雜質(zhì)研究及案例分析

雜質(zhì)研究及案例分析,主講人：張玉琥講習(xí)組成員：于紅 成海平藥品審評中心 2011.5,提綱,一、前言二、雜質(zhì)研究的基本要求及研究思路三、案例分析四、小結(jié),一、前言,一、雜質(zhì)研究在藥品研發(fā)中的地位二、存在的主要問題和差距,雜質(zhì)研究的重要地位,雜質(zhì)任何影響藥物純度的物質(zhì)包括有機(jī)雜質(zhì)、無機(jī)雜質(zhì)、殘留溶劑本講主要討論有機(jī)雜質(zhì)雜質(zhì)來源工藝雜質(zhì)、降解產(chǎn)物等工藝雜質(zhì)：工藝過程中引入的雜質(zhì)，包括起始原料及可能帶入的雜質(zhì)、中間體、副產(chǎn)物等降解產(chǎn)物：藥物降解產(chǎn)生，如水解、氧化、開環(huán)、聚合等反應(yīng)產(chǎn)物，與藥物的結(jié)構(gòu)特征密切相關(guān),雜質(zhì)研究的重要地位,保證藥品安全有效是研發(fā)及評價所要遵循的基 本原則雜質(zhì)研究是藥學(xué)研究（CMC）的重要內(nèi)容，同 時也直接涉及到藥品的安全有效性 藥理活性或毒性雜質(zhì)安全性 普通雜質(zhì)，控制純度有效性,存在的主要問題和差距,雜質(zhì)譜未分析或分析不到位；雜質(zhì)分析檢查方法缺乏針對性；雜質(zhì)限度的確定依據(jù)不足；忽視雜質(zhì)研究與其它研究工作聯(lián)系；,質(zhì)量研究主要問題分析,源自過渡期集中審評品種（2000個）,二、雜質(zhì)研究的基本要求及研究思路,相關(guān)技術(shù)指導(dǎo)原則雜質(zhì)譜分析研究建立檢查方法進(jìn)行充分的方法驗證確定合理的雜質(zhì)限度超過目標(biāo)限度時的考慮仿制藥雜質(zhì)研究的特點雜質(zhì)研究與其它研究工作的關(guān)系,相關(guān)技術(shù)指導(dǎo)原則,化學(xué)藥物雜質(zhì)研究的技術(shù)指導(dǎo)原則化學(xué)藥物質(zhì)量控制分析方法驗證技術(shù)指導(dǎo)原則已有國家標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)藥品研究技術(shù)指導(dǎo)原則ANDAs：Impurities in Drug Substances，F(xiàn)DAANDAs：Impurities in Drug Products，F(xiàn)DAQ2A Text on Validation of Analytical ProceduresQ2B Validation of Analytical Procedures：MethodologyQ3A (R) Impurities in New Drug SubstancesQ3B (R) Impurities in New Drug Products,雜質(zhì)譜分析,可能的雜質(zhì)原料藥生產(chǎn)過程中可能引入的工藝雜質(zhì)原料藥貯存過程中可能產(chǎn)生的降解產(chǎn)物制劑生產(chǎn)、貯存過程中可能產(chǎn)生的降解產(chǎn)物,雜質(zhì)譜分析,依據(jù)合成工藝，分析可能產(chǎn)生的工藝雜質(zhì)起始原料及可能引入的雜質(zhì)、中間體、副產(chǎn)物例：鹽酸曲美他嗪中哌嗪,雜質(zhì)譜分析,基于結(jié)構(gòu)特征，分析可能的降解產(chǎn)物例：羅庫溴銨中雜質(zhì)C,雜質(zhì)譜分析,通過強(qiáng)降解實驗，分析研究降解產(chǎn)物考察樣品在酸、堿、高溫、光照、氧化等因素影響下的降解產(chǎn)物。必要時，可根據(jù)情況進(jìn)行以上因素綜合存在時的強(qiáng)制降解實驗。與理論分析結(jié)果進(jìn)行對比,雜質(zhì)譜分析,研發(fā)過程中檢測到的實際存在的雜質(zhì)對超過鑒定限度的雜質(zhì)鑒定結(jié)構(gòu)，分析研究其來源工藝雜質(zhì)？降解產(chǎn)物？其它來源？,雜質(zhì)譜分析,參考信息：通過被仿藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（仿制藥）國家標(biāo)準(zhǔn)中的已知雜質(zhì)EP、BP、USP、JP等標(biāo)準(zhǔn)中的已知雜質(zhì),雜質(zhì)譜分析,參考信息： 通過被仿藥品實際測定結(jié)果獲取雜質(zhì)信息（仿制藥）采用適當(dāng)?shù)臋z查方法（LC/MS等），對被仿藥品進(jìn)行實際測定，對其雜質(zhì)情況（雜質(zhì)種類、雜質(zhì)含量）進(jìn)行研究分析 應(yīng)關(guān)注被仿藥品是否有良好的研究基礎(chǔ),研究建立檢查方法,基礎(chǔ)和經(jīng)驗 明確雜質(zhì)檢查的目標(biāo)（基于雜質(zhì)分析） 了解常用方法（例如HPLC、TLC、GC等）的特點 了解雜質(zhì)和藥物的特性 充分的文獻(xiàn)調(diào)研 既往雜質(zhì)分析的研究經(jīng)驗 方法的優(yōu)化和調(diào)整 多種方法的相互比較、相互補(bǔ)充,研究建立檢查方法,例：氟哌利多注射液BP及USP均采用HPLC法檢查有關(guān)物質(zhì)BP限度：單一雜質(zhì)0.25，總雜質(zhì)0.5原料藥原國家標(biāo)準(zhǔn)，TLC法（除主斑點外不得有其它雜質(zhì)斑點）,TLC法實驗結(jié)果 光照10天含量（UV法）下降10，未檢出雜質(zhì)斑點 影響因素、加速和長期實驗，樣品均未檢出雜質(zhì)斑點HPLC法實驗結(jié)果 雜質(zhì)達(dá)7以上 方法的比較研究顯示，TLC法不適于本品的有關(guān)物質(zhì)檢查CP2010版，改用HPLC法,例：鹽酸舍曲林,有7個已知雜質(zhì)A-G雜質(zhì)A:非對映異構(gòu)體雜質(zhì)B、C、D：工藝雜質(zhì)雜質(zhì)E（扁桃酸）：拆分試劑雜質(zhì)F：降解產(chǎn)物雜質(zhì)G：對映異構(gòu)體,例：鹽酸舍曲林采用一種方法不能有效控制所有雜質(zhì)針對不同雜質(zhì)，采用不同方法進(jìn)行控制HPLC法：雜質(zhì)E（拆分試劑）0.2GC法：雜質(zhì)C和D總量0.8 雜質(zhì)A、B、F均0.2 其它單一雜質(zhì)0.1，總雜質(zhì)1.5%手性HPLC，雜質(zhì)G（對映異構(gòu)體）1.5,充分的方法驗證,靈敏度（檢測限）、專屬性、定量限、線性、耐用性等定量實驗：關(guān)注和驗證準(zhǔn)確度、精密度、專屬性、定量限、線性、范圍、耐用性限度實驗：至少應(yīng)關(guān)注和驗證專屬性、檢測限、耐用性,充分的方法驗證,專屬性研究原料藥合成中間體、粗品等的分離度考察原料藥及其制劑的強(qiáng)制破壞實驗制劑的輔料干擾實驗雜質(zhì)加入實驗和藥典方法或經(jīng)論證的其它方法進(jìn)行比較峰純度檢查（二極管陣列檢測、質(zhì)譜檢測）,充分的方法驗證,線性、定量限、檢測限等 采用雜質(zhì)進(jìn)行相關(guān)試驗關(guān)注雜質(zhì)紫外吸收特征，確定適宜的檢測波長關(guān)注雜質(zhì)相應(yīng)因子,例：鹽酸左布比卡因注射液2,6-二甲基苯胺為毒性降解產(chǎn)物BP（布比卡因注射液）：對照品比色法，400ppm上市同品種：采用HPLC雜質(zhì)對照品法研制產(chǎn)品：方法學(xué)研究未針對該已知雜質(zhì)進(jìn)行驗證,確定合理的雜質(zhì)限度,核心是雜質(zhì)的安全性 相關(guān)技術(shù)指導(dǎo)原則的要求（決策樹） 論證雜質(zhì)安全性的相關(guān)文獻(xiàn)資料 雜質(zhì)安全性研究資料 上市產(chǎn)品中雜質(zhì)量不能超過進(jìn)行安全性研究樣品中雜質(zhì)量 被仿藥品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，雜質(zhì)種類和水平（仿制藥）,確定合理的雜質(zhì)限度,原料藥雜質(zhì)限度.化學(xué)藥品指導(dǎo)原則化學(xué)藥物雜質(zhì)研究技術(shù)指導(dǎo)原則.pdf,例：鹽酸帕羅西汀EP、USP收載，列出7個已知雜質(zhì)A-G HPLC法：控制雜質(zhì)A（去氟物）0.3，其它單一雜質(zhì)0.1%，總雜質(zhì)不得過0.5 手性HPLC控制雜質(zhì)D（對映異構(gòu)體）不得過0.2,例：鹽酸帕羅西汀雜質(zhì)G：遺傳毒性雜質(zhì)，為工藝雜質(zhì)EP、USP均規(guī)定該雜質(zhì)不得過1ppm具體品種：根據(jù)采用的工藝進(jìn)行分析，是否存在該雜質(zhì)如果存在，應(yīng)研究建立適當(dāng)?shù)姆椒ㄟM(jìn)行控制，限度：不得過1ppm,超過目標(biāo)限度時的考慮,采取措施降低雜質(zhì)至目標(biāo)限度以下（首選） 完善精制方法 優(yōu)化合成工藝 控制原料及中間體的純度 變更合成路線 完善包裝及貯藏條件（針對降解產(chǎn)物） 完善制劑處方工藝（針對降解產(chǎn)物）進(jìn)行雜質(zhì)安全性研究 采用含有雜質(zhì)的原料藥或制劑 采用分離的雜質(zhì)單體,超過目標(biāo)限度時的考慮,雜質(zhì)結(jié)構(gòu)決策樹.化學(xué)藥品指導(dǎo)原則化學(xué)藥物雜質(zhì)研究技術(shù)指導(dǎo)原則.pdf,仿制藥雜質(zhì)研究的特點,參考信息：被仿產(chǎn)品的相關(guān)信息（質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、實測結(jié)果等）目標(biāo)：雜質(zhì)水平不超過被仿產(chǎn)品雜質(zhì)對比研究：重要的研究手段 前提：被仿品的雜質(zhì)已得到充分研究，安全性已得到論證,仿制藥雜質(zhì)研究的特點,雜質(zhì)對比研究結(jié)果分析雜質(zhì)譜與被仿品一致或雜質(zhì)種類較被仿品少，無超過鑒定限度的新雜質(zhì)；各雜質(zhì)含量不超過被仿品試制品的雜質(zhì)控制達(dá)到了研究目標(biāo)雜質(zhì)譜與被仿品一致或雜質(zhì)種類較被仿品少，無超過鑒定限度的新雜質(zhì)；但已知雜質(zhì)含量超過了被仿品改進(jìn)工藝，降低雜質(zhì)含量,仿制藥雜質(zhì)研究的特點,雜質(zhì)對比研究結(jié)果分析雜質(zhì)譜與被仿品不一致，有超過鑒定限度的新雜質(zhì)；但已知雜質(zhì)含量不超過被仿品鑒定新雜質(zhì)結(jié)構(gòu)分析其產(chǎn)生原因，改進(jìn)工藝，降低雜質(zhì)含量至鑒定限度以下若通過改進(jìn)工藝，雜質(zhì)含量不能降低至鑒定限度以下，應(yīng)根據(jù)雜質(zhì)研究決策樹，進(jìn)行后續(xù)研究。,仿制藥雜質(zhì)研究的特點,雜質(zhì)對比研究結(jié)果分析雜質(zhì)譜與被仿品不一致，有超過鑒定限度的新雜質(zhì)；且已知雜質(zhì)含量亦超過被仿品改進(jìn)工藝，降低雜質(zhì)水平工藝路線：起始原料，中間體質(zhì)量控制；反應(yīng)條件的控制；精制方法等。,仿制藥雜質(zhì)研究的特點,雜質(zhì)限度的確定 指導(dǎo)原則要求 被仿品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（該質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)是否完善） 被仿品實測結(jié)果（雜質(zhì)種類、雜質(zhì)含量） 試制樣品研究結(jié)果（雜質(zhì)種類、雜質(zhì)含量） 相關(guān)文獻(xiàn)資料,雜質(zhì)研究與其它研究之間關(guān)系,與原料藥制備工藝研究 制備工藝決定雜質(zhì)水平（雜質(zhì)種類、雜質(zhì)含量） 雜質(zhì)研究結(jié)果驗證制備工藝的可行性 雜質(zhì)結(jié)構(gòu)結(jié)果為優(yōu)化制備工藝提供重要信息 雜質(zhì)檢查方法的驗證需制備工藝相關(guān)信息的支持,雜質(zhì)研究與其它研究之間關(guān)系,與制劑處方工藝研究 處方工藝對雜質(zhì)水平有重要影響 在原料藥符合要求的前提下，制劑的處方工藝實際 上決定了產(chǎn)品的雜質(zhì)水平是否可接受 雜質(zhì)研究是評價處方工藝合理可行性的重要依據(jù) 雜質(zhì)結(jié)構(gòu)結(jié)果為優(yōu)化制備工藝提供重要信息 若制劑中雜質(zhì)水平超過預(yù)期目標(biāo)，應(yīng)改進(jìn)完善處方工藝,雜質(zhì)研究與其它研究之間關(guān)系,與穩(wěn)定性研究 雜質(zhì)研究（降解途徑、降解產(chǎn)物）是穩(wěn)定性研究的重要內(nèi)容是貯藏條件選擇的重要依據(jù)穩(wěn)定性研究中雜質(zhì)考察結(jié)果是評價制劑處方工藝合理可行性的重要依據(jù)雜質(zhì)限度需要結(jié)合穩(wěn)定性考察結(jié)果確定（在符合安全性要求的前提下）,三、案例分析,阿托伐她汀鈣雜質(zhì)研究羅庫溴銨雜質(zhì)研究鹽酸艾司洛爾注射液雜質(zhì)分析,阿托伐他汀鈣雜質(zhì)研究,基本情況阿托伐他汀鈣（Atorvastatin Calcium）是一種人工合成的HMG-CoA還原酶抑制劑，是臨床常用降血脂藥原研發(fā)企業(yè)為輝瑞公司（Pfizer）目前國內(nèi)有原研發(fā)企業(yè)產(chǎn)品及仿制藥上市原料藥及其制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載于國家新藥轉(zhuǎn)正標(biāo)準(zhǔn) USP33、EP7.1收載原料藥,阿托伐他汀鈣雜質(zhì)研究,雜質(zhì)限度要求最大日劑量：口服80mg/天,阿托伐他汀鈣雜質(zhì)研究,雜質(zhì)控制方法比較,阿托伐他汀鈣雜質(zhì)研究,雜質(zhì)譜分析工藝雜質(zhì)：雜質(zhì)A（去氟阿托伐他汀）雜質(zhì)C（雙氟阿托伐他?。?、雜質(zhì)F、雜質(zhì)G工藝雜質(zhì)及降解產(chǎn)物雜質(zhì)B（非對映異構(gòu)體）雜質(zhì)E（對映異構(gòu)體）降解產(chǎn)物：雜質(zhì)D（環(huán)氧化物）雜質(zhì)H（內(nèi)酯化降解產(chǎn)物）EP中8個已知雜質(zhì)結(jié)構(gòu),阿托伐他汀鈣雜質(zhì)研究,本品常用制備工藝為先分別合成主環(huán)和側(cè)鏈，然后縮合、脫保護(hù)、成鹽。在常規(guī)條件下前述8個雜質(zhì)均可能出現(xiàn)可作為雜質(zhì)研究的重要參考依據(jù)需要注意存在的雜質(zhì)并不限于前述8個已知雜質(zhì),阿托伐他汀鈣雜質(zhì)研究,原料藥雜質(zhì)研究思路以EP標(biāo)準(zhǔn)中的檢驗方法及限度為參考依據(jù)，進(jìn)行必要的方法驗證試制樣品雜質(zhì)檢查結(jié)果符合EP標(biāo)準(zhǔn)要求，無超過鑒定限度的其它雜質(zhì)達(dá)到研究目標(biāo)若雜質(zhì)譜與EP標(biāo)準(zhǔn)一致，但雜質(zhì)量超過限度要求完善工藝（精制：優(yōu)化工藝參數(shù)；控制起始原料及中間體質(zhì)量）出現(xiàn)超過鑒定限度（0.1）的新雜質(zhì)鑒定結(jié)構(gòu)，分析原因，修改完善工藝，降低雜質(zhì)量至0.1以下。 若新雜質(zhì)不超過質(zhì)控限度（0.15），且經(jīng)鑒定結(jié)構(gòu)明確不是毒性 雜質(zhì)，可訂入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中進(jìn)行控制,阿托伐他汀鈣雜質(zhì)研究,制劑雜質(zhì)研究思路應(yīng)選擇質(zhì)量符合要求的原料藥若原料藥質(zhì)量符合要求，制劑雜質(zhì)研究重點考察降解產(chǎn)物關(guān)注降解途徑及降解產(chǎn)物阿托伐他汀主要降解途徑為內(nèi)酯化降解及氧化降解，氧化降解產(chǎn)物除環(huán)氧化物（雜質(zhì)D）外，尚有其它降解產(chǎn)物。EP、USP等未收載制劑。與原研廠產(chǎn)品的對比研究對評價雜質(zhì)檢查方法及限度合理性的尤其重要,阿托伐他汀鈣雜質(zhì)研究,申報品種的雜質(zhì)研究情況已有多家企業(yè)申報，研究工作的系統(tǒng)性和深入性參差不齊，有的品種差距較大有以下幾種情況僅按照國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行有關(guān)物質(zhì)檢查在國家標(biāo)準(zhǔn)基礎(chǔ)上，增加了對映異構(gòu)體檢查在分析雜質(zhì)譜的基礎(chǔ)上，對各已知雜質(zhì)、光學(xué)異構(gòu)體均進(jìn)行了研究與控制，并與上市產(chǎn)品進(jìn)行了質(zhì)量對比。,羅庫溴銨雜質(zhì)研究,制備工藝：（2，3，5，16，17）-16-（1-吡咯烷基）-2-（4-嗎啉基）-雄甾-3，17-二醇 （雄甾二醇）為起始原料，對17位進(jìn)行?；玫叫坨薮紗未姿狨ィ倥c烯丙基溴反應(yīng)成鹽。雄甾二醇的合成：以雄甾-2-烯-17-酮為起始原料，經(jīng)?；?、環(huán)氧化、加成、開環(huán)等反應(yīng)制得,羅庫溴銨雜質(zhì)研究,EP/BP收載，共列出8個已知雜質(zhì).藥品注冊資料羅庫溴銨原料及制劑羅庫溴銨申報資料羅庫溴銨雜質(zhì)結(jié)構(gòu).docHPLC法，控制雜質(zhì)A不得過0.2；雜質(zhì)B，雜質(zhì)C不得過0.3；雜質(zhì)D、E、F、G、H不得過0.1；其他單一雜質(zhì)不得過0.1；總雜質(zhì)不得過1.5雜質(zhì)譜分析在前述合成工藝下，EP中的八個雜質(zhì)均可能出現(xiàn)雜質(zhì)A、B、D、E、F、G 工藝雜質(zhì)雜質(zhì)C、H：工藝雜質(zhì)、降解雜質(zhì),羅庫溴銨雜質(zhì)研究,申報品種的雜質(zhì)研究情況品種1采用EP色譜條件，實測最大雜質(zhì)約2.1，總雜質(zhì)約2.6。未進(jìn)行雜質(zhì)定性研究，限度定為單個雜質(zhì)3.0，總雜質(zhì)5.0品種2參照EP色譜條件，實測最大雜質(zhì)約1.7，總雜質(zhì)約2.4，未進(jìn)行雜質(zhì)定性研究，限度定為單個雜質(zhì)3.5，總雜質(zhì)5.0存在問題雜質(zhì)研究不深入：未進(jìn)行雜質(zhì)譜分析，未進(jìn)行方法驗證，雜質(zhì)限度缺乏依據(jù),羅庫溴銨雜質(zhì)研究,申報品種的雜質(zhì)研究情況品種3采用EP色譜條件，對雜質(zhì)A、G、C進(jìn)行了方法學(xué)研究品種4對EP色譜柱進(jìn)行了變更，對雜質(zhì)A、B、C、F、G進(jìn)行了方法學(xué)研究存在問題雜質(zhì)譜分析不充分，方法學(xué)驗證不完善。應(yīng)參考EP，至少對八個雜質(zhì)進(jìn)行研究。,鹽酸艾司洛爾注射液雜質(zhì)研究,基本情況為1受體阻滯劑，是心血管臨床常用藥物之一原研發(fā)企業(yè)為百特公司國內(nèi)外均已上市，劑型為注射液目前國內(nèi)上市產(chǎn)品為仿制產(chǎn)品原料藥及其制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)均未收入藥典（中國藥典及國外藥典）,鹽酸艾司洛爾注射液雜質(zhì)研究,雜質(zhì)控制標(biāo)準(zhǔn)原料藥國家標(biāo)準(zhǔn)WS1-(X-232)-2003-ZTLC法，雜質(zhì)不得過1.0注射液國家標(biāo)準(zhǔn)WS1-（X-272）-2003Z未控制有關(guān)物質(zhì),鹽酸艾司洛爾注射液雜質(zhì)研究,雜質(zhì)譜分析本品原料藥為苯丙酸甲酯衍生物，酯類藥物易水解，在水溶液不穩(wěn)定，主要降解產(chǎn)物為酯鍵水解產(chǎn)物。,鹽酸艾司洛爾注射液雜質(zhì)研究,進(jìn)一步分析通過文獻(xiàn)調(diào)研，該雜質(zhì)是鹽酸艾司洛爾在體內(nèi)代