流動注射化學發(fā)光法檢測曲克蘆丁含量[改].doc

目錄摘要1.前言1.1 檢測曲克蘆丁的意義1.2 目前檢測曲克蘆丁的方法1.3 化學發(fā)光光譜法的原理1.4 流動注射分析法的原理2.實驗部分2.1 儀器與試劑2.2 實驗方法3.結(jié)果與討論3.1 動力學曲線3.2 反應介質(zhì)及其濃度影響3.3 高錳酸鉀及其濃度影響3.4 甲醛及其濃度影響3.5 標準曲線與檢出限3.6 共存物質(zhì)的影響3.7 樣品分析3.8 機理討論4.結(jié)論參考文獻致謝附錄流動注射化學發(fā)光法檢測曲克蘆丁含量制藥80501 張然 指導老師 嵇正平摘要：基于硫酸介質(zhì)中曲克蘆丁與高錳酸鉀反應產(chǎn)生強的化學發(fā)光，且甲醛的存在能使這一反應的化學發(fā)光強度大大增強。結(jié)合流動注射技術(shù)，建立了流動注射化學發(fā)光法測定曲克蘆丁的新方法。在優(yōu)化的實驗條件下，曲克蘆丁的物質(zhì)量濃度在3.010-5-1.810-4mol/L范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，檢出限為8.010-7mol/L。對1.010-4mol/L的曲克蘆丁平行測定11次，其相對標準偏差為1.6%，回收率為95-110%.關(guān)鍵字：曲克蘆??；化學發(fā)光；流動注射分析Flow-injection chemiluminescence detection of Troxerutin contentAbstract:Troxerutin has strong chemiluminescence reaction with potassium permanganate in sulfuric acid medium,and the existence of formaldehyde can make the intensity of chemiluminescence reaction enhanced greatly. Combination of flow-injection analysis,establish a new method of flow-injection chemiluminescence detection of troxerutin content. A detection limit of 8.010-7mol/L troxerutin with a linear range of 3.010-5-1.810-4mol/L for its theoretical troxerutin was obtained under the optimized experimental conditions. The relative standard deviation was 1.6% for 1.010-4mol/L troxerutin (n = 11),the recovery rates were 95-110%.Keywords: troxerutin; Chemiluminescence；Flow- Injection 1前言1.1 檢測曲克蘆丁的意義曲克蘆丁(troxerutin)是羥基蘆丁中最重要的有效成分，具有抑制紅細胞和血小板凝聚作用，防止血栓形成，同時能增加血中氧的含量，改善微循環(huán)，促進新血管生成以增進側(cè)支循環(huán)。它對內(nèi)皮細胞有保護作用，能對抗5-羥色胺和緩激肽引起的血管損傷，增加毛細血管的抵抗力，降低毛細血管的通透性，有防止因血管通透性升高而引起的水腫的作用，并有抗放射性損傷、抗炎癥、抗過敏、抗?jié)兊茸饔?。自1960年開始，歐洲已將羥基蘆丁(oxerutin)用于治療靜脈曲張，此時這類藥在北美卻尚未應用。oxerutiu不是單一物質(zhì)，是天然存在的稱為蘆丁的生物黃酮類衍生的一組化學成分。目前國內(nèi)產(chǎn)品是蘆丁經(jīng)羥乙基化得到的以曲克蘆丁為主的羥乙基蘆丁的混合物，為黃色，黃綠色或淺棕黃色粉末，無臭味微咸，有引濕性，曲克蘆丁含量不低于80%(國家藥品標準一2002)。是維腦路通的主要有效成分，化學名稱為3，4，7-三0-（2-羥乙基）-5 羥基黃酮-3-蕓香苷2。曲克蘆丁結(jié)構(gòu)式如圖1所示。 圖1 曲克蘆丁的化學結(jié)構(gòu)Fig.1 The chemical structure of Troxerutin1.2 目前檢測曲克蘆丁的方法目前測定曲克蘆丁的方法主要有紫外分光光度法3-4、紅外光譜法5、毛細管電泳法6、薄層色譜法7、電化學伏安法8和高效液相色譜法9-10等，隨著藥物分析的發(fā)展，要求分析方法靈敏、快速、準確、自動化。原有的一些靈敏度低、操作煩瑣的化學分析法將被逐步淘汰，有些大型儀器由于過于昂貴而難以推廣，而化學發(fā)光技術(shù)具有靈敏度高(檢測限可達10-12mol/L)、線性范圍寬(3-6個數(shù)量級)、不需光源，可避免瑞利和拉曼散射等干擾，結(jié)合流動注射分析技術(shù)后可大大提高信噪比，加快分析速度，并且具有儀器設(shè)備簡單，易于實現(xiàn)自動化等特點，是當前分析化學研究的熱點。1.3 化學發(fā)光光譜法的原理1.3.1 概述最早發(fā)現(xiàn)的化學發(fā)光現(xiàn)象發(fā)生在生物體內(nèi)，現(xiàn)在稱為生物發(fā)光。1877年Radziszewski在研究洛粉堿(2，4，5一三苯基咪哇)與過氧化氫反應時，發(fā)現(xiàn)洛粉堿與氧發(fā)生化學反應產(chǎn)生一種綠色的光，這是人們首次利用合成化合物觀察到的化學發(fā)光現(xiàn)象11。隨后在1928年，Albrecht觀察到魯米諾在堿性介質(zhì)中的化學發(fā)光行為，這一試劑的合成和發(fā)光現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn)，對于化學發(fā)光發(fā)展成一種分析化學手段起到重要的作用12。1.3.2 化學發(fā)光的基本原理化學發(fā)光(Chemiluminescence, CL)是指在一些特殊的化學反應中，反應中間體或反應產(chǎn)物由于吸收了反應釋放的化學能而處于價電子激發(fā)態(tài)，再由激發(fā)態(tài)回至基態(tài)過程中產(chǎn)生的一種光輻射?；瘜W發(fā)光分析是一種分子光譜分析法，它依據(jù)某一時刻化學發(fā)光強度(如峰值)或化學發(fā)光總量確定反應中相應組分含量?；瘜W發(fā)光反應所以能用于分析測定，是因為化學發(fā)光強度與化學反應速度相關(guān)聯(lián)，因而一切影響反應速度的因素都可以作為建立測定方法的依據(jù)?；瘜W發(fā)光分析不需要外源性激發(fā)光源，避免了背景光和雜散光的干擾，降低了噪聲，大大提高了信嗓比，因而化學發(fā)光分析具有很高的靈敏度。由于化學發(fā)光有靈敏度高、線性范圍寬、設(shè)備簡單、操作方便、易于實現(xiàn)自動化、分析快速的特點，在生物工程學、藥物學、分子生物學、臨床和環(huán)境化學等各個領(lǐng)域正顯示出它蓬勃的生機。近年來，各種技術(shù)在化學發(fā)光中的運用，比如: 藥物分析、分離技術(shù)、生物技術(shù)、傳感器技術(shù)、芯片技術(shù)、免疫技術(shù)等，使化學發(fā)光的選擇性、靈敏度得到很大提高，更顯出其作為一種痕量分析方法的優(yōu)越性13。化學發(fā)光的最新發(fā)展主要在原有發(fā)光試劑及體系的基礎(chǔ)上，研究合成新的發(fā)光試劑，建立新的發(fā)光體系，與其它技術(shù)，如流動注射技術(shù)(FIA)、高效液相色譜(HPLC)、固定化試劑技術(shù)、毛細管電泳技術(shù)、傳感器技術(shù)以及生化免疫技術(shù)等聯(lián)用。藥物分析在臨床、藥代動力學及藥物開發(fā)研究中具有重要地位，將化學發(fā)光用于藥物分析不僅具有理論意義，而且還有重要的實用價值。1.4 流動注射分析法的原理1.4.1 概述流動注射技術(shù)(Flow Injection Analysis，簡稱FIA)的出現(xiàn)是科學技術(shù)發(fā)展過程中對化學信息的質(zhì)量與數(shù)量要求不斷提高的結(jié)果，F(xiàn)IA是從實驗室操作中的最基礎(chǔ)部分入手來提高整個化學分析過程的效率及改善提供信息的能力。1988年，Ruzicka和Hanen在他們的第二部專著中，F(xiàn)IA定義為:“從注入一定體積并在無空氣分隔的連續(xù)載流中得到分散的試樣區(qū)帶形成的濃度梯度中收集信息的技術(shù)”。流動注射技術(shù)可以以較簡單的實驗設(shè)備在廣泛的領(lǐng)域中實現(xiàn)分析的自動化與高效率，能夠通過單次測定提供有關(guān)試樣不同稀釋，試樣與試劑不同混合比例的多維信息，因此在現(xiàn)代分析化學及其正在發(fā)生的第三次變革中占有非常重要的地位14。1.4.2 流動注射分析的原理15如圖2所示，基本的FIA系統(tǒng)是由載流(carrier)驅(qū)動系統(tǒng)如蠕動泵，注射器,反應器，流動式檢測器和信號檢測裝置組成。它是將一定體積的試樣溶液注入到以一定流速連續(xù)流動的載流試劑中，在流經(jīng)反應器管道時試樣與試劑之間相互滲透而形成一個個分散帶，同時發(fā)生化學反應，在流經(jīng)檢測器時被檢測，記錄儀讀出為一組峰形信號，即物理分散狀態(tài)和化學反應狀態(tài)的綜合反應。雖然樣品與載流試劑的混合總是不會完全的，然而，對一個固定的實驗裝置來說，只要流速不變，在一定的留存時間內(nèi)，分散狀態(tài)都是高度重現(xiàn)的，因此可以得到重現(xiàn)良好的分析結(jié)果。所以，與傳統(tǒng)的化學分析操作相比，既不需要均勻混合，也不需要達到化學平衡，這不僅在幅度上提高了分析速度而且有效地提高了分析方法的選擇性和靈敏度，為實現(xiàn)連續(xù)自動化分析奠定了基礎(chǔ)。圖2 流動注射分析系統(tǒng)Fig.2 Flow Injection Analysis System1.3 流動注射化學發(fā)光法的優(yōu)點流動注射(FIA)作為一種強有力的樣品處理技術(shù)，只有同特定的檢測技術(shù)相結(jié)合才能形成一個完整的分析體系，但也正因此它才有極為廣泛的適用性。而化學發(fā)光分析法(CL)，由于通常所使用的發(fā)光反應速度很快，所以必須保證樣品與發(fā)光試劑能夠快速、有效，高度重現(xiàn)的混合，流動注射技術(shù)滿足了這一要求，將化學發(fā)光與流動注射相結(jié)合，兼有分析速度快，儀器設(shè)備簡單，操作方便，靈敏度高、線性響應范圍寬，不存在空白等顯著優(yōu)點。而隨著藥物分析的不斷發(fā)展，它不但要求分析結(jié)果準確可靠，且要分析方法簡單快速，尤其是對痕量和微量藥物分析，流動注射化學發(fā)光法顯得更為重要。本文建立了一種用流動注射化學發(fā)光法測定曲克蘆丁藥物的新方法。該方法是在酸性介質(zhì)中，高錳酸鉀氧化曲克蘆丁藥物產(chǎn)生化學發(fā)光，甲醛顯著增強該體系的發(fā)光強度，據(jù)此建立了一種簡單、快速測定曲克蘆丁藥物的流動注射化學發(fā)光新方法。2.實驗部分2.1 儀器與試劑BPCL微弱發(fā)光測量儀（中國科學院生物物理研究所）；HL-2 恒流泵（上海青浦滬西儀器廠）；六通注射閥；BPCL 數(shù)據(jù)獲取和處理軟件，實驗數(shù)據(jù)的采集、處理在Windows XP界面下的BPCL軟件來完成。KMnO4 4 10-4 mol/L, H2SO4 0.1 mol/L,體積分數(shù)0.3%的HCHO，使用時濃度逐級增加。曲克蘆丁210-4 mol/L。二次蒸餾水；所用試劑均為分析純。實驗裝置如圖3所示。圖3 流動注射化學發(fā)光法測定曲克蘆丁流路圖Fig.3 Schematic diagram of the flow-injection CL determinationof TroxerutinP - 蠕動泵；F - 流通池；D - 檢測器；PC - 計算機；S - 樣品溶液；A高錳酸鉀; B甲醛+硫酸; W - 廢液2.2 實驗方法 按圖3所示流路，將各輸液管插入相應溶液，開啟蠕動泵，分別將曲克蘆丁，KMnO4與H2SO4和HCHO溶液以一定的流速通過相應的管道輸入分析系統(tǒng)，在流通池中產(chǎn)生化學發(fā)光，記錄發(fā)光信號強度I，以此進行定量分析。3結(jié)果與討論3.1 動力學曲線將2.010 -4 mol/L曲克蘆丁溶液, 4.0mol/LH2SO4和4.0%的HCHO溶液在燒杯中混合后，將燒杯至于化學分析儀的暗盒中，打開分析系統(tǒng)，即可檢測到很強的化學發(fā)光信號;待反應進行40s后,向上述混合液中注入1 .010 -3 mol/L的高錳酸鉀溶液，相對化學發(fā)光強度迅速升高，大約70s后化學發(fā)光信號開始回落至基線。圖4給出了相對化學發(fā)光強度一時間曲線圖。取一個峰即可圖4 相對化學發(fā)光強度一時間曲線Fig.4 The relative chemiluminescence intensity-time curve3.2 反應介質(zhì)的選擇當曲克蘆丁的質(zhì)量濃度為210-4 mol/L，以相同濃度的H2SO4、HCl、HNO3和H3 PO4為反應介質(zhì)，考察了曲克蘆丁對化學發(fā)光強度的影響，結(jié)果表明.在H2SO4介質(zhì)中化學發(fā)光強度大且穩(wěn)定(見圖5),所以實驗中選擇了H2SO4作為反應介質(zhì)。圖5 介質(zhì)濃度對化學發(fā)光強度的影響Fig.5 Effect of the medium concentration on CL intensity實驗中發(fā)現(xiàn)，隨著硫酸濃度的增大，化學發(fā)光強度逐漸增大，同時基線也隨之升高。實驗表明:當硫酸濃度在1 .0-4.0mol/L范圍內(nèi)變化時，化學發(fā)光強度隨濃度增大而加強；當硫酸濃度達到4.0mol/L時,濃度增加化學發(fā)光強度保持一定(見圖6)，故選擇濃度為4.0mol/L的硫酸溶液。 圖6 硫酸濃度對化學發(fā)光強度的影響Fig.6 Effect of H2SO4 concentration on CL intensity此圖不用了3.3 高錳酸鉀濃度的影響 高錳酸鉀在此化學發(fā)光反應中是氧化劑，對化學發(fā)光強度影響很大。在高錳酸鉀的濃度為1.0-10.010-4mol/L范圍內(nèi)試驗了高錳酸鉀的濃度對化學發(fā)光強度的影響(見圖7)。在實驗中發(fā)現(xiàn)，隨著高錳酸鉀濃度的增大，化學發(fā)光強度逐漸增大，同時基線也隨之升高。實驗表明:當高錳酸鉀濃度在1.0-8.010-4mol/L范圍內(nèi)變化時，化學發(fā)光強度隨濃度增大而加強；當高錳酸鉀濃度達到8.010-4mol/L時,濃度增加化學發(fā)光強度保持一定，故選擇濃度為8.010-4mol/L的高錳酸鉀溶液。 圖7 高錳酸鉀濃度對化學發(fā)光強度的影響 Fig.7 Effect of KMnO4 concentration on CL intensity3.4 甲醛濃度的影響在甲醛的體積分數(shù)為0-5.0%范圍內(nèi)試驗了甲醛的濃度對化學發(fā)光強度的影響(見圖8)。實驗表明:當甲醛體積分數(shù)在0-3.5%范圍內(nèi)變化時，化學發(fā)光強度隨濃度增大而加強；當甲醛體積分數(shù)達到3.5%時,濃度增加但化學發(fā)光強度保持一定，故選擇體積分數(shù)為4.0%的甲醛溶液。圖8 甲醛濃度對化學發(fā)光強度的影響Fig.8 Effect of HCHO concentration on CL intensity3.5 工作曲線、精密度與檢出限在選定的最佳實驗條件下，曲克蘆丁濃度在3.010-5-1.810-4mol/L范圍內(nèi)與相對化學發(fā)光強度呈良好的線性關(guān)系(見圖9)，其回歸方程為I=33.83710-5c+285.04(n=11，r=0.9948, c-曲克蘆丁濃度(mol/L), I為相對化學發(fā)光強度)。對濃度為1.010-4mol/L的曲克蘆丁溶液進行11次平行測定，得相對標準偏差為1.6%,根據(jù)IUPAC建議，計算出方法的檢出限為8.010-7mol/L。圖9 曲克蘆丁的標準曲線Fig.9取消掉部分點3.6 共存物質(zhì)的影響研究了曲克蘆丁中可能存在的無機離子與有機物對本方法的干擾。結(jié)果表明，對1.010-4mol/L的曲克蘆丁，以測定相對誤差不超過5%計，1000倍的K+、Ca2 +、NH4+、Cl-、Mg2 +、NO3-、SO42 -，10倍量的Co2 +、Ni2 +、Fe3 + 等常見無機離子對測定不干擾；200倍的淀粉、糊精、葡萄糖均不干擾測定;100倍的Vc,尿酸有干擾。3.7 樣品分析準確稱取10片曲克蘆丁片(每片標示量60mg，江蘇 藥業(yè)有限公司)于研缽中研細混勻，然后準確稱取0.10g藥片粉末于燒杯中，用水溶解，定容于100 ml容量瓶中。測定時從100ml容量瓶中取出1ml定容于100ml容量瓶，作為樣品溶液(10mg/L)，進行標準加入回收試驗，用標準曲線法測定曲克蘆丁針劑中曲克蘆丁的量,測得回收率，結(jié)果見表1。表1 曲克蘆丁的藥物分析結(jié)果Tab.1 Determination results of troxerutin in pharmaceutical perparations樣品序號曲克蘆丁含量（mol/L）加入曲克蘆?。╩ol/L）回收曲克蘆丁（mol/L）回收率（%） 14.410-51.010-55.510-5110 24.610-55.510-51.010-498 34.510-59.010-51.310-49544.510-51.110-4 1.610-4 1043.8 機理討論4.結(jié)論參考文獻:1 陳新謙,金有豫.新編藥物學.北京:人民衛(wèi)生出版社,2000,4082 周昌奎,吳曉華.曲克蘆丁臨床研究新進展J.中國生化藥物雜志, 2005,26(05)3 于素華，龔愛琴,嵇正平,馬正軍，朱霞石.曲克蘆丁的紫外-可見分光光度法測定J.揚州大學學報(自然科學版),2006,9(1):284 余穗萍，王金陵.分光光度法測定維腦路通注射液的含量J.江蘇藥學與臨床研究，2003,11(12): 25-265 杜德國,孫素琴,周群等.光譜學與光譜分析,2000,20(4):474.6 李向軍,熊輝,袁悼斌.分析實驗室,2001,20(5):417 何麗一,李寶明.維腦路通的組分分析J,藥物分析雜志,1987,7(4): 251-253 8 赫春香，張淑敏.維腦路通的伏安法行為及其二階導數(shù)卷積伏安法測定J.分析實驗室,2001,20(2):23-26 9 岑志芳,林瓊.高效液相色譜法測定曲克蘆丁氯化鈉注射液中曲克蘆丁的含量J.藥物研究,2005,8(2):1110 劉同華，盧來春.高效液相色譜法測定曲克蘆丁注射劑的含量J.中國藥房，2004,15(6):365-36611 RadziszewskiB.,Chem.Ber,1877,10,70.12 AlbreehtH.0.,Z.Phys.Chem.,1928,136,321.13 M.Yamaguchi,H.Yoshida,H.Nohta,J.Chromatogr.A 2002,950,1.14 Ruzacka J.,Hansen E.H.,Flow Injection Analysis.,M.(Second edition).NewYork:John Wileysons(1998):19115 方肇倫,流動注射分析法,科學出版社,199916翻譯：化學發(fā)光法檢測魯米諾-高錳酸鉀反應中高錳酸鹽的(CODMn)指數(shù)摘要：一種新型的化學發(fā)光（CL）系統(tǒng)結(jié)合流動注射分析測定高錳酸鹽(CODMn)指數(shù)在本文中已被提出。在此基礎(chǔ)上的魯米諾-高錳酸鉀化學發(fā)光反應，是由光電倍增管檢測到魯米諾-高錳酸鉀系統(tǒng)造成發(fā)光的，樣品消解后高錳酸鉀的外觀所決定的其強度與CODMn成反比。影響CODMn確定，如pH值，濃度和干擾進行了詳細的調(diào)查。在優(yōu)化的實驗條件下，CODMn的質(zhì)量濃度在0.3-200 mg / L范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系，檢出限為0.3 mg / L。對5.0 mg / L的CODMn進行11次平行測定，其相對標準偏差為4.3%。這種流動化學發(fā)光系統(tǒng)確定CODMn簡單，快速，適用于自動分析。獲得的數(shù)據(jù)的方法相當吻合這些標準得到的滴定法。它已被用于確定實際樣品，結(jié)果令人滿意。關(guān)鍵詞：流動注射;化學發(fā)光;高錳酸鹽CODMn指數(shù);魯米諾-高錳酸鉀介紹：截至目前，化學需氧量（COD），它可以表明水受還原性污染物的污染程度，是有機污染水系統(tǒng)的主要評估因素，也是個最重要的水質(zhì)監(jiān)測參數(shù)（APHA,，1989年）。標準反滴定法（APHA,1992）化學需氧量決定有機物樣品的組成，加入已知量的氧化劑，在高溫的開放式容器中反應和滴定過剩的氧化劑。在此基礎(chǔ)上氧化劑的使用，標準COD的方法可分為重鉻酸鉀法或高錳酸鉀的方法。由于它的較高的退化程度趨向于較廣泛的有機污染，標準重鉻酸鉀法相對于后者廣泛使用和普及。但是，標準重鉻酸鉀法有幾個缺點：即回流過程費時（2-4h），昂貴的和有劇毒的試劑等。因此，標準重鉻酸鉀法在日本已被拋棄。在中國，標準重鉻酸鉀法指定作為化學需氧量（GB11914-89,1990），和高錳酸鹽法是指定為高錳酸鹽指數(shù)(CODMn) (GB11892-89, 1990)。前者主要用于分配有機污染物的需氧量在重污染水體中有機污染30mg/L的需氧量，如工業(yè)廢水。后者是檢測地表水的有機污染物(GB 3838-2002,2002)和地下水(GB/T 14848-93,1994)在1.0 到15.0 mg/L范圍內(nèi)的有機污染物的需氧量。然而，傳統(tǒng)的方法有一系列的弊端：(1)分析時間過長，包括消化時間和滴定時間；(2)操作也是相當大，從而增加了錯誤的概率和可重復性的結(jié)果取決于操作技巧；(3)相當高消費的化學品(4)一些無機物種造成干擾；(5)樣品消解后反滴定法是一個敏感的方法檢測。因此，有必要開發(fā)低成本，操作簡便，自動化，易于維持更高的靈敏度和線性范圍更廣泛的質(zhì)量控制的CODCr和CODMn分析儀器。這些成就主要集中于改進消化和分析方法。例如，有些報告已經(jīng)出版關(guān)于微波輻射作為CODCr的熱源的測定應用，這些方法可能大幅降低加熱時間(Cuesta et al., 1996; Balconi et al., 1992)。另一方面，一些新的分析方法報導，測定COD，包括光度法(Jirka and Carter, 1975; Jones et al., 1985), 原子吸收光譜法(Cuesta et al., 1998), 光催化降解法(Kim et al., 2001) 和光電化學法(Zhao et al., 2004; Zhang et al., 2006), 等等。在這些分析方法中, 光度法是最在化學需氧量測定中最普遍使用的方法. 盡管如此,一些固有的問題在這些分光光度計測量系統(tǒng)中還是呈現(xiàn)出來: (1)為了增加試劑的氧化能力和降低消化時間, 這些系統(tǒng)加熱以便沸騰，而由于泡沫形成，沸騰的信號經(jīng)常不穩(wěn)定 (Balconi et al., 1992); (2)樣本顯示，由于嚴重干擾，高濁度不適合這種方法 (Jirka and Carter, 1975); (3)該系統(tǒng)缺乏足夠的敏感性，使系統(tǒng)的需要相當長的消化時間，不適合低化學需氧量的樣本; (4)系統(tǒng)的線性范圍是狹隘的，因此該系統(tǒng)的應用也受到限制。流動注射化學發(fā)光（CL）被稱為是一個強大的分析技術(shù)，因為它保證高靈敏度，反應時間快速以及廣泛的動態(tài)范圍，并且使用簡單，儀器使用成本低廉，很容易建立一個快速重復性檢測，所有的這些優(yōu)勢，使該方法已被方便地用于測定許多無機和有機化合物環(huán)境樣品中。目前，基于高選擇性和高靈敏度的luminol-H2O2-Cr3+化學發(fā)光反應系統(tǒng)，低成本的光電二極管代替光電倍增管（光電倍增管）的化學發(fā)光檢測器已研制成功，利用流動注射分析自動測定化學發(fā)光系統(tǒng)的化學需氧量是由(Hu and Yang, 2004). Li 以及其他人. (2003)提出的成比例的化學需氧量。在這一體系中，高錳酸鉀減少Mn2+在有機化合物室溫下氧化過程中在強酸性陽離子交換微型樹脂柱的第一次吸附和聚集。而過多的MnO4-微型柱唄浪費，然后集中的Mn2+通過luminol-H2O2-Mn2+ CL系統(tǒng)和光電倍增管被反向緩慢地洗脫。在這項研究中，流動注射化學發(fā)光法，基于KMnO4-luminol反應而不是luminol-H2O2-Mn2+化學發(fā)光系統(tǒng)，開發(fā)了高錳酸鹽指數(shù)分析。CODMn樣品的化學發(fā)光檢測的條件在流動注射化學發(fā)光模式下被優(yōu)化。這種流動注射化學發(fā)光體系測定化學需氧量是非常準確，簡便，快速，并且是易于自動的。有了這種新方法，水樣的結(jié)果能更好的與CODMn聯(lián)系起來，更加確定使用常規(guī)的滴定方法（高錳酸鉀法）。1 實驗1.1 試劑所有的化學試劑為分析級。全部溶液都是準備用蒸餾水。標準滴定方法所準備的消化溶液(GB11892-89, 1990)，包括：KMnO4 0.01 mol/L; NaOH 1.0mol/L; H2SO4 (H2SO4:H2O = 1:3); Na2C2O4 0.01 mol/L。此外，化學發(fā)光的儲備試劑如0.01 mol / L的魯米諾(Fluka, Czech) (pH= 12.0) 和0.1 mol / LEDTA。葡萄糖（上?；瘜W試劑廠，中國）作為CODMn標準物(Westbroke and Temmerman, 2001). 所有