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2.2.2動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體目標(biāo)導(dǎo)航1.掌握動(dòng)物細(xì)胞融合的原理和方法。2.結(jié)合圖224,歸納單克隆抗體的制備過(guò)程及應(yīng)用。重難點(diǎn)擊1.動(dòng)物細(xì)胞融合的原理和方法。2.單克隆抗體的制備過(guò)程。課堂導(dǎo)入方式一:1970年,有兩位科學(xué)家做了人鼠細(xì)胞融合的實(shí)驗(yàn),以證明細(xì)胞膜的流動(dòng)性。思考該如何實(shí)現(xiàn)人鼠細(xì)胞的融合,動(dòng)物細(xì)胞融合后還有什么用途呢?植物體細(xì)胞雜交可得到雜種植株,動(dòng)物細(xì)胞融合后能像電影上一樣形成雜種動(dòng)物個(gè)體嗎?方式二:“太空婚禮”2002年12月30日,兩場(chǎng)籌備了10年的“太空婚禮”首次在神舟四號(hào)飛船上舉行,植物細(xì)胞“新人”是黃花煙草和革新一號(hào)煙草葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體,動(dòng)物細(xì)胞“新人”是小鼠b淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞,兩批新人同時(shí)在“產(chǎn)房”電融合儀內(nèi)孕育新生命。請(qǐng)思考:新人一的婚禮流程是怎樣的?愛情結(jié)晶是什么?新人二的婚禮流程又是怎樣的?愛情結(jié)晶會(huì)是什么呢?要想知道答案,就讓我們一起來(lái)進(jìn)入今天的課題吧!一、動(dòng)物細(xì)胞融合1.概念:兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程,也稱細(xì)胞雜交。2.原理:細(xì)胞膜的流動(dòng)性。3.誘導(dǎo)融合的方法(1)物理、化學(xué)方法:與植物體細(xì)胞雜交相同,如聚乙二醇、電激等。(2)生物方法:滅活的病毒。4.過(guò)程:具有不同遺傳信息的兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞雜交細(xì)胞。5.結(jié)果:形成雜交細(xì)胞。6.意義:突破了有性雜交方法的局限,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段。如:利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù),為制造單克隆抗體開辟了新途徑。合作探究1.關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程與結(jié)果的思考:(1)融合處理后的細(xì)胞是否可以直接用于培養(yǎng),為什么?答案不可以,還需要篩選。因?yàn)檎T導(dǎo)融合的手段只是促使細(xì)胞間的融合,不能保證所有的細(xì)胞都發(fā)生融合,形成的融合細(xì)胞也有多種,因此需要篩選。(2)動(dòng)物細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是什么?答案動(dòng)物細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是來(lái)自不同細(xì)胞的兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞核融合成一個(gè)細(xì)胞核。(3)動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合所用的誘導(dǎo)方法有何不同?答案動(dòng)物細(xì)胞融合可用滅活的病毒進(jìn)行誘導(dǎo)。2.細(xì)胞融合技術(shù)與有性雜交相比有哪些優(yōu)點(diǎn)?答案有性雜交有著十分嚴(yán)格的時(shí)空關(guān)系和物種界限。動(dòng)物細(xì)胞融合則不同,它通過(guò)人工的方法克服了存在于物種之間的遺傳屏障,從而能夠按照人們的意愿,把不同物種的不同組織類型的細(xì)胞融合在一起。3.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的對(duì)比比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合原理細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞融合方法用纖維素酶、果膠酶去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合用胰蛋白酶或膠原蛋白酶使細(xì)胞分散后,誘導(dǎo)細(xì)胞融合誘導(dǎo)手段離心、電激、振動(dòng)、聚乙二醇等誘導(dǎo)與植物體細(xì)胞雜交相比,還可用滅活的病毒誘導(dǎo)結(jié)果形成雜種植株形成雜種細(xì)胞,以生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)品用途克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙,擴(kuò)展雜交親本范圍,培育新品種制備單克隆抗體、病毒疫苗、干擾素等意義突破有性雜交方法的局限,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能1.判斷正誤(1)動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交,是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程()(2)動(dòng)物細(xì)胞融合后形成的具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞遺傳信息的雙核或多核細(xì)胞稱為雜交細(xì)胞()(3)常用的誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的因素有:聚乙二醇、滅活的病毒、電激、離心等()(4)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能()答案(1)(2)(3)(4)2.如圖表示將人成纖維細(xì)胞與小鼠細(xì)胞進(jìn)行融合,獲得部分雜種細(xì)胞的過(guò)程(注:雜種細(xì)胞中人類的染色體會(huì)隨機(jī)丟失,各種雜種細(xì)胞保留人類染色體的種類和數(shù)量是不同的)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)圖中誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合常用的誘導(dǎo)因素有_(至少寫出兩種),細(xì)胞融合后,再用特定的_培養(yǎng)基進(jìn)行篩選,得到雜種細(xì)胞。(2)培養(yǎng)雜種細(xì)胞時(shí),根據(jù)細(xì)胞所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的種類和數(shù)量嚴(yán)格配制培養(yǎng)基,此外經(jīng)常會(huì)在培養(yǎng)基中加入_。培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)胞需置于含co2的混合氣體的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),co2的主要作用是維持培養(yǎng)液的_。(3)若只考慮人成纖維細(xì)胞與小鼠細(xì)胞兩兩融合形成的雜種細(xì)胞,假如每種雜種細(xì)胞只保留了人的1條染色體,從染色體組成的角度考慮,雜種細(xì)胞可能有_種。答案(1)聚乙二醇(peg)、滅活的病毒、電激(寫出兩種即可)選擇性(2)動(dòng)物血清、血漿ph(3)24解析(1)誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的因素包括物理因素(如電激)、化學(xué)因素(如聚乙二醇)、生物因素(如滅活的病毒)。通過(guò)選擇性培養(yǎng)基將雜種細(xì)胞篩選出來(lái)。(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液一般包括糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素、動(dòng)物血清、動(dòng)物血漿。(3)人體細(xì)胞中含有24種染色體,分別是22種常染色體和2種性染色體(即x染色體和y染色體)。一題多變?cè)谌顺衫w維細(xì)胞與小鼠細(xì)胞進(jìn)行融合的混合體系中可能有幾種細(xì)胞?答案在混合體系中可能有五種細(xì)胞,即三種融合細(xì)胞和兩種未融合細(xì)胞。二、單克隆抗體的制備1.傳統(tǒng)抗體的獲得(1)方法:向動(dòng)物體內(nèi)反復(fù)注射某種抗原,使動(dòng)物產(chǎn)生抗體;從動(dòng)物血清中分離所需抗體。(2)缺陷:產(chǎn)量低、純度低、特異性差。2.單克隆抗體的制備(1)制備原理b淋巴細(xì)胞特點(diǎn):一種b淋巴細(xì)胞產(chǎn)生一種單一抗體,b淋巴細(xì)胞在體外不能(能/不能)無(wú)限增殖。骨髓瘤細(xì)胞特點(diǎn):能無(wú)限增殖。雜交瘤細(xì)胞特點(diǎn):b淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合得到雜交瘤細(xì)胞,既能無(wú)限增殖,又能產(chǎn)生特異性抗體。(2)制備過(guò)程制備特異性b淋巴細(xì)胞獲得雜交瘤細(xì)胞將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾中形成的b淋巴細(xì)胞融合用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞,該雜種細(xì)胞既能迅速大量繁殖又能產(chǎn)生專一的抗體克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔中增殖提取單克隆抗體:從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取(3)單克隆抗體優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng)、靈敏度高、并可大量制備。(4)單克隆抗體的應(yīng)用作為診斷試劑,具有準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速的優(yōu)點(diǎn)。用于治療疾病和運(yùn)載藥物。合作探究1.仔細(xì)觀察教材p53圖224,探討下列問(wèn)題:(1)制備單克隆抗體過(guò)程中的幾種細(xì)胞有何特點(diǎn)?答案免疫的b淋巴細(xì)胞:能產(chǎn)生單一抗體,但不能無(wú)限增殖。骨髓瘤細(xì)胞:能無(wú)限增殖,不能產(chǎn)生抗體。雜交瘤細(xì)胞:既能產(chǎn)生特定的抗體,又能在培養(yǎng)條件下進(jìn)行無(wú)限增殖。(2)單克隆抗體制備過(guò)程中有兩次篩選,其目的分別是什么?答案第一次篩選是在b淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合之后,篩選出只有b淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的雜種細(xì)胞。第二次篩選需先在多孔培養(yǎng)皿上培養(yǎng),在每個(gè)孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下開始培養(yǎng),然后再篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群。2.用單克隆抗體及相關(guān)物質(zhì)制成的“生物導(dǎo)彈”中真正起治療作用的物質(zhì)是什么?答案“生物導(dǎo)彈”中真正發(fā)揮治療作用的物質(zhì)是相關(guān)“藥物”,單克隆抗體所起的作用是將藥物定向帶到靶細(xì)胞所在位置,借助其導(dǎo)向作用,在原位殺死癌細(xì)胞,這樣既不損傷正常細(xì)胞,又減少了用藥劑量。因此,“生物導(dǎo)彈”可作為一種療效高、毒副作用小的新型藥物。3.判斷正誤(1)制備單克隆抗體所用的b淋巴細(xì)胞是經(jīng)過(guò)免疫的b淋巴細(xì)胞()(2)細(xì)胞融合之后需要一次篩選,方可獲得能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞()(3)利用單克隆抗體制成的“生物導(dǎo)彈”,其選擇性是由藥物決定的,與抗體無(wú)關(guān)()(4)動(dòng)物雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體能體現(xiàn)細(xì)胞全能性()答案(1)(2)(3)(4)4.下圖是單克隆抗體制備流程的簡(jiǎn)明示意圖。下列有關(guān)敘述,正確的是()a.是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)t細(xì)胞b.中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細(xì)胞的形成c.同時(shí)具有脾臟細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞的特性d.是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群答案d解析是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的b淋巴細(xì)胞(漿細(xì)胞),a項(xiàng)錯(cuò)誤;胰蛋白酶可使組織分散為單個(gè)細(xì)胞,b項(xiàng)錯(cuò)誤;為雜交細(xì)胞,若是b淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合形成的雜交細(xì)胞,才同時(shí)具有b淋巴細(xì)胞(可產(chǎn)生抗體)和骨髓瘤細(xì)胞(可無(wú)限增殖)的特性,c項(xiàng)錯(cuò)誤;是經(jīng)篩選后獲得的能夠分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞,d項(xiàng)正確。一題多變(1)體外培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞,會(huì)不會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象?為什么?答案不會(huì)。骨髓瘤細(xì)胞是一種癌細(xì)胞,細(xì)胞表面糖蛋白減少,失去了接觸抑制作用。(2)體外培養(yǎng)時(shí),應(yīng)提供什么條件?答案無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境;必要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),如葡萄糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等;適宜的溫度和ph;提供氧氣和二氧化碳。1.下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中,敘述正確的是()a.誘導(dǎo)融合的方法完全相同b.所用的技術(shù)手段完全相同c.所采用的原理完全相同d.都能形成雜種細(xì)胞答案d解析兩種細(xì)胞工程技術(shù)都要進(jìn)行細(xì)胞融合,但融合的方法不完全相同;誘導(dǎo)的方法,除動(dòng)物細(xì)胞的融合常用滅活的病毒做誘導(dǎo)劑外,其他的兩者基本相同;兩者采用的原理不同,動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性,最終形成的是雜種細(xì)胞。植物體細(xì)胞雜交的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性和細(xì)胞的全能性。故正確答案為d。2.單克隆抗體在醫(yī)療、診斷等方面發(fā)揮著越來(lái)越重要的作用??茖W(xué)家米爾斯坦和科勒設(shè)計(jì)了一個(gè)用已免疫的b淋巴細(xì)胞制備單克隆抗體的實(shí)驗(yàn),下圖為其實(shí)驗(yàn)流程圖。則相關(guān)的敘述或說(shuō)法中,不正確的是()a.a是骨髓瘤細(xì)胞,表示在選擇培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)b.制備單克隆抗體時(shí),選擇b淋巴細(xì)胞的原因是它能分泌多種特異性抗體c.過(guò)程如在體外培養(yǎng),則需要無(wú)菌、無(wú)毒,營(yíng)養(yǎng)充足,溫度、ph適宜等環(huán)境條件d.誘導(dǎo)動(dòng)、植物細(xì)胞融合常用的一種化學(xué)誘導(dǎo)劑是聚乙二醇答案b解析對(duì)于b淋巴細(xì)胞來(lái)說(shuō),每一種b淋巴細(xì)胞經(jīng)特定抗原刺激只能產(chǎn)生一種特異性抗體。根據(jù)單克隆抗體制備的流程判斷:a是骨髓瘤細(xì)胞、b是雜交瘤細(xì)胞。是誘導(dǎo)b淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的過(guò)程。表示在選擇培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)、篩選能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞的過(guò)程。包括體外培養(yǎng)和注入小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)。選擇培養(yǎng)基只允許雜交瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖,其他細(xì)胞不能生存。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需具備的條件是:無(wú)菌、無(wú)毒,營(yíng)養(yǎng)充足,溫度適宜,ph適宜,充足的空氣。誘導(dǎo)細(xì)胞融合時(shí)常用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑。3.下面為制備單克隆抗體過(guò)程示意圖,下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()a.中的篩選是為了獲得能產(chǎn)生多種抗體的雜交瘤細(xì)胞b.中培養(yǎng)基應(yīng)加入選擇性抑制骨髓瘤細(xì)胞dna分子復(fù)制的物質(zhì)c.上圖中有一處明顯錯(cuò)誤d.可以無(wú)限增殖答案a解析中的篩選是為了獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞;中培養(yǎng)基應(yīng)加入選擇性抑制骨髓瘤細(xì)胞dna分子復(fù)制的物質(zhì),這樣才能篩選出雜交瘤細(xì)胞;圖中的小鼠沒有經(jīng)過(guò)免疫處理,應(yīng)該注射相應(yīng)的抗原,小鼠才能形成相應(yīng)的b淋巴細(xì)胞。4.下圖表示抗人體胃癌的單克隆抗體的制備過(guò)程,有關(guān)敘述不正確的是()a.圖中實(shí)驗(yàn)小鼠注射的甲是能與抗人體胃癌抗體特異性結(jié)合的抗原b.利用聚乙二醇、滅活的病毒和電激等方法均可誘導(dǎo)細(xì)胞融合獲得乙c.用特定的選擇培養(yǎng)基對(duì)乙篩選,融合細(xì)胞均能生長(zhǎng),未融合細(xì)胞均不能生長(zhǎng)d.丙需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè),經(jīng)多次篩選后可獲得大量能分泌所需抗體的丁答案c解析選擇培養(yǎng)基只能讓特定的符合條件的細(xì)胞存活下來(lái),在題目給定的選擇培養(yǎng)基上,只有雜交瘤細(xì)胞才能夠存活;圖中實(shí)驗(yàn)小鼠注射的甲是能與抗人體胃癌抗體特異性結(jié)合的抗原;利用聚乙二醇、滅活的病毒和電激等方法均可誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合;丙為能無(wú)限增殖和分泌抗體的雜交瘤細(xì)胞,為獲得大量專一性抗體,需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)、多次篩選。5.科學(xué)家從某些能無(wú)限增殖細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中分離出無(wú)限增殖調(diào)控基因(prg),該基因能激發(fā)許多動(dòng)物細(xì)胞的分裂,這為單克隆抗體的制備提供了更為廣闊的前景。請(qǐng)回答下面的問(wèn)題:(1)利用細(xì)胞融合技術(shù)制備單克隆抗體,一般選用的是_和_融合。(2)有人提出,可以直接通過(guò)基因工程導(dǎo)入該調(diào)控基因來(lái)制備單克隆抗體,其思路如圖所示。酶a是指_,酶b是指_。對(duì)已導(dǎo)入重組質(zhì)粒的進(jìn)行“檢測(cè)”的原因是_;指代的細(xì)胞具有的特點(diǎn)_。有人提出用細(xì)胞核移植技術(shù)構(gòu)建重組細(xì)胞來(lái)生產(chǎn)單克隆抗體,試用相關(guān)的圖示及文字表示該過(guò)程。答案(1)骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)過(guò)免疫的b淋巴細(xì)胞(漿細(xì)胞)(2)限制酶dna連接酶導(dǎo)入成功率很低既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體如圖所示解析(1)制備單克隆抗體選用的融合細(xì)胞一般為骨髓瘤細(xì)胞(能無(wú)限增殖)與經(jīng)過(guò)免疫的b淋巴細(xì)胞(能產(chǎn)生特異性抗體)。(2)圖示過(guò)程為獲取目的基因,需用限制酶切取出目的基因片段;由于目的基因?qū)氤晒β什⒉桓?,故常需進(jìn)行導(dǎo)入檢測(cè);由于的細(xì)胞具有“無(wú)限增殖”的調(diào)控基因,故可進(jìn)行無(wú)限增殖,從而產(chǎn)生大量的單克隆抗體?;A(chǔ)過(guò)關(guān)1.下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞融合的說(shuō)法,不正確的是()a.動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交,是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程b.動(dòng)物細(xì)胞融合后形成的具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞稱為雜交細(xì)胞c.常用于誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的手段有:聚乙二醇、滅活的病毒、電激、紫外線照射d.細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能答案c解析動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交,是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程,a正確;融合后形成的具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞,稱為雜交細(xì)胞,b正確;誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有電激、聚乙二醇、滅活的病毒等,不能用紫外線照射,c錯(cuò)誤;細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交不親和的障礙,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能,d正確。2.動(dòng)物細(xì)胞融合的目的中最重要的是()a.克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙b.制備單克隆抗體c.培育新物種d.生產(chǎn)雜交細(xì)胞答案b解析動(dòng)物細(xì)胞融合不像植物體細(xì)胞雜交那樣主要是為了克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙,以培育新品種;植物體細(xì)胞雜交還應(yīng)用了植物體細(xì)胞的全能性,動(dòng)物細(xì)胞作為整體,它的全能性受到限制,目前只見到高度分化的細(xì)胞核在去核卵細(xì)胞中表現(xiàn)出全能性,還未見到融合細(xì)胞核表現(xiàn)出全能性的例子,因此動(dòng)物細(xì)胞融合不能用來(lái)培育新物種;生產(chǎn)雜交細(xì)胞不是細(xì)胞融合的主要目的,雜交細(xì)胞只是細(xì)胞融合完成后所形成的結(jié)構(gòu)名稱。3.20世紀(jì)30年代,科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)肺結(jié)核、天花、水痘和麻疹等疾病患者的病理組織中存在多核細(xì)胞,這些多核細(xì)胞最可能的來(lái)源是()a.細(xì)胞進(jìn)行無(wú)絲分裂造成的b.細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂時(shí),染色體復(fù)制后沒有分開形成兩個(gè)子細(xì)胞c.有絲分裂時(shí),細(xì)胞核進(jìn)行了分裂,而細(xì)胞質(zhì)沒有進(jìn)行分裂d.細(xì)胞在體內(nèi)病毒的作用下發(fā)生了融合答案d解析選項(xiàng)c、d都可形成多核細(xì)胞,但結(jié)合題干信息,此種現(xiàn)象與感染病毒有關(guān),故選項(xiàng)d最有可能。4.單克隆抗體與血清抗體相比,其優(yōu)越之處在于()a.單克隆抗體可作為某些藥物的載體b.單克隆抗體可以在體外制備c.單克隆抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高,并可大量制備d.單克隆抗體的制備過(guò)程簡(jiǎn)單,操作方便答案c解析普通的抗體其實(shí)也可以作為藥物的載體,并可在體外通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)制備,但因其純度低、特異性差,在“生物導(dǎo)彈”應(yīng)用上沒有價(jià)值。單克隆抗體的制備過(guò)程比普通抗體的制備過(guò)程要復(fù)雜得多。5.科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合,得到雜交瘤細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體。與骨髓瘤細(xì)胞融合的細(xì)胞是()a.經(jīng)過(guò)特定抗原免疫的b淋巴細(xì)胞b.不經(jīng)過(guò)免疫的b淋巴細(xì)胞c.經(jīng)過(guò)特定抗原免疫的t淋巴細(xì)胞d.不經(jīng)過(guò)免疫的t淋巴細(xì)胞答案a解析骨髓瘤細(xì)胞必須與經(jīng)過(guò)特定抗原免疫的b淋巴細(xì)胞融合,形成雜交瘤細(xì)胞,才能大量增殖并產(chǎn)生能夠與相應(yīng)的抗原特異性結(jié)合的單克隆抗體。6.制備單克隆抗體所采用的細(xì)胞工程技術(shù)包括()細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞融合胚胎移植細(xì)胞核移植a. b. c. d.答案a解析制備單克隆抗體時(shí),首先采用細(xì)胞融合技術(shù)得到雜交瘤細(xì)胞,再采用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲得能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群。7.下面是單克隆抗體制備過(guò)程示意圖,其中1過(guò)程注射的物質(zhì)和a細(xì)胞的名稱分別為()a.抗體、t淋巴細(xì)胞b.抗原、t淋巴細(xì)胞c.抗體、b淋巴細(xì)胞d.抗原、b淋巴細(xì)胞答案d解析單克隆抗體是由骨髓瘤細(xì)胞與b淋巴細(xì)胞融合而成的雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的,其中b淋巴細(xì)胞必須首先經(jīng)過(guò)抗原刺激,成為具有分泌抗體功能的細(xì)胞。8.科學(xué)家用滅活的病毒把骨髓瘤細(xì)胞與經(jīng)過(guò)免疫的b淋巴細(xì)胞融合得到雜交瘤細(xì)胞,滅活病毒的作用是()a.病毒比較小,可鉆入到細(xì)胞內(nèi)b.滅活的病毒已完全死亡,死亡的病毒可以讓細(xì)胞聚集c.滅活的病毒已失去感染性,對(duì)各種動(dòng)物細(xì)胞不造成破壞,但所保留的融合活性可使不同的動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行融合d.滅活的病毒帶有目的基因,通過(guò)融合可以讓雜交細(xì)胞帶有目的基因答案c解析動(dòng)物細(xì)胞融合常用滅活的病毒作誘導(dǎo)劑是因?yàn)闇缁畹牟《静辉倬哂懈腥拘?,不?huì)對(duì)細(xì)胞造成破壞,但仍可促使不同的動(dòng)物細(xì)胞融合。能力提升9.單克隆抗體技術(shù)在疾病診斷和治療以及生命科學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用。下列關(guān)于單克隆抗體的敘述,錯(cuò)誤的是()a.特異性強(qiáng)、靈敏度高b.與抗癌藥物結(jié)合可制成“生物導(dǎo)彈”c.體外培養(yǎng)b淋巴細(xì)胞可大量分泌單克隆抗體d.由經(jīng)過(guò)免疫的b淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合而成的雜交瘤細(xì)胞分泌答案c解析抗體是由b淋巴細(xì)胞分泌的,每一種b淋巴細(xì)胞只能分泌一種抗體;要想獲得大量單一抗體,需要將某一種b淋巴細(xì)胞大量克隆,但是在體外培養(yǎng)的條件下,b淋巴細(xì)胞不能無(wú)限增殖;由已免疫的b淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合而成的雜交瘤細(xì)胞,能在體外培養(yǎng)的條件下大量增殖,并分泌單克隆抗體。10.用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)制備單克隆抗體,下列實(shí)驗(yàn)步驟中錯(cuò)誤的是()a.將抗原注入小鼠體內(nèi),獲得能產(chǎn)生抗體的b淋巴細(xì)胞b.用氯化鈣作誘導(dǎo)劑,促使能產(chǎn)生抗體的b淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合c.篩選雜交瘤細(xì)胞,并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群,培養(yǎng)后提取單克隆抗體d.該雜交瘤細(xì)胞株的增殖方式和產(chǎn)物分別是有絲分裂和單克隆抗體答案b解析b淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合需要滅活的病毒、聚乙二醇或物理因素來(lái)誘導(dǎo);氯化鈣不能作為誘導(dǎo)劑,氯化鈣的作用是在基因工程中用于提高細(xì)胞壁的通透性,便于重組質(zhì)粒進(jìn)入微生物細(xì)胞內(nèi)。11.右圖為細(xì)胞融合過(guò)程示意圖,請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題:(1)若a、b是植物細(xì)胞,則其融合形成的d細(xì)胞培養(yǎng)成植株,還要應(yīng)用_技術(shù)。(2)若a、b是動(dòng)物細(xì)胞,則一般取自_、幼齡動(dòng)物的器官或組織,然后用胰蛋白酶使其分散開來(lái)。a、b到c的過(guò)程中,常用的不同于植物細(xì)胞工程的方法是用_誘導(dǎo)細(xì)胞融合。(3)從a、b到c的過(guò)程中,可形成_種類型的c細(xì)胞(僅考慮兩個(gè)細(xì)胞間的融合)。若該過(guò)程用于制備單克隆抗體,應(yīng)篩選出符合要求的d細(xì)胞,方法是用特定的_培養(yǎng)基培養(yǎng),篩選出的d細(xì)胞稱為_,常用的培養(yǎng)方法有體外培養(yǎng)和體內(nèi)培養(yǎng)兩種;前者是在_培養(yǎng)基中培養(yǎng),后者是在_內(nèi)增殖。答案(1)植物組織培養(yǎng)(2)胚胎滅活的(仙臺(tái))病毒(3)3選擇雜交瘤細(xì)胞液體動(dòng)物的腹腔解析若a、b是植物細(xì)胞,則d代表雜種植株,若a、b是動(dòng)物細(xì)胞,進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)首先要用胰蛋白酶將器官、組織塊分散成單個(gè)細(xì)胞,選用的材料一般為胚胎、幼齡動(dòng)物的器官或組織,因?yàn)檫@些部位的細(xì)胞代謝旺盛,細(xì)胞分裂能力強(qiáng);能夠產(chǎn)生單克隆抗體的是雜交瘤細(xì)胞,需用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選,經(jīng)抗體專一檢測(cè)后大量克隆,以便進(jìn)行體內(nèi)或體外的單抗生產(chǎn)。12.下圖表示單克隆抗體制備過(guò)程的各階段圖解,請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題:(1)請(qǐng)用箭頭把代表各圖解的字母按單克隆抗體制備過(guò)程的順序連接起來(lái)。(2)在單克隆抗體制備過(guò)程中選用b淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞,是因?yàn)樗鼈內(nèi)诤虾蟮碾s交瘤細(xì)胞具有_、_的特性。(3)由圖中可以看出,在單克隆抗體制備過(guò)程中運(yùn)用了_和_的動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)手段。答案(1)(2)可在體外大量繁殖產(chǎn)生特異性抗體(3)動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)13.人絨毛膜促性腺激素(hcg)是女性懷孕后胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌的一種糖蛋白,制備抗hcg單克隆抗體可用于早孕的診斷。下圖是抗hcg單克隆抗體制備流程示意圖,請(qǐng)分析回答問(wèn)題。(1)制備單克隆抗體過(guò)程中要用到_和_技術(shù)。(2)制備單克隆抗體過(guò)程中,給小鼠注射的hcg相當(dāng)于_,使小鼠產(chǎn)生分泌相應(yīng)_的淋巴細(xì)胞,此過(guò)程屬于特異性免疫中的_免疫。(3)在細(xì)胞內(nèi)dna的合成一般有兩條途徑,主途徑是在細(xì)胞內(nèi)由糖和氨基酸合成核苷酸,進(jìn)而合成dna,而氨基嘌呤可以阻斷此途徑。另一輔助途徑是在次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情況下,經(jīng)酶的催化作用合成dna,而骨髓瘤細(xì)胞的dna合成沒有此輔助途徑。利用dna合成途徑不同的特點(diǎn)配制的hat培養(yǎng)基含有多種成分,其中添加的_成分具有篩選雜交瘤細(xì)胞的作用。最終篩選獲得的雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是_。(4)此過(guò)
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