馬麗萍+血小板與炎癥-10-5-14.ppt

血小板與炎癥中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院馬麗萍 傳統(tǒng)觀點(diǎn)的挑戰(zhàn) 血小板無細(xì)胞核 長期以來認(rèn)為其缺乏基因表達(dá)及蛋白合成的功能直到上世紀(jì)70年代 用活化后的血小板再次注入到血液循環(huán)中仍有正常的存活曲線及聚集功能 一些殘存于血小板胞漿中的mRNA具有完整的蛋白質(zhì)翻譯功能血小板在某種環(huán)境下合成新的蛋白質(zhì) 使其自身形態(tài)和 或功能發(fā)生變化 參與除止凝血以外的其它功能血小板僅僅是細(xì)胞碎片 不具有復(fù)雜分子途徑的能力這種觀點(diǎn)正在慢慢改變 進(jìn)步 血小板是炎癥細(xì)胞和 或免疫細(xì)胞 問題的提出 1999年RussellRoss 動脈動粥樣硬化 一種炎癥性疾病 炎癥反應(yīng)貫穿于AS的發(fā)生 發(fā)展及斑塊破裂 血栓形成的整個過程 血小板并不是被動的參與了AS中簡單的血栓形成 而是通過釋放大量的促炎物質(zhì)如PF4 IL 1 RANTES啟動AS 在AS斑塊模型中發(fā)現(xiàn) 血小板早于WBC出現(xiàn)在AS斑塊局部 血小板具有抗感染的作用 血小板具有抗感染的作用 血小板保留了原始炎癥細(xì)胞的特性 和他們享有共同的表面抗原 Fc RII RI受體 C 反應(yīng)蛋白受體 CD36 趨化因子 CCR1 CCR3 CCR4 CXCR4 血小板連接先天性和獲得性免疫血小板可產(chǎn)生誘導(dǎo)性受體 如toll like受體 TLRs 監(jiān)測感染信號并發(fā)生反應(yīng)Clark等人在感染模型中發(fā)現(xiàn) 血小板TLR4捕獲血中同源配體 引起血小板聚集 隨后粒細(xì)胞聚集 形成粒細(xì)胞胞外圍捕 尤其在有窗孔的組織如肝血竇 肺毛細(xì)管中 提示血小板可能通過識別分子模式和感染早期預(yù)警信號 直接或間接地監(jiān)測病原菌 從而促進(jìn)免疫 導(dǎo)致血小板 粒細(xì)胞相互作用以增強(qiáng)對細(xì)菌的清除 血小板能與很多種類的病原微生物相互作用 產(chǎn)生抗微生物的應(yīng)答和機(jī)制 血小板是數(shù)量最多 最早累積到血管感染部位 血小板聚集到血管內(nèi)皮感染的部位 并表現(xiàn)為對內(nèi)皮細(xì)胞損傷或微生物入侵產(chǎn)生應(yīng)答的最迅速 最大量的炎癥細(xì)胞 與抗微生物效應(yīng)有關(guān)的血小板特異性分子的證實(shí) 血小板有抗微生物蛋白 PMPs 與陽離子抗菌肽雙重趨化因子以及抗微生物效應(yīng)的功能 血小板功能 正常人血小板100 300 109 L 僅次于紅細(xì)胞含量第二豐富的細(xì)胞 不僅擁有大的表面面積 而且擁有多的開放通道系統(tǒng) 血小板通過激活 黏附 聚集 釋放四大基本功能參與止血與血栓的基本病理生理過程 血小板通過調(diào)節(jié)表面粘附及免疫受體的表達(dá) 刺激多種炎癥介質(zhì)和細(xì)胞因子的釋放 輔助和調(diào)控炎癥和免疫反應(yīng) 血小板 炎癥的啟動子 參與多種疾病的發(fā)生和發(fā)展 血小板結(jié)構(gòu)特點(diǎn) 無核 通過轉(zhuǎn)錄途徑合成蛋白質(zhì)3種顆粒 a granules lysosome dencecoregranules膜系統(tǒng)粘附蛋白 FIB FNT vWF P seletin GP b a vitronectin thrombospondin生長因子 PDGF TGF B EGF趨化因子 RANTES PF4 CXCL4 SDF 1 CXCL12 ENA78 CXCL5 細(xì)胞因子 IL 1B CD40L B TG凝血因子 F PAI 1 PL PS Figure1 Plateletadhesionmoleculesandsurfacereceptors 血小板是炎癥細(xì)胞和 或免疫細(xì)胞 血小板膜表面分子 P selectin P 選擇素 CD62P 表達(dá)于活化的血小板 配體是PSGL 1 PSGL 1與CD62P相互作用 使血小板聚集在白細(xì)胞周圍 增加與內(nèi)皮細(xì)胞的粘附 P 選擇素直接活化和上調(diào)白細(xì)胞CD11b CD18 Mac 1 后者與纖維蛋白原 GP b a接合 促進(jìn)白細(xì)胞與血小板的粘附及在血栓部位的聚集 Integrins a bB3 Gp b a 血小板內(nèi)外膜的轉(zhuǎn)運(yùn)通道 配體有FIB vWF FIN CD40L等血小板與內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)合的橋梁 CD40與CD40L CD40 主要表達(dá)于B淋巴細(xì)胞 單核細(xì)胞 巨噬細(xì)胞 內(nèi)皮細(xì)胞及血小板CD40L CD154 CD40的配體 一種膜轉(zhuǎn)移蛋白 表達(dá)于活化的血小板膜表面 在結(jié)構(gòu)上與TNF a相關(guān)CD40與CD40L結(jié)合后數(shù)分鐘至數(shù)小時 CD40L裂解形成相對分子質(zhì)量為18 103的蛋白 即可溶性CD40L sCD40L sCD154 目前認(rèn)為 機(jī)體70 以上的CD40L來源于血小板 CD40L主要功能 誘導(dǎo)內(nèi)皮 平滑肌和巨噬細(xì)胞分泌大量細(xì)胞因子 如IL 6 IL 8 TNF a 并在細(xì)胞表面表達(dá)粘附分子 如ICAM 1 CD54 VCAM 1 CD106 MCP 1 等 調(diào)節(jié)白細(xì)胞在炎癥部位信號途徑 誘導(dǎo)內(nèi)皮 平滑肌和巨噬細(xì)胞表達(dá)TF 下調(diào)血栓調(diào)節(jié)蛋白 TM 使內(nèi)皮細(xì)胞的凝血活性增強(qiáng) 纖溶活性減低 促進(jìn)局部血栓形成 sCD40L同樣可通過CD40直接誘導(dǎo)血小板活化 具體機(jī)制 sCD40L具有KGD氨基酸序列 通過結(jié)合 3 integrin 誘導(dǎo)GPIIb IIIa胞漿區(qū)磷酸化觸發(fā)血小板外向內(nèi)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 促進(jìn)血小板伸展和血栓形成 ICAM 2 細(xì)胞內(nèi)黏附分子 2 配體 白細(xì)胞CD11a CD18 DC SIGN JAM A血小板與白細(xì)胞結(jié)合的關(guān)鍵受體 Toll likeresceptors TLRs 表達(dá)在多種細(xì)胞 識別病原菌 天然免疫受體 配體 LPS 與CD40L TNF a釋放增加以及血小板減少有關(guān) 趨化因子受體7 轉(zhuǎn)移膜蛋白血小板有3種 CCR1 CCR3 CCR4參與血小板聚集和激活 可溶性免疫介質(zhì) 趨化因子功能 吸引免疫細(xì)胞到免疫應(yīng)答局部 參與免疫調(diào)節(jié)和免疫病理反應(yīng) 主要分為2個趨化因子亞家族 Cys X Cys CXC 和Cys Cys CC 血小板因子4 PF4 CXCL4 誘導(dǎo)單核細(xì)胞產(chǎn)生促炎癥細(xì)胞素MCP 1和IL 8 趨向炎癥部位中和肝素 保護(hù)凝血酶 RANTES CC SDF 1局部炎癥和AS 細(xì)胞因子IL 1 血小板微粒 plateletmicroparticles PMPs 血小板激活后產(chǎn)生許多促凝活性的微小膜碎片 具有完整血小板的標(biāo)記和功能PMPs含TF 可能具有更強(qiáng)的止血 凝血及誘發(fā)血栓形成的作用 血小板作為炎癥細(xì)胞與疾病的關(guān)系 激活的血小板與不同的細(xì)胞發(fā)生反應(yīng)受體間的直接作用 自分泌 旁分泌 直接參與多種炎癥過程 血小板激活狀態(tài)動脈粥樣硬化心血管疾病再狹窄膿毒癥血栓炎癥性腸病凝血關(guān)節(jié)炎 血小板誘導(dǎo)和啟動血管事件的加重 抗血小板治療有效 血小板與內(nèi)皮細(xì)胞 正常情況下 血小板不與完整的血管內(nèi)皮細(xì)胞相互作用 相反 內(nèi)皮控制血小板的再激活 COX2 PGI2 前列腺素合成 受損的內(nèi)皮細(xì)胞促使血小板發(fā)生黏附血小板在向內(nèi)皮黏附的過程中激活并釋放潛在的炎性和促有絲分裂物質(zhì) 發(fā)生趨化 黏附和內(nèi)皮細(xì)胞溶解如Gp b a受體吸附和上調(diào)血小板上CD62P和CD40L 導(dǎo)致CD40L依賴的內(nèi)皮細(xì)胞活性 Figure2 Platelet endotheliumadhesionActivatedendotheliumsurfaceexpressesP selectin PlateletsurfacereceptorsGPIb andPSGL 1interactwithendothelialP selectinandmediateplateletrolling Subsequentfirmadhesionismediatedthrough 3integrins 血小板與白細(xì)胞 血小板和白細(xì)胞聚集通過激活白細(xì)胞黏附受體或橋梁作用 黏附到血管內(nèi)皮細(xì)胞血小板進(jìn)一步趨化和吸引白細(xì)胞 使之牢固結(jié)合于血管壁 血小板 白細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞相互作用 引發(fā)炎性級聯(lián)擴(kuò)大包括自分泌 旁分泌和黏附受體的直接作用 血小板黏附和激活a顆?？焖籴尫臥 selectin到胞膜白細(xì)胞通過P selectin PSGL 1牢固結(jié)合血小板單核細(xì)胞通過Mac 1結(jié)合到血小板 血小板上Mac 1受體 Gp ba JAM 2 3 CD40L FIB 細(xì)胞內(nèi)激活NF kB激活提高單核和中性粒細(xì)胞的黏附凝血細(xì)胞因子釋放 IL 1 IL 8 MCP 1 TNF a 其他 u PAR TREM等 Figure3 InteractionsofplateletswithdifferentleukocytesubtypesregulatevascularinflammationAmultitudeofmolecularmechanismsandplatelet derivedcomponentsmediateandregulateplatelet inducedleukocyteinfiltrationincludingchemokinedepositionandmononuclearandendothelialcellactivation Figure4 Adherentplateletsrecruitandinflamemonocytes Adherentand oractivatedplateletsmainlyinteractwithmonocyticPSGL 1viaP selectinandwithmonocyticMac 1 M 2 via IIb 3 andfibrinogenbridging orGP Ib Thereby plateletsinitiatemonocytesecretionofchemokines cytokines andprocoagulatorytissuefactor upregulateandactivateadhesionreceptorsandproteases andinducemonocytedifferentiationintomacrophages Thus platelet monocyteinteractionprovidesanatherogenicmilieuatthevascularwallthatsupportsplaqueformation 血小板與內(nèi)皮前體細(xì)胞 EPCs EPCs來源于骨髓 表達(dá)CD34 CD133EPCs可分化為EC 修復(fù)血管分化為SMC 泡沫細(xì)胞 動脈硬化和狹窄EPCs并不表達(dá)黏附受體 而是通過血小板結(jié)合于受損的血管 趨化作用和提供接觸表面 血小板可引導(dǎo)循環(huán)中的EPCs到動脈血栓表面 通過SDF 1 Blockantibody支持上述觀點(diǎn)AndrasEM ArteriosclerThrombVascBiol2008 28 5 Figure6 HypotheticalmodelofatherogenesistriggeredbyplateletsActivatedplateletsrollalongtheendothelialmonolayerviaGPIb P selectinorPSGL 1 P selectin Thereafter plateletsfirmlyadheretovascularendotheliumvia 3integrins releaseproinflammatorycompounds IL 1 CD40L andinduceaproatherogenicphenotypeofECs chemotaxis MCP 1 adhesion ICAM 1 Subsequently adherentplateletsrecruitcirculatingleukocytes bindthem andinflamethembyreceptorinteractionsandparacrinepathways therebyinitiatingleukocytetransmigrationandfoamcellformation Thus plateletsprovidetheinflammatorybasisforplaqueformationbeforephysicallyoccludingthevesselbythrombosisuponplaquerupture 我們的工作 1 血小板與炎癥性疾病 AS 血小板活性在AS增高 血小板NO系統(tǒng)與AS進(jìn)程相關(guān) 心血管事件的發(fā)生和血小板激活有關(guān)血栓與止血學(xué) 2003JAAMP 2004中華血液學(xué)雜志 2005 3中華老年雜志 2009 7Blood 2004 ASH Abstract 2 血小板介導(dǎo)機(jī)體獲得性