【金版教程】高考生物一輪復(fù)習(xí) 1 微生物的利用課件 新人教版選修1.ppt

選修一生物技術(shù)實(shí)踐 專題一微生物的利用 1 培養(yǎng)基的概念 人們按照微生物對(duì)的不同需求 配制出供其生長繁殖的 2 培養(yǎng)基的成分 一般都含有水 提供碳元素的物質(zhì) 提供氮元素的物質(zhì) 和無機(jī)鹽 還需要滿足微生物生長對(duì) 特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及的要求 營養(yǎng)物質(zhì) 營養(yǎng)基質(zhì) 碳源 氮源 ph 氧氣 1 為什么倒平板后等平板冷卻后要將平板倒置 提示 將平板倒置的目的是防止培養(yǎng)皿蓋上的水珠滴落到平板上造成污染 稀釋涂布平板法測(cè)定微生物的生長情況及應(yīng)用可在培養(yǎng)物生長的不同階段用稀釋涂布平板法進(jìn)行測(cè)定 將培養(yǎng)物進(jìn)行一系列稀釋并接種到平板培養(yǎng) 統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)后平板上的菌落數(shù) 就可以計(jì)算出原培養(yǎng)物的密度 平板上的菌落應(yīng)該是彼此分散開的 菌落數(shù)最好在30 300個(gè) 計(jì)算公式 每毫升的細(xì)菌數(shù) 平板上的菌落數(shù) 樣品的稀釋倍數(shù) 注 平板上的菌落來自1ml稀釋液 舉例 稀釋1000倍的平板上有38個(gè)菌落 原培養(yǎng)物含有 38 1000 3 8 104個(gè)細(xì)菌細(xì)胞 ml 稀釋涂布平板法廣泛應(yīng)用于微生物學(xué)的研究 這種技術(shù)只統(tǒng)計(jì)活菌數(shù) 而且需要培養(yǎng)一段時(shí)間形成菌落后才能計(jì)數(shù) 因此 這種方法不宜用于某些食品工業(yè)的質(zhì)量控制 因?yàn)橛行┦称啡缗Ｄ桃赘瘮∽冑|(zhì) 不宜延擱這么長的時(shí)間 這時(shí)可使用直接的方法 如使用顯微鏡直接統(tǒng)計(jì)細(xì)胞的數(shù)目 1 含義 指在培養(yǎng)微生物的操作中 所有防止雜菌污染的方法 2 關(guān)鍵 防止外來雜菌的入侵 3 措施 1 制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟 計(jì)算 溶化 倒平板 2 純化大腸桿菌的原理 在培養(yǎng)基上將聚集的菌種稀釋分散成單個(gè)細(xì)胞 形成單個(gè)菌落 此菌落是由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的子細(xì)胞群體 稱量 滅菌 3 接種技術(shù) 平板劃線法和稀釋涂布平板法 1 平板劃線法 是通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面操作 將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面 2 稀釋涂布平板法 是將菌液進(jìn)行一系列的 然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面 連續(xù)劃線 梯度稀釋 2 平板劃線法為什么要把第一次以后的每一次劃線的起點(diǎn)放在上一次劃線的末端 提示 目的是使每一次劃線后菌體數(shù)目減少 培養(yǎng)之后形成的菌落是由單個(gè)菌體繁殖而成 小貼士 1 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù) 1 菌種篩選 使用是唯一氮源的選擇培養(yǎng)基培養(yǎng) 2 統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目 常用方法有 顯微鏡直接計(jì)數(shù)法 3 設(shè)置對(duì)照 指設(shè)置除了以外 其他條件都相同的實(shí)驗(yàn) 目的是排除實(shí)驗(yàn)組中對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響 提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度 4 實(shí)驗(yàn)流程 土壤取樣 制備 微生物的培養(yǎng)與觀察 細(xì)菌的計(jì)數(shù) 尿素 稀釋涂布平板法 被測(cè)試的條件 非測(cè)試因素 培養(yǎng)基 2 分解纖維素的微生物的分離 1 纖維素酶的組成 是一種復(fù)合酶 至少包括三種組分 即c1酶 cx酶和酶 2 纖維素酶的作用 3 篩選方法 剛果紅染色法 即通過是否產(chǎn)生來篩選纖維素分解菌 葡萄糖苷 透明圈 4 實(shí)驗(yàn)操作步驟 1 培養(yǎng)基的種類 1 按物理性質(zhì)分類 2 按功能分類 2 培養(yǎng)基的配制原則 1 目的要明確 根據(jù)微生物的種類 培養(yǎng)目的選擇不同的原料配制培養(yǎng)基 2 營養(yǎng)要協(xié)調(diào) 配制培養(yǎng)基時(shí)要注意各營養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例 ph要適宜 3 平板劃線操作的注意事項(xiàng) 1 第一次劃線及每次劃線之前都需要灼燒接種環(huán)滅菌 2 灼燒接種環(huán)之后 要冷卻后才能伸入菌液 以免溫度太高殺死菌種 3 劃線時(shí)最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連 4 劃線用力大小要適當(dāng) 防止用力過大將培養(yǎng)基劃破 平板劃線法幾次灼燒滅菌的目的比較 如圖是微生物平板劃線示意圖 劃線的順序?yàn)?2345 下列操作方法正確的是 a 操作前不用做任何處理b 劃線操作須在火焰上進(jìn)行c 在5區(qū)域中才可以得到所需菌落d 在12345區(qū)域中劃線前后都要對(duì)接種環(huán)滅菌 解析 每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種 使下一次劃線時(shí)接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端 從而通過劃線次數(shù)的增加 使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目減少 以便得到菌落 劃線后灼燒接種環(huán) 能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種 避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者 答案 d 1 篩選原理配制選擇培養(yǎng)基 把尿素作為培養(yǎng)基中的唯一氮源 原則上只有能夠利用尿素的微生物才能夠生長 其他微生物則不能在此培養(yǎng)基上生長 2 統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目 1 理論依據(jù) 當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí) 培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落 來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌 通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù) 就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌 為了保證結(jié)果準(zhǔn)確 一般選擇菌落數(shù)在30 300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù) 2 計(jì)算方法 每克樣品中的菌株數(shù) c v m其中c代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù) v代表涂布平板時(shí)所用稀釋液的體積 ml m代表稀釋倍數(shù) 3 統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低 因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí) 平板上觀察到的只是一個(gè)菌落 4 為使結(jié)果接近真實(shí)值 要設(shè)置重復(fù)組 取其平均值 可將同一稀釋度的樣品接種到三個(gè)或三個(gè)以上的平板上 經(jīng)涂布 培養(yǎng)計(jì)算出菌落平均數(shù) 3 設(shè)置對(duì)照可排除實(shí)驗(yàn)組中非測(cè)試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響 提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度 4 實(shí)驗(yàn)流程 1 以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基作為實(shí)驗(yàn)組 制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對(duì)照組 用來判斷選擇培養(yǎng)基是否具有選擇作用 2 以培養(yǎng)基加土壤樣品進(jìn)行培養(yǎng)為實(shí)驗(yàn)組 培養(yǎng)基不加土壤樣品進(jìn)行培養(yǎng)為對(duì)照組 判斷培養(yǎng)基是否被污染 5 課題延伸由于分離分解尿素的細(xì)菌的選擇培養(yǎng)基上可能生長著以尿素分解菌代謝產(chǎn)物為氮源的其他微生物 因此還需借助生物化學(xué)方法對(duì)分離細(xì)菌作進(jìn)一步鑒定 1 原理 細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成nh3 使培養(yǎng)基堿性增強(qiáng) ph升高 因此 可通過檢測(cè)ph的變化來判斷該化學(xué)反應(yīng)是否發(fā)生 2 方法 在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑 培養(yǎng)某種細(xì)菌 若ph升高 則指示劑變紅 說明該種菌能分解尿素 下表為兩種微生物的培養(yǎng)基配方a組 b組 上述兩種培養(yǎng)基中的物質(zhì)溶解后 均用蒸餾水定容至1000ml 1 如果要對(duì)土壤中分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行分離 則需要選擇上述哪種培養(yǎng)基 該培養(yǎng)基中的碳源是 能分離尿素分解菌的原因是 2 在分離尿素分解菌所用的培養(yǎng)基中可加入 指示劑 根據(jù)指示劑的顏色可鑒定某種細(xì)菌能否分解尿素 若有分解尿素的細(xì)菌 培養(yǎng)基將會(huì)呈現(xiàn) 3 從功能上來看 上述兩種培養(yǎng)基均屬于 培養(yǎng)基 從物理性質(zhì)來看 a屬于 培養(yǎng)基 思路點(diǎn)撥 解析 培養(yǎng)基a中 氮源只有尿素 所以只有能分解尿素的微生物才能從中獲得氮源 分解尿素的細(xì)菌在分解尿素過程中產(chǎn)生氨 會(huì)使ph升高 酚紅指示劑變紅 因?yàn)榕囵B(yǎng)基a中有凝固劑 瓊脂 所以屬于固體培養(yǎng)基 培養(yǎng)基b中 纖維素是唯一的碳源 所以也屬于選擇培養(yǎng)基 答案 1 培養(yǎng)基a葡萄糖培養(yǎng)基中尿素為唯一氮源 只有能分解尿素的微生物才能生長繁殖 2 酚紅紅色 3 選擇固體 1 篩選原理即 可根據(jù)是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌 2 實(shí)驗(yàn)流程土壤取樣 富含纖維素的環(huán)境 選擇培養(yǎng) 用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng) 以增加纖維素分解菌數(shù)量 梯度稀釋 涂布平板 將樣品涂布于鑒別培養(yǎng)基上 挑選產(chǎn)生透明圈的菌落 3 兩種常用剛果紅 cr 染色法的比較 纖維素分解菌能夠產(chǎn)生纖維素酶分解纖維素 回答下列問題 1 在篩選纖維素分解菌的過程中 通常用 染色法 這種方法能夠通過顏色反應(yīng)直接對(duì)纖維素分解菌進(jìn)行篩選 甲同學(xué)在實(shí)驗(yàn)時(shí)得到了如圖所示的結(jié)果 則纖維素分解菌位于 a b c d 2 乙同學(xué)打算從牛胃中分離纖維素分解菌并計(jì)數(shù) 與分離醋酸菌相比 進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)除了營養(yǎng)不同外 最主要的實(shí)驗(yàn)條件差別是 該同學(xué)采用活菌計(jì)數(shù)法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)目往往比活菌的實(shí)際數(shù)目 3 丙同學(xué)在提取和分離纖維素酶的過程中 為了抵制外界酸和堿對(duì)酶活性的影響 采取的措施是向提取液和分離液中添加 若探究纖維素酶活性的最適溫度 如何設(shè)置對(duì)照 解析 1 剛果紅與纖維素形成的紅色復(fù)合物在纖維素被分解后將不再形成 則在培養(yǎng)基上出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈 2 牛胃是一個(gè)厭氧的環(huán)境 所以其中的纖維素分解菌與需氧的醋酸菌培養(yǎng)條件有所不同 因是活菌計(jì)數(shù)法 所以部分死亡菌無法計(jì)數(shù) 另外當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)平板上只觀察到一個(gè)菌落 所以偏小 3 探究最適溫度可設(shè)置一系列的溫度梯度相互對(duì)照 其他無關(guān)變量要適宜 答案 1 剛果紅a 2 保證無氧環(huán)境小 低 3 緩沖溶液不同的溫度梯度之間相互對(duì)照 1 分離微生物的方法從混合樣品中獲得某種微生物的方法通常有兩種 1 利用該分離對(duì)象對(duì)某一營養(yǎng)物質(zhì)有 嗜好 的原理 專門在培養(yǎng)基中加入該營養(yǎng)物質(zhì) 從而使它成為一種加富培養(yǎng)基 2 利用該分離對(duì)象對(duì)某種抑菌物質(zhì)的抗性 在混合培養(yǎng)物中加入該抑制物 經(jīng)培養(yǎng)后 原來占優(yōu)勢(shì)的微生物生長受抑制 而分離對(duì)象卻可乘機(jī)大大增殖 在數(shù)量上占優(yōu)勢(shì) 2 選擇培養(yǎng)基應(yīng)用實(shí)例 1 培養(yǎng)基中加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌 2 培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽可得到金黃色葡萄球菌 3 培養(yǎng)基中缺乏氮源時(shí) 可以分離固氮微生物 因?yàn)榉枪痰⑸锊荒茉诖伺囵B(yǎng)基上生存 4 當(dāng)培養(yǎng)基的某種營養(yǎng)成分為特定化學(xué)成分時(shí) 也具有分離效果 如石油是唯一碳源時(shí) 可以抑制不能利用石油的微生物的生長 使能夠利用石油的微生物生存 達(dá)到分離能消除石油污染的微生物的目的 5 改變微生物的培養(yǎng)條件 也可以達(dá)到分離微生物的目的 如將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)只能得到耐高溫的微生物 2012 江蘇鎮(zhèn)江調(diào)研 通過選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物 在缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無法生長 在培養(yǎng)基中加入青霉素可以抑制細(xì)菌和放線菌 在培養(yǎng)基中加入10 的酚可以抑制細(xì)菌和霉菌 利用上述方法能從混雜的微生物群體中分別分離出 大腸桿菌 霉菌 放線菌 固氮細(xì)菌a b c d 解析 缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無法生長 而固氮細(xì)菌能生長 在培養(yǎng)基中加入青霉素可以抑制細(xì)菌和放線菌 霉菌能生長 在培養(yǎng)基中加入10 的酚可以抑制細(xì)菌和霉菌 放線菌能生長 答案 a 特定微生物的數(shù)量測(cè)定1 為了保證結(jié)果準(zhǔn)確 一般選擇菌落數(shù)在30 300的平板上進(jìn)行計(jì)數(shù) 2 在同一稀釋度下 至少對(duì)3個(gè)平板進(jìn)行重復(fù)計(jì)數(shù) 然后求出平均值 并根據(jù)平板所對(duì)應(yīng)的稀釋度計(jì)算出樣品中細(xì)菌的數(shù)目 如果某個(gè)平板的菌落數(shù)與其他差別甚遠(yuǎn) 說明該平板操作過程中出現(xiàn)失誤 應(yīng)舍棄 3 統(tǒng)計(jì)的菌落往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低 這是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí) 平板上觀察到的只是一個(gè)菌落 因此 統(tǒng)計(jì)結(jié)果用菌落數(shù)而不是活菌數(shù)來表示 2012 廣東中山一中測(cè)試 用稀釋涂布平板法測(cè)定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù) 在對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中 得到以下幾種統(tǒng)計(jì)結(jié)果 正確的是 a 涂布了一個(gè)平板 統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是230b 涂布了兩個(gè)平板 統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是215和260 取平均值238c 涂布了三個(gè)平板 統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是21 212和256 取平均值163d 涂布了三個(gè)平板 統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是210 240和250 取平均值233 解析 在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時(shí) 一定要涂布至少3個(gè)平板作為重復(fù)組 才能增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力與準(zhǔn)確性 所以a b不正確 c項(xiàng)雖涂布了3個(gè)平板 但是 其中1個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另兩個(gè)相差太遠(yuǎn) 說明在操作過程中可能出現(xiàn)了錯(cuò)誤 此時(shí) 不能簡單地將3個(gè)平板的計(jì)數(shù)值用來求平均值 答案 d 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)過程微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)過程涉及培養(yǎng)基的配制 滅菌 接種 培養(yǎng) 觀察等過程 其中配制培養(yǎng)基時(shí)要注意各種營養(yǎng)要素的均衡以及ph的適宜 這是基礎(chǔ) 配制好培養(yǎng)基后 要進(jìn)行滅菌 倒平板 接種后要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行倒置培養(yǎng) 這些過程都是我們?cè)谖⑸飳?shí)驗(yàn)室培養(yǎng)中需要注意的問題 另外我們還要對(duì)為什么這樣操作 說出原因 2012 煙臺(tái)診斷 某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進(jìn)行實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)包括制備培養(yǎng)基 滅菌 接種及培養(yǎng) 菌落觀察與計(jì)數(shù) 請(qǐng)回答與此實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問題 1 培養(yǎng)基中含有的蛋白胨 淀粉分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供了 和 除此之外 培養(yǎng)基還必須含有的基本成分是 和 2 對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌 應(yīng)該采用的方法是 3 為了盡快觀察到細(xì)菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果 應(yīng)將接種了湖水樣品的平板置于 中培養(yǎng) 培養(yǎng)的溫度設(shè)定在37 要使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可靠 還應(yīng)該同時(shí)在另一平板上接種 作為對(duì)照進(jìn)行實(shí)驗(yàn) 4 培養(yǎng)20h后 觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落 這說明湖水樣品中有 種細(xì)菌 一般說來 菌落總數(shù)越多 湖水遭受細(xì)菌污染的程度越 5 如果提高培養(yǎng)基中nacl的濃度 可以用于篩選耐 細(xì)菌 這種培養(yǎng)基被稱為 解析 3 小題易回答錯(cuò)誤 錯(cuò)誤原因是不知道如何處理對(duì)照實(shí)驗(yàn) 該實(shí)驗(yàn)中對(duì)照組為空白對(duì)照 因此應(yīng)接種無菌水 蛋白胨來源于動(dòng)物原料 含有維生素 糖和有機(jī)氮等營養(yǎng)物質(zhì) 在培養(yǎng)基中主要是作為氮源 微生物的培養(yǎng)基各種配方一般都要含有水 碳源 氮源 無機(jī)鹽 實(shí)驗(yàn)室的滅菌方法一般有 灼燒滅菌法 適合于接種工具的滅菌 干熱滅菌法 適合于耐高溫的 需要保持干燥的物品的滅菌 高壓蒸汽滅菌法 適合于培養(yǎng)基等物體的滅菌 要想使微生物快速地繁殖 就要置于適宜的條件下 特別是溫度 所以要置于恒溫箱中 對(duì)照實(shí)驗(yàn)就是要設(shè)置一個(gè)無菌的培養(yǎng)基加以比較 進(jìn)行觀察 不同的細(xì)菌形成的菌落具有不同的形態(tài) 細(xì)菌菌落的特征是識(shí)別不同細(xì)菌的主要依據(jù) 菌落是由一個(gè)細(xì)菌細(xì)胞繁殖而來的 菌落多則說明細(xì)菌的數(shù)目就多 加入了特定的物質(zhì) 用于篩選各種特定細(xì)菌的培養(yǎng)基就是選擇培養(yǎng)基 例如加入了nacl就可以用于篩選耐鹽細(xì)菌 答案 1 氮源 碳源不作要求 碳源無機(jī)鹽水 2 高壓蒸汽滅菌 3 恒溫箱無菌水 4 多高 5 鹽 或nacl 選擇培養(yǎng)基 1 2009 安徽理綜 下列是關(guān)于 檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù) 實(shí)驗(yàn)操作的敘述 其中錯(cuò)誤的是 a 用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 經(jīng)高溫 高壓滅菌后倒平板b 取104 105 106倍的土壤稀釋液和無菌水各0 1ml 分別涂布于各組平板上c 實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組平板倒置 37 恒溫培養(yǎng)24 48小時(shí)d 確定對(duì)照組無菌后 選擇菌落數(shù)在300以上的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù) 解析 檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù) 用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 經(jīng)高溫 高壓滅菌后倒平板 取104 105 106倍的土壤稀釋液和無菌水各0 1ml 分別涂布于各組平板上 將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組平板倒置 37 恒溫培養(yǎng)24 48小時(shí) 在確定對(duì)照組無菌后 選擇菌落數(shù)在30 300的一組平板為代表進(jìn)行計(jì)數(shù) 答案 d 2 2011 課標(biāo)全國 有些細(xì)菌可分解原油 從而消除由原油泄漏造成的土壤污染 某同學(xué)欲從受原油污染的土壤中篩選出高效降解原油的菌株 回答問題 1 在篩選過程中 應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以 為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上 從功能上講 該培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基 2 純化菌種時(shí) 為了得到單菌落 常采用的接種方法有兩種 即 和 3 為了篩選出高效菌株 可比較單菌落周圍分解圈的大小 分解圈大說明該菌株的降解能力 4 通常情況下 在微生物培養(yǎng)過程中實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌 和 無菌技術(shù)要求實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈 附近進(jìn)行 以避免周圍環(huán)境中微生物的污染 解析 本題主要考查生物技術(shù)實(shí)踐中微生物的培養(yǎng)與分離 意在考查考生對(duì)相關(guān)知識(shí)的靈活運(yùn)用能力 1 欲篩選出能降解原油的菌株 培養(yǎng)基中應(yīng)只含有原油而無其他碳源 這樣不能降解原油的細(xì)菌在此培養(yǎng)基上不能生存 這類培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基 2 分離純化菌種時(shí) 接種的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法 使聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞 從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落 以便于純化菌種 3 降解原油能力越強(qiáng)的菌株 在菌落周圍形成的分解圈越大 4 實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌 如接種環(huán) 干熱滅菌 如培養(yǎng)皿 和高壓蒸汽滅菌 如培養(yǎng)基 等 無菌技術(shù)要求在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中操作都在酒精燈火焰附近進(jìn)行 以避免周圍微生物的污染 答案 1 原油選擇 2 平板劃線法稀釋涂布平板法 3 強(qiáng) 4 干熱滅菌高壓蒸汽滅菌火焰 3 2009 寧夏理綜 1 在大腸桿菌培養(yǎng)過程中 除考慮營養(yǎng)條件外 還要考慮 和滲透壓等條件 由于該細(xì)菌具有體積小 結(jié)構(gòu)簡單 變異類型容易選擇 等優(yōu)點(diǎn) 因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料 2 在微生物培養(yǎng)操作過程中 為防止雜菌污染 需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進(jìn)行 消毒 滅菌 操作者的雙手需進(jìn)行清洗和 靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅 其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性 還能 3 若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù) 要想使所得估計(jì)值更接近實(shí)際值 除應(yīng)嚴(yán)格操作 多次重復(fù)外 還應(yīng)保證待測(cè)樣品稀釋的 4 通常 對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀 大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的 5 培養(yǎng)大腸桿菌時(shí) 在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染 對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是 6 若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn) 使用過的培養(yǎng)基及培養(yǎng)物必須經(jīng)過 處理后才能丟棄 以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散 解析 1 大腸桿菌具有體積小 結(jié)構(gòu)簡單 變異類型容易選擇 易培養(yǎng) 生活周期短等優(yōu)點(diǎn) 培養(yǎng)過程中 除考慮營養(yǎng)條件外 還要考慮溫度 酸堿度和滲透壓等條件 2 滅菌是用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物 所以對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌 消毒是用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物 操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和消毒 紫外線能使蛋白質(zhì)變性 還能損傷dna的結(jié)構(gòu) 3 稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋 然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面 進(jìn)行培養(yǎng) 應(yīng)保證樣品稀釋的比例適合 4 對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀 大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的鑒定 5 培養(yǎng)大腸桿菌時(shí) 在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染 對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間 觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生 6 因?yàn)橛械拇竽c桿菌會(huì)釋放一種強(qiáng)烈的毒素 并可能導(dǎo)致腸管出現(xiàn)嚴(yán)重癥狀 使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過滅菌處理后才能丟棄 以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散 答案 1 溫度酸堿度易培養(yǎng)生活周期短 2 滅菌消毒損傷dna的結(jié)構(gòu) 3 比例合適 4 鑒定 或分類 5 將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間 觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生 6 滅菌 4 2010 廣東生物 苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì) 自然界中存在著降解苯酚的微生物 某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚 為了降解廢水中的苯酚 研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細(xì)菌菌株 篩選的主要步驟如圖所示 為土壤樣品 請(qǐng)回答下列問題 1 中培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入 作為碳源 中不同濃度碳源的培養(yǎng)基 a 影響 b 不影響 細(xì)菌的數(shù)量 如果要測(cè)定 中活細(xì)菌數(shù)量 常采用 法 2 為對(duì)照 微生物在 中不生長 在 中生長 與 培養(yǎng)基的主要區(qū)別在于 使用 法可以在 上獲得單菌落 采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)為什么進(jìn)行倒置培養(yǎng) 3 如何比較不同菌株降解苯酚能力的大小 4 實(shí)驗(yàn)過程中如何防止其他微生物的污染 解析 1 從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細(xì)菌菌株 其培養(yǎng)基中必須添加苯酚作為碳源 碳源的濃度不同 培養(yǎng)基中生存的細(xì)菌的數(shù)量也不同 采用平板菌落計(jì)數(shù) 活菌計(jì)數(shù)或菌落計(jì)數(shù) 可以測(cè)定活細(xì)菌數(shù)量 2 與 培養(yǎng)基的區(qū)別主要是 中添加的是除 苯酚 以外的碳源 中添加的碳源只有苯酚 使用平板分離 稀釋涂布平板或平板劃線分離 法可以在平板培養(yǎng)基上獲得單菌落 采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)要倒置培養(yǎng) 目的是避免培養(yǎng)過程中產(chǎn)生的水分影響微生物的生長 3 4 見答案 答案 1 苯酚a平板菌落計(jì)數(shù) 活菌計(jì)數(shù)或菌落計(jì)數(shù) 2 含除苯酚外的其他碳源 以苯酚為唯一碳源平板分離 稀釋涂布平板或平板劃線分離 避免培養(yǎng)過程產(chǎn)生的水分影響微生物的生長 3 用同樣苯酚濃度的培養(yǎng)液培養(yǎng)不同菌株 一定時(shí)間后 測(cè)定培養(yǎng)液中苯酚含量 4 培養(yǎng)基滅菌 接種環(huán)境滅菌 接種過程無菌操作 1 2012 聊城高考模擬 有些微生物能合成纖維素酶 通過對(duì)這些微生物的研究 使人們能夠利用秸稈等廢棄物生產(chǎn)酒精 用纖維素酶處理服裝面料等 研究人員用化合物a 硝酸鹽 磷酸鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基 成功地篩選到能產(chǎn)生纖維素酶的微生物 分析回答問題 1 培養(yǎng)基中加入的化合物a是 為微生物的生長提供 這種培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基 2 為了篩選出能產(chǎn)生纖維素酶的微生物 向培養(yǎng)基中加入 3 在篩選出能產(chǎn)生纖維素酶的微生物之前 可用液體培養(yǎng)基培養(yǎng) 增加微生物的濃度 若獲得純凈的菌株 常采用平板劃線的方法進(jìn)行接種 此過程所用的接種工具是 操作時(shí)采用 滅菌的方法 還可用 方法操作 4 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后 使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理才能掉 這樣做的目的是 解析 在對(duì)微生物進(jìn)行選擇培養(yǎng)時(shí) 要針對(duì)微生物利用的營養(yǎng)物質(zhì)的特點(diǎn) 滿足微生物需要的某一種營養(yǎng)要素 其他微生物不能利用這一營養(yǎng)物質(zhì) 就能從多種微生物中進(jìn)行選擇培養(yǎng) 要分離分解纖維素的微生物 就應(yīng)該在培養(yǎng)基中加入纖維素作為碳源 不能利用纖維素的微生物在這樣的培養(yǎng)基上不能生長 所以該培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基 在篩選分解纖維素的微生物時(shí) 加入剛果紅作為指示劑 剛果紅能與纖維素形成紅色的復(fù)合物 當(dāng)纖維素被分解后 紅色消失形成了透明圈 在平板劃線法進(jìn)行接種時(shí) 常用接種環(huán)作為接種工具 操作時(shí)采用灼燒滅菌 接種的方法除了平板劃線法外 還可以用稀釋涂布平板法進(jìn)行操作 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后 為了防止微生物污染實(shí)驗(yàn)環(huán)境 需要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌處理后倒掉 答案 1 纖維素碳源選擇 2 剛果紅 3 接種環(huán)灼燒稀釋涂布平板 4 防止造成環(huán)境污染 2 2012 北京東城一模 某實(shí)驗(yàn)小組欲從土壤中篩選出能分泌淀粉酶的芽孢桿菌 設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)步驟如下 請(qǐng)給予合理的補(bǔ)充 1 采樣與培養(yǎng) 將采集的土樣混勻后稱取1g 置于經(jīng)過 法滅菌處理的 填 固體 或 液體 培養(yǎng)基中 28 振蕩培養(yǎng) 2 接種與選擇 為避免培養(yǎng)液中菌體濃度過高 需將培養(yǎng)液進(jìn)行 處理 之后 將菌液涂布接種于以 為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上 30 條件下培養(yǎng) 為避免污染 需將培養(yǎng)皿呈 狀態(tài)放置 此外 為排除其他因素的影響 提高實(shí)驗(yàn)可信度 本步驟需設(shè)計(jì) 作為空白對(duì)照 3 篩選與純化 將適量的碘液滴加在平板中的菌落周圍 如果菌落周圍的現(xiàn)象是 則說明此種菌能夠 從平板中挑取實(shí)驗(yàn)效果明顯的目的菌株 采用 法接種于新的培養(yǎng)基平板 可對(duì)菌株進(jìn)行進(jìn)一步的純化 解析 1 對(duì)培養(yǎng)基的滅菌方式是高壓蒸汽滅菌 因?yàn)楹竺嬉M(jìn)行涂布 所以應(yīng)該用液體培養(yǎng)基來培養(yǎng) 2 降低培養(yǎng)液菌體濃度一般用稀釋的方法 由于題目要求選出能分泌淀粉酶的芽孢桿菌 所以培養(yǎng)基就應(yīng)以淀粉為唯一碳源 倒置可以避免培養(yǎng)基受污染 為排除其他因素影響 需要設(shè)置未接種