馬麗萍+血小板與炎癥-10-5-14.ppt

血小板與炎癥中山大學孫逸仙紀念醫(yī)院馬麗萍 傳統(tǒng)觀點的挑戰(zhàn) 血小板無細胞核 長期以來認為其缺乏基因表達及蛋白合成的功能直到上世紀70年代 用活化后的血小板再次注入到血液循環(huán)中仍有正常的存活曲線及聚集功能 一些殘存于血小板胞漿中的mRNA具有完整的蛋白質(zhì)翻譯功能血小板在某種環(huán)境下合成新的蛋白質(zhì) 使其自身形態(tài)和 或功能發(fā)生變化 參與除止凝血以外的其它功能血小板僅僅是細胞碎片 不具有復雜分子途徑的能力這種觀點正在慢慢改變 進步 血小板是炎癥細胞和 或免疫細胞 問題的提出 1999年RussellRoss 動脈動粥樣硬化 一種炎癥性疾病 炎癥反應貫穿于AS的發(fā)生 發(fā)展及斑塊破裂 血栓形成的整個過程 血小板并不是被動的參與了AS中簡單的血栓形成 而是通過釋放大量的促炎物質(zhì)如PF4 IL 1 RANTES啟動AS 在AS斑塊模型中發(fā)現(xiàn) 血小板早于WBC出現(xiàn)在AS斑塊局部 血小板具有抗感染的作用 血小板具有抗感染的作用 血小板保留了原始炎癥細胞的特性 和他們享有共同的表面抗原 Fc RII RI受體 C 反應蛋白受體 CD36 趨化因子 CCR1 CCR3 CCR4 CXCR4 血小板連接先天性和獲得性免疫血小板可產(chǎn)生誘導性受體 如toll like受體 TLRs 監(jiān)測感染信號并發(fā)生反應Clark等人在感染模型中發(fā)現(xiàn) 血小板TLR4捕獲血中同源配體 引起血小板聚集 隨后粒細胞聚集 形成粒細胞胞外圍捕 尤其在有窗孔的組織如肝血竇 肺毛細管中 提示血小板可能通過識別分子模式和感染早期預警信號 直接或間接地監(jiān)測病原菌 從而促進免疫 導致血小板 粒細胞相互作用以增強對細菌的清除 血小板能與很多種類的病原微生物相互作用 產(chǎn)生抗微生物的應答和機制 血小板是數(shù)量最多 最早累積到血管感染部位 血小板聚集到血管內(nèi)皮感染的部位 并表現(xiàn)為對內(nèi)皮細胞損傷或微生物入侵產(chǎn)生應答的最迅速 最大量的炎癥細胞 與抗微生物效應有關的血小板特異性分子的證實 血小板有抗微生物蛋白 PMPs 與陽離子抗菌肽雙重趨化因子以及抗微生物效應的功能 血小板功能 正常人血小板100 300 109 L 僅次于紅細胞含量第二豐富的細胞 不僅擁有大的表面面積 而且擁有多的開放通道系統(tǒng) 血小板通過激活 黏附 聚集 釋放四大基本功能參與止血與血栓的基本病理生理過程 血小板通過調(diào)節(jié)表面粘附及免疫受體的表達 刺激多種炎癥介質(zhì)和細胞因子的釋放 輔助和調(diào)控炎癥和免疫反應 血小板 炎癥的啟動子 參與多種疾病的發(fā)生和發(fā)展 血小板結(jié)構(gòu)特點 無核 通過轉(zhuǎn)錄途徑合成蛋白質(zhì)3種顆粒 a granules lysosome dencecoregranules膜系統(tǒng)粘附蛋白 FIB FNT vWF P seletin GP b a vitronectin thrombospondin生長因子 PDGF TGF B EGF趨化因子 RANTES PF4 CXCL4 SDF 1 CXCL12 ENA78 CXCL5 細胞因子 IL 1B CD40L B TG凝血因子 F PAI 1 PL PS Figure1 Plateletadhesionmoleculesandsurfacereceptors 血小板是炎癥細胞和 或免疫細胞 血小板膜表面分子 P selectin P 選擇素 CD62P 表達于活化的血小板 配體是PSGL 1 PSGL 1與CD62P相互作用 使血小板聚集在白細胞周圍 增加與內(nèi)皮細胞的粘附 P 選擇素直接活化和上調(diào)白細胞CD11b CD18 Mac 1 后者與纖維蛋白原 GP b a接合 促進白細胞與血小板的粘附及在血栓部位的聚集 Integrins a bB3 Gp b a 血小板內(nèi)外膜的轉(zhuǎn)運通道 配體有FIB vWF FIN CD40L等血小板與內(nèi)皮細胞結(jié)合的橋梁 CD40與CD40L CD40 主要表達于B淋巴細胞 單核細胞 巨噬細胞 內(nèi)皮細胞及血小板CD40L CD154 CD40的配體 一種膜轉(zhuǎn)移蛋白 表達于活化的血小板膜表面 在結(jié)構(gòu)上與TNF a相關CD40與CD40L結(jié)合后數(shù)分鐘至數(shù)小時 CD40L裂解形成相對分子質(zhì)量為18 103的蛋白 即可溶性CD40L sCD40L sCD154 目前認為 機體70 以上的CD40L來源于血小板 CD40L主要功能 誘導內(nèi)皮 平滑肌和巨噬細胞分泌大量細胞因子 如IL 6 IL 8 TNF a 并在細胞表面表達粘附分子 如ICAM 1 CD54 VCAM 1 CD106 MCP 1 等 調(diào)節(jié)白細胞在炎癥部位信號途徑 誘導內(nèi)皮 平滑肌和巨噬細胞表達TF 下調(diào)血栓調(diào)節(jié)蛋白 TM 使內(nèi)皮細胞的凝血活性增強 纖溶活性減低 促進局部血栓形成 sCD40L同樣可通過CD40直接誘導血小板活化 具體機制 sCD40L具有KGD氨基酸序列 通過結(jié)合 3 integrin 誘導GPIIb IIIa胞漿區(qū)磷酸化觸發(fā)血小板外向內(nèi)的信號轉(zhuǎn)導 促進血小板伸展和血栓形成 ICAM 2 細胞內(nèi)黏附分子 2 配體 白細胞CD11a CD18 DC SIGN JAM A血小板與白細胞結(jié)合的關鍵受體 Toll likeresceptors TLRs 表達在多種細胞 識別病原菌 天然免疫受體 配體 LPS 與CD40L TNF a釋放增加以及血小板減少有關 趨化因子受體7 轉(zhuǎn)移膜蛋白血小板有3種 CCR1 CCR3 CCR4參與血小板聚集和激活 可溶性免疫介質(zhì) 趨化因子功能 吸引免疫細胞到免疫應答局部 參與免疫調(diào)節(jié)和免疫病理反應 主要分為2個趨化因子亞家族 Cys X Cys CXC 和Cys Cys CC 血小板因子4 PF4 CXCL4 誘導單核細胞產(chǎn)生促炎癥細胞素MCP 1和IL 8 趨向炎癥部位中和肝素 保護凝血酶 RANTES CC SDF 1局部炎癥和AS 細胞因子IL 1 血小板微粒 plateletmicroparticles PMPs 血小板激活后產(chǎn)生許多促凝活性的微小膜碎片 具有完整血小板的標記和功能PMPs含TF 可能具有更強的止血 凝血及誘發(fā)血栓形成的作用 血小板作為炎癥細胞與疾病的關系 激活的血小板與不同的細胞發(fā)生反應受體間的直接作用 自分泌 旁分泌 直接參與多種炎癥過程 血小板激活狀態(tài)動脈粥樣硬化心血管疾病再狹窄膿毒癥血栓炎癥性腸病凝血關節(jié)炎 血小板誘導和啟動血管事件的加重 抗血小板治療有效 血小板與內(nèi)皮細胞 正常情況下 血小板不與完整的血管內(nèi)皮細胞相互作用 相反 內(nèi)皮控制血小板的再激活 COX2 PGI2 前列腺素合成 受損的內(nèi)皮細胞促使血小板發(fā)生黏附血小板在向內(nèi)皮黏附的過程中激活并釋放潛在的炎性和促有絲分裂物質(zhì) 發(fā)生趨化 黏附和內(nèi)皮細胞溶解如Gp b a受體吸附和上調(diào)血小板上CD62P和CD40L 導致CD40L依賴的內(nèi)皮細胞活性 Figure2 Platelet endotheliumadhesionActivatedendotheliumsurfaceexpressesP selectin PlateletsurfacereceptorsGPIb andPSGL 1interactwithendothelialP selectinandmediateplateletrolling Subsequentfirmadhesionismediatedthrough 3integrins 血小板與白細胞 血小板和白細胞聚集通過激活白細胞黏附受體或橋梁作用 黏附到血管內(nèi)皮細胞血小板進一步趨化和吸引白細胞 使之牢固結(jié)合于血管壁 血小板 白細胞和內(nèi)皮細胞相互作用 引發(fā)炎性級聯(lián)擴大包括自分泌 旁分泌和黏附受體的直接作用 血小板黏附和激活a顆?？焖籴尫臥 selectin到胞膜白細胞通過P selectin PSGL 1牢固結(jié)合血小板單核細胞通過Mac 1結(jié)合到血小板 血小板上Mac 1受體 Gp ba JAM 2 3 CD40L FIB 細胞內(nèi)激活NF kB激活提高單核和中性粒細胞的黏附凝血細胞因子釋放 IL 1 IL 8 MCP 1 TNF a 其他 u PAR TREM等 Figure3 InteractionsofplateletswithdifferentleukocytesubtypesregulatevascularinflammationAmultitudeofmolecularmechanismsandplatelet derivedcomponentsmediateandregulateplatelet inducedleukocyteinfiltrationincludingchemokinedepositionandmononuclearandendothelialcellactivation Figure4 Adherentplateletsrecruitandinflamemonocytes Adherentand oractivatedplateletsmainlyinteractwithmonocyticPSGL 1viaP selectinandwithmonocyticMac 1 M 2 via IIb 3 andfibrinogenbridging orGP Ib Thereby plateletsinitiatemonocytesecretionofchemokines cytokines andprocoagulatorytissuefactor upregulateandactivateadhesionreceptorsandproteases andinducemonocytedifferentiationintomacrophages Thus platelet monocyteinteractionprovidesanatherogenicmilieuatthevascularwallthatsupportsplaqueformation 血小板與內(nèi)皮前體細胞 EPCs EPCs來源于骨髓 表達CD34 CD133EPCs可分化為EC 修復血管分化為SMC 泡沫細胞 動脈硬化和狹窄EPCs并不表達黏附受體 而是通過血小板結(jié)合于受損的血管 趨化作用和提供接觸表面 血小板可引導循環(huán)中的EPCs到動脈血栓表面 通過SDF 1 Blockantibody支持上述觀點AndrasEM ArteriosclerThrombVascBiol2008 28 5 Figure6 HypotheticalmodelofatherogenesistriggeredbyplateletsActivatedplateletsrollalongtheendothelialmonolayerviaGPIb P selectinorPSGL 1 P selectin Thereafter plateletsfirmlyadheretovascularendotheliumvia 3integrins releaseproinflammatorycompounds IL 1 CD40L andinduceaproatherogenicphenotypeofECs chemotaxis MCP 1 adhesion ICAM 1 Subsequently adherentplateletsrecruitcirculatingleukocytes bindthem andinflamethembyreceptorinteractionsandparacrinepathways therebyinitiatingleukocytetransmigrationandfoamcellformation Thus plateletsprovidetheinflammatorybasisforplaqueformationbeforephysicallyoccludingthevesselbythrombosisuponplaquerupture 我們的工作 1 血小板與炎癥性疾病 AS 血小板活性在AS增高 血小板NO系統(tǒng)與AS進程相關 心血管事件的發(fā)生和血小板激活有關血栓與止血學 2003JAAMP 2004中華血液學雜志 2005 3中華老年雜志 2009 7Blood 2004 ASH Abstract 2 血小板介導機體獲得性