐘革蘭氏陽性菌和陰性菌 但對綠膿桿菌和細(xì)菌芽孢作用弱 2 微生物的種類及其特性不同種類的微生物如細(xì)菌 病毒 真菌等對滅活劑的敏感性不同 同一種微生物在不同的生長階段對其滅火劑的敏感性不同 如細(xì)菌的芽孢對其滅活劑的抵抗力大于繁殖體 生長期細(xì)菌對滅活劑的敏感度應(yīng)大于靜止期 另外微生物的含氧濃度也會(huì)影響滅活的效果 一般含氧量越高 甲醛等滅活劑的消耗越大 滅活脫毒越慢 3 滅活溫度通常同一濃度滅活劑的滅活速度與溫度成正比 溫度每上升100C 細(xì)菌死亡率可成倍增加 金屬鹽類的殺菌效果增加2 5倍 苯酚的殺菌作用增加5 8倍 但是 如果溫度超過400C或更高 將會(huì)影響微生物的抗原性 4 滅活劑的濃度滅活劑的濃度越高 微生物滅活脫毒的速度越快 抗原損失的也越大 分批加入滅活劑棵保護(hù)抗原的免疫原性 5 滅活時(shí)間一般滅火時(shí)間與滅活濃度及滅活溫度反比 但是為了保證品質(zhì)質(zhì)量 短時(shí)間能達(dá)到滅活效果最好 6 pHpH對細(xì)菌的滅活作用影響很大 在微酸性是滅活速度慢 細(xì)菌抗原性保持較好 在堿性時(shí)滅活速度快 蛋抗原性易受破壞 pH也影響滅活劑的電離度 一般來說 未電離的分子較易通過細(xì)菌細(xì)胞膜 滅活效果較好 7 有機(jī)物的存在生物制品中含有較多的蛋白質(zhì)等有機(jī)物質(zhì) 這些有機(jī)物質(zhì)吸附于滅活劑的表面或者與滅活劑的化學(xué)基團(tuán)結(jié)合