不同濃度的中藥合劑對雙歧桿菌增殖的影響.doc

不同濃度的中藥合劑對雙歧桿菌增殖的影響摘要本實(shí)驗(yàn)測定了21種不同濃度的中藥合劑對雙歧桿菌增殖的影響,結(jié)果顯示:其中11種中藥對雙歧桿菌具有不同程度的促增殖作用。某些藥物對各個濃度雖均有一定的促雙歧作用,但在其中某一個濃度下作用最強(qiáng)。有些藥物在不同濃度,對雙歧桿菌增殖的影響截然不同,分別表現(xiàn)出促進(jìn)、無影響或抑制。從此提示:在測試中藥對細(xì)菌的作用時,應(yīng)盡可能多選擇幾個濃度。關(guān)鍵詞中藥濃度雙歧桿菌雙歧桿菌是人體重要的生理性細(xì)菌,尋找促進(jìn)雙歧桿菌增殖的物質(zhì),用以提高人體內(nèi)雙歧桿菌的水平,或促進(jìn)體外培養(yǎng)液中雙歧桿菌的增殖,是許多學(xué)者關(guān)注的課題之一。不同研究者報告的某些中藥對雙歧桿菌作用的結(jié)果不完全一致,其中一個重要原因是實(shí)驗(yàn)的藥物濃度不同,也就是說,某一種藥物對雙歧桿菌生長繁殖的影響究竟是抑制、促進(jìn)、還是無益,與藥物濃度密切相關(guān),不能一概而論。我們研究的21種中藥,取不同濃度對雙歧桿菌作用的效果就說明了這一點(diǎn)。1材料與方法1.1中藥合劑及制備選用具有益氣健脾的中藥共21種、它們是:萊菔子、椏葫蘆、黨參、玄參、馬勃、阿膠、豬苓、蘆根、黃芪、敗醬草、茯苓、甘草、五味子、梔子、竹茹、生地、枸杞、陳皮、當(dāng)歸、半夏、葛根。購自石家莊市樂仁堂藥房。以上中藥各稱取5克,加水20-50ml,浸泡24小時、煎煮30分鐘后過濾濃縮呈5ml,制備成含生藥1g/ml的藥液,將此液定為100%濃度。1.2菌株及培養(yǎng)雙歧桿菌DM8504株。實(shí)驗(yàn)用培養(yǎng)基為BS液體,固體培養(yǎng)基,本室自行配制。1.3菌液準(zhǔn)備將雙歧桿菌劃線接種在BS斜面培養(yǎng)基上,37培養(yǎng)48小時,加少量生理鹽水吹刮菌苔成菌懸液,再用生理鹽水將此菌懸液進(jìn)行十倍連續(xù)稀釋、配成含10個/ml濃度的菌液,為試驗(yàn)用液。1.4不同濃度中藥培養(yǎng)液的制備用BS液體培養(yǎng)基將實(shí)驗(yàn)用藥稀釋至50%、25%、12.5%三個濃度,同時設(shè)BS培養(yǎng)基對照,中藥原液(100%)對照。1.5試驗(yàn)方法用微量移液管在以上各管中加入菌液0.1ml,37培養(yǎng)24小時,取各管培養(yǎng)物0.1ml,經(jīng)無菌生理鹽水稀釋,采用文獻(xiàn)報道滴注法1接種至BS固體培養(yǎng)基上,37培養(yǎng)48小時后計(jì)數(shù),以平均菌落數(shù)計(jì)算出每毫升培養(yǎng)液中的活菌數(shù)。每一種藥物按以上方法重復(fù)2-3次,各次試驗(yàn)的均數(shù)為最后的結(jié)果數(shù)據(jù)。2結(jié)果2.1以“藥物試驗(yàn)管菌落均數(shù)”與“BS對照管菌落均數(shù)”之比D/C值做為判定增菌作用的指標(biāo),D/C值在2以上的共有11種中藥,包括:萊菔子、椏葫蘆、豬苓、馬勃、阿膠、黃芪、敗醬草、蘆根、黨參、茯苓、玄參。2.2某些藥物,雖然在各個濃度都有促雙歧作用,但在其中一個濃度作用最強(qiáng),如椏葫蘆,促雙歧最強(qiáng)濃度為25%,D/C值高達(dá)35.8,而濃度為50%及12.5%時,D/C值分別為2.4、3.5,具有類似情況的中藥還有萊菔子、馬勃、阿膠、豬苓(見表1)。2.3有的藥物在不同濃度,對雙歧桿菌29中國微生態(tài)學(xué)雜志1997年第9卷第5期表現(xiàn)為抑制,無影響或不同的促進(jìn)影響,例如黃芪在50%、25%、12.5%濃度的D/C值分別為0.04、1.4和9.3,其他有類似情況的中藥有蘆根、敗醬草、黨參、玄參、茯苓(見表2)。表1刺激雙歧桿菌生長的最佳藥物濃度藥物名稱試驗(yàn)管菌落數(shù)/對照管菌落數(shù)(D/C值)50%管25%管12.5%管椏葫蘆2.4 35.8*3.5萊菔子28 32.6 46.5*馬勃0.58 23.3*6.7阿膠3.7 16.3*11.6豬苓28*11.6 2.3*:為最高D/C值。表2藥物濃度對細(xì)菌生長的不同影響藥物名稱試驗(yàn)管菌落數(shù)/對照管菌落數(shù)(D/C值)50%管25%管12.5%管椏葫蘆4.3 0.85 0.54黃芪0.04 1.45 9.3敗醬草0.01 5.58 0.25黨參0.37 0.95 3.75玄參0.016 0.2 2.5茯苓0.02 3.47 2.63討論在實(shí)踐中為避免試驗(yàn)誤差,我們將D/C均值在2以上者確定為有明顯增菌作用的藥物及其濃度。傳統(tǒng)的中草藥與微生態(tài)以及某些正常細(xì)菌的關(guān)系,國內(nèi)有多位學(xué)者曾在這方面做了大量的工作,如陳聰敏2曾用中藥大黃,造成小鼠脾虛模型,通過腸菌群測定,雙歧桿菌,乳桿菌等優(yōu)勢菌均減少,而給予扶正固本的中藥治療后,優(yōu)勢菌增加,恢復(fù)正常功能。楊景云3等研制的中藥903口服液已證明可以調(diào)整腸菌群,增加優(yōu)勢厭氧菌的生長。也有一些學(xué)者利用單味藥,如云芝、刺五加、枸杞等,在試管內(nèi)或平皿上證明具有促進(jìn)雙歧桿菌增殖的作用?？紤]到祖國醫(yī)學(xué)與微生態(tài)學(xué)在原理上,觀念上的某些吻合,我們選取的21種中藥都是具有益氣健脾、扶正固本作用的,采用水煎服的方法,解析出以多糖為主的成份,發(fā)現(xiàn)其中11種藥在一定濃度下,具有程度不等的刺激雙歧桿菌增長的作用,實(shí)驗(yàn)還顯示:中藥的濃度對雙歧桿菌的增殖有著明顯的影響,有的中藥雖然各個濃度下均有刺激雙歧桿菌增殖的作用,但在某一濃度其作用最強(qiáng):而有的中藥在不同濃度下,對雙歧桿菌的影響分別表現(xiàn)出促進(jìn)、抑制或無影響。以此提示:在測試中藥對細(xì)菌的影響作用時,無論其目的是抑菌、還是增菌,應(yīng)盡可能多進(jìn)行幾個濃度的測試,以獲得完整的、全面的、正確的實(shí)驗(yàn)資料。參考文獻(xiàn)1康白編著.正常菌群與健康人體微生態(tài)學(xué)。19892陳聰敏.中國微生態(tài)學(xué)雜志.1989.2(2)3楊景云.中國微生態(tài)學(xué)雜志.1991.4(2)4郭志明.中國微生態(tài)學(xué)雜志.1995.7(6)5田碧文.中國微生態(tài)學(xué)雜志.1996.8(2)(收稿日期:1996-12-24)EFFECT OF TRADITIONAL CHINESE DRUGS WITH VARLANTCONCENTRATION ON BIFIDOBACTERIUMWeilin,Zhang Yonghong,Hao Weishan.Department of Microbiology and Immunology,Hebei Medical University,Shijiazhuang,ChinaAbstractIn this study, the effect of 21 kind of traditional Chinese drugs that thereare functions of tonifying the spleen and replenishing qi on Bifidobacterium (DM30中國微生態(tài)學(xué)雜志1997年第9卷第5期8504) was tested in vitro. Drugs were extracted with pure water and diluted to50%, 25%, 12.5% with BS culture medium, which also used as fundamental con-trol. The results indicate: (1) Among 21 kind of drugs, 11 of them show obviousstimulative growing effect on Bifidobacterium (DM 8504). The number of colony ofdrug-tube/The number of control-tube (D/C) is used to judge the effect. Somedrugs including Radish Seed, Calabash Gourd, Pclyporus, Puff-ball and Donkey-hide Gelatin are high D/C (16.3-46.5). and others including Milkvetch Root,Patrinia, Asiabell Root, Finwort Root, Reed Rhizoma and Pona are low D/C (2.5-9.3). (2) These is colse relation between different concentration of drug andstimulative growing effect of Bifidobacterium. It is found that each drug has its ownbest concentration for stimulative growing, such as 50% for Polyporus, Reed, Rhi-zoma, 12. 5%-25% for lthers. (3) For some drugs, different concentration hasopposite effect on Bifidobacterium. For example, Milkvetch Root shows bacte-riostasis in 50% concentration, stimulative growing in 12.5%, and no effect in25%. The same phenomenon remains in other drugs of Reed Rhizoma, AsiabellRoot, Figwort Root, Poria. The above ersults show that the concentration of drugshould be paid close attention to when testing its effect no growing of bacteria, onmatter what purpose the test is:bacteriostasis or stimulative growing. Otherwise,it is impossible to obtain the complete and correct results.(上接23頁)of streptococci to serum-coated HA. OralMicrobiol Immunol 1989;4:1996Hillman HD, Socransky SS, et al. The rela-tionships between streptococcal species andperiodontopathic bacteria in human dentalplaque. Arch Oral Biol 1985 b;7917Burton R, Benjamin A, Lindy K, et al.Chemostat studies of the effect of environmen-tal control on streptococcus sanguis adherenceto HA. Infect Immun 1982;35:648David LH, Itzak O, Harry SC, et al. Multipleadhesion of streptococci. 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